李曉瓊，王紅英，張宏超，陳玉晶，賈 磊，郭 歌

(1.鄭州蘭博爾科技有限公司，河南 鄭州 450009 ； 2.河南省化工研究所有限責(zé)任公司，河南 鄭州 450052)

甲維鹽，中文通用名甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽, 是以阿維菌素(微生物代謝產(chǎn)物)為原料，經(jīng)過結(jié)構(gòu)優(yōu)化與修飾得到的一種高效殺螨、殺蟲劑，對我國近期發(fā)生的草地貪夜蛾具有良好的效果。蟲螨腈又名溴蟲腈，是美國氰胺公司在對天然抗生素研究中發(fā)現(xiàn)的新型芳基吡咯腈類殺蟲、殺螨劑，對甜菜夜蛾具有良好的防治效果[1-2]。甲維鹽·蟲螨腈懸浮劑是一種二元復(fù)配殺蟲、殺螨制劑，綜合了兩種組分的優(yōu)勢：甲維鹽安全廣譜，用藥量低，持效期長，不易產(chǎn)生抗藥性；蟲螨腈殺蟲快速防效優(yōu)異，且二者均能殺蟲殺螨，復(fù)配制劑具有毒性低、殺蟲廣、用量低、速度快、持效長等優(yōu)點，該復(fù)配制劑在十字花科蔬菜害蟲的防治方面具有良好應(yīng)用，尤其在甜菜夜蛾的防治方面，更是發(fā)揮著重要作用，因此，甲維鹽·蟲螨腈懸浮劑有效組分的檢測就變得非常重要[3-4]。目前，兩種有效組分單劑的檢測方法已有報道，然而，對于這兩種殺蟲劑復(fù)配制劑進(jìn)行同時檢測的方法未見報道[5-6]。為了降低分析成本，提高分析效率，并通過多次試驗找到了對該二元復(fù)配制劑中的有效組分甲維鹽和蟲螨腈進(jìn)行同柱同條件下一次分析的方法[7-8]。該方法分離效果好，所得數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度和精密度高，操作簡單、快捷，可應(yīng)用于甲維鹽·蟲螨腈制劑的快速分析，滿足產(chǎn)品生產(chǎn)中質(zhì)量的實時監(jiān)控及成品分析。

1 實驗部分

1.1 試劑及溶液

乙腈，色譜純；甲醇，色譜純；含氨水溶液，氨水(分析純)：超純水=1∶300(體積比)；蟲螨腈標(biāo)樣，已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99.0%；甲維鹽標(biāo)樣，已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99.0%，12%甲維鹽·蟲螨腈懸浮劑。

1.2 儀器和設(shè)備

高效液相色譜使用安捷倫1220(Agilent 1220)色譜儀，配置有可變波長紫外檢測器和色譜工作站；色譜柱使用XDB C18柱(150 mm×4.6 mm，5 μm)；過濾器使用孔徑為0.45 μm濾膜；稱量設(shè)備使用精度為十萬分之一克的梅特勒(AB135-S)電子天平；使用50 μL微量進(jìn)樣器和20 μL定量進(jìn)樣管。

1.3 液相色譜操作條件

流動相由甲醇、乙腈和含氨水溶液組成的混合溶劑構(gòu)成，其體積比為甲醇∶乙腈∶含氨水溶液=42∶42∶16。溶劑在使用前經(jīng)過濾膜過濾，然后脫氣15 min。流動相流速控制在1.0 mL/min，柱溫控制在室溫(25 ℃)，檢測波長選擇245 nm，進(jìn)樣體積為20 μL，甲維鹽B1b的保留時間11.5 min，甲維鹽B1a的保留時間14.3 min，蟲螨腈的保留時間4.4 min。甲維鹽和蟲螨腈高效液相色譜圖見圖1。

圖1 12%甲維鹽·蟲螨腈SC的液相色譜圖

1.4 測定方法

1.4.1標(biāo)樣溶液的配制

分別稱取0.02 g(精確至0.000 1 g)甲維鹽標(biāo)樣和0.1 g(精確至0.000 1 g)蟲螨腈標(biāo)樣于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至約80 mL，放入超聲波中使標(biāo)樣完全溶解并脫氣15 min，然后降至室溫(25 ℃)并定容，搖勻待用。準(zhǔn)確移取上述溶液5 mL于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，搖勻待用。

1.4.2試樣溶液的配制

稱取甲維鹽·蟲螨腈制劑試樣1 g(精確至0.000 1 g)加入到100 mL的容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至約80 mL，放入超聲波中使試樣完全溶解并脫氣15 min，降至室溫(25 ℃)并定容，搖勻待用。準(zhǔn)確移取上述溶液5 mL于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，搖勻待用。

1.4.3測定

在1.3所述色譜操作條件下，當(dāng)儀器基線穩(wěn)定后，取標(biāo)樣溶液連續(xù)進(jìn)樣，直至甲維鹽或蟲螨腈的標(biāo)樣相鄰兩次進(jìn)樣的峰面積相對變化<1.5%后，再按照標(biāo)樣、試樣、試樣和標(biāo)樣的順序依次進(jìn)樣測定。

1.5 計算

把測得的兩次標(biāo)樣溶液和兩次試樣溶液中甲維鹽或蟲螨腈的峰面積分別加權(quán)平均，然后按如下公式計算試樣中甲維鹽或蟲螨腈的質(zhì)量分?jǐn)?shù)：

式中：A1為標(biāo)樣中甲維鹽或蟲螨腈峰面積的平均值；A2為試樣中甲維鹽或蟲螨腈峰面積的平均值；m1為甲維鹽或蟲螨腈標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2為甲維鹽·蟲螨腈試樣的質(zhì)量，g；P為標(biāo)樣中甲維鹽或蟲螨腈的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測波長的選擇

為了選擇最佳檢測波長，采用紫外分光光度計對甲維鹽及蟲螨腈標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行了全波長掃描，發(fā)現(xiàn)在波長245 nm左右，甲維鹽和蟲螨腈均有較好吸收，并參考已報道的甲維鹽和蟲螨腈檢測波長，選擇245 nm為樣品分析的檢測波長[9]。

2.2 流動相的選擇

為了提高分離度和分析效率，考察了不同比例的甲醇、乙腈和含氨水溶液作為流動相時的分離和分析效果。當(dāng)甲醇、乙腈和含氨水溶液以體積比為42∶42∶16的比例混合作為流動相，流速控制在1.0 mL/min時，對甲維鹽·蟲螨腈制劑進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)甲維鹽和蟲螨腈前后雜質(zhì)都能得到很好的分離，峰形較好，保留時間相對較短，能夠滿足簡單、快速分析的要求。同時結(jié)合甲維鹽檢測使用的流動相，最終選擇了以甲醇、乙腈、含氨水溶液體積比為42∶42∶16的混合溶液為流動相[7]。

2.3 方法的線性相關(guān)性分析

利用標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)一步考察線性相關(guān)性，為此分別稱取不同質(zhì)量的甲維鹽和蟲螨腈標(biāo)準(zhǔn)樣品，加入到100 mL的容量瓶中，用甲醇將其溶解并定容至刻度，搖勻待用。準(zhǔn)確移取上述溶液1、2、4、6、8、10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，得到不同濃度的甲維鹽和蟲螨腈標(biāo)樣溶液。在1.3所述的色譜條件下，當(dāng)儀器基線穩(wěn)定后，依次測定不同濃度下甲維鹽和蟲螨腈標(biāo)樣峰面積的值(見表1)，以甲維鹽和蟲螨腈標(biāo)樣的質(zhì)量為橫坐標(biāo)，以甲維鹽和蟲螨腈標(biāo)樣的峰面積為縱坐標(biāo)繪制回歸曲線(見圖2)。甲維鹽的線性回歸方程為y=1 190.9x+139.69，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 9，n=5；蟲螨腈的線性回歸方程為y=1 254.8x+81.013，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 9，n=5，所得回歸曲線線性關(guān)系良好。

表1 方法的線性相關(guān)性測定結(jié)果

2.4 方法的精密度評價

圖2 線性關(guān)系曲線

在1.3所述的色譜條件下，對同一含量樣品進(jìn)行不少于5次的平行測定，其測定結(jié)果如表2所示，甲維鹽和蟲螨腈的平均結(jié)果為2.31%、9.12%，其標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.017和0.072，變異系數(shù)(CV)分別為0.74%和0.79%；該結(jié)果表明所選擇分析方法的精密度良好。

表2 甲維鹽和蟲螨腈的精密度測定結(jié)果

2.5 方法的準(zhǔn)確度評價

分析方法的準(zhǔn)確度可以通過添加回收率的測定進(jìn)行評價。為此，在已知含量的甲維鹽·蟲螨腈制劑樣品中，分別加入特定質(zhì)量的甲維鹽和蟲螨腈標(biāo)準(zhǔn)品并配成溶液，在相同的色譜條件下測定甲維鹽和蟲螨腈含量，計算回收率，其結(jié)果見表3。

表3 添加回收率測定結(jié)果

由表3可以看出，甲維鹽的添加回收率為98.73%～101.27%，平均回收率為99.87%；蟲螨腈的添加回收率在99.17%～100.83%，平均回收率為99.83%。該結(jié)果表明，所選擇分析方法的準(zhǔn)確度較高，能夠滿足定量分析的要求。

3 結(jié)論

使用XDB C18色譜柱(150 mm×4.6 mm，5 μm)，以甲醇、乙腈和含氨水溶液(體積比42∶42∶16)為流動相，以245 nm為紫外檢測器檢測波長，開發(fā)了同柱同條件下一次同時測定甲維鹽·蟲螨腈懸浮劑中有效組分含量的方法。分析與評價結(jié)果表明，該方法在測定范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，分析數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度和精密度均較高，具有簡單、快速、準(zhǔn)確等特點，能夠滿足甲維鹽·蟲螨腈懸浮劑產(chǎn)品的常規(guī)、快速定量分析。