邢 平，徐艷飛，王燦燦，來 祺

(1.南京紅太陽股份有限公司，江蘇南京 211300；2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，江蘇南京 210014)

毒死蜱具有觸殺、胃毒、熏蒸作用，可用于防治柑橘矢尖蚧、蚧殼蟲、葉螨等。其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，不易降解，在農(nóng)作物上的殘留活性期較長[3-4]，是全球生產(chǎn)和銷量最大的廣譜性有機(jī)磷農(nóng)藥，已經(jīng)在全球幾十個國家登記和注冊[1-2]。氯氰菊酯是擬除蟲菊酯類殺蟲劑的主導(dǎo)產(chǎn)品，具有胃毒、觸殺、熏蒸和一定的殺卵作用[5-6]，殺蟲譜廣，對鱗翅目幼蟲和同翅目害蟲有特效，可有效防治尺蛾、枯葉蛾、介殼蟲、葉蟬、潛葉蛾、卷葉蛾、葉螨、蚜蟲等害蟲。

毒死蜱和氯氰菊酯常?；旌鲜褂梅乐喂麡浜οx。目前，國內(nèi)外對水果、蔬菜中毒死蜱和氯氰菊酯殘留量的檢測方法已有較多報(bào)道，但關(guān)于同時測定柑橘中2 種農(nóng)藥的殘留分析方法較少[7-9]?；诖?，本文進(jìn)行了采用氣相色譜法同時檢測柑橘中毒死蜱和氯氰菊酯殘留量的研究，以期為柑橘中農(nóng)藥殘留的快速測定提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 儀器設(shè)備

Agilent 7890A 氣相色譜儀配ECD 檢測器(美國 Agilent 公司)；ZQLY-180 型振蕩器(上海知楚儀器有限公司)；R-3 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士BUCHI)；BS110S 電子天平(瑞士塞多利斯天平有限公司)；JN25-12D 型超聲波清洗儀(寧波江南儀器廠)；Talboys 數(shù)顯型渦旋混合器(美國Henry Troemne 公司)；N-EVAP111 型氮吹儀(美國Organomation)；濾膜：0.22 μm(有機(jī)相，上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司)。

1.2 試劑與藥劑

乙腈，分析純[永華化學(xué)科技(江蘇)有限公司]；氯化鈉，分析純(Aladdin)；乙酸、正己烷，分析純(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。

毒死蜱(質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.5%，上海市農(nóng)藥研究所有限公司)；氯氰菊酯(質(zhì)量分?jǐn)?shù)97.3%，德國Dr. Ehrenstorfer GmbH 公司)。

1.3 樣品準(zhǔn)備

將柑橘全果或果肉切碎混勻后打碎成漿，分別稱取20 g 和10 g 供提取。

1.4 方法

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

準(zhǔn)確稱取0.010 2 g 98.5%毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)樣品于 10 mL 容量瓶中，用色譜純正己烷稀釋至刻度，配成1 004.7 mg/L 毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液，再用色譜純正己烷梯度稀釋配制成100 mg/L 標(biāo)準(zhǔn)溶液。

準(zhǔn)確稱取0.010 3 g 97.3%氯氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)樣品于10 mL 容量瓶中，用色譜純正己烷稀釋至刻度，配成1 002.2 mg/L 氯氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，再用色譜純正己烷梯度稀釋配制成100 mg/L 標(biāo)準(zhǔn)溶液。

分別準(zhǔn)確吸取100 mg/L毒死蜱和氯氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL 于10 mL 容量瓶中，用色譜純正己烷稀釋至刻度，配成10 mg/L 毒死蜱與氯氰菊酯混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，再用色譜純正己烷梯度稀釋配制成5、1、0.5、0.1、0.02、0.01 mg/L 系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.4.2 提取和凈化

全果：準(zhǔn)確稱取20 g 勻漿的柑橘全果樣本于 250 mL 的錐形瓶中，加入80 mL 含0.1%乙酸的乙腈溶液，均質(zhì) 3 min，振蕩1 h，抽濾，濾液倒入盛有5 g 氯化鈉的100 mL 具塞量筒中，劇烈振蕩3 min，靜置20 min，取10 mL 上清有機(jī)相于平底燒瓶中，旋轉(zhuǎn)濃縮至干，用2 mL 正己烷定容，過0.22 μm 濾膜，待測。

果肉：準(zhǔn)確稱取10 g 勻漿的柑橘果肉樣本，置于100 mL 離心管中，加入40 mL 含0.1%乙酸的乙腈溶液，混勻，超聲提取30 min；加入5 g 氯化鈉，渦旋10 min；4 000 rpm 離心5 min，取上清液10 mL，旋轉(zhuǎn)濃縮至干，用2 mL 正己烷定容，過0.22 μm 濾膜，待測。

1.4.3 色譜條件

檢測器：電子捕獲檢測器(ECD)；色譜柱：DB-1701 毛細(xì)管柱，30 m×250 μm×0.25 μm；進(jìn)樣口溫度：260 ℃；檢測器溫度：300 ℃；載氣(N2)： 1.5 mL/min；進(jìn)樣模式：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣量：1.0 μL；柱溫：采用程序升溫，初始溫度120 ℃，保持2 min，20 ℃/min 升至280 ℃，保持10 min；尾吹氣(N2)：40 mL/min。在該色譜條件下毒死蜱和氯氰菊酯的保留時間分別約是9.18 和15.45 min

1.5 統(tǒng)計(jì)方法與計(jì)算公式

采用EXCEL 對所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理分析和作圖，毒死蜱或氯氰菊酯殘留量計(jì)算公式如下：

式中：Xi，樣本中毒死蜱或氯氰菊酯殘留量，mg/kg；A，樣本中毒死蜱或氯氰菊酯的峰面積；Cs，標(biāo)準(zhǔn)溶液中毒死蜱或氯氰菊酯的濃度，mg/L；m，稱取的試樣質(zhì)量，g；Vri，分取液體體積，mL；As，標(biāo)準(zhǔn)溶液中毒死蜱或氯氰菊酯的峰面積；Vex，提取液總體積，mL；Vx，樣本定容體積，mL。

2 結(jié)果與分析

2.1 提取溶劑的選擇

乙腈對毒死蜱和氯氰菊酯均有較強(qiáng)的溶解性，對油脂和色素類雜質(zhì)溶解度小，加入氯化鈉后即可與水鹽析分層。毒死蜱和氯氰菊酯分子結(jié)構(gòu)中均含有Cl，因此本方法采用乙腈作為柑橘全果、果肉樣本中該2 種農(nóng)藥的提取溶劑。氯氰菊酯在堿性條件下不穩(wěn)定，在酸性條件下穩(wěn)定性好，在乙腈中加入0.1%的乙酸使得分離效果更好。因而，該試驗(yàn)中選擇含0.1%乙酸的乙腈溶劑作為提取溶劑。

圖1 毒死蜱、氯氰菊酯溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

在1.3.3 節(jié)的色譜條件下測定配制好的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，以毒死蜱、氯氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(x)為橫坐標(biāo)，峰面積(y)為縱坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線。毒死蜱、氯氰菊酯標(biāo)樣線性方程及相關(guān)系數(shù)分別為：y=85 726x- 2 214.4，R2=0.999 7；y=38 361x-923.97，R2=0.999 7 (圖1)。

柑橘樣本中的毒死蜱、氯氰菊酯存在基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)，為提高定量的準(zhǔn)確性，采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液校正方法對基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行補(bǔ)償。分別按照上述步驟制得空白柑橘全果和果肉樣本，氮吹或減壓至干，準(zhǔn)確加入質(zhì)量濃度為0.01、0.02、0.1、0.5、1、5 mg/L毒死蜱和氯氰菊酯混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液2 mL，即得系列質(zhì)量濃度的毒死蜱和氯氰菊酯柑橘全果和果肉基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液。毒死蜱柑橘全果、果肉基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程及相關(guān)系數(shù)分別為：y=101 509x- 2 128.3，R2=0.999 8；y=95 478x-2 896.2，R2=0.999 8 (圖2)。氯氰菊酯柑橘全果、果肉基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程及相關(guān)系數(shù)分別為：y=25 840x+347.61，R2=0.999 8；y=50 457x-1 043.8，R2=0.999 8(圖3)。

2.3 添加回收試驗(yàn)

分別在空白柑橘全果和果肉樣本中添加3 個濃度水平的毒死蜱或氯氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個水平重復(fù)5 次，按上述分析方法測定回收率，結(jié)果見表1。

圖3 氯氰菊酯柑橘全果、果肉基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線

表1 毒死蜱和氯氰菊酯在柑橘中的添加回收率

毒死蜱、氯氰菊酯在柑橘全果樣本中添加濃度為0.02～1 mg/kg 時，毒死蜱和氯氰菊酯的平均回收率分別為77.0%～99.3%和80.1%～101.2%；毒死蜱、氯氰菊酯在果肉樣本中添加濃度為0.02～1 mg/kg時，毒死蜱和氯氰菊酯的平均回收率分別為76.3%～90.4%和77.5%～90.3%，符合農(nóng)藥殘留檢測分析的基本要求。

2.4 精密度

毒死蜱、氯氰菊酯在柑橘全果樣本中添加濃度 為0.02～1 mg/kg 時，全果中毒死蜱相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.4%～3.7%，全果中氯氰菊酯相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.2%～ 7.9%；毒死蜱、氯氰菊酯在果肉樣本中添加濃度均為0.02～1 mg/kg 時，果肉中毒死蜱相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.1%～4.1%，果肉中氯氰菊酯相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.7%～11.7%，符合農(nóng)藥殘留檢測分析的基本要求。

2.5 定量限

在上述色譜條件下，毒死蜱的最小檢出量為2×10-4ng，氯氰菊酯的最小檢出量為5×10-4ng；毒死蜱、氯氰菊酯在柑橘全果和果肉樣本中的最低檢測濃度均為0.02 mg/kg。典型色譜圖見圖4、圖5。

圖4 0.1 mg/L 毒死蜱、氯氰菊酯標(biāo)樣溶劑的曲線譜圖

圖5 毒死蜱、氯氰菊酯全果、果肉基質(zhì)標(biāo)樣0.1 mg/L 標(biāo)準(zhǔn)曲線譜圖

3 結(jié) 論

本文建立了GC-ECD 同時測定柑橘中毒死蜱和氯氰菊酯殘留量的方法。柑橘全果或果肉樣本經(jīng)含0.1%乙酸的乙腈超聲渦旋或均質(zhì)振蕩提取，氣相色譜檢測。結(jié)果表明該方法靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度均符合農(nóng)藥殘留檢測要求，可適用于柑橘樣本中毒死蜱和氯氰菊酯的殘留量檢測。