閆月明

【摘 要】目的：為了探索解決實(shí)際工作中ELIsA法檢測(cè)HBsAg中溶血和脂濁對(duì)ELIsA法檢測(cè)HBsAg 的影響。結(jié)論：ELISA法檢測(cè)HBsAg標(biāo)本質(zhì)量很重要，會(huì)直接影響檢驗(yàn)結(jié)果，采血要空腹、避免溶血和脂血。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出溶血對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果有一定的影響，可以造成假陰性。脂血對(duì)ELISA法檢測(cè)HBsAg無(wú)影響。

【關(guān)鍵詞】ELIsA法;HBsAg;溶血和脂濁;影響因素

【中圖分類號(hào)】R446.6 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1002-8714（2020）02-00-01

乙肝是我國(guó)發(fā)病率比較高的傳染病，乙肝病毒感染人體后很難消除，HBsAg是感染乙肝病毒在人體最早出現(xiàn)的血清學(xué)標(biāo)志物。目前，臨床用ELIsA法檢測(cè)HBsAg，因其靈敏度高，特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)而受到廣泛應(yīng)用，但我們?cè)趯?shí)際工作中碰到結(jié)果前后不一致，重復(fù)性不好，花板等現(xiàn)象，且結(jié)果不因檢測(cè)者的改變而穩(wěn)定。現(xiàn)對(duì)實(shí)際工作中各種影響因素，進(jìn)行如下分析探討：

1 材料與方法

1.1材料 ELISA法檢測(cè) HBsAg試劑為上?？迫A公司提供所有試劑均在有效期內(nèi)。標(biāo)準(zhǔn)品由寧夏臨檢中心提供。

1.2標(biāo)本來(lái)源 本院健康體檢各類人群368例，采集靜脈血，分離血清。

1.3方法? 嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，加樣量、水浴溫度、孵育時(shí)間、洗板、拍板嚴(yán)格操作規(guī)程，配置新鮮清洗液，用洗板機(jī)洗滌。可疑結(jié)果平行反復(fù)2次[1]，用標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)本批次試劑盒進(jìn)行質(zhì)量控制，HBsAg陰性、陽(yáng)性結(jié)果均在控。

1.4結(jié)果判斷 ELISA雙抗體夾心法檢測(cè)HBsAg在檢測(cè)線和對(duì)照線位置出現(xiàn)兩條紫紅色線結(jié)果為陽(yáng)性，僅在對(duì)照線位置出現(xiàn)紫紅色線結(jié)果為陰性，試紙條上對(duì)照線位置未出現(xiàn)紫紅色結(jié)果為無(wú)效。

2 結(jié)果

2.1人群篩查結(jié)果368例檢測(cè)標(biāo)本HBsAg，正常檢測(cè)其中陽(yáng)性35例，陽(yáng)性率9.5%。

2.2將未溶血無(wú)脂血標(biāo)本35例陽(yáng)性血樣，人為用清潔竹簽造成溶血后檢測(cè)HBsAg，出現(xiàn)3例假陰性，假陰性率為8.7%。

2.3讓35名陽(yáng)性患者中有復(fù)查檢驗(yàn)結(jié)果并且自愿配合的人復(fù)檢結(jié)果，采集到餐后脂血20份，復(fù)查陽(yáng)性結(jié)果符合率為100%。

3 討論

ELISA法檢測(cè)HBsAg中溶血和脂濁是臨床檢驗(yàn)中最常見(jiàn)的干擾因素，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出溶血對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果有一定的影響，可以造成假陰性。原因有可能是實(shí)驗(yàn)中酶標(biāo)反應(yīng)孔因?yàn)槿苎璧K了實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)后帶現(xiàn)象，造成假陰性。脂血對(duì)ELISA法檢測(cè)HBsAg無(wú)影響。[2.3.4]

ELISA法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的特點(diǎn)，但是ELISA法易受到加樣量、反應(yīng)溫度恒定、反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確、洗滌徹底性等諸多因素的影響，而且操作步驟較多，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程至少需要2h左右，在實(shí)驗(yàn)前校正加樣器，保證吸樣量的精確，洗板前，應(yīng)檢查洗板機(jī)針孔有無(wú)堵塞，保證孵育時(shí)間、水浴溫度穩(wěn)定。

ELISA法檢測(cè)HBsAg標(biāo)本質(zhì)量很重要，會(huì)直接影響檢驗(yàn)結(jié)果，采血時(shí)要空腹、避免溶血和脂血標(biāo)本，盡量當(dāng)天標(biāo)本當(dāng)天完成，不能完成要及早分離出血清，在冰箱保存?？傊珽LISA實(shí)驗(yàn)的影響因素比較多，在實(shí)際工作中要嚴(yán)格操作規(guī)范，避免各種因素的影響，以保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

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