熊和兵 曾有紅 楊劍鋒 朱小艷 黎斌

摘要：目的 對本地區(qū)粘液型和非粘液型銅綠假單胞菌臨床分離特點和耐藥性進(jìn)行動態(tài)分析，從而為臨床初始治療性抗生素的使用提依據(jù)。方法 選擇在2018年1月至2019年10月期間就診于本院取呼吸道標(biāo)本培養(yǎng)的病例，共分離出銅綠假單胞菌530株，回顧性分析它們的耐藥性和科室來源構(gòu)成比。結(jié)果 病原體為粘液型銅綠假單胞菌的流行病學(xué)因素為慢性阻塞肺病、結(jié)構(gòu)性肺病普遍較敏，而來自一般住院和重癥醫(yī)學(xué)科對藥物敏感性逐漸嚴(yán)重。結(jié)論 粘液型和非粘液型銅綠假單胞菌的臨床特點和耐藥性存在顯著差異，醫(yī)生初始治療必須參考本地區(qū)的耐藥性分析。

關(guān)鍵詞：粘液型和非粘液型銅綠假單胞菌;臨床分離特點;耐藥性分析

【中圖分類號】R322.3 ?【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A ?【文章編號】1673-9026（2020）09-091-02

銅綠假單胞菌引起的所有感染中，呼吸系統(tǒng)感染是臨床進(jìn)行最常見的。有研究發(fā)現(xiàn)，粘液型銅綠假單胞菌是引起彌漫性泛細(xì)支氣管炎、慢性支氣管炎、支氣管擴(kuò)張并感染的重要病原菌之—，生物膜是感染反復(fù)發(fā)作的關(guān)鍵因素。而非粘液型銅綠假單胞菌已經(jīng)是院內(nèi)感染的重要條件致病菌之一，隨著廣譜抗菌素的應(yīng)用，多重耐藥菌開始流行，監(jiān)測并分析其耐藥性已刻不容緩。本文回顧性分析本地區(qū)近3年來收治的因呼吸系統(tǒng)疾病及相關(guān)感染疾?。ㄈ鏑AP，HAP，VAP等）而送檢的痰和BALF培養(yǎng)結(jié)果和耐藥譜變遷，從收治科室、基礎(chǔ)疾病、藥敏結(jié)果等分析。

1材料與方法

1.1時間及地點：2018年1月至2019年10月在本院就診患者

對象：選擇在此期間就診于本院取呼吸道標(biāo)本培養(yǎng)的病例。

入組條件：革蘭氏染色每低倍鏡視野鱗狀上皮細(xì)胞計數(shù)小于10個。支氣管肺泡灌洗液革蘭染色每低倍鏡視野鱗狀上皮細(xì)胞計數(shù)小于1%的細(xì)胞總數(shù)。

1.2儀器與試劑：合肥恒星全自動細(xì)菌鑒定儀Hx-21。試劑：微生物培養(yǎng)所用培養(yǎng)平板，手工藥敏紙片，質(zhì)控菌株大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853 均購自溫州康泰。所有試劑均在有效期內(nèi)使用，儀器室內(nèi)質(zhì)控均在控。

1.3實驗方法：接到標(biāo)本后首先進(jìn)行涂片革蘭染色評價標(biāo)本質(zhì)量，然后接種哥倫比亞血平板、中國蘭、巧克力平板分離單個菌落，按CLSIm100-2017操作方法上機(jī)鑒定和藥敏。對于涂片產(chǎn)生物被膜革蘭陰性桿菌，平板上粘稠、膠胨樣菌落，取巧克力平板上菌落以K-B法孵育24小時進(jìn)行測試。

1.4統(tǒng)計方法：以WHONET5.6統(tǒng)計病例來源、入住科室、藥敏數(shù)據(jù)等。

2結(jié)果

本院符合入組條件中共分離出銅綠假單胞菌530株，其中非粘液型銅綠假單胞菌（416株，重癥醫(yī)學(xué)科209株），粘液型銅綠假單胞菌（114株）。它們對常用抗生素體外藥物敏感性見表1，科室來源構(gòu)成比見表2。

3討論

在醫(yī)院內(nèi)，銅綠假單胞菌可引起呼吸機(jī)相關(guān)肺炎、手術(shù)切口、植入物感染等。粘液樣銅綠假單胞菌在我國是引起彌漫性泛細(xì)支氣管炎、慢性支氣管炎、支氣管擴(kuò)張并感染的重要病原菌之—。

3.1粘液樣銅綠假單胞菌的體外藥敏對于自動化系統(tǒng)是存在偏差的，因為粘液樣菌株通常在24小時內(nèi)生長不良，所以敏感性可能被高估。而且由于粘液樣菌落在無菌鹽水中不易乳化，導(dǎo)致0.5麥?zhǔn)蠞岫入y以調(diào)節(jié)，研究發(fā)現(xiàn)以巧克力平板上的菌落能很好的解決這一問題，我院的實驗方法是對于涂片產(chǎn)生物被膜革蘭陰性桿菌，平板上粘稠、膠胨樣菌落，取巧克力平板上菌落按CLSIm100-2017以K-B法孵育24小時進(jìn)行測試。我院粘液樣銅綠假單胞菌主要分離自呼吸科，對頭孢他啶、頭孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、美羅培南、亞胺培南的敏感率在90%以上，因為不可能清除病原體，患者一般病程長多次就診，所以可以參照上一次的藥物敏感試驗進(jìn)行經(jīng)驗治療。但有一部分基礎(chǔ)病程長，免疫力低下，經(jīng)常有抗生素暴露的人群已經(jīng)出現(xiàn)了美羅培南、亞胺培南的耐藥，這部分病人應(yīng)根據(jù)藥敏試驗結(jié)果確認(rèn)下一步的治療方案。

3.2銅綠假單胞菌天然耐藥嚴(yán)重，其對氨芐西林，阿莫西林，阿莫西林/克拉維酸，第一代頭孢菌素，第二代頭孢菌素，頭孢噻肟，頭孢曲松，萘啶酸和復(fù)方磺胺甲噁唑天然耐藥，厄他培南，替加環(huán)素及頭孢西丁臨床對銅綠通常也無效。此次統(tǒng)計結(jié)果表明銅綠對亞胺培南、美羅培南、頭孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦，阿米卡星的敏感率在90%以上，對于一般的住院患者，這幾類藥物可以經(jīng)驗使用，對于氟喹諾酮類藥物，環(huán)丙沙星比左氧氟沙星表現(xiàn)出更強(qiáng)的殺菌活性。但是對于美羅培南、亞胺培南已經(jīng)出現(xiàn)7%的耐藥率，應(yīng)防止院內(nèi)播散。

3.3從重癥醫(yī)學(xué)科呼吸道檢測出非粘液型銅綠假單胞菌構(gòu)成比50.24%，在呼吸機(jī)相關(guān)肺炎中，銅綠假單胞菌出現(xiàn)在第一或第二位，藥物敏感性普遍下降，更容易出現(xiàn)多重耐藥菌，美羅培南、亞胺培南的耐藥性明顯增加，常常需要多藥聯(lián)合，臨床用藥更多依賴于體外藥敏結(jié)果。

銅綠假單胞菌可能為定植或感染，從革蘭氏染色每低倍鏡視野鱗狀上皮細(xì)胞計數(shù)小于10個，細(xì)菌出現(xiàn)于多形核細(xì)胞內(nèi)的標(biāo)本分離出的銅綠假單胞菌通常與感染相關(guān)，對于涂片被無定形物質(zhì)包繞革蘭陰性桿菌小集群，實驗室應(yīng)報告給醫(yī)生，提示慢性感染。而且實驗室應(yīng)取巧克力平板上菌落按CLSIm100-2017以K-B法孵育24小時進(jìn)行測試。對于重癥醫(yī)學(xué)科，出現(xiàn)多重耐藥銅綠假單胞菌幾率明顯加大，應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果適時聯(lián)合用藥。

參考文獻(xiàn)

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[2]陳東科，孫長貴.實用臨床微生物學(xué)檢驗與圖譜[M].第1版人民衛(wèi)生出版社2010：5.

注：江西省宜春市課題基金項目（編號：JxYC2020KSB032）

作者單位：

江西省豐城市人民醫(yī)院 ?檢驗科 ?江西豐城 ?331100