于 鵬，翁習(xí)生

中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)院 1國(guó)際醫(yī)療部 2骨科，北京 100730

ANK即鼠進(jìn)行性強(qiáng)直蛋白，又稱無(wú)機(jī)焦磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)蛋白，系位于小鼠細(xì)胞膜上的由492個(gè)氨基酸構(gòu)成的多通道跨膜蛋白。該蛋白與其人類(lèi)同源物(鼠進(jìn)行性強(qiáng)直蛋白人類(lèi)同源物ANKH)的主要功能類(lèi)似，可以將細(xì)胞內(nèi)的無(wú)機(jī)焦磷酸鹽(inorganic pyrophosphate，PPi)轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞外環(huán)境中，通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外PPi比例以及細(xì)胞外PPi和無(wú)機(jī)磷酸鹽(inorganic phosphate，Pi)的比例進(jìn)而調(diào)控組織鈣化。PPi是礦化的抑制物，骨關(guān)節(jié)局部的高PPi濃度可以抑制羥基磷灰石的沉積，阻斷關(guān)節(jié)軟骨等組織不必要的礦化[1- 3]。ANK無(wú)意突變使細(xì)胞外PPi水平下降、細(xì)胞內(nèi)PPi水平升高，進(jìn)而導(dǎo)致骨關(guān)節(jié)中鈣化調(diào)控異常，引發(fā)礦物質(zhì)沉積，從而導(dǎo)致骨沉積異常、炎癥和骨贅形成、異常鈣化等[1]。有關(guān)ANKH的研究深化了人們對(duì)部分骨關(guān)節(jié)病的認(rèn)識(shí)，并為骨關(guān)節(jié)病的診斷、防治提供了新的方法和方向。目前，ANKH被認(rèn)為主要與強(qiáng)直性脊柱炎(ankylosing spondylitis，AS)、顱骨干骺端發(fā)育不全(craniometaphyseal dysplasia，CMD)、軟骨鈣鹽沉積等幾種疾病相關(guān)。對(duì)該基因和上述骨關(guān)節(jié)疾病相關(guān)性的歸納總結(jié)，有利于提高研究人員對(duì)疾病的認(rèn)知，推動(dòng)相關(guān)疾病分子機(jī)制的研究。

ANKH與AS

AS是一種表現(xiàn)為背痛和進(jìn)行性脊柱強(qiáng)直的中軸骨慢性炎癥性疾病，也可同時(shí)累及髖關(guān)節(jié)、肩關(guān)節(jié)、肌肉起止點(diǎn)等。在疾病晚期由于軟骨、軟骨周?chē)}化以及纖維化導(dǎo)致脊柱不可逆的僵硬以及特征性的“竹節(jié)樣”X線表現(xiàn)。ANK無(wú)意突變可以導(dǎo)致小鼠漸進(jìn)性關(guān)節(jié)炎[4]。該疾病表現(xiàn)為漸進(jìn)性的關(guān)節(jié)間隙變窄、椎間盤(pán)和脊柱韌帶鈣化、脊柱僵硬，和人類(lèi)的AS極為類(lèi)似，因此人們很自然地聯(lián)想到ANKH可能與AS相關(guān)[4- 6]。關(guān)于AS和ANKH之間的相關(guān)性，目前研究主要集中在ANKH的單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)和AS的易感性、嚴(yán)重性間是否存在聯(lián)系。但各研究的結(jié)果間存在一定分歧。

一方面，有研究者以歐洲的高加索人種(葡萄牙人)為研究對(duì)象，分析了ANKH的4個(gè)SNP位點(diǎn)(rs27356、rs26307、rs25957、rs28006)，這些SNP與AS的易感性、癥狀嚴(yán)重性、起病年齡并無(wú)聯(lián)系[7]。另一項(xiàng)基于英國(guó)人群(種族不詳)的研究雖然發(fā)現(xiàn)了5個(gè)此前未發(fā)現(xiàn)的SNP，但最終結(jié)果表明這些SNP與AS同樣沒(méi)有關(guān)聯(lián)[8]。

另一方面，研究者Tsui等[9]針對(duì)美國(guó)和加拿大的高加索人種的AS家系研究顯示，AS的發(fā)病與ANKH的單倍型ANKH-OR等位基因1(即位于5’-UTR的 1～2個(gè)拷貝數(shù)的8 bp重復(fù)序列)和 ANKH-TR 等位基因7(即位于啟動(dòng)子區(qū)不同拷貝數(shù)的3倍重復(fù)序列)相關(guān)。該研究者在后續(xù)的同樣針對(duì)美國(guó)和加拿大高加索人種AS家系的研究中，對(duì)AS家系進(jìn)行了基因分型，結(jié)果顯示位于ANKH堿基序列的兩個(gè)不同區(qū)域與AS相關(guān)：rs26307/rs27356與男性罹患AS相關(guān)，而rs28006/rs25957則與女性罹患AS相關(guān)[10]。這項(xiàng)研究支持了ANKH與AS遺傳易感性具有一定相關(guān)性，同時(shí)還揭示了這種相關(guān)性具有性別-基因特異性。針對(duì)我國(guó)北方漢族群體的研究顯示，rs26307(T)/rs27356(C)單體型為AS的保護(hù)因素[11]。與Tsui等[9]研究結(jié)果不同，該研究中rs26307和rs27356位點(diǎn)基因型和單體型頻率分布無(wú)性別差異；另外，該研究并未發(fā)現(xiàn)rs26307與男性患病相關(guān)。針對(duì)日本及中國(guó)臺(tái)灣人群的研究顯示，ANKH中的SNP c.963T>G(dbSNP ID：rs2288474)在日本人群中顯示出較弱的相關(guān)性(P=0.045)，但在中國(guó)臺(tái)灣人群中未顯示出相關(guān)性[12]。

上述各項(xiàng)研究的異質(zhì)性很高，所采用的統(tǒng)計(jì)量不同且無(wú)法互相轉(zhuǎn)化，所以也無(wú)法對(duì)各研究的統(tǒng)計(jì)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)合并。各研究結(jié)果間的差異來(lái)源可能來(lái)自以下幾個(gè)方面。首先，各研究所納入的SNP間的重合度并不高，故而其結(jié)果間出現(xiàn)差異也并不出乎意料；其次，即使對(duì)于所納入的SNP一致的幾項(xiàng)研究，單就各研究的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、研究類(lèi)型、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法等的異質(zhì)性完全就可以解釋其結(jié)果間的差異；另外，AS的易感性本身就與民族、種族有關(guān)，各研究的研究對(duì)象不一致很可能也會(huì)導(dǎo)致研究結(jié)果的不一致；最后，有研究者猜測(cè)ANKH僅是受到某些上游因素調(diào)控從而導(dǎo)致組織鈣化的下游基因，因此，ANKH可能僅與局部鈣化程度相關(guān)而與AS本身并不相關(guān)。

最后，隨著近年微小RNA成為研究的熱門(mén)，研究者們?cè)噲D從這一表觀遺傳學(xué)層面研究ANKH和AS間的關(guān)系。一項(xiàng)新近的研究顯示下調(diào)AS患者成纖維細(xì)胞中的miR- 17- 5p可以減少其成骨分化，這一調(diào)控作用是通過(guò)和ANKH的3’UTR結(jié)合、調(diào)節(jié)ANKH的表達(dá)水平實(shí)現(xiàn)的，該研究表明miR- 17- 5p的抑制物可以緩解AS模型大鼠的骶髂關(guān)節(jié)炎，抑制異位骨化[13]。該研究從一個(gè)側(cè)面表明，即使ANKH和AS的起病、嚴(yán)重程度、易感性間并無(wú)相關(guān)性，ANKH仍具備成為AS治療靶點(diǎn)的潛質(zhì)。

ANKH與CMD

CMD是一種罕見(jiàn)的遺傳性骨發(fā)育不良疾病。該病特征性的表現(xiàn)是肢體長(zhǎng)骨的骨質(zhì)減少以及顱、頜面部的骨質(zhì)肥厚、硬化。部分嚴(yán)重病例也可由于骨異常增生壓迫顱神經(jīng)孔，導(dǎo)致面神經(jīng)、前庭蝸神經(jīng)、視神經(jīng)的功能障礙。該病的遺傳方式有兩種：常染色體顯性遺傳(AD，MIM#123000，致病基因位于染色體 5p15.2-p14.1[14- 15])，以及常染色體隱性遺傳(AR，MIM#218400，致病基因位于6q21- 22，較AD更為罕見(jiàn)[16- 19])。其中，遵循AD遺傳模式的CMD即由ANKH的突變所致。有研究者通過(guò)對(duì)9個(gè)家系的突變進(jìn)行研究顯示6個(gè)導(dǎo)致該疾病的ANKH突變，這些基因突變包括單核苷酸替換、刪失或者插入，這些突變均發(fā)生于高度保守的核苷酸殘基，且均位于跨膜蛋白的細(xì)胞質(zhì)側(cè)，進(jìn)而導(dǎo)致跨膜蛋白的構(gòu)像變化[20]。除上述研究外，人們還發(fā)現(xiàn)其他位點(diǎn)的刪失突變及插入突變[17]、單氨基酸突變[21]，外顯子區(qū)的復(fù)雜雜合突變[22]、無(wú)意突變L244[23]、母源鑲嵌性突變[24]等其他致病突變形式。上述這些突變所編碼的氨基酸幾乎均位于細(xì)胞內(nèi)或者跨膜段，可以導(dǎo)致PPi轉(zhuǎn)運(yùn)功能異常，從而影響骨質(zhì)鈣化[25]。由于CMD較為罕見(jiàn)，因此研究者們嘗試建立鼠CMD模型，在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物上進(jìn)行有關(guān)CMD的細(xì)胞和分子水平研究。雖然ANK敲除小鼠(ANKnull/null)表型與CMD者類(lèi)似，但是ANK敲除鼠只能復(fù)制出CMD的一部分表現(xiàn)，如顱骨厚度增加、中耳骨融合、枕骨大孔變窄以及股骨干骺端骨小梁減少[25]等。而鼻竇閉塞、下頜骨前突伴頜骨骨量增加、長(zhǎng)骨肥大及干骺端肥大等特點(diǎn)則無(wú)法在ANK敲除鼠中獲得。因此，人們嘗試將表達(dá)ANK人類(lèi)突變(Phe377缺失，TTC1130- 1132)的基因敲入鼠中，這種純合子ANK敲入鼠(ANKKI/KI)成功地復(fù)制了幾乎所有的人類(lèi)CMD特征。在ANKKI/KI鼠的成骨細(xì)胞中PPi水平與正常對(duì)照組的PPi水平類(lèi)似，均顯著高于ANKnull/null組。事實(shí)上，在ANKKI/KI鼠成骨細(xì)胞中，另一PPi穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)基因ENPP- 1的表達(dá)水平顯著增加，這很可能彌補(bǔ)了ANK功能異常導(dǎo)致的PPi水平變化，這表明3組間的表型差異并不是單純的源自成骨細(xì)胞PPi水平的差異。實(shí)驗(yàn)證明，ANKKI/KI鼠的破骨細(xì)胞生成減少。因此使得成骨/破骨間的平衡被打破，導(dǎo)致骨量異常增加，進(jìn)而出現(xiàn)CMD相關(guān)的表型[26]。骨髓移植可以改善這種異常的骨量增加，很可能是因?yàn)橐浦驳墓撬韪杉?xì)胞在體內(nèi)發(fā)生分化，彌補(bǔ)了破骨細(xì)胞的缺乏[26]。由此可見(jiàn)，ANKH導(dǎo)致的破骨細(xì)胞生成減少是導(dǎo)致CMD表型的真正原因，同時(shí)也給CMD的治療指出了方向。如果可將該方法[26]用于其他突變的研究，對(duì)于了解其他突變的致病機(jī)制將很有幫助。但目前仍然不知道突變的ANK是通過(guò)什么調(diào)控方式導(dǎo)致破骨細(xì)胞生成減少的。雖然ANK的蛋白構(gòu)象研究目前仍停留在軟件預(yù)測(cè)的程度上，但仍舊可以推斷，ANKH的致病突變很可能是由于堿基突變導(dǎo)致跨膜蛋白構(gòu)像發(fā)生變化，從而造成某些通路的異?；罨蚴Щ?，最終導(dǎo)致破骨細(xì)胞產(chǎn)生減少的后果。

和其他大多數(shù)罕見(jiàn)基因病一樣，雖然研究者們了解了CMD發(fā)病的分子學(xué)機(jī)制，但是目前并無(wú)針對(duì)CMD的有效治療。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，補(bǔ)充磷酸鹽并不能改善本病的骨骼異常[27]。而存在低血鈣的CMD患者究竟應(yīng)該補(bǔ)鈣治療還是應(yīng)該低鈣飲食尚存在爭(zhēng)議[28]。補(bǔ)鈣可以改善CMD患者的甲狀旁腺素升高和低血鈣，但這樣是否真的可以改善預(yù)后目前尚無(wú)有力證據(jù)[29]。手術(shù)解除神經(jīng)壓迫、糾正關(guān)節(jié)僵硬、調(diào)整面部外觀可以用來(lái)改善神經(jīng)壓迫癥狀、提高生活治療、改善社交[30- 31]。雖然在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)骨髓移植可以改善異常增加的骨量，但距離應(yīng)用于臨床尚有十分遙遠(yuǎn)的距離。ANKH敲入鼠除了出現(xiàn)CMD相關(guān)表型之外還存在破骨細(xì)胞功能異常；而存在Phe377缺失或Ser375缺失的CMD患者的人源多能干細(xì)胞可以穩(wěn)定地分化為破骨細(xì)胞，因而這兩者具備成為工具動(dòng)物、工具細(xì)胞以研究CMD等其他破骨細(xì)胞相關(guān)疾病的潛質(zhì)[32]。

ANKH與焦磷酸鈣沉積

焦磷酸鈣(calcium pyrophosphate，CPP)晶體沉積(calcium pyrophosphate deposition，CPPD)在關(guān)節(jié)軟骨鈣化(chondrocalcinosis，CC)時(shí)十分常見(jiàn)[33]。CPP沉積可能表現(xiàn)為急性焦磷酸鹽晶體性關(guān)節(jié)炎，CPPD并發(fā)骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis，OA)，慢性CPP晶體炎癥性關(guān)節(jié)炎或無(wú)癥狀關(guān)節(jié)鈣化[34]。歷史上，由于這些CPPD疾病的臨床癥狀和痛風(fēng)、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等很類(lèi)似，故而被稱之為 “假性綜合征”，即假性痛風(fēng)和假性類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎[35]等。后來(lái)，這些名稱被歐洲風(fēng)濕病聯(lián)盟公布的新名詞取代。CC可以散發(fā)于關(guān)節(jié)病變的患者中，也可呈家族性分布。

散發(fā)性CC在人群中十分常見(jiàn)。導(dǎo)致CC的高危因素眾多，高齡、骨關(guān)節(jié)炎是十分重要的危險(xiǎn)因素[34]。實(shí)際上，CPPD并發(fā)OA在臨床上十分常見(jiàn)，OA患者也在散發(fā)性CC患者中占據(jù)相當(dāng)大的比重。因此，有關(guān)散發(fā)性CC的研究很多都以O(shè)A患者或OA動(dòng)物模型作為研究對(duì)象和實(shí)驗(yàn)材料的來(lái)源，因而有關(guān)CC的很多研究結(jié)果也可以推廣至OA。CC在OA發(fā)生發(fā)展中的角色并不完全清楚，但可以確定的是，CPPD和OA存在密切聯(lián)系。一方面，CPPD普遍存在于OA患者的關(guān)節(jié)軟骨中，可以涉及整個(gè)膝關(guān)節(jié)軟骨，甚至包含肉眼觀測(cè)正常的負(fù)重區(qū)；同時(shí)有充足證據(jù)證明這些晶體可以啟動(dòng)、放大骨破壞，參與關(guān)節(jié)損傷[34]。另外，關(guān)節(jié)液中CPPD的存在可以用來(lái)預(yù)測(cè)OA患者關(guān)節(jié)損傷的嚴(yán)重程度和關(guān)節(jié)破壞速度[36]。PPi作為CPPD的陰離子組分，其調(diào)控基因ANKH也受到研究者的重視。概括地說(shuō)，ANKH可以調(diào)控CPPD在關(guān)節(jié)組分中的沉積，參與OA的形成和進(jìn)展。有研究者發(fā)現(xiàn)體外培養(yǎng)的合并CPPD的軟骨細(xì)胞和合并CPPD的軟骨提取物中ANK mRNA的基礎(chǔ)表達(dá)高于普通OA患者的軟骨或正常軟骨，而且與沒(méi)有CPPD沉積的對(duì)照組OA患者相比，CPPD沉積患者的關(guān)節(jié)組織中ANK蛋白和mRNA的水平增加，表明ANK在CPPD晶體形成中起到了直接作用[37]。在晶體沉積物附近的軟骨細(xì)胞中，ANKH的免疫熒光強(qiáng)度也明顯增強(qiáng)。另外，OA患者的受累關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞易于在體外被誘導(dǎo)鈣化。在這些細(xì)胞中，與礦化過(guò)程有關(guān)的幾個(gè)基因，包括ENPP- 1和ANKH的表達(dá)可見(jiàn)上調(diào)[38]。上述研究表明，ANKH參與了關(guān)節(jié)軟骨的晶體沉積。另有研究顯示OA患者的半月板細(xì)胞也存在CPPD晶體，并在OA患者半月板中發(fā)現(xiàn)了ANKH的表達(dá)異常，并且表達(dá)水平的異常程度隨著OA嚴(yán)重程度的增加而增加[39- 41]。除了關(guān)節(jié)軟骨和半月板細(xì)胞外，還有研究顯示OA患者的成骨細(xì)胞中的ANKH表達(dá)增加，在硬化的成骨細(xì)胞中觀察到的ANKH高表達(dá)可能是局部PPi積累的原因[42]。

除了ANKH對(duì)CPPD的調(diào)控研究外，尚有研究顯示軟骨鈣化與ANKH的5’UTR中的SNP- 4bpG>A存在關(guān)聯(lián)[43]。雖然在歐洲人中上述SNP與散發(fā)型CC有關(guān)[44]，但是，在同為雅利安人種的以Khatris為種姓的印度OA人群中卻并未發(fā)現(xiàn)這項(xiàng)突變[45]。這一研究結(jié)果間的差別是因?yàn)椴±龜?shù)不夠大還是由于種族間的差異，抑或其他原因目前尚不清楚，ANKH的其他SNP是否與OA存在關(guān)聯(lián)也不得而知。

有研究者發(fā)現(xiàn)，將大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞暴露于白介素- 1β、腫瘤壞死因子α可以使細(xì)胞外無(wú)機(jī)磷酸鹽含量下降，暴露于生長(zhǎng)因子可以使胞外無(wú)機(jī)磷酸鹽含量上升[46- 47]。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β對(duì)于誘導(dǎo)ANKH表達(dá)尤為有效，具有增加軟骨細(xì)胞釋放PPi的能力[48]。上述因子都是OA形成的重要分子機(jī)制，再加上ANKH在軟骨細(xì)胞、半月板細(xì)胞、軟骨下骨中均有表達(dá)并與鈣化、晶體形成等過(guò)程相關(guān)，所以該基因?qū)τ诜乐购湍孓D(zhuǎn)晶體沉積，阻止退變性關(guān)節(jié)炎的進(jìn)展存在理論上的可能性[36]，具備成為預(yù)防、治療靶點(diǎn)的潛質(zhì)。

CPPD還可以作為家族性遺傳病而存在。目前已有多個(gè)國(guó)家和不同種族的家系報(bào)道，遺傳模式通常是常染色體顯性[49- 54]。與CMD患者的負(fù)性功能突變不同，家族性CPPD患者的突變通常為功能獲得性突變[25]。該病主要臨床表現(xiàn)為家族性早發(fā)性(通常在20～40歲)CPP晶體性關(guān)節(jié)炎，伴有多關(guān)節(jié)鈣鹽沉積，輕重不一的結(jié)構(gòu)性關(guān)節(jié)炎/骨關(guān)節(jié)炎。該病還有第2種表型，發(fā)作于60～70歲，表現(xiàn)為少關(guān)節(jié)的鈣鹽沉積，更類(lèi)似于散發(fā)的CPPD[55]。在兒童期良性發(fā)病似乎是一個(gè)早期多關(guān)節(jié)發(fā)病的英國(guó)家系所獨(dú)有的。導(dǎo)致該病的染色體5p15上的致病基因CCAL2(MIM 118600，即ANKH)即首次在這個(gè)家族中被鑒定出來(lái)[56]。在美國(guó)的另一個(gè)合并早發(fā)OA和相關(guān)CPPD的家庭中，則發(fā)現(xiàn)了該病的另一個(gè)致病基因，位于染色體8q(CCAL1，MIM 600668)[57]。有研究將導(dǎo)致CPPD的ANKH突變(ΔE490)轉(zhuǎn)染入成軟骨細(xì)胞ATDC5中，實(shí)驗(yàn)證明ANKH和組織非特異性堿性磷酸酶的相互作用有利于正常組織礦化，而ANKH的功能異常即可導(dǎo)致組織非特異性堿性磷酸酶的調(diào)控異常。加上其他尚不明確的調(diào)控因素，導(dǎo)致病理性礦化發(fā)生，出現(xiàn)CPPD[58]。該研究者的另一項(xiàng)研究還將同樣可以導(dǎo)致CPPD的ANKH的突變M48T轉(zhuǎn)染入ATDC5細(xì)胞中，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)ANKH M48T突變蛋白喪失了與鈉/磷酸鹽共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PiT- 1相互作用的能力。而PiT- 1則可以調(diào)節(jié)Pi和PPi的穩(wěn)態(tài)[59]。這些研究初步說(shuō)明ANKH突變所導(dǎo)致CPPD的分子機(jī)制，即突變導(dǎo)致結(jié)構(gòu)異常，進(jìn)而導(dǎo)致蛋白質(zhì)互相作用異常。由于上述突變所造成的功能異常穩(wěn)定且可在細(xì)胞水平進(jìn)行驗(yàn)證，故而這些攜帶ANKH突變的細(xì)胞同樣具備成為工具細(xì)胞的潛質(zhì)。

無(wú)論是家族性的焦磷酸鈣蛋白沉積病還是散發(fā)型的焦磷酸鈣蛋白沉積病，目前的治療方法都和骨關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎乃至痛風(fēng)類(lèi)似，主要是對(duì)癥及抗炎治療。在疾病的急性發(fā)作期早期或慢性CPP關(guān)節(jié)炎的早、中期，均以非甾體類(lèi)抗炎藥、糖皮質(zhì)激素治療，羥氯喹、甲氨蝶呤等免疫抑制治療為主?？捎糜谥委熗达L(fēng)的秋水仙堿、白介素- 1抑制劑可能對(duì)該病也有效。和OA一樣，在CPPD疾病的終末期關(guān)節(jié)置換術(shù)仍然是改善癥狀及關(guān)節(jié)功能的優(yōu)選治療方案。目前尚無(wú)作用于ANKH的減少晶體形成的治療方法。究其緣由，首先，目前尚缺乏高選擇性調(diào)節(jié)ANKH表達(dá)水平的治療手段，關(guān)節(jié)局部的RNA干擾雖不失為一項(xiàng)有前景的治療方法，但目前尚無(wú)此類(lèi)研究出現(xiàn)。其次，在控制異常鈣鹽沉積的同時(shí)如何還能夠不影響正常骨質(zhì)鈣沉積也是有待解決的難題。最后，PPi平衡的穩(wěn)態(tài)同時(shí)還受其他基因調(diào)控，單一改變AKNH的表達(dá)能否起到預(yù)期的結(jié)果也不得而知。

綜上，ANKH是骨關(guān)節(jié)組織鈣化的重要調(diào)節(jié)物，在AS、CMD、CC等骨關(guān)節(jié)病的分子機(jī)制中扮演了重要角色。對(duì)于AS，雖然ANK無(wú)意突變可以導(dǎo)致小鼠與AS類(lèi)似的表現(xiàn)，但ANKH的SNP與AS的相關(guān)性間目前尚有爭(zhēng)議。盡管如此，通過(guò)微小RNA對(duì)ANKH表達(dá)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)依然可能改善AS的嚴(yán)重程度。對(duì)于CMD來(lái)說(shuō)，目前人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了多種ANKH的致病突變形式。破骨細(xì)胞生成減少(可能系因ANKH突變導(dǎo)致蛋白構(gòu)象改變)是導(dǎo)致CMD表型的重要原因。骨髓移植可能成為CMD的治療方法。對(duì)于散發(fā)性CPP沉積病，ANKH通過(guò)調(diào)節(jié)CPP沉積參與CC、OA等CPPD沉積相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展；對(duì)于家族性CPPD，ANKH突變則是主要病因之一。目前研究主要集中于ANKH與上述疾病的易感性、起病及發(fā)展的分子機(jī)制，以及使用攜帶該基因突變型的細(xì)胞、動(dòng)物作為疾病和細(xì)胞分化異常研究工具。目前尚缺乏的研究方向有：ANKH突變與蛋白構(gòu)象改變、調(diào)控異常相關(guān)性的研究，如何精確地、局部地改變ANKH表達(dá)的研究，以及將ANKH作為治療靶點(diǎn)的疾病治療研究。近年，有關(guān)該基因的研究和尤其是骨關(guān)節(jié)病的研究不多，近年所檢索到的有關(guān)ANKH的研究很多是將其作為組織鈣化的標(biāo)記物。此外，由于ANKH的表達(dá)受微小RNA的影響[13，60]，微小RNA及RNA干擾技術(shù)可能使ANKH成為治療靶點(diǎn)，具備應(yīng)用潛質(zhì)，但目前該方向的研究仍極度缺乏，有待研究者們進(jìn)一步探索。