何 沛，馬永華，劉仁民，王殿奎

(中唯國(guó)際生命科技有限公司，天津 300381)

衛(wèi)矛醇(dulcitol或galactitol)作為一種促進(jìn)乳桿菌生長(zhǎng)的益生元，其對(duì)人體功能性的研究尚不多見。作者曾研究了人體連續(xù)試食2 g含量大于99.9%的衛(wèi)矛醇具有顯著的通便功效[1]，但是衛(wèi)矛醇調(diào)節(jié)人體腸道菌群的功效作用尚不可知。為此，在國(guó)家食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中心對(duì)衛(wèi)矛醇安全性評(píng)估意見[2]的基礎(chǔ)上，采用調(diào)節(jié)腸道菌群功能檢驗(yàn)方法(衛(wèi)健委《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》[3])進(jìn)行試驗(yàn)研究，對(duì)每日食用2 g含量大于99.9%的衛(wèi)矛醇對(duì)人體腸道菌群的影響予以評(píng)價(jià)，以期為衛(wèi)矛醇膳食補(bǔ)充劑開發(fā)中產(chǎn)品配方設(shè)計(jì)衛(wèi)矛醇的添加量及其它研究提供一定參考依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 樣品

衛(wèi)矛醇(中唯國(guó)際生命科技有限公司提供，山東福田藥業(yè)有限公司生產(chǎn))。樣品性狀：白色結(jié)晶性粉末；規(guī)格：2 g/袋；批號(hào)：20190620；貯藏方法：密閉，置陰涼干燥處存放；保質(zhì)期：24個(gè)月。安慰劑為食用小麥淀粉。規(guī)格：2 g/袋；貯藏方法：密閉，置陰涼干燥處存放；保質(zhì)期：24個(gè)月。

1.2 儀器與試劑

日立7180全自動(dòng)生化分析儀(日本株式會(huì)社日立高新技術(shù)生產(chǎn))；桂林優(yōu)利特300全自動(dòng)尿液分析儀(桂林優(yōu)利特電子集團(tuán)有限公司生產(chǎn))；Sysmex-K21 三分類血液分析儀(Sysmex公司生產(chǎn))；Sysmex血細(xì)胞分析稀釋液(Sysmex公司生產(chǎn))；KX-21全自動(dòng)血液分析儀(日本希森美康公司生產(chǎn))；BS-800全自動(dòng)生化分析儀(深圳邁瑞公司生產(chǎn))；優(yōu)利特URIT尿八聯(lián)試紙(桂林優(yōu)利特電子集團(tuán)有限公司生產(chǎn))；利德曼生化試劑盒(北京利德曼生化股份有限公司生產(chǎn))；日本協(xié)和生化試劑盒(日本協(xié)和醫(yī)藥株式會(huì)社生產(chǎn))；日本一化生化試劑盒(日本第一化學(xué)藥品株氏會(huì)社生產(chǎn))；原丁試劑(上海阿拉丁生化科技股份有限公司生產(chǎn))；德國(guó)CENTRONIC試劑(德國(guó)CENTRONIC公司上過(guò)床)；Vitek MS微生物檢測(cè)儀(法國(guó)梅里埃公司生產(chǎn))。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法和觀察指標(biāo)

1.3.1 試驗(yàn)步驟

試食組人群試食受試物前，無(wú)菌采取受試者糞便，檢驗(yàn)?zāi)c桿菌、腸球菌、擬桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、雙歧桿菌、乳桿菌等指標(biāo)。受試者每日服用受試物，連續(xù)30 d。于服受試物最后一次24 h后，無(wú)菌采取受試者糞便，再次檢驗(yàn)上述指標(biāo)。對(duì)照組人群試驗(yàn)前后糞便無(wú)菌采集和檢驗(yàn)指標(biāo)均同試食組。

1.3.2 觀察指標(biāo)

雙歧桿菌、乳桿菌、腸桿菌、腸球菌、擬桿菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌。

2 結(jié)果

2.1 試食組與對(duì)照組均衡性比較

納入受試者58例，試驗(yàn)結(jié)束后試食組有3例、對(duì)照組有4例受試者脫失，有效受試者試食組26例，對(duì)照組25例。由表2可見，試食前，試食組性別、年齡、腸道菌群與對(duì)照組比較，差異無(wú)顯著性(P>0.05)，表明兩組試食前年齡、性別和腸道菌群具有均衡可比性。

表1 受試者國(guó)籍分布Tab.1 Nationality distribution of subjects

表2 試食前兩組腸道菌群、年齡、性別均衡性比較

2.2 試食組與對(duì)照組一般情況比較

對(duì)受試者睡眠、飲食、精神、大小便情況進(jìn)行了詢問(wèn)調(diào)查，按差、一般、良好分級(jí)統(tǒng)計(jì)，并測(cè)量心率、血壓。腹部心電圖、B超、胸透未見異常，試食組和對(duì)照組均在正常范圍。并且由表3可見，兩組試食前后自身比較，所有指標(biāo)差異均無(wú)顯著性(P>0.05)；大部分受試者一般情況良好，試食組試食后飲食情況、精神狀態(tài)正常，表明試食對(duì)人體一般情況無(wú)不良影響。

表3 試食前后兩組一般情況比較

2.3 試食前后血常規(guī)、尿常規(guī)、便常規(guī)及血生化指標(biāo)

兩組受試者的血液生化指標(biāo)及血常規(guī)基本在正常范圍內(nèi)，并且兩組試食前后自身比較無(wú)顯著改變(P>0.05)。兩組試食前后便常規(guī)、尿常規(guī)均基本正常。

表4 試食前后血、尿、便常規(guī)及血生化指標(biāo)變化

2.4 受試物對(duì)人體腸道菌群的影響

由表5可知，試食前試食組與對(duì)照組比較各指標(biāo)菌數(shù)量均無(wú)顯著差異(P>0.05)。服用受試物30 d后，試食前后自身相比，試食組乳桿菌數(shù)量增加，有顯著性差異(P<0.01)；雙歧桿菌、腸桿菌、腸球菌、擬桿菌及產(chǎn)氣莢膜梭菌的數(shù)量變化差異無(wú)顯著性(P>0.05)，對(duì)照組各指標(biāo)菌變化均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。試食組試食后與對(duì)照組相比，試食組乳桿菌的數(shù)量增加，有顯著性差異(P<0.01)；雙歧桿菌、腸球菌、腸桿菌、擬桿菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌數(shù)量差異均無(wú)顯著性(P>0.05)。

表5 受試人群試食前后腸道菌群變化

2.5 受試者脫失率

納入受試者58例，試食組29例、對(duì)照組29例。其中對(duì)照組有4例、試食組有3例未在規(guī)定時(shí)間按時(shí)復(fù)查，均符合受試者排除標(biāo)準(zhǔn)，有效受試者試食組26例、對(duì)照組25例，試食組、對(duì)照組受試者脫失率分別為10.3%、13.8%。

2.6 不良反應(yīng)觀察

未見過(guò)敏及其他不良反應(yīng)。

表6 試食后兩組試食期間其他不良反應(yīng)及過(guò)敏反應(yīng)情況Tab.6 Other adverse reactions and anaphylaxos situations of two groups during test

3 結(jié)論

3.1 改變腸道菌群功效

采用自身與組間兩種對(duì)照設(shè)計(jì)。51例符合要求的有效受試者，試食組26例、對(duì)照組25例。對(duì)照組安慰劑對(duì)照。試食組人群服用受試物30 d后，試食前后自身相比，試食組乳桿菌數(shù)量增加有顯著性差異(P<0.01)；雙歧桿菌、擬桿菌、腸球菌、腸桿菌及產(chǎn)氣莢膜梭菌的數(shù)量變化差異無(wú)顯著性(P>0.05)，對(duì)照組各指標(biāo)菌變化均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。另外，試食組試食后與對(duì)照組相比，可看出試食組乳桿菌數(shù)量明顯增加，有顯著性差異(P<0.01)；腸球菌、腸桿菌、擬桿菌、雙歧桿菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌數(shù)量差異均無(wú)顯著性(P>0.05)。

根據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》2003版中的調(diào)節(jié)腸道菌群功能人體試食試驗(yàn)的判定標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果顯示，衛(wèi)矛醇具有調(diào)節(jié)人體腸道菌群功能。

3.2 對(duì)身體健康的影響

試食者胸透、腹部B超、心電圖均基本在正常范圍。試食衛(wèi)矛醇前后，受試者尿常規(guī)、血常規(guī)、便常規(guī)、心率、血壓及血生化指標(biāo)均在正常范圍，這說(shuō)明本品對(duì)試食者身體健康無(wú)不良影響。

3.3 過(guò)敏及其它不良反應(yīng)

試食衛(wèi)矛醇之后，均未觀察到試食者過(guò)敏及其它不良反應(yīng)。

4 討論

每日攝食2 g衛(wèi)矛醇具有調(diào)節(jié)人體腸道菌群、激活人體乳桿菌增殖作用，對(duì)人體健康無(wú)不良作用。

腸道菌群對(duì)宿主免疫系統(tǒng)的影響與宿主健康相關(guān)。Kailyn L. Stefan等人在小鼠研究中鑒定出特定的腸道細(xì)菌，可以誘導(dǎo)免疫細(xì)胞釋放出一種被稱為1型干擾素(IFN-1)的抗病毒化學(xué)物質(zhì)，重要的是，能進(jìn)一步精準(zhǔn)確定并分離出廣泛的腸道細(xì)菌所共有的分子，補(bǔ)充這種分子足以恢復(fù)整個(gè)腸道菌群的保護(hù)作用[4]。

對(duì)于衛(wèi)矛醇調(diào)節(jié)人體腸道菌群、從而產(chǎn)生對(duì)人體免疫系統(tǒng)的作用來(lái)促進(jìn)人體健康和預(yù)防與治療各種疾病是否有效還有待進(jìn)一步研究[5-7]。關(guān)于高劑量(大于2 g)衛(wèi)矛醇調(diào)節(jié)人體腸道菌群以及腸道微生物的改變是一個(gè)十分迫切的研究課題，有待進(jìn)一步探究。