国产日韩欧美一区二区三区三州_亚洲少妇熟女av_久久久久亚洲av国产精品_波多野结衣网站一区二区_亚洲欧美色片在线91_国产亚洲精品精品国产优播av_日本一区二区三区波多野结衣 _久久国产av不卡

?

采用葡萄糖參考方法為室間質量評價樣本確定靶值的應用初探

2020-12-03 01:44:44金中淦張素潔歐元祝虞嘯炫孫賀偉范霄宇虞科穎
檢驗醫(yī)學 2020年11期
關鍵詞:賦值定值實驗室

金中淦, 居 漪, 張素潔, 李 卿, 歐元祝, 虞嘯炫, 孫賀偉, 范霄宇, 虞科穎

(1. 上海市臨床檢驗中心參考測量實驗室,上海 200126;2.上海市臨床檢驗中心臨床生化免疫學研究室,上海 200126)

葡萄糖(glucose,Glu)是臨床實驗中重要的檢測項目,血糖監(jiān)測是糖尿病診斷和治療的重要環(huán)節(jié),其結果有助于評估糖尿病患者血糖代謝情況,可幫助臨床制定治療方案,并監(jiān)測療效。因此,臨床實驗室Glu檢測質量在糖尿病管理中具有重要作用[1-2]。能力比對檢驗(proficiency testing,PT)/室間質量評價(external quality assessment,EQA)活動是目前管理和提高臨床實驗室檢測質量的常用方式,通常依據(jù)方法學或檢測系統(tǒng)進行分組統(tǒng)計,靶值為組內均值或中位值[3]。本研究擬運用國際檢驗醫(yī)學溯源聯(lián)合委員會(the Joint Committee for Traceability in Laboratory Medicine,JCTLM)公布的同位素稀釋氣相色譜串聯(lián)質譜(isotope dilution gas chromatography tandem mass spectrometry,IDGC/MS)Glu參考方法[4]確定EQA樣本靶值,探索其在EQA中的可行性。

1 材料和方法

1.1 研究對象

收集參加上海市臨床檢驗中心2018年第2次常規(guī)化學EQA活動的509家各級、各類醫(yī)院的醫(yī)學實驗室及獨立實驗室反饋結果。

1.2 樣品

正確度物質為美國國家標準與技術研究院(the National Institute of Standards and Technology,NIST)標準物質SRM 965b(-70℃保存)及國際臨床化學協(xié)會(the International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine,IFCC)提供的RELA-A和RELA-B。EQA樣品為2018年第2次EQA活動的5份樣本,編號分別為EQA1、EQA2、EQA3、EQA4和EQA5,均為凍干血清,依據(jù)中國合格評定國家認可委員會(China National Accreditation Service for Conformity Assessment,CNAS)-GL03-2006《能力驗證計劃樣品均勻性和穩(wěn)定性評價指南》評估樣品的均一性和穩(wěn)定性[5]。

1.3 儀器與試劑

Glu標準品SRM 917c,純度為(99.7±0.3)%,購自NIST;13C6-D-Glu標記物同位素豐度為99%,購自美國Cambridge Isotope laboratories公司;乙腈(質譜級)、乙酸(質譜級)購自美國Fisher公司,乙酸酐購自國藥集團。Agilent G7000B氣相質譜儀、HP-5MS UI毛細管柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm)均購自美國Agilent公司,梅特勒-托勒多分析天平(Max=220 g,d=0.1 mg)購自德國METTLER公司,氮氣儀購自美國THERMO公司。

1.4 參考方法賦值

上海市臨床檢驗中心參考測量實驗室是通過CNAS ISO/IEC17025/15195認可的實驗室,被認可的項目包括血清Glu。賦值過程:(1)樣品前處理,在血清樣品中加入適量Glu標記物溶液,使血清中Glu的含量與Glu標記物含量之比約為1,加入適量無水乙醇去除蛋白質,10 000×g離心10 min,收集上清液至另一管中;(2)衍生化反應,取收集的上清液200 μL至另一樣品瓶中,60 ℃氮氣吹干后,加入鹽酸羥氨吡啶溶液(0.6 mol/L)200 μL,混勻,90 ℃條件下反應1.5 h,冷卻后加乙酸酐300 μL,90 ℃條件下反應1 h,60 ℃氮氣吹干,用400 μL二氯甲烷復溶,進行ID-GC/MS分析;(3)ID-GC/MS條件,以分流模式進樣,分樣流比為20∶l。進樣口溫度設定為270 ℃,氦氣流速為1.0 mL/min,初始爐溫為150 ℃,持續(xù)1 min,再以30 ℃/min的速率升至180 ℃,持續(xù)1 min,再以20 ℃/min的速率升至280 ℃,持續(xù)1 min。離子源溫度250 ℃,電離能為70 eV。選擇離子監(jiān)測模式下采集質荷比(m/z)314和319,掃描時間為200 ms。進樣量為1 μL;(4)測定過程,參考方法賦值過程依據(jù)本實驗質譜法樣品賦值標準操作規(guī)程進行,分3批次測定,每批次每個濃度樣品重復前處理3份樣本,每份樣本與標樣同步測定,按低標-樣品(含質控)-高標的次序進樣,每份樣本最少重復測定3次,要求3次進樣檢測結果的變異系數(shù)(coefficient of variation,CV)<2%,否則需要再增加進樣次數(shù)至滿足要求,以3次進樣的均值作為每份樣本的有效實驗結果。

1.5 臨床實驗室EQA過程

樣本通過上海市臨床檢驗中心指定冷鏈系統(tǒng)運送到參評實驗室,各參評實驗室按照標準操作規(guī)程測量樣本,記錄測量結果,并通過網(wǎng)絡平臺上傳測定結果、所用儀器、方法等相關信息。

1.6 統(tǒng)計學方法

使用上海市臨床檢驗中心EQA評價管理平臺及Excel 2016軟件進行數(shù)據(jù)的分析處理,計算中位數(shù)及偏移。

2 結果

2.1 參考方法性能

Glu參考方法測量不精密度≤2.0%,測量參考物質相對偏移<1.0%。本實驗室參加IFCC參考實驗室網(wǎng)絡比對,測定結果均在規(guī)定的等效限內。見表1。

表1 參考方法主要性能評價

2.2 EQA樣本賦值結果

實驗過程中同步測定正確度物質,要求正確度物質測定結果在靶值允許偏移范圍內,否則該批次實驗結果無效。參考方法為EQA樣本定值結果。見表2。

表2 參考方法測定血清Glu結果

2.3 EQA結果分析

2.3.1 按照Glu檢測的不同方法對調查結果進行分析 按照Glu檢測方法對檢測結果進行分析,不同方法測定的Glu水平中位值與參考方法定值結果的相對偏移為-2.22%~4.51%,見圖1。按WS/T 403-2012[6]中偏移2%的評價標準,其中己糖激酶法5個濃度的測定值與參考方法確定靶值的相對偏移均<2%。

圖1 不同方法測定的Glu濃度與參考方法確定靶值的相對偏移

2.3.2 按照不同檢測系統(tǒng)對結果進行分析 不同常規(guī)分析系統(tǒng)測定的血清Glu濃度中位數(shù)與參考方法確定靶值的相對偏移見圖2。13個系統(tǒng)檢測EQA1~5結果中位數(shù)與參考方法確定靶值的相對偏移分別為-1.71%~3.47%、-0.17%~3.75%、-2.3%~3.60%、0.50%~7.52%、-1.70%~3.23%。按WS/T 403-2012[6]中偏移2%的評價標準,只有7.69%(1/13)的常規(guī)分析系統(tǒng)測定的5個Glu結果與參考方法定值的相對偏移<2%,有61.54%(8/13)的系統(tǒng)只有1個結果與參考方法定值的相對偏移>2%,有15.38%(2/13)的系統(tǒng)2個結果與參考方法定值的相對偏移均>2%,有7.69%(1/13)的系統(tǒng)3個結果與參考方法定值的相對偏移>2%,有7.69%(1/13)的系統(tǒng)測定的5個Glu濃度與參考方法定值的相對偏移>2%。

圖2 不同常規(guī)分析系統(tǒng)測定的血清Glu濃度與參考方法賦值結果的相對偏移

2.3.3 EQA結果分析 分別以實驗室所有數(shù)據(jù)中位數(shù)、參考方法定值為靶值,并且以WS/T 403-2012[6]中允許總誤差的7%評價實驗室合格率,結果見表3。

表3 實驗室合格率

3 討論

EQA中靶值的正確性、客觀性一直是質量評價機構努力的方向。本研究主要利用Glu參考方法確定EQA樣本靶值,初步探討其在上海地區(qū)EQA工作中的可行性。

本實驗室Glu參考方法已通過2018年CNAS ISO/IEC17025/15195認可[7],并于2019年通過JCTLM評審認可,該項目的檢測能力已獲得國際組織認可,可以為全球提供賦值服務,保證了本實驗室檢測靶值的可靠性。我們所分析的上海地區(qū)509家臨床實驗室的數(shù)據(jù),不同檢測原理測定的Glu濃度中位數(shù)與參考方法確定靶值的相對偏移為-2.22%~4.51%,己糖激酶法5個濃度的測定值與參考方法確定靶值的相對偏移均<2%,顯示出較好的正確性。己糖激酶法的特異性高于葡萄糖氧化酶法,是公認的血糖測定的參考方法,己糖激酶法常規(guī)分析方法原理與參考方法類似,因此其測定準確性是比較高的。

按照檢測系統(tǒng)進行分組分析,大部分系統(tǒng)測定的Glu濃度與參考方法賦值結果的相對偏移與行業(yè)標準中2%偏移的要求還存在一定距離,但大部分系統(tǒng)是能夠滿足1/2允許總誤差的要求。張傳寶等[8]用參考方法對血清進行賦值,并用標準物質SRM 965a對系統(tǒng)進行校準,評價了13種Glu常規(guī)檢測系統(tǒng)的正確性,校準前大部分系統(tǒng)為正偏移,與我們的研究結果一致,常規(guī)方法測定Glu的特異性問題可能是主要原因。另外,目前大部分體外診斷試劑均采用的是單一校準品,該校準品的濃度和定值準確性是臨床實驗室檢測結果的重要保證。

以行業(yè)標準中允許總誤差7%來評價實驗室合格率,當靶值為所有實驗室檢測結果的中位數(shù)時,EQA1~5不合格率分別為2.16%、2.95%、3.34%、3.14 %、1.77%;當靶值為參考方法賦值結果評價時,EQA1~5不合格率分別為2.75%、3.14%、2.75%、7.86%、2.16%。提示不同的靶值對實驗室來講,可能會導致不同的質量評價結果。CNAS-GL002:2018《能力驗證結果的統(tǒng)計處理和能力評價指南》[9]指出,在能力驗證中指定值的確定方式有多種,除去采用已知值和有證參考值外,參考方法賦值比采用參加者公議值為指定值等級高,不確定度要小[9],可以適當減少均值或中位數(shù)的偏移導致靶值出現(xiàn)偏差的情況,提高靶值和質量評價的客觀性。EQA的關鍵是掌握樣本的互換性及靶值的設定過程,本研究主要探討靶值的設定過程,對于樣本的互換性,需進一步探討。值得注意的是,EQA樣品雖為人血清基質,但為了滿足保存和運輸?shù)囊螅赡軙砑右欢ǖ姆€(wěn)定劑,因此對于臨床實驗室檢測EQA4樣本出現(xiàn)的較大偏差是來自于系統(tǒng)的正確性問題還是樣本存在的互通性問題,仍需進一步研究。EQA4樣本濃度在4 mmol/L左右,為較低水平的濃度,而本實驗室認可的參考測量范圍是1.8~26.3 mmol/L,校準和測量能力為1.4%,故參考方法定值的準確性比較高。對于低濃度Glu的準確測量是值得被關注的。當血糖濃度為3.4~3.9 mmol/L時,約有29.92%糖尿病住院患者易發(fā)生有癥狀低血糖;而當血糖值為2.8~3.3 mmol/L時,約31.80%糖尿病住院患者易發(fā)生無癥狀低血糖[10]。低血糖的危害主要是對神經(jīng)系統(tǒng)的損傷,因此應及時檢測血糖,提高低血糖的診斷準確率,以達到早期預防、及時干預的目的,減少低血糖的臨床危害[2]。后續(xù)我們將著手2方面的工作:一是嘗試開展正確度驗證工作,使用新鮮冰凍血清考察臨床實驗室檢測水平;二是研究EQA樣本的互換性,因常規(guī)EQA樣本在保存、運輸及成本上相對正確度樣本具有較大優(yōu)勢,因此有必要評價選擇質量較高的EQA樣本,并且制定合理的EQA評價方案,為提高臨床實驗室檢測質量發(fā)揮作用。目前較高質量EQA樣本的獲得需要實驗室、質量評價機構及體外診斷試劑企業(yè)的共同努力[11]。

綜上所述,如何確立靶值在臨床實驗室質量管理中有重要意義。參考方法可在推動臨床實驗室量值溯源工作、提高實驗室檢測質量中起一定作用。質量監(jiān)管機構應關注EQA樣本的質量,臨床實驗室應關注低濃度Glu測量的可靠性。

猜你喜歡
賦值定值實驗室
關于1 1/2 … 1/n的一類初等對稱函數(shù)的2-adic賦值
L-代數(shù)上的賦值
圓錐曲線的一類定值應用
“大處著眼、小處著手”解決圓錐曲線中的定值問題
電競實驗室
電子競技(2019年22期)2019-03-07 05:17:26
電競實驗室
電子競技(2019年21期)2019-02-24 06:55:52
電競實驗室
電子競技(2019年20期)2019-02-24 06:55:35
電競實驗室
電子競技(2019年19期)2019-01-16 05:36:09
強賦值幺半群上的加權Mealy機與加權Moore機的關系*
10kV線路保護定值修改后存在安全隱患
電子制作(2018年10期)2018-08-04 03:25:02
404 Not Found

404 Not Found


nginx
锡林浩特市| 韶关市| 泽库县| 京山县| 鲁甸县| 镇原县| 黑水县| 南投县| 灯塔市| 定结县| 隆林| 阿拉善右旗| 沙田区| 绍兴市| 宣恩县| 班戈县| 石嘴山市| 密云县| 灵武市| 元谋县| 罗田县| 通化县| 土默特左旗| 嘉荫县| 竹北市| 利辛县| 高清| 铜梁县| 长乐市| 金秀| 巴林左旗| 莒南县| 库车县| 平山县| 南丹县| 天峻县| 云林县| 山阴县| 灵丘县| 娱乐| 岳池县|