羅清 袁琛 桂定文 姜衛(wèi)東

前列腺癌(prostatic cancer, PCa)是男性常見的惡性腫瘤之一，其病因未明，但研究發(fā)現(xiàn)單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms, SNPs)是其發(fā)生的獨立危險因素[1]。近年來，國內(nèi)外大量研究提示，維生素D受體(vitamin D receptor, VDR)基因多態(tài)性與PCa密切相關[2-4]，然而，目前結論尚存爭議。為此，本研究對既往發(fā)表的有關VDR多態(tài)性與中國人PCa易感性的文獻進行薈萃分析，以期闡明VDR基因多態(tài)性與中國人PCa易感性的關聯(lián)性。

對象與方法

一、文獻檢索策略

以“vitamin D receptor/VDR” or “FokI” or “TaqI” or “BsmI” or “ApaI” and “gene polymorphisms” and “prostate cancer/tumor/carcinoma”為關鍵詞在PubMed等數(shù)據(jù)庫中檢索，以“維生素D受體”或“FokI”或“TaqI”或“BsmI”或“ApaI”和“基因多態(tài)性”和“前列腺癌”為關鍵詞在中國知網(wǎng)等數(shù)據(jù)庫中檢索，獲取VDR基因多態(tài)性與中國人PCa易感性的中英文文獻。檢索時間設置為建庫至2019年6月1日，語言為中文和英語。同時，手工檢索擬納入文獻、相關綜述、系統(tǒng)評價和薈萃分析的參考文獻，并追溯全文。

二、文獻納入與排除標準

文獻納入標準：①主題為探索VDR基因多態(tài)性(包括FokI、TaqI、BsmI和ApaI中的一個及以上)與PCa易感性的關系；②研究設計為病例-對照或前瞻性隊列研究；③病例組PCa確診方式為病理檢查；④對照組為健康人群或前列腺增生癥患者；⑤文獻數(shù)據(jù)報告完整或經(jīng)推算可得出各基因型在兩組中的頻數(shù)分布；⑥基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡；⑦研究對象為中國人。排除標準：①重復發(fā)表的文獻；②研究對象非中國人或者來源不清；③動物實驗等非臨床研究；④未給出病例組/對照組具體的基因頻數(shù)且無法與原作者取得聯(lián)系；⑤語言不是英語或中文。

三、數(shù)據(jù)提取

對檢索出的每篇文獻由2名研究者獨立根據(jù)納入和排除標準進行篩選和評價，達成一致后決定是否納入本次分析，否則征求第三研究者意見。根據(jù)事先制定好的表格提取相關數(shù)據(jù)錄入計算機并交叉核對，如有不一致則重新核對。提取的數(shù)據(jù)或信息包括第一作者、發(fā)表年份、地區(qū)、樣本量、對照來源、基因型頻率分布、是否符合Hardy-Weinberg平衡、基因型檢測方法及SNPs種類等。

四、統(tǒng)計學分析

應用Review Manager 5.3和SPSS 17.0軟件進行數(shù)據(jù)整理和分析，Stata 12.0軟件進行Egger’s檢驗及Meta回歸分析。首先，采用2檢驗對每項研究中對照組的各基因型分布進行Hardy-Weinberg平衡檢驗。各研究結果間的異質性由Q檢驗和I2值評價，如果P>0.1，I2<50%，則選用固定效應模型進行數(shù)據(jù)合并的Meta分析，分別計算各基因多態(tài)性的等位基因模型、雜合子模型、純合子模型、顯性模型和隱性模型的OR值及其95%CI；如P≤0.1，I2>50%，說明各研究結果異質性較大，使用隨機效應模型進行數(shù)據(jù)分析。應用漏斗圖及Egger’s檢驗對納入的各項研究進行發(fā)表偏倚評估，結果判定參考Jairath等[5]的研究，并對研究進行敏感性分析，觀察研究結果的一致性和可靠性。Meta回歸分析追蹤異質性來源，對具有顯著性異質性文獻進行分層分析。P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

結 果

一、納入研究的一般特征

經(jīng)篩選后，共有10篇文獻[6-15]被納入本次薈萃分析。文獻發(fā)表年限為2001年至2014年，研究對象來自上海、香港、湖北、臺灣、浙江、廣東、江蘇及中國北方地區(qū)，共3 439例，其中PCa病例組1 437例，對照組2 002例(健康人群或良性前列腺增生癥患者)。經(jīng)2檢驗，10篇文獻中的對照組各基因型分布均滿足Hardy-Weinberg平衡。除1篇文獻使用了熒光定量實時多聚酶鏈式反應法外，其他9篇文獻均采用多聚酶鏈式反應-限制性酶切片段長度多態(tài)性法檢測VDR基因多態(tài)性。7篇文獻涉及FokI基因多態(tài)性研究，其中病例組1 106例，對照組1 379例；4篇文獻涉及TaqI基因多態(tài)性研究，其中病例組493例，對照組803例；4篇文獻涉及BsmI基因多態(tài)性研究，其中病例組546例，對照組858例；3篇文獻為ApaI基因多態(tài)性研究，其中病例組385例，對照組561例。

二、VDR基因多態(tài)性與PCa相關性的Meta分析結果

1.FokI基因多態(tài)性與PCa：對納入研究的等位基因進行異質性檢驗，檢驗結果示I2=14%，P=0.32，采用固定效應模型合并OR值進行統(tǒng)計分析，結果顯示，OR=1.09，95%CI：0.98～1.22，總體效應檢驗差異無統(tǒng)計學意義(P=0.13)。依次定量合成雜合子模型(OR=1.17，95%CI：0.95～1.44，P=0.13)、純合子模型(OR=1.36，95%CI：0.93～2.00，P=0.11)、顯性模型(OR=1.16，95%CI：0.96～1.42，P=0.13)和隱性模型(OR=1.10，95%CI：0.92～1.31，P=0.31)，差異均無統(tǒng)計學意義，表明VDR基因FokI位點與中國人PCa無相關性。

2.TaqI基因多態(tài)性與PCa：對納入研究的等位基因進行統(tǒng)計分析(固定效應模型)，結果顯示，OR=1.02，95%CI：0.70～1.47，總體效應檢驗差異無統(tǒng)計學意義(P=0.93)。依次比較其他4種模型(結果分別為OR=0.23，95%CI：0.02～2.81，P=0.25；OR=0.22，95%CI：0.02～2.45，P=0.22；OR=0.22，95%CI：0.02～2.45，P=0.22；OR=1.06，95%CI：0.72～1.56，P=0.76)，差異均無統(tǒng)計學意義，提示VDR基因TaqI位點與中國人PCa無相關性。

3.BsmI基因多態(tài)性與PCa：分析結果顯示，OR=0.70，95%CI：0.51～0.97，總體效應檢驗差異有統(tǒng)計學意義(P=0.04)。依次定量合成其他4種模型(結果分別為OR=0.64，95%CI：0.44～0.92，P=0.02；OR=0.94，95%CI：0.35～2.54，P=0.91；OR=0.66，95%CI：0.47～0.94，P=0.02；OR=0.98，95%CI：0.36～2.63，P=0.96)，提示VDR基因BsmI位點可能降低中國人PCa的易感性。

4.ApaI基因多態(tài)性與PCa：分析結果顯示，OR=1.11，95%CI：0.91～1.35，總體效應檢驗差異無統(tǒng)計學意義(P=0.32)。依次定量合成其他4種模型(結果分別為OR=0.91，95%CI：0.68～1.21，P=0.51；OR=1.33，95%CI：0.89～2.00，P=0.17；OR=1.01，95%CI：0.78～1.32，P=0.92；OR=1.32，95%CI：0.73～2.39，P=0.36)，差異均無統(tǒng)計學意義，提示VDR基因ApaI位點與中國人PCa未見相關性。

三、發(fā)表偏倚及敏感性分析

利用Begg漏斗圖評估文獻是否存在發(fā)表偏倚，結果顯示漏斗圖對稱性良好，表明無發(fā)表偏倚。另外利用Egger’s檢驗回歸定量評價漏斗圖的對稱情況，進一步提示不存在發(fā)表偏倚(t=0.43，P=0.612)。敏感性分析提示本次Meta分析結果穩(wěn)定可靠。

討 論

本文評估了VDR基因多態(tài)性與中國人PCa易感性的關系，VDR基因常見多態(tài)性位點包括FokI(rs2228570)、TaqI(rs7975232)、BsmI(rs1544410)和ApaI(rs7975232)。結果顯示，在中國人群中，VDR BsmI位點突變可能降低PCa風險，可能為保護因素，而VDR FokI、TaqI及ApaI多態(tài)性與PCa無關。本研究分析了中國人VDR基因多態(tài)性與PCa易感性的關聯(lián)性，包含的樣本量大，且無發(fā)表偏倚，敏感性分析結果穩(wěn)定，說明本研究結論真實可靠，可為后續(xù)相關研究和臨床實踐提供理論基礎。

VDR FokI多態(tài)性與PCa易感性之間的關系備受爭議。Berndt 等[16]分析26篇研究文獻未獲得有意義的陽性結果。但McKay等[17]分析6篇來自法國的前瞻性研究顯示，與野生型相比，F(xiàn)okI位點純合突變顯著但微弱地增加PCa風險(OR=1.16，95%CI：1.04～1.28)。Cao等[18]的研究，按人種進行亞組分析，提示FokI位點變異可能與黃種人PCa易感性并無相關性(OR=1.09，95%CI：0.95～1.24)，這與我們的研究結果一致，說明種族差異在FokI多態(tài)性與PCa的關聯(lián)中起重要作用。

我們的研究提示VDR TaqI位點變異與中國男性PCa易感性無關，這與劉多等[19]和Xu等[20]的研究結論不一致，而另一篇類似的Meta分析卻未能得出較為肯定的結論，原因可能是納入的文獻數(shù)量不足，僅7篇(病例組801例，對照組965例)[21]。為獲得確切的結論，后續(xù)仍需開展更多高質量的研究。

李夏西等[22]通過納入6篇亞洲人群的病例對照研究，合計樣本量為1 890例(病例組796例，對照組1094例)，探討VDR基因位點BsmI(rs1544410)多態(tài)性與PCa易感性的關系，結果顯示等位基因B對PCa有保護作用(OR=0.69，95%CI：0.55～0.88，P=0.002)，基因型BB+Bb也能顯著降低PCa的發(fā)生率(OR=0.64，95%CI：0.49～0.83，P=0.001)，因而推測，對于亞洲人群，VDR BsmI位點多態(tài)性可能對PCa發(fā)病起保護作用。這與我們的研究結果B等位基因突變可能降低中國人PCa發(fā)病率一致。

最近的一項薈萃分析發(fā)現(xiàn)，VDR基因ApaI位點突變與PCa不存在關聯(lián)[23]，這與本文研究結果相似。然而本研究僅檢索到3篇關于ApaI位點多態(tài)性與PCa易感性的文獻(385例PCa患者和561例正常對照)，因而尚需要進一步的研究來證實本文的結果。

總之，我們的薈萃分析表明，VDR FokI、TaqI和ApaI位點的多態(tài)性與中國人PCa易感性無顯著關聯(lián)，VDR BsmI位點等位基因B可能為中國人PCa的保護因素。然而，VDR基因多態(tài)性和PCa的確切因果關系和機制還有待進一步的研究證實。