林佑平

（湖南省安化縣東坪鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務中心，湖南安化413500）

豬圓環(huán)病又稱為斷奶仔豬多系統(tǒng)呼吸衰竭綜合征，是由豬圓環(huán)病毒二型（PCV2）感染引起，其主要臨床癥狀包括腹股溝淋巴結(jié)腫大、漸進性消瘦且呼吸困難[1]；豬偽狂犬病由豬偽狂犬病毒（PRV）感染所引起，導致保育豬出現(xiàn)呼吸困難、消瘦，甚至是神經(jīng)癥狀[2]。值得注意的是，PCV2 和PRV 均屬于免疫抑制性病原，該類疫病可導致病豬免疫下降，容易繼發(fā)其它疾病，給養(yǎng)豬場造成巨大的經(jīng)濟損失。

副豬嗜血桿菌（HPS）對我國養(yǎng)豬業(yè)危害極大，由于近年養(yǎng)豬密度不斷增大，當豬群免疫力下降后容易繼發(fā)類似HPS 的細菌性疾病，出現(xiàn)咳嗽、關節(jié)腫大，甚至死亡等[3]。在生豬養(yǎng)殖過程中，豬群病原混合感染情況較為常見，但豬PCV2、PRV 和HPS混合感染較為少見，本文對該混合感染案例的診斷過程進行詳細介紹，為相關疾病的診斷和防控提供參考。

1 發(fā)病情況

2019 年11 月初，湖南安化縣某小型規(guī)模化豬場30 日齡部分保育豬相繼發(fā)病，發(fā)病豬群主要表現(xiàn)為食欲減退、精神萎靡和發(fā)熱（39.0～41.2℃），發(fā)病嚴重豬群出現(xiàn)喘氣、神經(jīng)癥狀（發(fā)抖、嘔吐等）和四肢關節(jié)腫脹，駐場獸醫(yī)對全部豬群在飼料中拌喂替米考星和阿司匹林，對發(fā)病豬群采取肌肉注射青霉素和氨基比林，但豬群發(fā)病情況并未有效改善，且死亡情況逐漸嚴重。其后，養(yǎng)殖戶將發(fā)病嚴重保育豬送至動物防疫站進行病因確診。

2 病理變化

將送檢病豬動脈放血致死并剖檢，發(fā)現(xiàn)病豬腹股溝淋巴結(jié)和頜下淋巴結(jié)腫大，且充血；胸腔多纖維性滲出，且肺臟、肝臟與與胸腔粘連；腎臟表面有大小不一的出血點，甚至是壞死灶；脾臟充血腫大；腦膜出現(xiàn)充血現(xiàn)象；四肢腫脹，內(nèi)部有漿液性黃色液體；其它組織器官病變現(xiàn)象不明顯。

3 實驗室診斷

3.1 細菌分離鑒定與藥敏試驗

3.1.1 細菌分離鑒定

無菌采集剖檢豬病變明顯肺臟組織，用滅菌手術刀切開組織，以接種環(huán)蘸取組織深層組織液于含10%乳牛血清的TSA 培養(yǎng)基表面平板劃線，其后將培養(yǎng)基置于37℃恒溫箱培養(yǎng)36 h，并對分離菌株進行革蘭氏染色，根據(jù)菌株形態(tài)特征對其進行鑒定。結(jié)果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基表面出現(xiàn)露珠狀光滑菌落，且革蘭氏染色、鏡檢的結(jié)果可確定分離菌株為副豬嗜血桿菌[1]。

3.1.2 細菌藥敏試驗

將單一菌落進行菌液擴增，將菌液適度稀釋后涂抹于培養(yǎng)基表面，待液面稍干燥，將16 種含有不同抗生素藥敏試驗貼在培養(yǎng)基表面，于37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h，觀察藥敏紙片周圍菌生長情況以判定細菌的耐藥情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：該菌株對氟苯尼考、頭孢菌素、環(huán)丙沙星和恩諾沙星等抗生素高度敏感，對青霉素、林可霉素、鏈霉素和土霉素等低敏。

3.2 病毒性病原檢測

3.2.1 病料處理

將適量病變明顯組織（肺臟、淋巴結(jié)和腎臟等）剪碎，與無菌PBS 混合置于研缽內(nèi)研磨，將研磨產(chǎn)物上清液移至1.5 mL 離心管內(nèi)，高速離心后取上清樣品用組織DNA/RNA 提取試劑盒提取獲得核酸，其操作步驟按照試劑盒提供說明書進行，最后將獲得的核酸樣品保存于-80℃待檢。

3.2.2 病原檢測

按照RNA 反轉(zhuǎn)錄試劑盒提供說明書將獲得的RNA 反轉(zhuǎn)錄為cDNA，其后采用RT-PCR 或PCR法對核酸樣品中豬繁殖障礙與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬瘟病毒（CSFV）、豬流行性腹瀉病毒（PEDV）、PRV 和PCV2 進行病原檢測。病原檢測結(jié)果顯示病豬同時感染PCV2 和PRV，而其它病原為陰性。

根據(jù)以上檢測結(jié)果，發(fā)病豬群最終確診為PCV2、PRV 和 HPS 混合感染。

4 綜合防治措施

針對此次疫病，我們制定如下綜合防治措施：（1）將發(fā)病豬群與假定健康豬群隔離飼養(yǎng)，對全場豬群緊急免疫接種偽狂犬病毒弱毒疫苗，間隔2～3日免疫接種豬圓環(huán)病毒二型滅活疫苗，并在飼料中添加適量黃芪多糖和恩諾沙星，提高豬群免疫力的同時治療福豬嗜血桿菌；（2）對發(fā)病豬群進行針對性治療，如降溫、緩解咳嗽等，對無治療價值的病豬緊急處死，并無害化處理；全場衛(wèi)生打掃、消毒，并提高豬舍環(huán)境溫度，加強通風。

實施以上防治措施約1 個月后，該場疫病發(fā)生情況得到有效好轉(zhuǎn)，豬群生產(chǎn)成績有所提高。

5 討論

疫病混合感染在豬群養(yǎng)殖過程中較為常見，PCV2 和PRV 在我國豬場較為常見，該病發(fā)生不但對病豬組織器官造成嚴重損傷，同時降低病豬免疫力，容易繼發(fā)其它疫病導致混合感染[4]，使得疫病的診斷和治療較為困難。本次豬場發(fā)生疫病為PCV2、PRV 和HPS 混合感染所致，其中HPS 為機會致病菌，當豬群免疫力下降可導致豬群發(fā)病，甚至導致死亡。對于此類疫病的治療，只有依靠疫苗緊急接種和高效抗生素的使用，且篩選抗生素種類取決于細菌藥敏試驗結(jié)果，我們通過對豬群緊急免疫接種偽狂犬病毒弱毒苗和豬圓環(huán)病毒二型滅活苗，同時對豬群恩諾沙星拌飼使疫情得到有效控制。

對于該豬場未來疫病防控，可制定圓環(huán)病毒和偽狂犬病毒疫苗免疫方案，同時加強偽狂犬病毒的血清學監(jiān)測，及時淘汰陽性豬群；對引進豬群進行血清學監(jiān)測，防止感染野毒的豬群進場；提高豬群飼養(yǎng)管理水平，鏈球菌和副豬嗜血桿菌病在豬場較為常見，應提高對該類細菌性疫病的防控意識。