趙小瓊,肖漓

1.佳木斯大學(xué)，佳木斯 154007；2.中國人民解放軍總醫(yī)院第八醫(yī)學(xué)中心呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)部研究所 北京市器官移植與免疫調(diào)節(jié)重點實驗室

1 外泌體

細胞外囊泡(EVs)是由細胞分泌的各種具有雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡的統(tǒng)稱。細胞外囊泡可分為4個亞群：外泌體、微粒(微囊泡)、凋亡小體和癌小體，而目前研究點主要集中在外泌體[1]。外泌體是由細胞內(nèi)溶酶體反向出芽形成的杯狀囊泡，40～100 nm，通過與質(zhì)膜融合從細胞中釋放出來[2]。1983年，外泌體首次于綿羊網(wǎng)織紅細胞中被發(fā)現(xiàn)，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。大多數(shù)細胞都可以分泌外泌體，例如肥大細胞、樹突狀細胞、T和B淋巴細胞、間充質(zhì)干細胞、脂肪細胞、內(nèi)皮細胞和上皮細胞等等[3]。并且在多種體液，如血液、尿液、腹水、母乳、唾液、羊水、淋巴液和支氣管肺泡灌洗液(BALF)等中都發(fā)現(xiàn)了外泌體[4]。外泌體含有多種生物分子，包括糖類、蛋白質(zhì)、脂類、核酸(即DNA和RNA)和代謝物等[5]。根據(jù)目前的外泌體內(nèi)容數(shù)據(jù)庫Exocarta，各種生物和細胞類型的外泌體含有41 860種蛋白質(zhì)、3 408種mRNA、2 838種microRNA(miRNA)和1 116種脂質(zhì)。

外泌體的組成取決于其來源的細胞，如器官移植、超敏反應(yīng)、癌癥、感染性疾病和其他病理條件下，循環(huán)外泌體的表面標(biāo)志物和內(nèi)含物都不相同。肺移植受者(LTxRs)中的循環(huán)外泌體存在組織相關(guān)自身抗原(SAgs)——K-α1微管蛋白(Ka1T)和膠原蛋白V(Col-V)、共刺激分子、轉(zhuǎn)錄因子核因子κB(NF-κB)、缺氧誘導(dǎo)因子(HIF)、20S蛋白酶體、MHC Ⅱ類分子和其轉(zhuǎn)錄因子CIITA等[6]。通過研究外泌體的生物成分，對理解其在移植排斥反應(yīng)中的作用至關(guān)重要。有研究[6]表明，小鼠對腎SAg 基底膜聚糖的體液免疫反應(yīng)是由外泌體中存在的20S蛋白酶體引起的，20S蛋白酶體失活后，小鼠對腎的自身免疫性反應(yīng)也將消失。外泌體中含有豐富的生物成分，可作為生物標(biāo)志物監(jiān)測移植排斥反應(yīng)、疾病進展和預(yù)后狀況等，將會有光明的應(yīng)用前景；同時外泌體作為抗原提呈囊泡(APVs)，參與肺移植(LTx)后的固有免疫和適應(yīng)性免疫應(yīng)答；外泌體具有遞送生物分子的功能，還有發(fā)展成為臨床藥物遞送載體的潛力。2013年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎被授予了發(fā)現(xiàn)囊泡運輸調(diào)控機制的研究人員，強調(diào)了外泌體對生物學(xué)領(lǐng)域的影響。

2 外泌體是重要的生物標(biāo)志物

對于許多被診斷為終末期肺疾病的患者來說，LTx是唯一的治療措施[7]。根據(jù)國際心肺移植協(xié)會的登記報告顯示，截至2017年6月30日，全球已有67 260例LTx手術(shù)。隨著醫(yī)療技術(shù)和免疫抑制的不斷發(fā)展，LTx越來越成熟，但術(shù)后仍會出現(xiàn)很多并發(fā)癥，像感染、急性排斥反應(yīng)(AR)、慢性排斥反應(yīng)(CR)、急性肺水腫和心血管疾病等等。其中CR在LTx術(shù)后最為常見，5年內(nèi)發(fā)生率約為50%，10年內(nèi)發(fā)生率可達90%[4]。CR中慢性同種異體肺移植功能障礙(CLAD)導(dǎo)致的肺衰竭是移植后一年內(nèi)死亡的主要原因[8]。CLAD包括閉塞性細支氣管炎綜合征(BOS)和限制性同種異體肺移植綜合征2種亞型[4，9]。BOS是CLAD最常見的臨床表現(xiàn)，大約70%的CLAD患者會發(fā)生BOS[9]。

LTx術(shù)后，臨床醫(yī)生通過支氣管鏡活檢、影像學(xué)檢查等方法監(jiān)測排斥反應(yīng)。然而，這些方法缺乏準(zhǔn)確性、特異性，常常反映移植肺損傷的非早期。因此，在LTx領(lǐng)域迫切需要開發(fā)新的診斷生物標(biāo)志物，對同種異體LTx進行無創(chuàng)和連續(xù)監(jiān)測。發(fā)生排斥反應(yīng)與否的LTxRs外泌體的主要成分不同，其有望成為同種異體移植排斥反應(yīng)的預(yù)測/診斷生物標(biāo)志物。

2.1 外泌體——肺相關(guān)自身抗原 發(fā)生排斥反應(yīng)的主要原因是異體移植物與受者人類白細胞抗原(HLA)不匹配，被受者的免疫監(jiān)測所識別。Sureshbabu等[9]報道診斷為AR和CR的LTxRs血清和BALF中存在外泌體，這些外泌體攜帶有特異性抗原，參與了同種異體LTx的排斥反應(yīng)。原發(fā)性移植物功能障礙(PGD)、缺血再灌注損傷、呼吸道病毒感染(RVI)、供者特異性抗體(DSA)和肺相關(guān)SAgs (Ka1T和Col-V)抗體的產(chǎn)生等會誘導(dǎo)循環(huán)外泌體的釋放[4]。CLAD患者的循環(huán)外泌體表達：與受者錯配的HLA分子、肺相關(guān)SAgs、共刺激分子(CD80,CD86)、轉(zhuǎn)錄因子NF-κβ、HIF-1α、microRNA(miRNA)和20S蛋白酶體等[6]。Gunasekaran等[10]研究發(fā)現(xiàn)非排斥患者的外泌體不表達MHC Ⅱ類分子和共刺激分子(CD80、CD86、CD40)，但黏附分子在LTxRs的循環(huán)外泌體上都有表達。

HLA分子和(或)肺相關(guān)SAgs抗體的產(chǎn)生是預(yù)測排斥反應(yīng)的標(biāo)志。在發(fā)生排斥反應(yīng)的LTxRs中，在供者來源的外泌體表面檢測到供者HLA和SAgs，在穩(wěn)定性LTxRs的供者來源的外泌體上沒有檢測到SAgs，表明循環(huán)外泌體來源于免疫損傷后的移植器官[9，11]。供者來源的外泌體從移植物中“滲漏”出來，并通過受者毛細淋巴管外滲或切斷的開口向移植物引流的淋巴器官流動。Habertheuer等[7]將Wistar轉(zhuǎn)基因鼠的左肺移植到MHC分子完全不匹配的Lewis受者中,GFP標(biāo)記CD63檢測外泌體水平，循環(huán)外泌體在第1天達到峰值，第2天顯著下降，然后在第3天達到基線水平，符合AR的表現(xiàn)。外泌體水平快速下降，發(fā)生在移植出現(xiàn)AR的組織學(xué)證據(jù)之前，提示外泌體可以作為一種新的生物標(biāo)志物。

Rahman等[12]在原位單側(cè)LTx CR的小鼠模型中，觀察到超過80%的移植小鼠從第14天開始，血清中分離的外泌體顯示肺SAgs(Col-V和Ka1T)水平升高，血清中還存在抗肺SAgs的抗體，而在第30天才出現(xiàn)CR的組織學(xué)變化，表明外泌體可能是CR的潛在生物標(biāo)志物，并推測外泌體可能參與了LTx后CR的發(fā)生。Sharma等[13]研究表明，在BOS臨床診斷前12個月，從血漿中分離的外泌體顯示肺SAgs(Ka1T和Col-V)水平的升高(特異性為100%，敏感性為90%)，表明帶有肺SAgs的循環(huán)外泌體可作為鑒別有BOS風(fēng)險的LTxRs生物標(biāo)志物。Mohanakumar等[14]用BOS患者的循環(huán)外泌體(添加佐劑)免疫小鼠，供者氣道上皮細胞(AEC)分泌的外泌體具有高度免疫原性，含有HLA Ⅱ類分子、20S蛋白酶體和共刺激分子等，小鼠脾臟T細胞對外泌體上兩種SAgs(Ka1T和Col-V)均有反應(yīng)，γ-干擾素(IFN-γ)和白細胞介素17(IL-17)生成增加，白細胞介素10(IL-10)水平降低。因此，AEC分泌的外泌體會增強LTx后的免疫反應(yīng)，導(dǎo)致排斥反應(yīng)的發(fā)生。

棒狀細胞分泌蛋白(CCSP)具有抗炎功能，在吸煙、感染、肺損傷、BOS和其他可導(dǎo)致炎癥反應(yīng)的疾病中，CCSP水平下降。據(jù)Itabashi等[15]報道，在BOS臨床診斷前7～9個月，患者BALF中CCSP水平顯著下降，低水平的CCSP可以促進促炎細胞因子的產(chǎn)生、自然殺傷細胞(NK細胞)來源外泌體的誘導(dǎo)以及對HLA和SAgs的免疫反應(yīng)，NK細胞來源的外泌體含有增加的SAgs、NK細胞標(biāo)志物和細胞毒性分子，提示NK細胞來源的外泌體在CLAD發(fā)生中發(fā)揮作用。CCSP缺失導(dǎo)致NK細胞釋放外泌體，能夠刺激移植后固有免疫和適應(yīng)性免疫應(yīng)答，增加了BOS的風(fēng)險。

Goodlet等[16]報告，1例76歲的女性肺移植患者，因AR接受免疫抑制劑治療后，隨后感染了SARS-CoV-2，HLA抗體水平開始急劇增加。在SARS-CoV-2感染前，對循環(huán)外泌體分析顯示存在肺SAgs、HLA-DR和HLA-DQ?；颊吒腥維ARS-CoV-2后，發(fā)現(xiàn)外泌體含有SARS-CoV-2刺突蛋白，感染癥狀消除后，不再檢測到含有SARS-CoV-2刺突蛋白的外泌體，然而，具有肺SAgs、HLA-DR和HLA-DQ的外泌體始終存在，肺功能持續(xù)下降，提示患者出現(xiàn)CLAD。以上表明，檢測含有病毒蛋白的外泌體可能有助于識別由病毒感染引起的同種異體移植物損傷。

抗HLA和抗肺相關(guān)SAgs可能在BOS的免疫發(fā)病機制中發(fā)揮協(xié)同作用，并且是BOS進展的重要預(yù)測因子[17]。大多數(shù)產(chǎn)生DSA的患者隨后也會產(chǎn)生肺相關(guān)SAgs抗體，表明DSA可能會激活并誘導(dǎo)肺相關(guān)SAgs抗體的產(chǎn)生[18]。Sureshbabu等[9]對103例LTxRs的分析表明，42.7%的LTxRs產(chǎn)生了DSA,30.1%的LTxRs產(chǎn)生了Kα1T和ColV抗體，表明DSA的產(chǎn)生通常先于肺SAgs抗體的產(chǎn)生。此外，HLA抗原和肺相關(guān)SAgs，彼此相互影響產(chǎn)生抗體的概率更大，提示存在免疫擴散現(xiàn)象。研究表明肺相關(guān)SAg(Kα1T)不僅可以誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生對Kα1T的抗體，還可以誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生對Col-V的抗體，表明在小鼠LTx CR模型中，在BOS形成之前出現(xiàn)了免疫應(yīng)答擴散。然而，由于HLA分子和肺相關(guān)SAgs在不同的染色體上由不同基因編碼，所以導(dǎo)致其擴散的機制尚不清楚[6]。

2.2 外泌體-miRNAs miRNA可作為新的診斷生物標(biāo)志物來識別有BOS發(fā)展風(fēng)險的患者。miRNA是器官移植領(lǐng)域的研究熱點，它們與靶mRNA結(jié)合調(diào)控基因表達，這些基因是先天和適應(yīng)性免疫應(yīng)答的關(guān)鍵要素。DSA可以誘導(dǎo)生成miRNA，已知的外泌體包含的miRNA，可誘導(dǎo)炎癥、內(nèi)皮激活、Th17分化和抗體介導(dǎo)的排斥反應(yīng)等，從而觸發(fā)免疫應(yīng)答。Xu等[19]研究表明，與穩(wěn)定性LTxRs血清樣本相比，在BOS 12個月時，miR-134、miR-10a、miR-195和miR-133b的表達水平顯著下調(diào)，miR-144、miR-142-5p和miR-155表達顯著上調(diào)。還有TGF-β相關(guān)miRNA，即miR-369-5p和miR-144，它們在TGF-β信號通路介導(dǎo)的纖維化中發(fā)揮作用。根據(jù)上述miRNA可以區(qū)分有BOS發(fā)展風(fēng)險的LTxRs。

帶有肺相關(guān)SAgs的循環(huán)外泌體可以預(yù)測LTxRs發(fā)生CLAD的風(fēng)險，提示臨床醫(yī)生在LTx發(fā)生不可逆損害之前提前制訂預(yù)防或干預(yù)策略。在人類腎臟和心臟移植后CR發(fā)生之前，也檢測到帶有組織相關(guān)SAgs的循環(huán)外泌體[13]。Vallabhajosyula等[20]對人類胰島和腎移植受者進行5年隨訪，分析循環(huán)外泌體，發(fā)現(xiàn)帶有組織特異性SAgs的外泌體長期存在。因此認為，具有組織特異性SAgs的循環(huán)外泌體有望成為一種無創(chuàng)性生物標(biāo)志物，可以監(jiān)測實體器官移植受者發(fā)生排斥反應(yīng)的風(fēng)險，為臨床移植提供巨大幫助。

3 外泌體在LTx排斥反應(yīng)中的作用

Sureshbabu等[9]在小鼠支氣管內(nèi)給予MHC抗體，誘導(dǎo)呼吸道阻塞疾病(OAD)，類似于人類CLAD，重要的是，在OAD臨床診斷前檢測到了對于外泌體上肺相關(guān)SAgs(Col-V,Kα1T)的抗體，證明外泌體可激活免疫應(yīng)答，導(dǎo)致產(chǎn)生對肺SAgs的抗體并最終導(dǎo)致OAD的發(fā)生。供者白細胞的清除，或無法遷移到受者淋巴組織，表明供者移植物來源的外泌體在同種異體抗原識別途徑中發(fā)揮重要作用。有研究顯示，直接識別、間接識別和半直接識別途徑在同種異體移植排斥中發(fā)揮作用。

3.1 直接識別和間接識別 在同種異體LTx中，使T細胞活化的主要方式有兩種:直接識別[供肺抗原提呈細胞(APC)刺激受者T細胞]和間接識別(受者APC刺激受者T細胞)。直接識別的基本過程是：供肺中的過客白細胞，包括APC和淋巴細胞，移植物血管與受者血管接通后，過客白細胞可進入受者血液循環(huán)或局部引流淋巴組織，受者T細胞也可進入移植物中，供者APC將其表面的抗原肽-MHC分子復(fù)合物(pMHC)直接提呈給受者的同種反應(yīng)性T細胞，供其識別，引發(fā)移植排斥反應(yīng)[21]。而間接識別是指供肺的MHC分子經(jīng)受者APC加工和處理后，以供者抗原肽―受者MHC分子復(fù)合物的形式提呈給受者T細胞，使之活化[4]。間接識別是發(fā)生移植排斥反應(yīng)的重要機制，這種排斥反應(yīng)主要由CD4+T細胞和同種異體反應(yīng)性抗體產(chǎn)生，BOS與非BOS患者相比，間接識別引起的同種異體排斥反應(yīng)的頻率更高[22]。在AR早期，直接識別機制起主要作用；在AR中晚期和CR中，間接識別機制起更重要的作用[4]。

3.2 半直接識別 LTx后，受者血液循環(huán)和淋巴組織內(nèi)的APC可以通過各種方式攝取供者抗原，包括吞噬作用、內(nèi)吞作用或胞飲作用，并以外泌體(同種異體抗原)的形式分泌。由APC分泌的外泌體表面高度富集抗原肽-MHC分子復(fù)合物，提示它們可以作為抗原提呈囊泡(APVs)，類似于APC來提呈抗原，從而參與免疫應(yīng)答[3,6]。有研究表明，外泌體以吞噬體的形式內(nèi)化和分泌抗原，比DC提呈抗原肽的效率高103～104倍。外泌體維持起源APC的拓撲結(jié)構(gòu)，在囊泡表面暴露MHC Ⅰ類或MHC Ⅱ類分子的胞外結(jié)構(gòu)域，可能具有直接刺激CD8+或CD4+T細胞的能力。雖然游離外泌體直接刺激同種異體反應(yīng)性T細胞的能力有限，但它們攜帶的p-MHC分子復(fù)合物，在APC通過吞噬或微胞飲作用內(nèi)化時，可作為肽源間接啟動T細胞[22]。

樹突狀細胞(DC)是一種重要的專職性APC，可以提呈抗原，參與免疫調(diào)節(jié)，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)等。在原代DC和DC細胞系中已經(jīng)觀察到由DC分泌的外泌體，并已成為外泌體介導(dǎo)的同種異體識別領(lǐng)域的研究重點[21]。成熟DC釋放的外泌體富集MHC分子、黏附分子和共刺激分子，能夠觸發(fā)免疫應(yīng)答，未成熟DC(imDC)釋放的外泌體顯示出低水平的MHC Ⅱ/I類分子以及黏附分子和共刺激分子，具有調(diào)節(jié)功能，抑制免疫反應(yīng)[23]。盡管一些研究已經(jīng)證明了供者DC的重要性，但許多研究小組報道，某些同種異體移植發(fā)生AR第一周內(nèi)，在受者血液循環(huán)或移植物引流淋巴組織中無法檢測到供者來源的DC，這表明在AR早期，除了直接識別途徑以外，可能存在其他機制，移植物來源的外泌體可能在同種異體抗原識別中發(fā)揮作用。

存在另一種稱為半直接識別的途徑，受者T細胞通過供者來源的外泌體被激活[3]。LTx后，受者血液循環(huán)或移植物引流淋巴組織中除了過客白細胞，供肺還會釋放外泌體，攜帶供者MHC分子的外泌體被受者APC攝取，受者APC與供者來源外泌體上的MHC分子結(jié)合，可以直接或間接地提呈供者MHC分子和其他相關(guān)抗原，這一現(xiàn)象被稱為異裝[24]。Lombardi等[25]證明了受者來源的DC與供者MHC分子異裝可以激活受者反應(yīng)性T細胞，為移植中同種異體T細胞識別的半直接途徑奠定了基礎(chǔ)。隨后，在實體器官和同種異體骨髓移植中，供者MHC分子在受者APC上的存在也被證實。

有研究[26-28]也提到，外泌體參與了半直接識別途徑，同種異體皮膚、心臟移植后，移植物引流淋巴組織中，受者來源的DC和B細胞被供者來源的攜帶完整供者MHC分子的外泌體異穿；在心臟或胰島移植模型中，異裝細胞在刺激受者T細胞反應(yīng)中起有效作用。然而，需要注意的是，外泌體不是被受者DC內(nèi)化，而是小簇地黏附在受者DC表面，保留完整和功能良好的供者MHC分子和APC激活信號[22]。外泌體通過配體與受體特異性結(jié)合的方式與細胞相互作用，與靶細胞胞膜融合，并將其內(nèi)含物“注射”到靶細胞的胞質(zhì)中，外泌體中的miRNA調(diào)節(jié)靶細胞mRNA[5]。

Sharma等[29]提到帶有供者H-2分子的循環(huán)外泌體具有高水平的熱休克蛋白(HSPs)和miR-155，它們可以激活受者DC，受者DC比供者過客DC的數(shù)量多。當(dāng)完整的供者H-2分子從供者轉(zhuǎn)移到受者DC，然后由受者DC提呈給T細胞時，就會發(fā)生半直接識別，這種機制使得直接和間接激活的T細胞通過相同的APC進行交叉調(diào)節(jié)。異裝的受者DC通過供者來源的外泌體提供供者H-2分子，通過半直接途徑有效激活異源反應(yīng)性T細胞。

3.3 外泌體-miRNAs在LTx排斥反應(yīng)中的調(diào)控作用 DSA可以誘導(dǎo)生成miRNA，miRNA不僅有助于合成抗體，還參與纖維蛋白的形成。外泌體包含已知的功能性miRNA，miR-182可誘導(dǎo)炎癥、miR-92a參與內(nèi)皮激活、miR-142-5p參與抗體介導(dǎo)的排斥反應(yīng)和miR-155促進Th-17分化、T細胞激活等等[30]。

miR-144已被證實參與了BOS的發(fā)展。與非BOS患者相比，BOS患者miR-144表達顯著增加。miR-144過表達導(dǎo)致TGIF1 TGF-β誘導(dǎo)因子同位序列1(smads的輔助抑制因子)顯著下降，Smad2、Smad4、TGF-β、成纖維細胞生長因子6和血管內(nèi)皮生長因子表達增加，α-平滑肌肌動蛋白和纖維粘連蛋白水平增加，促進了肺纖維化[4]。miR-155是與炎癥相關(guān)的miRNA，在多個細胞系中有效上調(diào)Toll樣受體，是炎癥細胞因子(例如IL-17)產(chǎn)生的正調(diào)控因子，已被證明在LTx后CR的發(fā)展中發(fā)揮重要作用[31]。IL-17在BOS發(fā)病機制中也起著重要作用:通過多克隆抗IL-17，阻斷IL-17可顯著減少BOS病變[4]。miR-155在抗MHC誘導(dǎo)的OAD的發(fā)病機制中起著不可或缺的作用。研究[32]表明，給予MHC Ⅰ類抗體后，野生型小鼠肺血管和細支氣管周圍炎癥細胞浸潤，纖維化程度增加，管腔閉塞。而敲除miR-155基因的小鼠未表現(xiàn)出明顯病變。

阻斷來自供肺的外泌體釋放有可能防止同種異體移植排斥反應(yīng)。在結(jié)核分枝桿菌感染的小鼠模型中，發(fā)現(xiàn)敲除了Rab27a基因的小鼠由于釋放外泌體的能力減弱，刺激T細胞的效率較低。有一些小的抑制分子如中性鞘磷脂酶抑制劑GW4869，酸性鞘磷脂酶抑制劑鹽酸丙咪嗪，可以有效地阻斷來自各種組織和細胞的外泌體誘導(dǎo)。但一項研究表明，雖然GW4869降低了外泌體的分泌，但它增強了更多的漿膜來源EV的分泌；Rab27a在減少外泌體分泌的同時，也可以減少一些非EV結(jié)合的可溶性因子的分泌，表明這些抑制方法可能會間接影響EV的組成和分泌，改變細胞功能[5]。同時在機體正常生理過程中，外泌體可以實現(xiàn)細胞間的通信，維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。因此我們應(yīng)該只阻斷移植器官釋放外泌體，不要影響其他組織或細胞外泌體的釋放。在體外肺灌注過程中阻斷供肺的外泌體誘導(dǎo)，能夠減少肺損傷，改善移植器官的功能，這樣即使是邊緣肺也可以成功移植。Ravichandran等[5]提到在體外肺灌注過程中阻斷外泌體的形成和釋放是可行的。

外泌體介導(dǎo)AR和CR的機制尚不十分清楚，進一步深入研究這些機制對理解LTx后免疫過程的發(fā)展至關(guān)重要，并將為未來的治療和生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)提供方向。

4 外泌體作為治療策略

研究[21]證明，EVs在妊娠期間孕婦對胎兒同種異體抗原的耐受以及實驗室嚙齒動物對同種異體肝移植耐受相關(guān)的免疫特權(quán)中發(fā)揮重要作用。在腸道、心臟、肝臟或腎臟移植模型中，外泌體與低劑量免疫抑制劑或供者特異性Treg聯(lián)合可以有效提升同種異體移植物的存活率[3]。利用外泌體治療替代免疫抑制治療，可能為處理移植后的嚴重副作用，提高異體移植存活率開辟新的前景。

外泌體也是靶向藥物遞送的有效候選物，在藥物傳遞方面，外泌體與脂質(zhì)體等傳統(tǒng)合成材料相比具有各種優(yōu)勢。外泌體介導(dǎo)的藥物傳遞的治療潛力仍在初步臨床試驗中(胰腺癌、急性缺血性腦卒中和結(jié)腸癌)[33]。近年來，為了克服天然外泌體的局限性，基于納米生物技術(shù)的人工外泌體不斷涌現(xiàn)，低免疫原性和毒性的人工外泌體可以有效運輸藥物、蛋白質(zhì)和核酸等物質(zhì)，外泌體的脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)可以作為內(nèi)容物的天然保護屏障，防止周圍酶類對運載物的分解，在LTx領(lǐng)域中將會起到重要作用[3]。納米生物技術(shù)的進步有利于開發(fā)人工外泌體，這可能會加速外泌體在移植領(lǐng)域的臨床轉(zhuǎn)化，人工外泌體因其大規(guī)模生產(chǎn)而具有商業(yè)優(yōu)勢。未來，依靠生物技術(shù)、納米技術(shù)、化學(xué)工程和制藥行業(yè)等多學(xué)科的努力，將開發(fā)出新穎、多功能的人工外泌體，以改善醫(yī)療保健。我們對外泌體在LTx治療方面的潛力充滿信心。

5 小結(jié)

外泌體是一種重要的生物標(biāo)志物，用于識別可能發(fā)生CLAD風(fēng)險的LTxRs。相關(guān)研究還需要揭示來自移植器官的外泌體生物發(fā)生的新機制，以及外泌體在人LTx后CLAD發(fā)展中的不同作用，外泌體介導(dǎo)的同種異體識別可能為解決移植領(lǐng)域的新問題提供了缺失的一環(huán)。外泌體正在成為藥物輸送的有效納米載體，對靶細胞進行藥物傳遞，有望在移植領(lǐng)域成為一種極具開發(fā)潛力的運輸載體。