于少芳，王紅芬，邵云華，祝新榮＊

（1.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 蠶桑研究所，浙江 杭州 310021；2.杭州蠶種場(chǎng)，浙江 杭州 310021）

雄蠶品種因生命力強(qiáng)、出絲率高、繭絲質(zhì)優(yōu)等特性而廣受蠶農(nóng)與繭絲綢企業(yè)的歡迎，專養(yǎng)雄蠶能提高蠶農(nóng)和繭絲綢企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。2005年，浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑研究所首次育成并審定通過(guò)雄蠶品種“秋·華×平30”[1，2]，并作為雄蠶主推品種在生產(chǎn)上得到大規(guī)模推廣應(yīng)用，取得了良好的社會(huì)與經(jīng)濟(jì)效益。該品種自推廣以來(lái)，生產(chǎn)上不時(shí)出現(xiàn)孵化率偏高的異常情況，即其孵化率明顯高于理論值≤50%的問(wèn)題。為探究雄蠶雜交種孵化率異常的可能原因及規(guī)律，2017～2018年度在春蠶期選擇單系平衡致死系原種“平30A”、“平30B”與對(duì)交品種“秋·華”組配成雄蠶雜交種，并分別采用不同活化處理方法，調(diào)查其各自孵化情況，發(fā)現(xiàn)不同處理方式對(duì)春制雄蠶雜交種的孵化率存在明顯差異：即浸種與冷浸種較易發(fā)生高孵化率卵圈，而越年種不易發(fā)生[3]。

為了解秋制雄蠶雜交種不同活化處理方法對(duì)其孵化率的影響，于2019年秋期選用杭州千島湖蠶種有限公司的秋制“秋·華×平30”雄蠶雜交種為材料，采用同蛾卵圈半分法，采用不同的活化處理方式，調(diào)查各活化處理的孵化率情況，以了解春制與秋制雄蠶雜交種不同活化處理對(duì)孵化率影響的差異。發(fā)現(xiàn)秋制雄蠶雜交種3種不同活化處理方式對(duì)高孵化率發(fā)生的概率均相對(duì)較低，相比之下，即浸種更易發(fā)生，而冷浸種與越年種發(fā)生概率較低，但整體差別不大。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

秋制雄蠶雜交種“秋·華×平30”由杭州千島湖蠶種有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)方法

隨機(jī)選取3張28蛾框制蠶種作為3個(gè)重復(fù)，將每個(gè)卵圈一分為二，分別進(jìn)行即浸種和冷浸種處理。另取3張28蛾框制蠶種，將每個(gè)卵圈一分為二，分別進(jìn)行冷浸種和越年種處理。各處理方法如下：

即浸種：產(chǎn)卵后20 h，用1.1比重鹽酸在25℃條件下浸漬60 min；

冷浸種：產(chǎn)卵后蠶種在5℃冰箱冷藏52 d后，用1.094比重鹽酸在47℃條件下浸漬6 min；

越年種：產(chǎn)卵后經(jīng)15 d人工越夏，11月底浴消后送冷庫(kù)保護(hù)至次年春期。

經(jīng)上述3種不同處理后的蠶種均采用二段催青法催青，孵化2 d后分別調(diào)查每半個(gè)卵圈的孵化率情況，統(tǒng)計(jì)不同處理的卵圈孵化率和高孵化率卵圈所占調(diào)查卵圈數(shù)的百分比。

表1 “秋·華×平30”秋制種不同處理間高孵化率卵圈數(shù)占比Table 1 Egg Batch Numbers of Two Hatching Rate And Proportion of High Hatching Rate for“Qiu·hua × Ping 30”in Different Treatments

表3 “秋·華×平30”秋制種高孵化率同一卵圈中冷浸種和越年種的孵化率Table 3 Hatching Rate for“Qiu·hua × Ping 30”Eggs by Acid Treatment After Refrigeration and Hibernated Silkworm Eggs From the Same Laying with Higher Occurring Tendency

2 結(jié)果與分析

2.1 高孵化率卵圈的發(fā)生

秋制“秋·華×平30”采用同卵圈不同方式處理（即浸種和冷浸種、冷浸種和越年種），2種不同處理的蠶卵均來(lái)自同一卵圈，并設(shè)置3個(gè)重復(fù)。去除不正常卵圈（整圈死卵、全部孵化的純對(duì)卵圈及卵粒數(shù)過(guò)少的卵圈等），調(diào)查明顯超過(guò)50%孵化率和正常50%孵化率左右的卵圈數(shù)，計(jì)算高孵化率卵圈數(shù)占調(diào)查卵圈總數(shù)的百分率。結(jié)果如表1所示?！扒铩とA×平30”秋制種3種不同處理方式的高孵化率卵圈數(shù)占比均低于10%，其中以即浸種最高，其次是越年種，冷浸種為最低，冷浸種與越年種間差異不明顯。

表2所示為同一卵圈即浸種和冷浸種高孵化率卵圈的孵化率，3張28蛾框制種中即浸種有6個(gè)高孵化率卵圈，冷浸種有5個(gè)高孵化率卵圈。在同一高孵化率卵圈中，即浸種的孵化率均高于冷浸種。

表3所示為同一卵圈中冷浸種和越年種高孵化率卵圈的孵化率，3張28蛾框制種中冷浸種有5個(gè)高孵化率卵圈，越年種有5個(gè)高孵化率卵圈。在同一高孵化率卵圈中，冷浸種的孵化率比越年種高的卵圈有2個(gè)，越年種的孵化率比冷浸種高的卵圈有3個(gè)，整體相差不大。

2.2 高孵化率卵圈的發(fā)生規(guī)律

前期我們對(duì)平衡致死系不同品系組配的雄蠶雜交種“秋·華×平30A”、“秋·華×平30B”的3種不同活化處理方式的孵化率進(jìn)行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)春制雄蠶雜交種的即浸種與冷浸種易發(fā)生高孵化率卵圈，而越年種則發(fā)生率低；同時(shí)，由“平30A”組配的雄蠶雜交種發(fā)生高孵化率的卵圈明顯要多由“平30B”組配的雄蠶雜交種[3]。而秋制種“秋·華×平30”的3種不同活化方式的孵化率與春制種相比，秋制種“秋·華×平30”的3種不同活化方式的孵化率更接近于春制種“秋·華×平30B”不同處理方式的孵化率，而與“秋·華×平30B”春制種相比，表現(xiàn)為即浸種孵化率稍低，冷浸種相同，而越年種稍高（圖1）。秋制“秋·華×平30”的孵化率即浸種與冷浸種低于“秋·華×平30”春制種。

3 討論

家蠶性連鎖平衡致死系雄性與常規(guī)蠶品種雌性雜交，在致死基因的作用下，雜交后代的雌蠶在胚胎期死亡，雄蠶能正常生長(zhǎng)發(fā)育，雄蠶雜交種的理論孵化率應(yīng)≤50%，然而，自雄蠶品種推廣以來(lái)，生產(chǎn)上時(shí)有高孵化率發(fā)生的情況。根據(jù)先前研究，發(fā)現(xiàn)春制越年種的高孵化率發(fā)生情況較少，春制即浸種與冷浸種容易發(fā)生高孵化率卵圈。雖然雄蠶雜交種出現(xiàn)高孵化率的情況，但其結(jié)繭后的雄蠶率仍達(dá)99%以上，且大蠶的健康度與結(jié)繭率不受影響[3]。本文通過(guò)對(duì)秋制“秋·華×平30”雜交種在不同蠶種活化方式下的孵化率進(jìn)行調(diào)查，得出以下結(jié)論：秋制雄蠶雜交種采用不同活化處理方式，對(duì)其孵化率仍有一定影響，但影響不大。即浸種最易發(fā)生高孵化率，冷浸種與越年種則很少發(fā)生。與春制雄蠶雜交種相比，秋制雄蠶雜交種越年種高孵化率發(fā)生情況接近于春制“秋·華×平30B”的越年種。秋制雄蠶雜交種的越年種和春制越年種一樣，發(fā)生高孵化率卵圈的概率較低。

生產(chǎn)實(shí)際也表明，春制或秋制雄蠶雜交種的越年種發(fā)生高孵化率的概率較低。秋制雄蠶雜交種的即浸種與冷浸種在生產(chǎn)上雖沒(méi)有實(shí)際意義，但從調(diào)查高孵化率發(fā)生的角度具有一定的參考意義。秋制雄蠶雜交種的冷浸種和越年種的孵化率基本接近正常理論孵化率50%，有偶發(fā)性孵化率異常發(fā)生。具體原因可能與在蠶種保護(hù)過(guò)程中的卵內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗有關(guān)，但真正原因及以何種方式影響平衡致死系致死基因的致死延后尚有待深入研究。