駱妙卡

結(jié)核病是臨床常見(jiàn)的傳染性疾病，我國(guó)作為結(jié)核病發(fā)病最為嚴(yán)重的國(guó)家之一，每年新發(fā)結(jié)核病患者超過(guò)130萬(wàn)，占到全球每年新發(fā)病例的15%左右[1]。由此可見(jiàn)，結(jié)核病的防治形勢(shì)不容樂(lè)觀，須進(jìn)一步加強(qiáng)防治工作。目前，對(duì)于肺結(jié)核病的診治和檢測(cè)方法較多，常見(jiàn)的有痰液培養(yǎng)、藥敏試驗(yàn)等技術(shù)，盡管具有較為廣泛的開(kāi)展率，但存在一定的不足，痰涂片陽(yáng)性率較低，結(jié)核桿菌培養(yǎng)條件要求高，藥敏試驗(yàn)周期長(zhǎng)，容易造成誤診[2]。隨著分子生物學(xué)的快速發(fā)展以及對(duì)結(jié)核桿菌基因組的分析，新型的檢測(cè)方法Xpert MTB/RIF得到了廣泛的關(guān)注，在痰涂片及常規(guī)檢測(cè)手段上進(jìn)行改進(jìn)，可在短時(shí)間內(nèi)完成對(duì)結(jié)核桿菌及其耐藥性的檢測(cè)，得到了許多國(guó)家認(rèn)可，對(duì)結(jié)核病的診斷做出了重要貢獻(xiàn)，但我國(guó)對(duì)其研究較少[3]。為此我院選取120例初診疑似肺結(jié)核病患者展開(kāi)分析，對(duì)比不同方法對(duì)結(jié)核病的診斷情況，結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年1～6月我院收治的120例疑似肺結(jié)核病患者，其中男57例(47.5%)，女63例(52.5%)；年齡21～78(54.16±3.59)歲。其中年齡≥60歲31例(25.83%)，40～59歲59例(49.17%)，<40歲23例(19.17%)。痰液性狀：干酪樣痰35例、黏液痰62例、血痰23例。

1.2方法

1.2.1檢測(cè)所用儀器設(shè)備和試劑 Xpert MTB/RIF檢測(cè)系統(tǒng)及試劑；酸性培養(yǎng)基；藥敏培養(yǎng)基。在檢測(cè)過(guò)程中，嚴(yán)格按照《結(jié)核病診斷細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)規(guī)程》[4]相關(guān)要求操作。

1.2.2檢測(cè)操作 ①采用堿處理固體培養(yǎng)法進(jìn)行分離培養(yǎng)藥敏試驗(yàn)，若結(jié)果為陽(yáng)性，則進(jìn)行比例法藥敏試驗(yàn)；②Xpert MTB/RIF檢測(cè)：根據(jù)1∶2的比例原則，將1 ml的標(biāo)本溶于處理液中，輕微振動(dòng)并將混合液搖勻，靜置15 min；③利用菌吸管吸取混合液，吸取量為2 ml，然后轉(zhuǎn)移至一次性反應(yīng)盒中，放入檢測(cè)系統(tǒng)中進(jìn)行檢測(cè)，并于2 h后利用檢測(cè)軟件讀取數(shù)據(jù)。

1.3觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 以傳統(tǒng)比例法藥敏試驗(yàn)為金標(biāo)準(zhǔn)，分析不同方法檢測(cè)痰標(biāo)本中結(jié)核桿菌及耐藥菌的陽(yáng)性率以及抗酸染色法和Xpert MTB/RIF3的靈敏度、特異性。陽(yáng)性：金標(biāo)準(zhǔn)確診有該疾病，試驗(yàn)檢出的陽(yáng)性例數(shù)；陰性：金標(biāo)準(zhǔn)確診無(wú)該疾病，試驗(yàn)檢出的陰性例數(shù)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，定性數(shù)據(jù)采用χ2檢驗(yàn)，以P≤0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1固體培養(yǎng)法與Xpert MTB/RIF法檢測(cè)結(jié)核桿菌的陽(yáng)性率比較 見(jiàn)表1。120例患者中，Xpert MTB/RIF檢測(cè)結(jié)核桿菌的陽(yáng)性率為70.00%，高于固體培養(yǎng)法的55.00%(χ2=5.76，P<0.05)。

表1 固體培養(yǎng)法與Xpert MTB/RIF法檢測(cè)結(jié)核桿菌的陽(yáng)性率比較 [例(%)]

2.2固體培養(yǎng)法與抗酸染色法檢測(cè)結(jié)核桿菌的陽(yáng)性率比較 見(jiàn)表2。120例患者中，抗酸染色法檢測(cè)結(jié)核桿菌的陽(yáng)性率為40.83%，低于固體培養(yǎng)法的55.0%(χ2=4.83，P<0.05)。

表2 固體培養(yǎng)法與抗酸染色法檢測(cè)結(jié)核桿菌的陽(yáng)性率比較 [例(%)]

2.3Xpert MTB/RIF與抗酸染色法檢測(cè)結(jié)核桿菌的靈敏度、特異度比較 Xpert MTB/RIF檢測(cè)結(jié)核桿菌的靈敏度為70.83%(85/120)，特異度為88.33%(106/120)；抗酸染色法檢測(cè)結(jié)核桿菌的靈敏度為48.33%(58/120)，特異度為53.33%(64/120)；Xpert MTB/RIF檢測(cè)結(jié)核桿菌的靈敏度高于抗酸染色法(χ2=12.61，P<0.01)，特異度亦高于抗酸染色法(χ2=35.58，P<0.01)。

3 討 論

結(jié)核病作為一種傳染性疾病，其耐藥情況較為嚴(yán)重，受到了全社會(huì)的廣泛關(guān)注[5]。目前認(rèn)為，涂片鏡檢法、傳統(tǒng)藥檢等是檢測(cè)結(jié)核菌的有效方式，但所需時(shí)間較長(zhǎng)，特異度較低，影響藥敏報(bào)告的時(shí)效性。傳統(tǒng)固體培養(yǎng)法和比例法體外藥敏試驗(yàn)需要時(shí)間為4～8周，因此在臨床診療過(guò)程中常延誤結(jié)核病的早期診斷和治療而導(dǎo)致預(yù)后不佳[6]。為此，探求合理的診斷方式對(duì)患者的治療至關(guān)重要。

隨著臨床醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)的不斷發(fā)展，針對(duì)結(jié)核病的檢測(cè)技術(shù)日趨豐富，檢測(cè)水平有了明顯提高。其中Xpert MTB/RIF檢測(cè)技術(shù)是一種半巢式實(shí)時(shí)熒光定量PCR體外診斷技術(shù)，針對(duì)rpoB基因81 bp利福平耐藥核心區(qū)間設(shè)計(jì)引物、探針，對(duì)其是否發(fā)生突變進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)對(duì)是否為肺結(jié)核病，或者是否對(duì)利福平耐藥進(jìn)行檢測(cè)[7]。從世界各國(guó)對(duì)肺結(jié)核病及耐藥結(jié)核菌檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用來(lái)看，Xpert MTB/RIF檢測(cè)技術(shù)是當(dāng)前首選的檢測(cè)技術(shù)，其效果受到了社會(huì)的高度認(rèn)可，在全自動(dòng)檢測(cè)系統(tǒng)中完成檢驗(yàn)，最終可以取得較準(zhǔn)確的診斷結(jié)果。

本研究嘗試將Xpert MTB/RIF檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用于肺結(jié)核病及耐藥菌的檢測(cè)中，取得了理想的效果。研究結(jié)果顯示，在120例患者中，Xpert MTB/RIF的檢測(cè)陽(yáng)性率(70.00%)高于固體培養(yǎng)法(55.00%)，說(shuō)明對(duì)于疑似肺結(jié)核病患者Xpert MTB/RIF檢測(cè)應(yīng)用價(jià)值高于固體培養(yǎng)法，與陸小玲[8]的研究結(jié)果一致。究其原因，固體培養(yǎng)法在應(yīng)用酸、堿進(jìn)行前處理時(shí)，會(huì)損傷標(biāo)本中40%～70%結(jié)核菌活性，一定程度上影響結(jié)果的判別，同時(shí)部分患者痰液不是從肺深部咳出，含菌量少，其在玻片上黏附力差，在后續(xù)染色過(guò)程中會(huì)造成部分成分的大量丟失，導(dǎo)致檢出率降低。Xpert MTB/RIF檢測(cè)系統(tǒng)采用了實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增技術(shù)，操作簡(jiǎn)單，全自動(dòng)運(yùn)行，降低污染，實(shí)施快速檢測(cè)，陽(yáng)性率高。本研究結(jié)果顯示，固體培養(yǎng)法與抗酸染色法進(jìn)行比較，抗酸染色法的陽(yáng)性率(40.83%)低于固體培養(yǎng)法(55.0%)，說(shuō)明對(duì)于疑似肺結(jié)核病患者固體培養(yǎng)法的陽(yáng)性檢測(cè)值高于抗酸染色法，與周洪經(jīng)等[9]研究結(jié)果一致。究其原因，抗酸染色法操作簡(jiǎn)單、快速，但靈敏度較低，容易出現(xiàn)漏檢，從而影響診斷結(jié)果，其中不排除檢測(cè)人員技術(shù)水平，是否按照操作要求執(zhí)行的問(wèn)題，固體培養(yǎng)法是傳統(tǒng)的結(jié)核桿菌檢驗(yàn)方法，可準(zhǔn)確判斷出患者是否有結(jié)核桿菌耐藥菌的感染。

本文采用Xpert MTB/RIF、抗酸染色法、固體培養(yǎng)法三種方法進(jìn)行檢測(cè)，研究結(jié)果顯示，Xpert MTB/RIF比抗酸染色法靈敏度高(70.83%)、特異性強(qiáng)(88.33%)，與孫蕊等[10]研究結(jié)果相符。究其原因，固體培養(yǎng)法耗時(shí)較長(zhǎng)，無(wú)法滿足結(jié)核病快速診斷的要求，抗酸染色方法簡(jiǎn)便快捷，但陽(yáng)性率較低，結(jié)核病痰標(biāo)本結(jié)核菌數(shù)目需>5000條/ml才能得到陽(yáng)性結(jié)果，靈敏度較低，特異性較差，Xpert MTB/RIF檢測(cè)結(jié)核桿菌敏感、方法簡(jiǎn)單、操作便捷快速、安全，準(zhǔn)確度高，對(duì)基層單位結(jié)核患者的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷及治療具有重要的意義，因而此技術(shù)在實(shí)驗(yàn)室結(jié)核病診斷中具有可行性。

綜上所述，采用Xpert MTB/RIF檢測(cè)肺結(jié)核病及耐藥結(jié)核菌，檢測(cè)的靈敏度、特異性較高，在各級(jí)結(jié)核病防治機(jī)構(gòu)均有廣泛的應(yīng)用前景。