孫小鑫，苗 青，王瑞海，劉麗梅

（中國中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究所 北京 100700）

丹參-葛根是《施今墨對藥》中收載的常用藥對。丹參活血祛瘀、通經(jīng)止痛、清心除煩、涼血消癰；葛根解肌退熱、生津止渴、通經(jīng)活絡(luò)，二藥參合，相互促進(jìn)，活血化瘀、祛瘀生新[1]。丹參-葛根作為藥對在清代以前很少使用，清代以后，葛根疏散經(jīng)脈的藥理作用開始被證實，其與丹參的配伍也出現(xiàn)于名醫(yī)醫(yī)案中。近代，葛根擴(kuò)張血管的作用被充分研究，丹參-葛根自20世紀(jì)以后成為現(xiàn)代臨床治療心腦血管病變的常用藥對[2]。目前已經(jīng)有對丹參、葛根單味藥的化學(xué)成分、藥理作用等方面的全面綜述，而丹參-葛根藥對的綜述還較少，本文從化學(xué)成分、藥理作用、臨床應(yīng)用這3個方面對丹參-葛根藥對的研究情況進(jìn)行系統(tǒng)總結(jié)、分析，以期為此藥對治病的科學(xué)內(nèi)涵闡釋及進(jìn)一步研究應(yīng)用提供依據(jù)。

1 化學(xué)成分

丹參和葛根的化學(xué)成分差異較大，丹參主要含有菲醌類和酚酸類化合物，葛根主要含有異黃酮類化合物。藥對的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)不是組成其單味藥的化學(xué)成分的簡單加和，而是單味藥的化學(xué)成分發(fā)揮整體作用而形成的，提取工藝、配伍比例、炮制方法等不同會使藥對化學(xué)成分的含量或數(shù)量發(fā)生變化，藥對進(jìn)入機(jī)體后的吸收、代謝、分布、排泄等過程也會使其化學(xué)成分發(fā)生變化[3]，這些都會對藥對的藥效產(chǎn)生影響。朱海燕等提出，丹參與葛根配伍后可起到協(xié)同增效的作用[4]，但其協(xié)同增效的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)尚不清楚，因此，深入研究此藥對的化學(xué)成分很有必要。

1.1 化學(xué)成分定性與定量研究

李燕燕[5]采用萃取法、層析法、柱色譜法等方法從丹參-葛根藥對提取液中分離得到了10 個成分，后通過理化法和波譜法確定了丹參酮Ⅰ、二氫丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA、丹酚酸B、隱丹參酮、葛根素、大豆苷、大豆苷元、刺芒柄花素這9個成分，并篩選出了大孔吸附樹脂純化丹酚酸B 和葛根素的最佳工藝，采用近紅外光譜法，對丹參-葛根提取液中丹參酮ⅡA、丹酚酸B、葛根素進(jìn)行了定量分析，且建立了這3 個成分的定量分析校正模型，分析快速、準(zhǔn)確。Chang等[6]采用HPLC對丹參葛根膠囊（由丹參-葛根藥對研制而成）進(jìn)行了分析，通過與對照品對比，結(jié)果顯示，丹參葛根膠囊含有丹參素、丹酚酸B、原兒茶醛、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA、葛根素、大豆苷元-8-C-芹菜糖基-葡萄糖苷、大豆苷、大豆苷元。趙玉華等[7]分別以水和75%的乙醇作溶劑，對丹參單煎液、葛根單煎液、丹參與葛根單煎后混合液（比例為1:1）以及丹參-葛根藥對提取液進(jìn)行了薄層色譜研究，結(jié)果表明，無論以水還是以75%的乙醇作溶劑，丹參-葛根藥對提取液中化學(xué)成分的種類沒有變化，即沒有新成分的產(chǎn)生或原有成分的消失，但某些成分的溶出率會發(fā)生改變，提示共煎會對化學(xué)成分的含量產(chǎn)生影響。

李燕燕[5]和Chang 等[6]的研究都對丹參-葛根藥對中的丹參酮ⅡA、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ、丹酚酸B、葛根素進(jìn)行了定性，這5 個成分也是《中國藥典》2015 版[8]規(guī)定的丹參、葛根中的指標(biāo)性成分，故丹參-葛根作為藥對使用，其質(zhì)量控制至少應(yīng)該包含丹參酮ⅡA、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ、丹酚酸B、葛根素這5個成分。

1.2 化學(xué)成分體內(nèi)過程研究

唐洪梅等[9]采用HPLC，對糖尿病眼病模型大鼠的空白血漿以及葛根組、丹參-葛根組給藥后不同時間的含藥血漿進(jìn)行了分析，結(jié)果表明，丹參可以促進(jìn)葛根素在大鼠體內(nèi)的吸收、分布，并且可以延緩葛根素在大鼠體內(nèi)的代謝和排泄；黎醒等[10]研究發(fā)現(xiàn)，葛根素可促進(jìn)丹參素在大鼠在體單向腸灌流模型的空腸和十二指腸的吸收，此作用可能是由于葛根素競爭性地結(jié)合P-糖蛋白（P-gp），使外排的丹參素減少，被吸收的丹參素增加而導(dǎo)致的。

上述研究提示，丹參-葛根藥對合煎后，某些成分的溶出度會發(fā)生變化，進(jìn)入體內(nèi)后在吸收、分布、代謝、排泄等環(huán)節(jié)藥對成分也會發(fā)生變化，但是未發(fā)現(xiàn)此藥對有新成分的產(chǎn)生或原有成分的消失。目前，對丹參-葛根藥對化學(xué)成分的研究還有一些值得探討的內(nèi)容，如此藥對發(fā)揮作用時化學(xué)成分間相互作用的機(jī)制以及此藥對共煎時化學(xué)成分的數(shù)量、含量變化。

2 藥理作用

現(xiàn)代研究表明，丹參與葛根都具有防止心肌梗死[11，12]、抗腦缺血[13，14]、防止動脈粥樣硬化[15-16]、抗炎[1718]、抗氧化[19，20]、抑制細(xì)胞凋亡[15,21]等藥理作用，丹參-葛根藥對的很多藥理作用與丹參、葛根單味藥的相同，具有保護(hù)心肌、防止腦缺血再灌注損傷、抗炎、抗氧化等作用，已有的對丹參、葛根單味藥的藥理作用研究，可以為丹參-葛根藥對及丹參、葛根有效成分配伍的藥理作用研究提供依據(jù)與支撐。

2.1 丹參-葛根藥對的藥理作用

2.1.1 丹參-葛根藥對對心臟的作用

有研究表明，丹參-葛根水提物能夠激活心肌細(xì)胞 中 蛋 白 激 酶Cε（PKCε）與ATP 敏 感 性 鉀 通 道（KATP），增強(qiáng)線粒體的抗氧化狀態(tài)和線粒體膜結(jié)構(gòu)的完整性，減少線粒體內(nèi)Ca2+的積累，保護(hù)大鼠的心肌缺血再灌注損傷[22，23]。丹參-葛根水提物可以提高心肌細(xì)胞谷胱甘肽（GSH）的水平，抑制Ca2+誘導(dǎo)的線粒體通透性的轉(zhuǎn)變，防止缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的H9c2 心肌細(xì)胞的凋亡，這種作用可能與PKCε/mKATP 信號通路和細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶/核轉(zhuǎn)錄因子E2 相關(guān)因子2（ERK/Nrf2)信號通路有關(guān)[24]。丹參-葛根水提物能夠通過激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號通路和胰島素信號通路，上調(diào)胰島素受體底物（IRS）、蛋白激酶B（Akt）和c-Jun 氨基末端激酶（JNK）等蛋白的磷酸活化水平，抑制腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）等的表達(dá)，使心肌細(xì)胞增殖[25]。此外，丹參-葛根藥對水提物還可以保護(hù)大鼠的心肌免受異丙腎上腺素引起的損傷[26]，機(jī)制同樣可能與PKCε/mKATP信號通路有關(guān)。

2.1.2 丹參-葛根藥對對腦的作用

Deng 等[27]通過實驗研究表明，丹參、葛根及丹參-葛根藥對水提物都能增加大鼠腦基底動脈血管平滑肌細(xì)胞的KATP的電流，阻止Ca2+流入，抑制CaCl2誘導(dǎo)的動脈環(huán)的收縮，從而對大鼠腦基底動脈產(chǎn)生血管舒張作用，且丹參-葛根藥對水提物的作用更強(qiáng)。馬和碩等[28]研究表明，丹參、葛根都可以保護(hù)大腦中動脈栓塞（MCAO）大鼠的腦缺血再灌注損傷，且丹參-葛根藥對可以使這種保護(hù)作用加強(qiáng)，推測丹參-葛根藥對的增效作用可能與蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白/低氧誘導(dǎo)因子-1α（Akt/mTOR/HIF-1α）信號通路有關(guān)。

2.1.3 丹參-葛根藥對對血管、血液的作用

Hu 等[29]用丹參-葛根水提物處理斑馬魚腸下血管（SIVs）區(qū)域的毛細(xì)血管和人微血管內(nèi)皮細(xì)胞（HMEC-1）后，SIVs 出現(xiàn)明顯的出芽新生，HMEC-1 明顯地增殖、遷移、分化，這表明，丹參-葛根水提物可以促進(jìn)血管生成，推測丹參-葛根藥對在治療冠狀動脈疾病方面具有潛力。羅小文[30]研究發(fā)現(xiàn)，丹參葛根水提物和乙酸乙酯部位都可以通過調(diào)節(jié)動脈粥樣硬化鵪鶉的脂質(zhì)代謝紊亂、抑制脂質(zhì)斑塊形成、改善內(nèi)皮細(xì)胞功能，防止鵪鶉動脈粥樣硬化的發(fā)展，作用機(jī)制涉及總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、丙二醛（MDA）含量的降低，高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、載脂蛋白A1（ApoA1）含量的升高，超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮合酶（NOS）活性的增強(qiáng)等。此外，有研究表明[31]，丹參-葛根水提物可以通過抗炎、抗泡沫細(xì)胞形成、防止血管平滑肌細(xì)胞增殖等作用防止動脈粥樣硬化的發(fā)展。

2.1.4 抗炎

有研究表明[32]，丹參-葛根水提物可以通過抑制白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）等炎性因子的產(chǎn)生，降低IκB 激酶α/β（IKKα/β）的活性，防止IκBα 降解，抑制核因子-κB（NF-κB）發(fā)生核轉(zhuǎn)位，進(jìn)而抑制脂多糖誘導(dǎo)的RAW 264.7巨噬細(xì)胞的炎癥反應(yīng)。

2.1.5 抗氧化

肖覃等[33]研究發(fā)現(xiàn)，丹參-葛根藥對提取物的抗氧化活性主要是通過清除DPPH 自由基實現(xiàn)的，且丹酚酸B、迷迭香酸和葛根素清除自由基的藥理活性強(qiáng)。

2.1.6 改善血液循環(huán)

唐洪梅等[9]以糖尿病眼病大鼠為模型，研究發(fā)現(xiàn)，模型大鼠給予丹參-葛根提取液灌胃后，脈絡(luò)膜局部小血管充血減少，視網(wǎng)膜基本恢復(fù)至正常狀態(tài)，糖尿病眼病的癥狀改善，效果優(yōu)于葛根單獨(dú)使用。

2.1.7 調(diào)節(jié)免疫

孟祥博[34]分別以丹參、葛根以及丹參-葛根藥對水提物處理小鼠脾淋巴細(xì)胞，并采用微量熱法和CCK-8法對小鼠脾淋巴細(xì)胞生長、代謝、增殖過程進(jìn)行檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，丹參、葛根以及丹參-葛根藥對水提物均能提高小鼠脾淋巴細(xì)胞生長代謝的產(chǎn)熱量，提高其生長速率，促進(jìn)其增殖，并有一定的量效關(guān)系，且丹參-葛根藥對效果更優(yōu)。

2.2 丹參、葛根的有效成分配伍的藥理作用

2.2.1 抗心肌缺血

Gao 等[35]以心肌梗死小鼠為模型，以丹參酮IIA 和葛根素為研究對象，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，丹參酮IIA 和葛根素能夠通過改善心臟功能、減少膠原蛋白的合成、抑制心肌纖維化和心室重構(gòu)來改善心肌梗死小鼠的血液動力學(xué)，起到抗心肌缺血的作用，該實驗比較了丹參酮IIA 和葛根素的配伍比例為1∶1 和1∶2 時的治療效果，結(jié)果表明，丹參酮IIA和葛根素的配伍比例為1∶1時的治療效果更佳。

2.2.2 抗氧化、保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞、改善血流動力學(xué)、抗炎、降血糖

楊雪等[36]、李恒華等[37]研究表明，丹參酮ⅡA 與葛根素配伍，可以通過減少氧化應(yīng)激損傷、保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞、調(diào)節(jié)凝血-纖溶系統(tǒng)以及抑制炎癥反應(yīng)來緩解糖尿病大鼠的血管病變，配伍使用的效果優(yōu)于丹參酮ⅡA 或葛根素單獨(dú)使用。朱海燕等[38]研究表明，丹參酮ⅡA、葛根素或丹參酮ⅡA 與葛根素配伍，都可以使糖尿病腎病大鼠的尿量和尿蛋白減少，血糖的含量及腎組織p27kip1的表達(dá)降低，丹參酮ⅡA 與葛根素高、低劑量組改善大鼠糖尿病腎病的效果優(yōu)于丹參酮ⅡA高、低劑量組和葛根素高、低劑量組，這說明丹參酮ⅡA 與葛根素配伍的效果優(yōu)于丹參酮ⅡA 或葛根素單獨(dú)使用，以丹參酮ⅡA與葛根素高劑量組的效果最顯著。

綜合以上研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，體內(nèi)和體外實驗都能證明丹參-葛根藥對良好的藥理活性。Deng 等[27]、馬和碩等[28]、孟祥博[34]的研究結(jié)果表明，丹參-葛根藥對在舒張腦血管、保護(hù)腦缺血再灌注損傷、調(diào)節(jié)免疫方面具有協(xié)同增效作用，楊雪等[36]、李恒華等[37]、朱海燕等[38]的研究從成分配伍的角度佐證了丹參、葛根配伍的協(xié)同增效作用，但對丹參-葛根藥對協(xié)同增效作用機(jī)制研究較少，對丹參、葛根有效成分配伍的藥理作用研究也較少，這些都需要進(jìn)一步研究。

3 臨床應(yīng)用

3.1 丹參-葛根藥對的臨床應(yīng)用

3.1.1 冠心病心絞痛

廖菽丹等[39]隨機(jī)將420 例冠心病心絞痛患者分為對照組（西藥拜阿司匹林腸溶片、阿托伐他汀鈣片等治療）和治療組（在對照組西藥治療的基礎(chǔ)上，每天加用15 g 丹參配方顆粒和15 g 葛根配方顆粒，分3 次沖服），治療后，治療組總有效率為88.5%，高于對照組的68.1%；心電圖改善率為92.6%，高于對照組的62.3%；治療組的TC、低密度脂蛋白（LDL）、TG 等血脂水平的改善程度優(yōu)于對照組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義，此研究結(jié)果表明，丹參葛根配方顆粒治療冠心病心絞痛的效果優(yōu)于常規(guī)西藥治療。另外，續(xù)平等[40]通過臨床實驗發(fā)現(xiàn)，丹參葛根膠囊能使冠心病患者的血管功能和結(jié)構(gòu)得到改善，此膠囊治療冠心病耐受性良好，可在冠心病的二級預(yù)防中應(yīng)用。

3.1.2 血管病變

甄秉言等[41]將98例外周血管病伴間歇性跛行的患者分為安慰劑組和丹參葛根膠囊組，兩組患者分別口服安慰劑和丹參葛根膠囊，安慰劑與丹參葛根膠囊外觀相同，均500 mg/粒，患者服用方法如下：3粒/次，2次/日，共服用24周，治療后，丹參葛根膠囊組的患者的血管功能及微循環(huán)改善，最大行走距離明顯增加，步行能力得到改善，而安慰劑組患者癥狀改善的情況不明顯。

3.1.3 糖尿病周圍神經(jīng)病變

文燕[42]將72 例糖尿病周圍神經(jīng)病變（DPN）患者隨機(jī)分為對照組（口服甲鈷胺片，1.5 mg/日，每日分3次服用）和觀察組（每日分3次服用15 g丹參配方顆粒和15 g 葛根配方顆粒），兩組DPN 患者服用藥物的同時均采用胰島素控制血糖，治療后，觀察組總有效率為94.4%，高于對照組的69.5%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，這表明，丹參葛根配方顆粒在治療DPN 方面取得了較好的效果。

3.1.4 視網(wǎng)膜靜脈阻塞

蔡善安[43]對52 例視網(wǎng)膜靜脈栓塞（RVO）患者的58 只RVO 眼睛進(jìn)行了研究，患者每日在服用維生素B、C 類藥物的基礎(chǔ)上，加服丹參-葛根水煎液（每日將30 g 丹參、150 g 葛根加適量水煎煮，早晚服用，7 日/療程，共3個療程），治療后，僅6只RVO 眼睛的視力沒有提高、視網(wǎng)膜出血的癥狀沒有改善，治療總有效率達(dá)89.7%，這表明，丹參-葛根水煎液治療視網(wǎng)膜靜脈阻塞效果較好。

3.2 丹參、葛根有效成分配伍的臨床應(yīng)用

白勇濤等[44]將100 例首發(fā)急性腦梗死患者分成對照組（葛根素靜脈滴注，葛根素0.5 g/日）和實驗組（對照組治療的基礎(chǔ)上，加用丹參酮注射液，丹參酮0.1 g/日），治療后，實驗組患者不良反應(yīng)發(fā)生率為2%，低于對照組的26%；實驗組有效率為88%，高于對照組的56%；實驗組生存質(zhì)量得分為（80.42 ± 12.45）分，明顯高于對照組的（20.42±10.34）分，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義，此研究結(jié)果表明，葛根素與丹參酮注射液合用治療急性腦梗死的效果優(yōu)于葛根素注射液單獨(dú)使用，且不良反應(yīng)發(fā)生率低。另外，曾勝煌等[45]通過臨床研究發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA 磺酸鈉注射液與葛根素注射液合用，治療慢性充血性心力衰竭療效較好。

可見，丹參-葛根藥對在臨床應(yīng)用廣泛，治療的疾病涉及冠心病、急性腦梗死、糖尿病周圍神經(jīng)病變等，以心腦血管疾病居多。研究丹參-葛根藥對的臨床應(yīng)用，不僅可以指導(dǎo)臨床合理用藥，也可以為新藥的開發(fā)提供基礎(chǔ)。目前，臨床應(yīng)用方面，以丹參-葛根藥對為原料藥的制劑主要是丹參葛根配方顆粒、丹參葛根膠囊，丹參、葛根有效成分的制劑在臨床也常合用，其中，丹參酮注射液聯(lián)合葛根素注射液的應(yīng)用較多，這些制劑主要用于治療心腦血管疾病，療效較好，但是偶爾會發(fā)生不良反應(yīng)。近期，其它含有丹參、葛根有效成分的制劑也已經(jīng)被研制出來，Guo 等[46]研究制備了丹參酮和葛根素前藥共載固體脂質(zhì)納米粒，實驗表明，其治療心肌梗塞的效果顯著優(yōu)于丹參酮或葛根素單獨(dú)裝載的固體脂質(zhì)納米粒，此外，該藥藥效持久，可以作為有前景的治療心肌梗塞的藥物使用。以丹參總丹參酮、總酚酸和葛根總黃酮為有效組分的丹葛酚酮膠囊已獲得國家藥品監(jiān)督管理局的臨床批件，審批上市后將用于糖尿病周圍神經(jīng)病變的治療[47]。

4 小結(jié)及展望

丹參-葛根藥對包括丹參酮ⅡA、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ、丹酚酸B、葛根素等主要有效成分，具有保護(hù)心肌、防止腦缺血再灌注損傷、防止動脈粥樣硬化、抗炎、抗氧化等藥理作用，在臨床多用于心腦血管疾病的治療，并且取得了良好的療效。未來，丹參-葛根藥對還有更大的研究潛力可挖掘，如：①研究丹參-葛根藥對的化學(xué)成分時，可以采用HPLC，建立丹參、葛根以及丹參-葛根藥對的指紋圖譜，將藥對與單一藥味相比較，全面分析其化學(xué)成分變化，同時測定主要有效成分的含量，考察共煎對某些成分含量的影響，以確定丹參-葛根作為藥對使用后化學(xué)成分的含量和數(shù)量的變化；此外，借助代謝組學(xué)、翻轉(zhuǎn)腸囊法、Caco-2細(xì)胞模型等方法研究此藥對在體內(nèi)化學(xué)成分的變化，也非常必要；②研究丹參-葛根藥對的藥理作用時，應(yīng)注重此藥對中丹參與葛根的相互作用研究，注意將藥理作用研究與藥效物質(zhì)研究相結(jié)合，在充分了解丹參-葛根藥對的藥效物質(zhì)的基礎(chǔ)上，探求藥效物質(zhì)在含量、數(shù)量方面的變化對此藥對藥理作用的影響，并探索將丹參、葛根更多的有效成分配伍使用，挖掘它們更多的藥理作用及作用機(jī)制；此外，還可以利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)等技術(shù)，對丹參-葛根藥對發(fā)揮作用可能涉及的藥效物質(zhì)、靶點(diǎn)及通路進(jìn)行預(yù)測，根據(jù)預(yù)測的結(jié)果開展實驗，進(jìn)行驗證；③臨床研制丹參-葛根新制劑時，應(yīng)注意根據(jù)疾病的性質(zhì)、特點(diǎn)以及制劑的藥動學(xué)和藥效學(xué)的特點(diǎn)，確定丹參、葛根藥材或其有效成分的最佳配伍比例，選擇合適的制備工藝，以使丹參-葛根制劑更好地應(yīng)用于臨床。