（勁牌研究院，中藥保健食品質(zhì)量與安全湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北大冶 435100）

在酒類(lèi)消費(fèi)升級(jí)的趨勢(shì)下，飲健康的酒和如何健康飲酒成為一種時(shí)尚追求[1-7]。其中，飲酒后是否口干及口干程度，逐漸成為人們?cè)谌粘ｏ嬀浦刑接懙囊环N健康飲酒感受。研究顯示，在大量急性和慢性飲用酒精后，會(huì)嚴(yán)重影響口腔感知，產(chǎn)生口渴和口干?？诳剩茄獫{滲透壓升高和體液量減少，及影響神經(jīng)、體液的神經(jīng)遞質(zhì)、激素及細(xì)胞因子綜合作用誘導(dǎo)產(chǎn)生?？诟?，是口腔干燥的一種綜合感覺(jué)，由唾液分泌減少引起[8]。引起白酒飲后口干的原因包括酒中的乙醛、雜醇油含量過(guò)高，酸酯比例不協(xié)調(diào)等因素[9-12]。引起保健酒飲后口干的因素不僅涉及到原酒的使用，還包括各種組方藥材和輔料。另外，飲酒者的飲酒方式、生理?xiàng)l件、心理狀態(tài)等因素對(duì)其感受的飲后口干程度也有影響[8]。

目前，臨床前口干研究，多采用實(shí)驗(yàn)小鼠的飲水量變化、唾液分泌量等指標(biāo)來(lái)考察其口干程度[12-14]。而臨床研究，主要考察臨床口干患者的唾液分泌情況與其口腔中的靜息唾液流率[15]。從臨床診斷研究角度出發(fā)，唾液在功能上等同于血清[16-17]。本研究從唾液分泌量與血清滲透壓的潛在相關(guān)性出發(fā)，先后采用水、相同度數(shù)的酒精和一種保健酒灌胃，均檢測(cè)禁水后不同時(shí)間點(diǎn)的血清滲透壓，初步確定飲后口干程度與血清滲透壓的關(guān)系。將血清滲透壓指標(biāo)的檢測(cè)與動(dòng)物醉酒試驗(yàn)結(jié)合，探索性應(yīng)用于白酒、保健酒等酒類(lèi)飲后口干程度的對(duì)比分析。通過(guò)檢測(cè)飲酒小鼠翻正反射恢復(fù)后血清滲透壓，對(duì)比分析小鼠飲酒后的口干程度，以評(píng)價(jià)酒體的飲后口干程度。

在白酒、保健酒等產(chǎn)品開(kāi)發(fā)與優(yōu)化升級(jí)過(guò)程中，如何使飲酒者在飲后減輕甚至避免口干也成為各種酒類(lèi)產(chǎn)品研發(fā)的方向與重點(diǎn)。因此，研發(fā)一種客觀而有效的評(píng)價(jià)白酒、保健酒等酒類(lèi)飲后口干程度的檢測(cè)方法，具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 酒樣、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和儀器

酒樣：主要包括35%vol酒精，一種保健酒不同生藥濃度酒體1#，2#，3#，4#，5#（表1）。均為實(shí)驗(yàn)室自制樣品。

表1 保健酒不同生藥濃度酒體分組及信息

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：雄性BALB/c小鼠，SPF級(jí)，18～22 g，6～8周齡。許可證號(hào)碼：SCKXK(湘)2011-0003，購(gòu)于湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。IVC 籠具飼養(yǎng)，5～6 只/籠。飼養(yǎng)溫度20～25 ℃，相對(duì)濕度40 %～70 %，自然光照12 h 明暗交替。采用飲水瓶供應(yīng)，自由飲水。灌胃前12 h 禁食不禁水。試驗(yàn)前小鼠適應(yīng)環(huán)境3～5 d。適應(yīng)期主要檢查內(nèi)容：是否與訂購(gòu)時(shí)要求的質(zhì)量指標(biāo)一致；一般狀態(tài)；體重是否達(dá)到試驗(yàn)要求的體重范圍；不合格的動(dòng)物不納入本試驗(yàn)。本研究所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物操作均按湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理辦法進(jìn)行。

儀器設(shè)備：冰點(diǎn)滲透壓儀（德國(guó)羅澤，OM815）、電子天平（梅特勒-托利多儀器上海有限公司，ME2002E/02）、低溫冷凍離心機(jī)（sigma，1-14K）等。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物購(gòu)入后，適應(yīng)性喂養(yǎng)后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定，35%vol酒體灌胃劑量為0.19 mL/10 g·bw。實(shí)驗(yàn)前12 h 禁食，自由飲水。按體重隨機(jī)分組，每組10～12只，并用苦味酸進(jìn)行標(biāo)記。采用水、35%vol酒精分別灌胃，依次在禁水0 h、灌胃后禁水0.5 h、1 h、2 h、3 h 共5 個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)各組實(shí)驗(yàn)小鼠取血。采用保健酒不同生藥濃度酒體灌胃后觀察小鼠的醉酒狀況，待翻正反射恢復(fù)后取血（按照灌胃順序）。靜置30 min 后，3500 r/min、15 min 離心，吸取上清液后-20 ℃冰箱保存。將血清樣本室溫解凍30～60 min，采用冰點(diǎn)滲透壓儀進(jìn)行血清滲透壓測(cè)量。采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，采用統(tǒng)計(jì)軟件spss19.0進(jìn)行單因素方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 灌胃水后禁水不同時(shí)間小鼠血清滲透壓變化與口干程度

考察灌胃水后禁水0 h、0.5 h、1 h、2 h、3 h 小鼠血清滲透壓的變化。如表2。

表2 禁水后不同時(shí)間血清滲透壓變化

從表2 可以看出，與禁水0 h 比較，實(shí)驗(yàn)小鼠灌胃水后禁水0.5～3 h 其血清滲透壓顯著升高（p＜0.01）。結(jié)果表明，在禁水后0.5 h 開(kāi)始，實(shí)驗(yàn)小鼠血清滲透壓開(kāi)始顯著升高；且在禁水0.5～3 h 內(nèi)，實(shí)驗(yàn)小鼠的血清滲透壓均保持在一個(gè)較高值。初步分析禁水后0.5 h 實(shí)驗(yàn)小鼠出現(xiàn)口干，且在禁水0.5至3 h內(nèi)均保持明顯的口干程度。

表4 保健酒不同生藥濃度酒體飲后醉酒和血清滲透壓結(jié)果

2.2 灌胃35 %vol 酒精和保健酒后禁水不同時(shí)間小鼠血清滲透壓變化與口干程度

考察灌胃35%vol 酒精和保健酒后禁水0.5 h、1 h、2 h、3 h小鼠血清滲透壓的變化。如表3。

從表3 可以看出，與灌胃前-對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)小鼠灌胃35 %vol 酒精和保健酒后，禁水0.5～3 h其血清滲透壓均顯著升高（p＜0.01）。與35 %vol酒精灌胃后0.5 h 組比較，35%vol 酒精灌胃后禁水1 h 實(shí)驗(yàn)小鼠血清滲透壓顯著升高（p＜0.05），灌胃后禁水3 h 實(shí)驗(yàn)小鼠血清滲透壓顯著降低（p＜0.05），灌胃后禁水2 h 實(shí)驗(yàn)小鼠血清滲透壓無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與35%vol 保健酒灌胃后0.5 h 組比較，保健酒灌胃后禁水1～3 h 實(shí)驗(yàn)小鼠血清滲透壓均極顯著升高（p＜0.01），呈現(xiàn)一定的下降趨勢(shì)。

結(jié)果表明，與灌胃前口干情況比較，35%vol 酒精和保健酒灌胃后禁水0.5 h 實(shí)驗(yàn)小鼠口干程度明顯。且35 %vol 酒精和保健酒在灌胃后禁水0.5 h至3 h 內(nèi)呈現(xiàn)不一樣的口干程度變化，但均在灌胃后禁水1 h 時(shí)出現(xiàn)峰值。其中，35%vol 酒精灌胃后禁水0.5 h 至1 h，其口干程度呈現(xiàn)明顯升高，然后在禁水3 h 其口干程度明顯降低。35 %vol 保健酒灌胃后禁水0.5～3 h 內(nèi)，其口干程度保持明顯升高，但有隨著禁水時(shí)間延長(zhǎng)口干程度下降的趨勢(shì)。分析35%vol 酒精灌胃后口干程度的變化，主要和機(jī)體中攝入乙醇及其代謝物乙醛等物質(zhì)含量有關(guān)。35 %vol 保健酒飲后口干程度的變化，與同度數(shù)酒精存在差異，可能還與保健酒基酒及其組方藥材所含成分在機(jī)體內(nèi)的代謝情況有關(guān)。

2.3 保健酒不同生藥濃度酒體的飲后血清滲透壓與口干程度

結(jié)合小鼠醉酒試驗(yàn)，以保健酒基酒為對(duì)照，記錄分析保健酒不同生藥濃度酒體灌胃后小鼠醉酒試驗(yàn)的潛伏期、沉醉期，并檢測(cè)分析翻正反射恢復(fù)后血清滲透壓數(shù)據(jù)。保健酒不同生藥濃度的小鼠醉酒和滲透壓結(jié)果如表4。

從表4 可以看出，保健酒不同生藥濃度酒體灌胃飲后，與對(duì)照組-保健酒基酒組比較，保健酒不同生藥濃度組的沉醉期不同程度的縮短，潛伏期均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。其中，保健酒M 組、H1 組和H2 組沉醉期顯著縮短（p＜0.01，p＜0.05，p＜0.01），保健酒L 組沉醉期較基酒對(duì)照組無(wú)差異。同時(shí)，保健酒不同生藥濃度組的翻正反射恢復(fù)后血清滲透壓呈現(xiàn)一定差異性。即保健酒L 組、M 組滲透壓較基酒對(duì)照組顯著升高（p＜0.01，p＜0.05），保健酒H2 組滲透壓較基酒對(duì)照組顯著降低（p＜0.01），保健酒H1組滲透壓較基酒對(duì)照組無(wú)差異。如圖1。

圖1 保健酒不同生藥濃度酒體飲后血清滲透壓變化

結(jié)果顯示，與保健酒基酒比較，添加不同生藥濃度組方藥材對(duì)保健酒飲后醉酒度有不同程度的改善作用；且添加高生藥濃度的組方藥材，對(duì)飲后口干程度具有減輕作用。其中，保健酒5～15 倍生藥濃度酒體飲后醉酒度均呈現(xiàn)明顯的改善作用。且保健酒1～5 倍生藥濃度酒體飲后口干程度明顯加重，保健酒10 倍生藥濃度酒體飲后口干程度與其基酒飲后口干程度無(wú)差異，保健酒15 倍生藥濃度酒體飲后口干程度明顯減輕，整體呈現(xiàn)保健酒10～15 倍高生藥濃度酒體飲后口干程度明顯減輕的結(jié)果。綜合顯示，在保健酒基酒的基礎(chǔ)上，添加10～15倍生藥濃度的組方藥材，對(duì)其飲后醉酒度和口干程度具有顯著的改善作用。

3 結(jié)論

采用藥理動(dòng)物模型開(kāi)展飲酒口干程度檢測(cè)方法的探索性研究與應(yīng)用。通過(guò)明確實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在禁水0.5～3 h 內(nèi)血清滲透壓顯著升高，開(kāi)展相同度數(shù)的酒精和保健酒灌胃飲后血清滲透壓變化對(duì)比研究，初步建立并驗(yàn)證動(dòng)物模型口干程度與其血清滲透壓的相關(guān)性。探索性應(yīng)用于不同生藥濃度的組方藥材對(duì)保健酒飲后醉酒度和口干程度的影響研究。通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，相同度數(shù)的酒精和保健酒飲后口干程度變化呈現(xiàn)一定的差異性；且添加不同生藥濃度的組方藥材對(duì)保健酒飲后口干程度也有不同影響。由于口干是一個(gè)復(fù)雜的生理現(xiàn)象，與唾液腺功能、內(nèi)外部刺激、神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)控等多因素相關(guān)，因此飲酒后對(duì)機(jī)體血清滲透壓影響及導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生口干等作用機(jī)理有待進(jìn)一步研究明確。