葉 霆 鄭善堅 史文競 胡金春

(1.衢州市水產(chǎn)技術(shù)推廣中心，浙江 衢州 324000；2.浙江師范大學(xué)，浙江 金華 321004)

維氏氣單胞菌(Aeromonas veronii)隸屬于氣單胞菌科、弧菌屬，近年來已在羅非魚、鰻鱺、黃顙魚、斑點叉尾■和草魚等多種淡水魚造成發(fā)病死亡，張飄等報道維氏氣單胞菌感染的草魚主要出現(xiàn)掉鱗、腸炎、腹水等細(xì)菌性敗血病癥狀。維氏氣單胞菌主要發(fā)生在8-9 月草魚的快速生長期，水質(zhì)、水溫和天氣等因素影響易造成發(fā)病感染。本文對2020 年5 月發(fā)生的一例草魚大量死亡的病例進行病原鑒定及防治探討，供大家參考。

一、池塘養(yǎng)殖情況

發(fā)病池塘為狹長形土塘，地勢較低，水面15 畝，平均水深1.4 米。2 月16 日投放草魚種1 000 尾/畝，魚種平均規(guī)格為6 尾/千克，一直吃料較好，生長較快，日投喂量最高達(dá)到3 包料(120千克)，4月底平均規(guī)格達(dá)到0.5千克/尾。

二、發(fā)病情況

2020 年4 月28 日草魚出現(xiàn)少量死亡，死魚前剛增加投喂了1周的蘆葦草，出現(xiàn)發(fā)病情況后停止投喂。死亡草魚體表正常，肛門有輕微發(fā)紅，料臺上部分吃食魚的頭部發(fā)白或發(fā)黃，養(yǎng)殖戶認(rèn)為是投喂了蘆葦草引起的腸炎，就內(nèi)服3天的恩諾沙星進行消炎。5 月1 日草魚死亡量增多，5 月3 日激增至1 000 多尾。5 月4 日筆者去現(xiàn)場檢查，水質(zhì)基本正常，氨氮0.5 毫克/升，亞硝酸鹽0.1 毫克/升。但解剖發(fā)現(xiàn)草魚鰓絲腫脹，腸道充血發(fā)紅，鱗片疏松，腹腔內(nèi)有腹水，腸道充血發(fā)紅(圖1)，肝臟呈土黃色且萎縮。

圖1 發(fā)病草魚解剖

三、病原檢測

用接種環(huán)無菌操作，將病魚的肝胰臟、腎臟等組織在瓊脂肉湯培養(yǎng)基劃線，35℃條件下培養(yǎng)24 小時，挑取形態(tài)大小相似的菌落進行純化培養(yǎng)，其生理生化指標(biāo)用梅里埃VITEK2 Compact 全自動細(xì)菌鑒定分析儀進行鑒定。鑒定結(jié)果顯示，在發(fā)病草魚內(nèi)臟上分離到的細(xì)菌為維氏氣單胞菌(Aeromonas veronii)，其生理生化指標(biāo)見表1。根據(jù)生理生化的判定結(jié)果，提取細(xì)菌DNA，使用維氏氣單胞菌的特異性RAA試劑盒擴增，凝膠電泳觀察。經(jīng)電泳后顯示擴增出大小為1 500 bp 左右的特異性條帶(圖2)，確認(rèn)為維氏氣單胞菌。

表1 細(xì)菌的生理生化鑒定

圖2 RAA擴增條帶

四、藥敏試驗與治療效果

采用藥敏紙片法，結(jié)果顯示該菌對恩諾沙星、慶大霉素、鏈霉素、氟苯尼考、卡那霉素、阿奇霉素、強力霉素敏感，對頭孢拉定、四環(huán)素、土霉素、紅霉素、利福平、青霉素耐藥。

根據(jù)藥敏試驗結(jié)果，先減半投喂飼料，采用外潑應(yīng)激素和有機酸穩(wěn)定魚體和水質(zhì)，3小時后外用中草藥暴病一潑停(板藍(lán)根、黨參等)，內(nèi)服敏感抗生素氟苯尼考，結(jié)合保肝藥物肝腎康、增強代謝的應(yīng)激寧，以及促進機體微量元素和多維平衡的“賽維”，共內(nèi)服5 天，其中氟苯尼考投喂3 天。5 月4 日開始處理，當(dāng)天死魚1 200 多尾， 5 月 8 日 死 魚降為100多尾，隔兩天又繼續(xù)按上述方法投喂第2 個療程，至5 月15日死魚基本停止。

五、討論與分析

本次草魚的發(fā)病死亡情況嚴(yán)重，呈現(xiàn)爆發(fā)式增長，經(jīng)細(xì)菌鑒定為維氏氣單胞菌。維氏氣單胞菌對環(huán)境適應(yīng)力較強，在土壤及各種水環(huán)境中都存在，是一種人、獸及水生動物共患的條件致病菌。

分析本病例發(fā)現(xiàn)，該養(yǎng)殖戶在春季草魚的飼料投喂管理上存在不足。王明闖認(rèn)為早春魚體的食欲和腸道的消化機能存在一個錯位問題，魚體雖然攝食旺盛，但大量攝食容易引起腸道的損傷。4月以后的投喂量增加較快，雖然魚體生長也快，但沒有考慮春季魚的腸道消化機能問題，相關(guān)的促代謝、微量元素和腸道調(diào)理的保健又沒有跟上，導(dǎo)致草魚腸道負(fù)擔(dān)過大。相反在4月下旬增加投喂了蘆葦草，蘆葦草葉子雖嫩，但其莖稈較堅硬，草魚大量攝食蘆葦草加劇了草魚腸道的炎癥。

綜合以上病因分析，在治療過程中通過減少飼料的投喂，使用應(yīng)激素和有機酸穩(wěn)定魚的體質(zhì)和水質(zhì)，結(jié)合內(nèi)服保肝、促代謝的微量元素、多種維生素和適當(dāng)使用敏感抗生素，取得了較好的治療效果。