賀剛，方春林，何力，吳斌，費春平

（1.江西省水產(chǎn)科學研究所，江西 南昌 330039；2.中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所，湖北 武漢 430223；3.江西金龜王實業(yè)有限責任公司，江西 上饒 334400）

烏龜Chinemys reevesii 隸屬龜鱉目Testudinate、龜科Emydidae、烏龜屬，俗稱泥龜、草龜、墨龜，是常見的水生龜種，在中國分布廣泛[1]。黑頸烏龜Chinemys nigricans，俗稱三線龜、彩龜、廣東草龜，亦屬烏龜屬，主要分布于越南以及中國的廣東、廣西等地，數(shù)量極為稀少，為國家Ⅱ級重點水生野生動物。

烏龜為常見的養(yǎng)殖龜種之一，但生長速度緩慢；而黑頸烏龜價值高，但適應性較差，數(shù)量稀少。為了獲得適于養(yǎng)殖推廣的新品系，由烏龜（♀）×黑頸烏龜（♂）雜交后培育的品種稱為烏黑雜龜，具有品相好、生長快、價值高等優(yōu)點[2]。

體質(zhì)量是龜類動物選育的重要經(jīng)濟性狀，通過測量和篩選形態(tài)性狀，確定影響體質(zhì)量的重要性狀，依據(jù)通徑分析的統(tǒng)計，建立估算體質(zhì)量回歸方程[3-5]，這些方法廣泛應用于養(yǎng)殖實踐中，在蟹、蝦、貝、鱉及魚類等水產(chǎn)動物已有不少報道[6-11]，但在龜類動物選育中的應用甚少[12]。近年來雜交新龜品種日益增加，目前已發(fā)現(xiàn)20 多種雜交龜，僅見金石雜龜[13]和烏花雜龜[14，15]的相關報道。本研究采用表型相關分析、通徑分析和多元回歸分析，對烏龜Chinemys reevesii（♀）×黑頸烏龜C.nigricans（♂）雜種F1代群體1、2 齡雌雄F1代雜交龜形態(tài)性狀和體質(zhì)量進行相關性及通徑分析，確定不同階段的群體中形態(tài)性狀對質(zhì)量相的對重要性和優(yōu)勢性狀的選擇方法，為龜類的養(yǎng)殖提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料

2016、2017 年9 月隨機選取雌、雄雜種F1代養(yǎng)殖群體各90 只，來自江西弋陽于2015 年9 月孵出的烏龜（♀）×黑頸烏龜（♂）雜種F1代，在恒溫30℃下飼養(yǎng)至2017 年9 月。

1.2 測定方法

用精確度0.01g 電子天平稱量體質(zhì)量（Y），用精確度0.01cm 游標卡尺測量背甲長（X1）、背甲寬（X2）、殼高（X3）、腹甲長（X4）、腹甲后半部長（X5）、腹甲前半部寬（X6）、腹甲后半部前寬（X7）、腹甲后半部后寬（X8）、甲橋長（X9）、喉盾寬（X10）、喉盾縫長（X11）、肱盾縫長（X12）、胸盾縫長（X13）、腹盾縫長（X14）、股盾縫長（X15）和肛盾縫長（X16）等17 項形態(tài)性狀（圖1）。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 和SPSS 16.0 統(tǒng)計軟件處理所測量的形態(tài)性狀參數(shù)量。利用各表型參數(shù)統(tǒng)計量分析不同組內(nèi)表型相關性，進行形態(tài)性狀對體質(zhì)量的通徑分析，獲得相應的通徑系數(shù)、決定系數(shù)，建立多元回歸方程。

2 結(jié)果與分析

2.1 表型性狀參數(shù)

由表1 可見，所測1、2 齡雌、雄雜種龜?shù)捏w質(zhì)量均大于其他形態(tài)指標，從12 月齡到24 月齡，雌龜平均值從356.632g 增長到了580.713g，增長率為62.83%；雄龜平均值從171.352g 增長到了290.495g，增長率為69.53%。體質(zhì)量是變異程度最高的性狀，說明具有較高的選擇潛力；其次為肱盾縫長，其他性狀的離散程度相對較低且平穩(wěn)。相對而言，1 齡雜交龜各性狀的變異系數(shù)要大于2 齡。

2.2 各形態(tài)性狀間的相關系數(shù)

Person 相關分析表明，雜種F1代的各形態(tài)性狀及體質(zhì)量間的表型相關系數(shù)中，除個別性狀（如肱盾縫長）與體質(zhì)量不相關以外，1、2 齡各形態(tài)性狀與體質(zhì)量的表型相關性均呈極顯著水平（P＜0.01），雌、雄雜種龜?shù)谋臣组L與體質(zhì)量的相關系數(shù)均最大。除背甲長外，雌龜與體質(zhì)量相關系數(shù)較大的形態(tài)性狀為腹甲長、殼高，而雄龜與體質(zhì)量相關系數(shù)較大的形態(tài)性狀為背甲寬、背甲前半部寬。除1 齡雌龜?shù)碾哦芸p長與胸盾縫長、腹盾縫長，1 齡雄龜?shù)母囟芸p長、2 齡雌龜?shù)碾哦芸p長與大多數(shù)形態(tài)性狀均呈負相關或相關系數(shù)不顯著外（P＞0.05），雜種龜其他性狀之間的相關系數(shù)均達到極顯著（P＜0.01）或顯著（P＜0.05）水平。

2.3 各形態(tài)性狀對體質(zhì)量影響的通徑系數(shù)

1、2 齡雌、雄雜種龜?shù)母餍螒B(tài)性狀對體質(zhì)量的通徑系數(shù)見表2～表5。1、2 齡雌龜組保留性狀分別為背甲長（X1）、殼高（X3）、腹甲后半部長（X5）、甲橋長（X9）和背甲長（X1）、殼高（X3）、腹甲長（X4）和甲橋長（X9）；1、2 齡雄龜組保留的性狀為背甲長（X1）、背甲寬（X2）、殼高（X3）和背甲長（X1）、背甲寬（X2）、殼高（X3）和甲橋長（X9）。獲得兩個年齡雌、雄龜組相關指數(shù)R2=∑riyPi分別0.987 和0.978、0.968 和0.982。結(jié)果表明，除2 齡雄龜組中背甲長對體質(zhì)量直接作用較大以外，1、2 齡雌、雄龜組中所分析的其他性狀對體質(zhì)量的直接作用均較小，對體質(zhì)量的影響很大程度上取決于間接作用。背甲長、殼高和甲橋長是1、2 齡雌龜分析的共同重要性狀，背甲長、背甲寬和殼高是1、2 齡雄龜分析的共同重要性狀，因此，背甲長和殼高是影響雌、雄龜?shù)闹匾螒B(tài)性狀。

2.4 兩年齡組雜種F1 代形態(tài)性狀對體質(zhì)量的決定程度

表1 雜種F1 代體質(zhì)量與形態(tài)性狀的表型統(tǒng)計量Tab.1 escriptive statistics between the body weight (Y/g) and various measurable traits (X/cm) of the hybrid F1(n=90)

用決定系數(shù)公式計算的各形態(tài)性狀對體質(zhì)量的共同及相對決定系數(shù)結(jié)果見（表6～表9）。由表6可知，雌龜1 齡組以背甲長對體質(zhì)量的相對決定程度最大，甲橋長最小，背甲長和殼高對體質(zhì)量的共同決定程度最大，達到28.9%；2 齡組以殼高的相對決定程度最大、腹甲長最小，殼高和甲橋長的共同決定程度最大，達到16.2%（表7）。1 齡雄龜組以背甲寬的相對決定程度最大，殼高最小，背甲長、寬的共同決定程度最大，達到23.3%（表8）；2 齡組相對決定程度以背甲長最大，甲橋長最小，背甲長、寬的共同決定程度最大，達到21.1%（表9）。

2.5 多元回歸分析及方程的建立

通過相關分析、通徑分析和逐步回歸法，各形態(tài)性狀與體質(zhì)量的相關性為顯著或極顯著水平，保留偏回歸系數(shù)顯著的性狀，建立與體質(zhì)量的回歸方程。

1 齡雌龜：Y=-636.682+35.820X1+56.665X3+19.395X5+20.718X9；

2 齡雌龜：Y=-1108.134+23.992X1+117.486X3+16.527X4+58.478X9；

1 齡雄龜：Y=-292.224+14.158X1+23.149X2+33.102X3；

2 齡雄龜：Y=-480.618+37.962X1+14.474X2+21.013X3+13.373X9。

經(jīng)多元回歸關系和偏回歸系數(shù)的顯著性檢驗表明，回歸關系為極顯著，而偏回歸系數(shù)均達到極顯著（P＜0.01）或顯著水平（P＜0.05）。經(jīng)回歸預測，估計值和實際值差異均不顯著（P＞0.05），表明1、2 齡雌、雄烏黑雜龜?shù)幕貧w方程可用于生產(chǎn)實踐。

表2 1 齡雌龜形態(tài)性狀對體質(zhì)量的影響Tab.2 Effects of metric traits on body weight of the female one-year-old tortoise

表3 2 齡雌龜形態(tài)性狀對體質(zhì)量的影響Tab.3 Effects of metric traits on body weight of the female two-year-old tortoise

表4 1 齡雄龜形態(tài)性狀對體質(zhì)量的影響Tab.4 Effects of metric traits on body weight of the male one-year-old tortoise

表5 2 齡雄龜形態(tài)性狀對體質(zhì)量的影響Tab.5 Effects of metric traits on body weight of the male two-year-old tortoise

表6 1 齡雌龜形態(tài)性狀對體質(zhì)量的決定系數(shù)Tab.6 Determinant coefficients of the metric traits on body weight of the female one-year-old tortoise

表7 2 齡雌龜形態(tài)性狀對體質(zhì)量的決定系數(shù)Tab.7 Determinant coefficients of the metric traits on body weight of the female two-year-old tortoise

表8 1 齡雄龜形態(tài)性狀對體質(zhì)量的決定系數(shù)Tab.8 Determinant coefficients of the metric traits on body weight of the male one-year-old tortoise

表9 2 齡雄龜形態(tài)性狀對體質(zhì)量的決定系數(shù)Tab.9 Determinant coefficients of the metric traits on body weight of the male two-year-old tortoise

3 討論

3.1 體質(zhì)量與形態(tài)性狀的變化

本試驗所測各性狀以體質(zhì)量的變異系數(shù)最大，與中華絨螫蟹Eriocheir sinensis[6]、硬頭鱒Oncorhynchus mykiss[16]、中華鱉Trionyx sinensis[17]等研究結(jié)果一致，說明以體質(zhì)量作為目標性狀進行選育，培育出優(yōu)良品種潛力更大。雜種F1 代各生長階段的性狀表現(xiàn)為外部形態(tài)指標增長及體質(zhì)量增加。影響1、2 齡雌龜體質(zhì)量的主要形態(tài)性狀有背甲長、殼高和甲橋長，表現(xiàn)出二維平面生長趨勢；而1、2齡雄龜?shù)闹饕螒B(tài)性狀有背甲長、背甲寬和殼高，呈三維立體生長態(tài)勢。

無論1 齡還是2 齡，背甲長、背甲寬、殼高等多項形態(tài)性狀與體質(zhì)量線性關系極為顯著。1 齡雜種龜?shù)南嚓P性指數(shù)分別為0.987（雌）和0.968（雄），2齡的指數(shù)分別為0.978（雌）和0.982（雄），說明方程擬合度良好，把影響體質(zhì)量的主要形態(tài)因素均考慮到了。本研究中，1 齡雜種龜各性狀的變異系數(shù)均大于2 齡，主要原因是幼龜生長較迅速，形態(tài)變異程度較大，選擇潛力更大；定期篩選并保留生長優(yōu)勢、大小勻稱的個體，而后期被選擇的次數(shù)越多，規(guī)格就趨向一致，所以變異系數(shù)以1 齡較大。

本試驗中，雌、雄雜種龜形態(tài)性狀與體質(zhì)量間的相關性差異顯著（P＜0.05），同齡雌龜個體大于雄性，變異系數(shù)也較大，對體質(zhì)量影響的主要性狀也有一定差異。不同性別生長差異的重要因素可能是性腺發(fā)育的不同步。在進行烏黑雜交龜選育時，根據(jù)選育的目的可將雌、雄龜群體分開，建立不同的選育測量指標。

3.2 各形態(tài)性狀對體質(zhì)量的影響

相關系數(shù)是兩個變量間的綜合體現(xiàn)，雌、雄雜種龜?shù)捏w質(zhì)量與各形態(tài)性狀間的相關系數(shù)大多達到極顯著水平，但不能說明所有的形態(tài)性狀是影響其經(jīng)濟性狀的主要因素。因此，有必要采用通徑分析，以表型相關系數(shù)達到顯著水平為入選條件，表型相關系數(shù)不顯著者剔除。本研究中，從1、2 齡雌、雄雜種龜群體各測量16 項性狀中分別入選的背甲長、殼高、腹甲后半部長和甲橋長；背甲長、殼高、腹甲長和甲橋長；背甲長、背甲寬和殼高；背甲長、背甲寬、殼高和甲橋長等變量都達到極顯著或顯著水平，所保留的形態(tài)性狀與體質(zhì)量的回歸方程的可靠程度在85%以上，說明方程擬合度良好，影響體質(zhì)量的主要性狀已經(jīng)找到。背甲長、殼高和甲橋長是1、2 齡雌雜種龜保留的共同性狀，而背甲長、背甲寬和殼高是1、2 齡雄龜?shù)墓餐誀?。因此，背甲長和殼高是影響烏黑雜龜體質(zhì)量的共同重要性狀，這與2 齡黃喉擬水龜研究結(jié)果相似[18]。背甲長和殼高是龜類生產(chǎn)實踐中理想的輔助指標。

3.3 在龜類選育中的應用

體質(zhì)量是龜類動物選育中重要的目標性狀之一，量化形態(tài)性狀對體質(zhì)量的影響是龜類選育的基礎?；蜻B鎖和基因多效性[19]使體質(zhì)量與形態(tài)性狀存在著不同程度的相關性[20-24]。王誠遠等[25]研究發(fā)現(xiàn)，決定1 齡烏龜體質(zhì)量最主要的因素是背甲長；賀剛等[26]對野生黑頸烏龜群體的研究表明，影響體質(zhì)量的形態(tài)性狀由高至低依次為背甲長、腹甲長、背甲寬、殼高。本試驗表明，各測量性狀中體質(zhì)量的變異系數(shù)最大，而背甲長、殼高等其他指標的變異系數(shù)較小。然而，在實際工作中，直接測量體質(zhì)量作為選擇指標，效果并不好，需結(jié)合其他性狀進行間接選擇，才能保證選育效果。本研究聯(lián)合使用相關分析、通徑分析和多元回歸分析，選擇出對1、2 齡雌體質(zhì)量具有決定性作用的形態(tài)性狀為背甲長、殼高、腹甲后半部長和甲橋長；背甲長、殼高、腹甲長和甲橋長。對1、2 齡雄龜體質(zhì)量具有決定性作用的性狀為背甲長、背甲寬和殼高；背甲長、背甲寬、殼高和甲橋長。其中，背甲長和殼高是影響烏黑雜交龜體質(zhì)量的共同性狀，說明雜交種具有親本的部分遺傳特征，在選育實踐中也發(fā)生了變異。龜?shù)姆N類、生活方式的不同，及不同生長階段也影響體質(zhì)量的形體性狀[17]，至于烏黑雜交龜后期的生長情況，需進一步開展基因遺傳等的相關研究。