黃 方，龔文靜，刁慶春，江 瓊，林 茂、

（1．重慶醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院2019級碩士研究生，重慶 400016；2．重慶市中醫(yī)院皮膚科，重慶400011；3．重慶醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院，重慶 400016）

白癜風(fēng)是一種常見的色素脫失性皮膚黏膜疾病，世界范圍內(nèi)發(fā)病率為0.5%～1%，嚴(yán)重影響著患者的生活質(zhì)量［1］。目前該病的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，主要認(rèn)為其發(fā)病與自身免疫、氧化應(yīng)激、黑素細(xì)胞自毀、遺傳等多方面功能障礙相關(guān)，導(dǎo)致黑素細(xì)胞破壞，最終使患處色素脫失而致［2］。黑色素是形成皮膚顏色的主要物質(zhì)，由處于表皮內(nèi)基底層的黑素細(xì)胞分泌，黑素細(xì)胞破壞或黑素細(xì)胞合成障礙均會導(dǎo)致色素缺失性疾病。目前認(rèn)為白癜風(fēng)患者皮損中以CD8+T細(xì)胞為主的浸潤，攻擊黑素細(xì)胞造成白斑形成是其主要發(fā)病機(jī)制之一。自身抗氧化系統(tǒng)破壞導(dǎo)致黑素細(xì)胞易受到自由基介導(dǎo)的損傷，氧化應(yīng)激本身也可能誘發(fā)自身免疫反應(yīng)攻擊，也可能是白癜風(fēng)病情發(fā)生發(fā)展的一部分機(jī)制［3］。因此，對白癜風(fēng)的治療目前主要以抑制自身免疫、抗氧化、促進(jìn)黑素細(xì)胞恢復(fù)為主要策略。

關(guān)于白癜風(fēng)的治療中醫(yī)古籍早有記載，巢元方著《諸病源侯論》謂：“白癜者，面及頸項(xiàng)身體皮肉色變白，與血色不同，亦不癢痛，謂之白癜?！贝艘嗍怯伞帮L(fēng)邪搏于皮膚，血?dú)獠缓退病?。王清任著《醫(yī)林改錯》論證白癜風(fēng)為“血瘀皮里”，成為白癜風(fēng)病因病機(jī)研究一個里程碑，王氏創(chuàng)制的通竅活血湯現(xiàn)代用治白癜風(fēng)仍然有效。朱仁康總結(jié)近代學(xué)者臨床經(jīng)驗(yàn)，提出“肝腎不足，皮毛腠里失養(yǎng)而發(fā)白斑”的觀點(diǎn)。近年來，中醫(yī)治療白癜風(fēng)取得的療效備受矚目，有關(guān)中醫(yī)藥治療白癜風(fēng)的作用機(jī)制研究日益增加，在相關(guān)領(lǐng)域取得了一定的研究成果［4］。在中醫(yī)藥治療白癜風(fēng)研究中，以中藥復(fù)方和單味中藥治療報(bào)道居多，然而中藥成分復(fù)雜，其中哪些成分對白癜風(fēng)治療有效尚不十分清楚。近年國內(nèi)外對中草藥單體化合物的研究取得較多成果，發(fā)現(xiàn)一些中藥的有效成分可作用于抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、促進(jìn)黑素細(xì)胞增殖、黑素生成等多個機(jī)制，可能對白癜風(fēng)的治療有效［5］，部分中藥有效成分應(yīng)用于動物模型及臨床研究取得較好療效。

1 免疫調(diào)節(jié)機(jī)制

白癜風(fēng)是一種炎癥性皮膚病，白癜風(fēng)患者的CD8+T細(xì)胞可以表達(dá)皮膚歸巢受體和皮膚淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原，從而進(jìn)一步動員外周血T細(xì)胞遷移到受損皮膚，攻擊黑素細(xì)胞［6］。此外，研究發(fā)現(xiàn)白癜風(fēng)患者體液免疫也參與到免疫發(fā)病機(jī)制中，對黑素細(xì)胞有殺傷作用［7］。近年來，諸多研究證明具有免疫調(diào)節(jié)作用的中藥單體對CLA+CD8+T細(xì)胞有抑制功能，從而可能用于治療白癜風(fēng)。

1.1 芹黃素（Apigenin）

芹黃素是一種黃酮類化合物，廣泛分布于溫?zé)釒У氖卟撕退?，尤以芹菜中含量為高，芹黃素具有抗菌、抗癌作用，可降低患慢性疾病的風(fēng)險［8］。張寶祥［9］研究表明芹黃素可抑制進(jìn)展期白癜風(fēng)患者外周血CLA+CD8+T細(xì)胞增殖，抑制白癜風(fēng)CLA+CD8+T細(xì)胞分泌IL-2，能誘導(dǎo)白癜風(fēng)CLA+CD8+T細(xì)胞周期停滯在G0/G1期，可能用于白癜風(fēng)的治療。

1.2 綠茶多酚（Green tea polyphenols）

綠茶多酚是綠茶的提取物，具有免疫調(diào)節(jié)作用，主要化學(xué)成分是Epigallocatechin-3-gallate（EGCG）。閻羽欣等［10］研究表明EGCG在自身免疫性疾病中對多種固有免疫細(xì)胞和適應(yīng)性免疫細(xì)胞具有免疫調(diào)節(jié)作用。Zhu YP等［11］用莫諾苯宗外涂誘導(dǎo)小鼠白癜風(fēng)模型，研究EGCG的作用，結(jié)果顯示組織學(xué)檢查提示皮損處CD8+T細(xì)胞浸潤減少，從而推測EGCG可能對白癜風(fēng)自身免疫有抑制作用。

2 抗氧化機(jī)制

皮膚作為人體第一道保護(hù)屏障，每天暴露于紫外線（UV）輻射、各種化學(xué)物質(zhì)的侵害，以及內(nèi)外環(huán)境活性氧（ROS）的攻擊，很容易引起皮膚細(xì)胞的損傷［12］。研究發(fā)現(xiàn)DNA堿基氧化損傷與白癜風(fēng)的發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)［13］。氧化應(yīng)激可激活角質(zhì)形成細(xì)胞未折疊蛋白應(yīng)答，增加趨化因子CXCL16等的表達(dá)，誘導(dǎo)CD8+T細(xì)胞趨化攻擊黑素細(xì)胞［14］。此外，氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的角質(zhì)形成細(xì)胞IL-15表達(dá)有助于激活CD8+T細(xì)胞，為誘導(dǎo)白癜風(fēng)自身免疫的一種新機(jī)制［15］。因此，抗氧化治療可能會保護(hù)黑素細(xì)胞，阻斷自身免疫攻擊，從而有助于白癜風(fēng)的治療。以中藥為主的植物藥是天然抗氧化劑的主要來源，實(shí)驗(yàn)證明諸多中藥提取物可發(fā)揮抗氧化作用，在白癜風(fēng)的治療中具有較好的應(yīng)用前景。

2.1 胡椒堿（Piperine）

胡椒堿是從黑胡椒提取出來的一種生物堿，基于動物和人類的研究，胡椒堿被發(fā)現(xiàn)具有抗氧化、抗炎、抗?jié)兊茸饔?。有?bào)道關(guān)于聯(lián)合NB-UVB和胡椒堿軟膏的體內(nèi)動物模型研究，在小鼠模型上評估了三種不同的胡椒堿類似物聯(lián)合紫外線促進(jìn)皮膚色素沉著的療效，包括胡椒堿、四氫胡椒堿和胡椒堿還原環(huán)己基。結(jié)果表明，胡椒堿、四氫胡椒堿或胡椒堿還原環(huán)己基與紫外線聯(lián)合使用可使小鼠產(chǎn)生明顯的色素沉著，與單獨(dú)使用紫外線照射相比，色素沉著的產(chǎn)生優(yōu)于單用紫外線照射；此外，采用同樣方法在人體面部使用安慰劑對比試驗(yàn)中，取得了同樣的效果，提示胡椒堿聯(lián)合NB-UVB可能是治療白癜風(fēng)的有效方法［16］。

2.2 綠茶多酚（Green tea polyphenols）

綠茶多酚是綠茶的提取物，自古就有藥用價值，在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中已經(jīng)被證實(shí)具有抗炎、抗衰老、抗氧化［17］及抗腫瘤作用［18］。綠茶中含有大量的多酚類物質(zhì)，包括黃烷醇類和黃酮醇類物質(zhì)，黃烷-3-醇類物質(zhì)被稱為兒茶素，主要為表兒茶素（EC）、表沒食子兒茶素（EGC）、表兒茶素沒食子酸酯（ECG）和表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG），其中EGCG 水平最高［19］。近期研究表明，綠茶多酚可以抗黑素細(xì)胞氧化應(yīng)激，減少黑素細(xì)胞凋亡，可能有助于白癜風(fēng)的治療［5］。另一項(xiàng)研究用乙?；〈鶨GCG的羥基成為完全乙?；疎GCG（AcEGCG），結(jié)果顯示AcEGCG較EGCG更能有效的保護(hù)黑素細(xì)胞免受DCF-DA誘導(dǎo)的氧化損傷［20］。

2.3 辣椒素（Capsaicin）

辣椒素是辣椒屬植物的有效成分之一，由于其抗炎和抗氧化的作用，成為白癜風(fēng)治療的備選藥物。Becatti M等［21］選取12例白癜風(fēng)患者經(jīng)辣椒素治療前后的皮損，發(fā)現(xiàn)未治療的白癜風(fēng)周圍皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞中，激活的p38水平明顯增加，用辣椒素治療可降低p38磷酸化，并且增加細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases，ERK）磷酸化，從而抑制細(xì)胞凋亡；辣椒素作為天然抗氧化劑，可抑制caspase激活，提高總抗氧化能力，抑制細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生，提高線粒體活性，從而對角質(zhì)形成細(xì)胞起到抗氧化保護(hù)作用。

2.4 姜黃素（Curcumin）

姜黃素是一種從金香料姜黃中提取的多酚，具有抗氧化、抗增殖、抗炎、抗病毒、抗菌等特性，已被廣泛用于各種疾病的治療［22］。研究人員用四氫姜黃素乳膏與NB-UVB聯(lián)合治療白癜風(fēng)，光療每周進(jìn)行2次，共12周。在治療方案結(jié)束時，與只接受NB-UVB治療的患者相比，患者色素沉著更明顯，因此姜黃素可能作為白癜風(fēng)患者的輔助治療［23］。

2.5 槲皮素（Quercetin）

槲皮素是一種黃酮類化合物，具有多種生物活性，廣泛分布于多種植物中，如銀杏葉、中藥槐米、菟絲子、刺五加等，它具有抗氧化及清除自由基的作用。Jeong YM等［24］研究發(fā)現(xiàn)槲皮素可以保護(hù)Me-Ab細(xì)胞（immortalized melanocyte cell）減少H202誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用。另外有研究表明槲皮素能拮抗氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的角質(zhì)形成細(xì)胞早期細(xì)胞凋亡及線粒體損傷［25］。

2.6 芹黃素（Apigenin）

芹黃素屬于黃酮類化合物，廣泛存在于芹菜、歐芹及洋甘菊植物中［8］。研究表明其具有調(diào)節(jié)炎癥、氧化應(yīng)激［26］及抗癌的作用［27］。Zhang BX等［28］用芹黃素處理PIG3V細(xì)胞，用H2O2激發(fā)，然后用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）評估活性和氧化應(yīng)激相關(guān)參數(shù)，結(jié)果提示芹黃素能增強(qiáng)細(xì)胞抗氧化物SOD、CAT和GSH-Px的表達(dá)，通過激活Nrf2通路保護(hù)黑素細(xì)胞免受氧化損傷。張德利等［29］采用MTT法測定芹黃素對HaCat細(xì)胞的活力的影響，結(jié)果顯示芹黃素可能通過抗氧化對白癜風(fēng)x-box結(jié)合蛋白1（x-box binding protein 1，xBPl）表達(dá)升高具有抑制作用，減少氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的自身免疫，有潛力成為治療白癜風(fēng)的新藥之一。

2.7 黃芩素（Baicalein）

黃芩素又稱為黃芩苷元、黃芩黃素，為黃酮類化合物，是黃芩干燥根提取物的主要有效成分，有抗氧化、抗炎、抗細(xì)菌等作用。張倩等［31］通過測定黃芩素對DPPH自由基、超氧陰離子的清除活性，表明黃芩素對DPPH自由基、超氧陰離子均具有較強(qiáng)的清除活性，且呈劑量依賴關(guān)系［30］。最近研究發(fā)現(xiàn)，黃芩素可通過激活核因子紅血球樣因子2（Nrf2）信號，起到抗氧化保護(hù)黑素細(xì)胞作用。

3 激活酪氨酸酶的活性機(jī)制

酪氨酸酶稱為一元酚單氧酶，又稱DOPA氧化酶，具有多種催化功能，是黑素合成過程中的主要限速酶［32］，任何激活或者抑制酪氨酸酶的活性的因素都能夠有效調(diào)節(jié)黑素生成，研究表明，諸多中藥單體對酪氨酸酶活性有激活作用，從而促進(jìn)黑素細(xì)胞增值，可以應(yīng)用于治療白癜風(fēng)［33］。

3.1 山奈素（Kaempferol）

山奈素又稱作山奈酚或貓眼草素，屬于黃酮類化合物，具有抗炎、抗氧化以及抗癌的作用［34］。譚城等［35］采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法體外測定酪氨酸酶活性，結(jié)果表明2mmol/L山奈素對酪氨酸酶的激活率高達(dá)110%。

3.2 補(bǔ)骨脂素/8-甲氧補(bǔ)骨脂素（8-methoxypsoralen）

補(bǔ)骨脂素來源于補(bǔ)骨脂，是一種光敏化合物，有抗炎的作用，也被用于免疫治療［36］。黃波等［37］利用薄層色譜（TLC）法鑒定出，補(bǔ)骨脂中含有的補(bǔ)骨脂素及其衍生物是具激活酪氨酸酶活性的有效單體成分，可考慮作為白癜風(fēng)治療的協(xié)同用藥。李劍［38］通過研究表明補(bǔ)骨脂素與8-甲氧補(bǔ)骨脂素（8-MOP）同為香豆素類化合物，對酪氨酸酶活性有很好的上調(diào)作用，對黑素的合成有促進(jìn)作用。

3.3 胡椒堿（Piperine）

胡椒堿是胡椒子中主要的生物堿，是黑胡椒和白胡椒的主要味道來源，馬慧軍等［39］研究發(fā)現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)濃度（0.01～1.00mmol/L）胡椒堿可促進(jìn)酪氨酸酶活性，體外可直接增加蘑菇酪氨酸酶的活性，0.5mmol/L的胡椒堿對黑素含量促進(jìn)作用最為明顯。

4 促進(jìn)黑素細(xì)胞增殖分化

目前治療白癜風(fēng)的方法旨在阻止其進(jìn)展和恢復(fù)色素沉著，通過刺激現(xiàn)有的黑色素細(xì)胞增殖遷移到脫色區(qū)。白癜風(fēng)皮損中，表皮活躍的黑素細(xì)胞完全缺失，而毛囊中還含有黑素細(xì)胞干細(xì)胞，這些干細(xì)胞在一定條件下可再次增殖分化，新分化的黑素細(xì)胞具有恢復(fù)正常色素的能力［40］。由此黑素細(xì)胞干細(xì)胞為白癜風(fēng)的復(fù)色提供了來源，研究表明某些中藥單體對黑素細(xì)胞的增殖、分化、遷移有促進(jìn)作用。

4.1 芍藥甙（Paeoniflorin）

李劍［38］指出中藥單體芍藥甙可以促進(jìn)黑素細(xì)胞增殖，上調(diào)酪氨酸酶的活性和促進(jìn)黑素合成，并可以促進(jìn)黑素細(xì)胞TYR、TRP-1mRNA基因表達(dá)，推測芍藥甙可能通過此途徑起到促進(jìn)黑素合成的作用。

4.2 黃芪甲苷（astragaloside iv）

黃芪在中醫(yī)學(xué)中具有補(bǔ)氣升陽、利水消腫、行滯通痹等功效，其主要的活性成分之一為黃芪甲苷?，F(xiàn)代藥理研究表明，黃芪甲苷具有抗炎、抗氧化［41］、抗腫瘤等多種藥理作用［42］。李劍［38］認(rèn)為黃芪甲苷對黑素細(xì)胞增殖有較強(qiáng)的促進(jìn)作用，并可以增加黑素細(xì)胞S期的比率，推測可能通過此途徑起到促進(jìn)黑素合成的作用。

4.3 表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯（Epigallocatechin-3-gallate）

表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯（EGCG）是綠茶的主要化學(xué)成分之一，Zhu YP等［11］評估了EGCG在莫諾苯宗誘導(dǎo)的小鼠白癜風(fēng)的作用，采用光反射共聚焦顯微鏡檢查EGCG治療脫色皮膚提示表皮黑素細(xì)胞數(shù)量增加，并指出5%EGCG是治療白癜風(fēng)的最佳的濃度。

4.4 三七總皂苷（Panax notoginseng saponins，PNS）

三七總皂苷是三七中的主要活性成分，迄今為止，已經(jīng)從三七中發(fā)現(xiàn)了60多種皂苷，主要是達(dá)瑪烷型人參皂苷［43］。研究發(fā)現(xiàn)三七總皂苷能有效地促進(jìn)細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞凋亡［44］，且具有多種生物活性，包括抗糖尿病、抗動脈粥樣硬化、抗肝纖維化、抗腎病，抗骨質(zhì)疏松等。石海霞用不同濃度PNS處理黑素細(xì)胞，觀察黑素細(xì)胞的生長情況，用多巴氧化法檢測酪氨酸酶活性、氫氧化鈉法檢測黑素含量、CCK-8法檢測細(xì)胞增殖率。結(jié)果表明PNS 對黑素細(xì)胞增殖、酪氨酸酶活性、黑素合成具有促進(jìn)作用，PNS濃度在60μg/ml時達(dá)到峰值［45］。

5 小 結(jié)

中藥單體及有效成分研究在現(xiàn)代研究中的重要性得到了廣泛的肯定，中藥有效成分在白癜風(fēng)的各個關(guān)鍵病理環(huán)節(jié)的免疫調(diào)節(jié)、抗氧化反應(yīng)、激活酪氨酸酶活性、促進(jìn)黑素細(xì)胞合成各機(jī)制間存在相互影響，交互作用的關(guān)系。如高水平的氧化應(yīng)激既可以直接殺傷黑素細(xì)胞，也可誘導(dǎo)自身免疫攻擊黑素細(xì)胞。部分抗氧化的中藥成分也同時具有免疫調(diào)節(jié)、促進(jìn)黑素細(xì)胞增殖、黑素合成的作用。中藥豐富了白癜風(fēng)治療方案，但仍存在諸多不足，如中藥單體的研究仍不能與臨床中藥作用相對等，存在著靶向性差的問題。對于一些中藥治療機(jī)制尚不明確及多機(jī)制存在的問題尚需更加深一步的研究。研究中藥單體成分治療白癜風(fēng)時，缺乏與中藥的特性，如四氣五味、歸經(jīng)相結(jié)合，未形成全面的中西醫(yī)結(jié)合體系。對于中藥單體的研究大多停留在基礎(chǔ)層面，而較少運(yùn)用于臨床，中藥復(fù)方成分相互作用不明確以及科研設(shè)計(jì)缺陷等問題，限制了其在全球范圍內(nèi)的應(yīng)用。因此，需要設(shè)計(jì)更科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)，并運(yùn)用新型的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，實(shí)現(xiàn)動物模型建立的規(guī)范化，明確中藥有效成分對靶點(diǎn)發(fā)揮作用的機(jī)制。