樊玉萍 程雪絨 雷懷玉 鄭 蕾 楊淑惠 趙朝陽
(咸陽市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院,陜西咸陽 712034)
平菇(Pleurotus ostreatus)又稱側(cè)耳、北風(fēng)菌,分類學(xué)上屬真菌門、擔(dān)子菌綱、傘菌目、側(cè)耳科、側(cè)耳屬[1],是栽培較廣泛的一種食用菌。平菇營養(yǎng)豐富、味道鮮美,含有多種人體需要的多糖[2]、維生素、氨基酸,是一種低油脂、高蛋白的健康菌類,具有提高機(jī)體免疫力、抗疲勞、抗腫瘤、調(diào)節(jié)血糖等功效,深受消費(fèi)者青睞,市場需求量也不斷增加。
栽培平菇一般采用固體菌種接種栽培袋。固體菌種制種時間較長,從母種到栽培種的培養(yǎng)時間需要50~60 d,而液體菌種具有生產(chǎn)周期短、菌種純度高、菌齡一致、萌發(fā)快、生產(chǎn)成本低等優(yōu)點(diǎn),在食用菌生產(chǎn)中具有廣闊的應(yīng)用前景[3-5]。隨著食用菌工廠化生產(chǎn)的不斷發(fā)展,固體菌種很難滿足高效率生產(chǎn)對菌種的要求,液體菌種應(yīng)用已成為必然的趨勢。因此,篩選優(yōu)良的平菇液體菌種培養(yǎng)基配方具有一定的現(xiàn)實(shí)意義。
筆者進(jìn)行了平菇液體菌種培養(yǎng)基配方比較試驗(yàn)及液體菌種接種栽培袋出菇試驗(yàn),以期為平菇液體菌種規(guī)?;瘧?yīng)用提供理論依據(jù)。
(1)供試菌株:平菇615,引自天達(dá)食用菌研究所。
(2)培養(yǎng)材料:瓊脂粉、蛋白胨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、葡萄糖、紅糖、馬鈴薯、麩皮、玉米粉、棉籽殼、木屑。
(3)試劑、儀器及培養(yǎng)容器:上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠YXQ-LS-50SII 立式壓力蒸汽滅菌器、西安博奧儀器有限公司電子天平、上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠SPX-150B-Z 生化培養(yǎng)箱、常州市瑞華儀器制造有限公司HY-5 A 調(diào)速振蕩器、上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠SW-CJ-1CU超凈工作臺。
培養(yǎng)容器:1 000 mL 三角瓶、聚乙烯袋(規(guī)格為15 cm×30 cm×0.004 cm)。
配方1:玉米粉5 g,麩皮25 g,紅糖7.5 g,葡萄糖5 g,蛋白胨0.75 g,磷酸二氫鉀0.75 g,硫酸鎂0.375 g,水+濾液500 mL;配方2:玉米粉10 g,麩皮20 g,紅糖7.5 g,葡萄糖5 g,蛋白胨0.75 g,磷酸二氫鉀0.75 g,硫酸鎂0.375 g,水+濾液500 mL;配方3:玉米粉15 g,麩皮15 g,紅糖7.5 g,葡萄糖5 g,蛋白胨0.75 g,磷酸二氫鉀0.75 g,硫酸鎂0.375 g,水+濾液500 mL;配方4:玉米粉20 g,麩皮10 g,紅 糖7.5 g,葡萄糖5 g,蛋白胨0.75 g,磷酸二氫鉀0.75 g,硫酸鎂0.375 g,水+濾液500 mL;配方5:玉米粉25 g,麩皮5 g,紅糖7.5 g,葡萄糖5 g,蛋白胨0.75 g,磷酸二氫鉀0.75 g,硫酸鎂0.375 g,水+濾液500 mL。
1.3.1 液體菌種培養(yǎng)及測定方法
鍋中加入600 mL 水,水開后加麩皮,煮20 min,過濾,再加玉米粉煮5 min,4 層紗布過濾,濾液加其他輔料,再過濾,倒入量筒中添加水至500 mL。每個配方重復(fù)2 次,每個重復(fù)3 瓶,并于121 ℃高壓滅菌30 min。
滅菌結(jié)束后,待培養(yǎng)液溫度降至25 ℃以下時,于超凈工作臺上接種。每瓶接種1 cm2斜面菌種1塊,在25 ℃,150 r/min條件下培養(yǎng)7 d。
每瓶培養(yǎng)液取樣3次,分別測定菌球數(shù)量、菌球直徑及菌絲體干重,取平均值。
菌球平均數(shù)量測定:培養(yǎng)7 d 后取菌液5 mL,并倒入培養(yǎng)皿內(nèi),統(tǒng)計菌球數(shù)。計算出1 mL菌液中菌球個數(shù),并計算平均值。
菌球平均直徑測定:隨機(jī)取10 個菌球,排成一行,測定其直徑,計算出單個菌球平均直徑。
菌絲體干重測定:取100 mL 菌液離心,倒去上清液,菌絲體于60 ℃烘干至恒重,稱重。
1.3.2 出菇試驗(yàn)及考察方法
栽培袋裝料折干0.364 kg(配方:棉籽殼72%,木屑15%,麩皮10%,石灰3%,料含水量63.6%),于121 ℃高壓滅菌2 h,冷卻后接種。每袋接種量為25 mL,3 次重復(fù),每個重復(fù)15 袋。接種后25 ℃恒溫箱培養(yǎng),觀察記錄菌絲生長狀況和菌絲滿袋時間。
當(dāng)菌絲長滿袋5~7 d 后,給予晝夜溫差催蕾出菇。出菇溫度18~24 ℃、空氣相對濕度85%~95%。每袋出菇4潮。
菌絲滿袋時間:從接種到菌絲滿袋所用時間的平均值;
袋平均產(chǎn)量:稱量4潮菇鮮重,計算平均值;
由表1 可以看出,配方3 和配方4 菌球大小均勻,菌球直徑中等,菌球形狀規(guī)則,配方3 菌球平均個數(shù)和菌絲體干重最高,菌球平均直徑適中;配方1菌球平均直徑最小,形狀不規(guī)則,菌球表面有長刺,菌絲體干重最??;配方2菌球形狀不規(guī)則,表面有長刺,菌球平均數(shù)量最少;配方5 菌球大小均勻,形狀規(guī)則,菌球平均直徑較小。
表1 供試液體菌種培養(yǎng)基中菌絲生長狀況
圖1 配方3培養(yǎng)的液體菌種
配方3 每毫升菌球平均個數(shù)為73.2,與其他配方差異顯著;配方2、配方3 的菌球平均直徑為2.19 mm、2.12 mm,與配方1、配方4、配方5 差異顯著;配方3 菌絲體干重為1.57 g/100 mL,與其他配方差異顯著。由此可見,從菌球平均個數(shù)及菌絲體干重考察,配方3 最佳,其次為配方4、配方5。因此,用配方3、配方4、配方5 培養(yǎng)的液體菌種接種栽培袋。
由表2 可知,配方3 液體菌種接種栽培袋的平均袋產(chǎn)量和生物轉(zhuǎn)化率最高;配方5 液體菌種接種栽培袋的菌絲滿袋時間最短,平均袋產(chǎn)量及生物轉(zhuǎn)化率最低。
表2 3個配方培養(yǎng)的液體菌種接種栽培袋試驗(yàn)結(jié)果
配方3、配方4液體菌種接種栽培袋的菌絲滿袋時間與配方5 差異顯著;配方3 液體菌種接種栽培袋的平均產(chǎn)量最高,為0.512 g/袋、生物轉(zhuǎn)化率也最高,為140.7%,與配方4、配方5差異顯著。
配方3 培養(yǎng)的平菇液體菌種接種栽培袋效果最佳。
試驗(yàn)結(jié)果表明:平菇615 菌株液體菌種最佳培養(yǎng)基配方為配方3,菌球數(shù)量多,菌絲體干重高,菌球大小均勻、形狀規(guī)則。配方3 培養(yǎng)的液體菌種接入栽培袋,平菇產(chǎn)量及生物轉(zhuǎn)化率最高。