楊柏 李金慶

（煙臺海關(guān)技術(shù)中心 山東煙臺 264000）

1 動物疫病實(shí)驗(yàn)室檢測概述

動物疫病的實(shí)驗(yàn)室檢測是動物疫病檢測機(jī)構(gòu)依據(jù)國家所制定動物防疫的規(guī)定以及標(biāo)準(zhǔn)，嚴(yán)格遵循國家所制定相關(guān)的法律法規(guī)和檢驗(yàn)流程與檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)等，對動物活體及其制品開展的檢測活動。在國內(nèi)對動物疫病的檢測中，實(shí)驗(yàn)室檢測是重要手段，檢測人員需要重點(diǎn)關(guān)注幼年動物體內(nèi)的抗體水平及變化情況。同時，需要對養(yǎng)殖環(huán)境內(nèi)部的疫病進(jìn)行監(jiān)測，并對動物流行病實(shí)施研究和分析。另外，還需要對疫病未來發(fā)展的趨勢進(jìn)行預(yù)測，若養(yǎng)殖場受到某種病原的侵襲，則檢測人員就需要對動物開展血清或PCR檢測工作，將檢測結(jié)果和養(yǎng)殖場動物疫病的實(shí)際發(fā)生情況、養(yǎng)殖場對動物用藥的情況等進(jìn)行綜合分析，并制定科學(xué)的檢測報(bào)告，為養(yǎng)殖企業(yè)提供科學(xué)建議[1]。

2 影響動物疫病實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的因素

2.1 人為影響

在對動物疫病開展實(shí)驗(yàn)室檢測的過程中，檢測人員的專業(yè)水平、工作態(tài)度和綜合素養(yǎng)等，都會對檢測結(jié)果產(chǎn)生較大影響。例如，部分檢測人員在開展血凝抑制試驗(yàn)或酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)期間，存在操作失誤、實(shí)驗(yàn)步驟不完善等情況，就會影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.2 儀器設(shè)備

在對動物疫病開展實(shí)驗(yàn)室的檢測期間，需要使用到很多類型儀器和設(shè)備，且這些儀器和設(shè)備也存在型號、參數(shù)與精密度等性能的不同，而它們的性能參數(shù)對檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性有著直接的影響。如在實(shí)驗(yàn)室的檢測中往往會用到離心機(jī)，其根據(jù)用途還可以分作低、中、高速等類型，若對儀器設(shè)備的選擇中沒有結(jié)合實(shí)際所需合理選用，就可能會導(dǎo)致誤差的出現(xiàn)，且同樣的離心機(jī)也可能會因?yàn)樾阅苷系K或者維護(hù)的不當(dāng)，而造成偏差值的出現(xiàn)，影響實(shí)驗(yàn)室的檢測結(jié)果。

2.3 實(shí)驗(yàn)樣本

在對動物開展實(shí)驗(yàn)室檢測的過程中，需要使用動物樣品組織、分泌物或血樣等樣本。對動物開展血清學(xué)實(shí)驗(yàn)期間，血清溶血的程度會直接影響到檢測結(jié)果。在畜禽動物受到細(xì)菌或病毒感染后，勢必會對動物的不同靶器官造成影響，因?yàn)槠湓馐懿煌≡⑸锏母腥?，即便樣本是從同一動物體內(nèi)取出，也會呈現(xiàn)出差異性的檢測結(jié)果。如若動物由于細(xì)菌或者病毒而導(dǎo)致其出現(xiàn)呼吸道疾病，此時病原菌在其氣管或者肺臟內(nèi)集中；若動物因?yàn)榧?xì)菌或者病毒導(dǎo)致消化道疾病出現(xiàn)，此時其病原菌則在腸道或者糞便內(nèi)集中。因此，在取樣期間，若沒有對動物的不同發(fā)病部位情況進(jìn)行詳細(xì)了解，會影響到檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性[2]。

2.4 實(shí)驗(yàn)試劑

在實(shí)驗(yàn)室檢測中，試劑的使用十分頻繁，不同試劑在敏感性和穩(wěn)定性等方面存在一定差異，即便是同一類試劑，由于生產(chǎn)批次不同，其效果也可能會有差異。同時，如果在對標(biāo)準(zhǔn)溶液等試劑的存放過程中沒有做到嚴(yán)格規(guī)范，或沒有在有效期內(nèi)及時使用，都會導(dǎo)致其出現(xiàn)失效的情況，從而對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。另外，在檢測期間，如果室內(nèi)的溫度條件發(fā)生變化，也可能會使試劑的參數(shù)條件出現(xiàn)變化，使檢測結(jié)果出現(xiàn)誤差。

2.5 檢測方法

在對動物疫病開展實(shí)驗(yàn)室的檢測中，同一項(xiàng)目可能存在多種檢測方法，而這些不同方法的檢測結(jié)果可能存在差異性。在開展檢測中，應(yīng)當(dāng)根據(jù)實(shí)際的檢測需求，合理選擇檢測方法，如果控制得不夠嚴(yán)格，將會影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.6 實(shí)驗(yàn)環(huán)境

環(huán)境因素對于動物疫病實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果的影響主要體現(xiàn)在溫度、濕度及實(shí)驗(yàn)環(huán)境清潔情況等。例如，在進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)過程中，對于實(shí)驗(yàn)室溫度有一定要求，如果溫度不達(dá)標(biāo)，會影響檢測試劑及樣品的發(fā)揮，減緩反應(yīng)速度，最終對實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果造成影響。如果實(shí)驗(yàn)室環(huán)境遭受污染，也會影響到檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性[3]。

3 動物疫病實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果準(zhǔn)確性影響因素的控制

3.1 對實(shí)驗(yàn)人員加強(qiáng)培訓(xùn)

在對動物疫病開展實(shí)驗(yàn)室的檢測中，為避免人為因素對檢測結(jié)果造成影響，需要加強(qiáng)對實(shí)驗(yàn)人員的培訓(xùn)。應(yīng)當(dāng)做好培訓(xùn)制度的制定，對實(shí)驗(yàn)檢測人員定期開展知識、技能和職業(yè)培訓(xùn)活動，幫助檢測人員掌握各項(xiàng)操作要領(lǐng)和規(guī)范，保持良好的工作責(zé)任心與工作態(tài)度。同時，為切實(shí)確保對檢測人員的培訓(xùn)能夠取得良好的效果，還需要將培訓(xùn)工作與考核工作相結(jié)合，對檢測人員的知識、技能和責(zé)任意識等實(shí)施全面的監(jiān)督與評價，促進(jìn)檢測人員綜合素養(yǎng)的全面提升，為實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)確檢測奠定基礎(chǔ)，全方位地實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室檢測水平的提升。

3.2 對實(shí)驗(yàn)室的檢測流程嚴(yán)格規(guī)范

在對動物疫病開展實(shí)驗(yàn)室檢測的過程中，一定要做好對檢測流程的規(guī)范和檢測標(biāo)準(zhǔn)的明確，確保檢測流程的規(guī)范性，并做好對器材設(shè)備的性能檢查和維護(hù)工作。同時，要做好實(shí)驗(yàn)方法的合理選擇，避免實(shí)驗(yàn)方法的不合理或不規(guī)范影響到檢測結(jié)果[4]。另外，還需要對實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的廢料、廢液等進(jìn)行及時處理，避免對實(shí)驗(yàn)過程產(chǎn)生影響。

3.3 加大對實(shí)驗(yàn)室內(nèi)硬件設(shè)施的建設(shè)

為確保實(shí)驗(yàn)室的檢測工作能夠有序和有效的開展，需要有良好的實(shí)驗(yàn)硬件條件作為支撐，需要加大實(shí)驗(yàn)室硬件設(shè)施的建設(shè)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的具體情況做好對實(shí)驗(yàn)室的科學(xué)規(guī)劃，積極引進(jìn)先進(jìn)的硬件設(shè)備和技術(shù)，明確實(shí)驗(yàn)室人員的職能，實(shí)現(xiàn)精細(xì)化分工，確保實(shí)驗(yàn)室的檢測工作能夠高質(zhì)高效完成。

3.4 做好實(shí)驗(yàn)樣本良好處理

為避免實(shí)驗(yàn)樣本對檢測結(jié)果造成影響，需要做好實(shí)驗(yàn)樣本的處理工作，在對實(shí)驗(yàn)樣本進(jìn)行采樣時，一定要嚴(yán)格依據(jù)要求，規(guī)范開展采樣工作，準(zhǔn)確采樣、科學(xué)儲存，為實(shí)驗(yàn)室的檢測奠定良好基礎(chǔ)[5]。

3.5 對實(shí)驗(yàn)試劑正確選用

做好對實(shí)驗(yàn)試劑合理選擇，是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的必要條件。在對實(shí)驗(yàn)試劑選擇中，要與檢測項(xiàng)目的需求相結(jié)合，對實(shí)驗(yàn)試劑進(jìn)行合理選擇和有效驗(yàn)證，避免因?yàn)樵噭┰蚨鴮?dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)誤差。

3.6 對實(shí)驗(yàn)環(huán)境嚴(yán)格控制

在對動物疫病開展實(shí)驗(yàn)室檢測的過程中，需要做好對溫度、濕度等環(huán)境條件的控制，保證最佳的檢測條件，同時還需要做好對儀器、設(shè)備的清潔工作，避免衛(wèi)生條件不達(dá)標(biāo)而影響檢測結(jié)果。

4 污染處理措施

4.1 輕度污染處理措施

對于離心機(jī)轉(zhuǎn)子、八聯(lián)管板、PCR板，可通過50%的84消毒液進(jìn)行30 min的浸泡，注意進(jìn)行多次重復(fù)。對于操作臺面，可先通過酒精進(jìn)行擦拭，之后用30%的84消毒液進(jìn)行多次重復(fù)擦拭。每次實(shí)驗(yàn)前后，都要運(yùn)用酒精擦拭離心機(jī)、移液槍和操作臺面。在實(shí)驗(yàn)室管理中，每天要通過30%的84消毒水對地面進(jìn)行1～2次的擦拭。要對實(shí)驗(yàn)室做好通風(fēng)管理，并適當(dāng)運(yùn)用紫外線燈照射方式處理污染。運(yùn)用上述方法，通常情況下7 d即可基本消除污染。

4.2 中度、重度污染處理措施

一方面，要對污染源頭進(jìn)行有效評估，重點(diǎn)是評估試劑盒污染、環(huán)境污染以及器材污染，特別是離心機(jī)與移液槍。首先，要準(zhǔn)備一組新的試劑盒、耗材、離心機(jī)、移液槍。其次，要在新的環(huán)境下使用原來的試劑和新的移液槍配2個陰性對照，而后上機(jī)擴(kuò)增，若未發(fā)生污染，則代表試劑盒未出現(xiàn)污染問題；若發(fā)生污染，則代表試劑盒已被污染。之后，在原來的環(huán)境下運(yùn)用新的試劑盒和新的移液槍配2個陰性對照，之后上機(jī)擴(kuò)增，若未發(fā)生污染，則代表環(huán)境未受到污染；若出現(xiàn)污染，則代表環(huán)境已受污染。最后，在新的環(huán)境下運(yùn)用新的試劑盒和原來的移液槍配2個陰性對照，之后上機(jī)擴(kuò)增，若未發(fā)生污染，則代表移液槍未受污染；若存在污染，則代表移液槍已被污染。

另一方面，要注意對不同污染進(jìn)行針對性處理。首先，要對器材污染進(jìn)行有效處理。在移液槍污染處理中，要在移液槍未帶有槍頭的情況下吸取酒精，使槍柄部分完全浸泡于酒精當(dāng)中，使其中的有機(jī)物充分溶解。之后，在移液槍未帶有槍頭的情況下吸取清水，重復(fù)多次，以完全洗掉有機(jī)物和酒精，進(jìn)而使用未帶有槍頭的移液槍吸取50%的84消毒液，重復(fù)多次，同步停留至少30 min，后用未帶有槍頭的移液槍吸取清水，將所吸取清水視作樣品展開檢測，結(jié)合檢測結(jié)果，評估是否已消除污染。對于八聯(lián)管板架和離心板架，應(yīng)當(dāng)先完全浸泡在酒精中，之后通過清水洗凈，后浸泡于30%的84消毒水中，浸泡時間至少30 min，而后用清水洗凈，重復(fù)多次。針對離心機(jī)污染，可先通過酒精擦拭，后用清水擦拭多次，將轉(zhuǎn)子浸泡于50%的84消毒液當(dāng)中，后用清水洗凈，經(jīng)過充分晾曬，通過棉簽采集離心機(jī)拭子并檢測，結(jié)合結(jié)果評估污染解除與否。其次，要處理試劑盒污染，主要是將污染試劑盒封存，使用中使用新試劑盒。最后，要處理環(huán)境污染。具體是每天用30%的84消毒液對操作臺面進(jìn)行2～3次擦拭，結(jié)合實(shí)際情況適當(dāng)增減擦拭次數(shù)。對于設(shè)備門把手、外部區(qū)域、門窗把手，可通過10%的84消毒液進(jìn)行2～3次擦拭。實(shí)驗(yàn)所產(chǎn)生的垃圾但凡可浸泡在消毒水中，均選擇浸泡處理，否則進(jìn)行無害化處理。地面處理中，使用50%的84消毒液沾濕拖把，而后反復(fù)拖地，每天拖2次。實(shí)驗(yàn)室若有紫外線設(shè)備，將紫外線燈開啟，照射約30 min，注意每天都要長時間的對實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行紫外線照射消毒。實(shí)驗(yàn)室環(huán)境應(yīng)當(dāng)適度通風(fēng)，使氣溶膠蓄積逐步降低，若通風(fēng)條件不佳，可選擇風(fēng)扇進(jìn)行機(jī)械通風(fēng)。環(huán)境污染處理后，采集環(huán)境樣品展開檢測，結(jié)合檢測結(jié)果評估污染消除與否。

5 結(jié)論

綜上所述，動物疫病實(shí)驗(yàn)室檢測是實(shí)現(xiàn)動物疫病有效預(yù)防與控制的重要手段，但在其檢測中還常受諸多因素的影響，導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確，為避免此類情況的出現(xiàn)，需要相關(guān)部門和人員全面了解其影響因素，并采取有效措施，確保檢測工作的有序和有效開展，提高檢測質(zhì)量。