王 勇， 王懷棟，郭永清

（內蒙古農業(yè)大學職業(yè)技術學院，內蒙古包頭014109）

純血馬具有體格高大、速度快、耐勞、遺傳性穩(wěn)定、種用價值高等優(yōu)點，是世界公認的最優(yōu)秀騎乘馬品種之一，從18世紀開始，各個國家將純血馬引入并進行繁殖（趙宇飛，2019）。益生菌具有無殘留、綠色安全、易生產等優(yōu)點，可以促進動物生長發(fā)育，調整腸道內菌群平衡，提高動物生產性能及免疫機能等，被廣泛應于畜禽養(yǎng)殖中（陳宏銳，2019；趙國清，2019）。 酵母菌是一種兼性厭氧微生物，該菌不僅富含蛋白質、氨基酸、維生素及礦物質等多種營養(yǎng)物質，還含有活性因子及多種消化酶類（許國洋，2019；仲偉光，2018）。研究表明，酵母菌制劑可以提高牛、羊、豬、雞等多種動物生長性能（劉政，2017）。本試驗在基礎日糧中添加不同水平的酵母菌提取物，研究其對純血馬駒生長性能、免疫機能及糞便微生物菌群結構的影響，為酵母菌提取物在臨床進一步應用與推廣提供研究基礎。

1 材料與方法

1.1 主要試劑與儀器 酵母菌提取物為固體粉末狀，主要成分為甘露寡糖（純度≥65%），購自山東寶來利來生物工程股份有限公司；免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）、細胞因子（IL-2、IL-6）ELISA Kit，購自南京建成生物研究所；乳酸桿菌培養(yǎng)基、大腸桿菌桿菌顯色培養(yǎng)基、雙歧桿菌培養(yǎng)基，購自青島高科園海博生物技術有限公司。

1.2 試驗設計與管理 采用單因素隨機設計試驗，于2019年7～8月，在包頭市良種馬繁殖基地選擇8月齡體重相近的純血馬駒40匹，隨機分成4個組，每組10個重復，每個重復1匹，1組為空白對照組飼喂基礎日糧，試驗2、3、4組分別在基礎日糧中添加1.0%、2.0%、3.0%的酵母菌提取物，試驗期為28 d。每個重復組單獨飼喂，每天定時3次飼喂，先精后粗、少量多次，自由飲水。按照常規(guī)飼養(yǎng)管理方式進行飼養(yǎng)與管理，定期免疫、驅蟲與養(yǎng)殖場消毒。試驗馬的基礎飼糧營養(yǎng)水平參考NRC（2007）馬飼養(yǎng)標準配制，制成顆粒飼料，其日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎日糧組成與營養(yǎng)水平%

1.3 生長性能的測定 在試驗期間，對每個重復組的純血馬駒空腹稱重，記錄試驗開始的體重和試驗結束的體重及投料量和剩料。測定總增重、平均日增重指標。

1.4 免疫指標的測定 試驗結束后，每個試驗組隨機抽取5匹純血馬駒頸靜脈采血3 mL，離心分離血清。按照說明書測定血清中免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）、細胞因子（IL-2、IL-6）的含量。

1.5 糞便微生物菌群結構的測定 參考何佳（2017）報道的方法，試驗結束前5 d，采集每個組的新鮮糞便樣品，經處理后，分別接種于乳酸桿菌培養(yǎng)基、大腸桿菌桿菌顯色培養(yǎng)基、雙歧桿菌培養(yǎng)基進行培養(yǎng)與菌落計數(shù)，記錄每克糞便中所含乳酸桿菌、雙歧桿菌和大腸桿菌總數(shù)，用對數(shù)（log10 cfu/g）表示。

1.6 試驗數(shù)據分析 試驗結果以 “平均值±標準差”表示，采用統(tǒng)計學軟件SPSS 19.0進行單因素方差分析，采用Duncan’s法進行均值比較，以P＜0.05表示差異顯著性。

2 結果

2.1 不同水平酵母菌提取物對馬生長性能的影響 由表2可知，試驗2、3、4組的試驗末重和平均日增重均高于1組，其中試驗2組高于1組，但差異性不顯著（P＞0.05），試驗3、4組的試驗末重和平均日增重較1組分別提高17.9%、10.2%、15.1%、19.2%（P ＜ 0.05），試驗 2、3、4 組之間相比，差異性不顯著（P ＞ 0.05）；試驗 2、3、4 組的平均采食量均高于1組，差異性不顯著（P＞0.05）。

表2 不同水平酵母菌提取物對馬生長性能的檢測結果

2.2 不同水平酵母菌提取物對馬免疫機能的影響 由表3可知，試驗 2、3、4組血清中 IgG、IgA、IL-2的含量均高于1組，其中試驗2組高于1組，差異性不顯著 （P＞0.05）， 試驗3、4組IgG、IgA、IL-2的含量含量較1組相比分別提高11.8%、14.7%、9.3%、10.1%、20.5%、28.5%（P ＜ 0.05），試驗 2、3、4組之間相比，差異性不顯著 （P ＞ 0.05）；試驗2、3、4組血清中的 IgM、IL-6含量均高于 1組，差異性不顯著（P＞0.05）。

表3 不同水平酵母菌提取物對馬免疫機能的檢測結果ng/mL

2.3 不同水平酵母菌提取物對馬糞便微生物菌群結構的影響 由表4可知，試驗2、3、4組糞便中大腸桿菌的含量均低于1組，其中試驗2組與1組相比，差異性不顯著（P ＞ 0.05），試驗 3、4組糞便中大腸桿菌的含量較1組分別降低18.5%、19.1% （P ＜ 0.05），試驗 2、3、4 組之間相比，差異性不顯著（P ＞ 0.05）；試驗 2、3、4 組糞便中雙歧桿菌的含量均高于1組，其中試驗2組高于1組比，差異性不顯著（P＞0.05），試驗3、4組糞便中雙歧桿菌的含量較1組相比分別提高5.2%、6.7%（P＜0.05），試驗 2、3、4 組之間相比，差異性不顯著（P＞ 0.05）；試驗 2、3、4組糞便中乳酸桿菌的含量均高于1組，差異性不顯著（P＞0.05）。

表4 不同水平酵母菌提取物對馬糞便微生物菌群結構的檢測結果lg cfu/g

3 討論

研究表明，酵母菌富含多種營養(yǎng)物質及活性物質，酵母菌制劑或含酵母菌的益生菌制劑可以提高動物生長性能。楊帆等（2015）報道，在哺乳馬駒日糧中添加一定量的枯草芽孢桿菌制劑和植物乳桿菌制劑能夠提高馬駒增重。任宏（2019）等報道，飼料中添加 5.0%的復合微生態(tài)制劑，可以提高蒙古馬的生長性能。本試驗研究表明，試驗2、3、4組的平均采食量均高于1組（P＞0.05），試驗3、4組的試驗末重和平均日增重較1組分別提高7.9%、10.2%、15.1%、19.2%（P ＜0.05）， 說明不同水平的酵母菌提取物可以提高純血馬駒生長性能。本試驗與上述報道的結果基本一致?？赡苡捎诮湍妇崛∥锔缓喾N消化酶類，可促進飼料中營養(yǎng)物質在腸道內的消化與吸收，增加采食量，提高飼料利用率，因而提高純血馬駒生長性能。

動物機體內免疫系統(tǒng)主要包括體液免疫和細胞免疫，免疫蛋白IgG、IgA、IgM主要誘導動物機體產生體液免疫應答主要物質，在動物機體免疫中起著重要作用，IL-2、IL-6是介導細胞免疫的主要細胞因子，參與機體的體液免疫和細胞免疫，在免疫過程中具有重要作用（賈紅杰，2019；張召興，2017）。本試驗研究表明，試驗3、4組IgG、I-gA、IL-2的含量較1組相比分別提高 11.8%、14.7%、9.3%、10.1%、20.5%、28.5%（P ＜ 0.05），試驗2、3、4組血清中的IgM、IL-6含量均高于1組（P＞0.05），說明不同水平的酵母菌提取物可以提高純血馬駒血清中免疫球蛋白和細胞因子的含量，提高其免疫機能?？赡苡捎诮湍妇崛∥锼事豆烟堑然钚晕镔|可刺激機體免疫系統(tǒng)，促進漿細胞分泌抗體和細胞因子分泌，提高機體的免疫機能。這與任宏（2019）等報道的結果一致。

動物腸道中富含多種微生物菌群，當腸道內菌群結構不平衡時，會引起動物一系列的腸道疾病，嚴重者可導致死亡，動物腸道菌群結構的平衡，對動物健康具有重要意義（鄧琳，2019）。本試驗研究表明，試驗3、4組糞便中雙歧桿菌的含量較1組相比分別提高5.2%、6.7% （P＜0.05），試驗3、4組糞便中大腸桿菌的含量較1組相比分別降低 19.1%、18.5% （P ＜ 0.05），試驗 2、3、4 組糞便中乳酸桿菌的含量均高于1組（P＞0.05）。說明不同水平的酵母菌提取物可以改善純血馬駒腸道菌群結構，降低糞便中大腸桿菌含量，提高糞便中雙歧桿菌和乳酸桿菌的含量。由于酵母菌提取物的添加可以有效提高腸道內有益菌的生長繁殖，抑制有害菌的生長，從而達到調節(jié)腸道菌群平衡的作用。其作用機理有待進一步研究。

4 結論

酵母菌提取物可以提高純血馬駒生長性能和免疫機能，改善腸道菌群結構，抑制有害菌生長，提高有益菌生長，以3.0%的添加量為適宜。