張明波 馬麗源
摘? ? 要:為了對(duì)新品種紅花槭‘十月光輝進(jìn)行擴(kuò)繁增殖,以紅花槭‘十月光輝莖段為外植體進(jìn)行組培快繁研究,結(jié)果表明:先用70%乙醇處理10~30s,后用0.1%升汞處理1~5min為最適宜的滅菌方案;以MS+0.03mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂為最適初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基,以MS+0.3mg/L IBA+30g/L蔗糖+6g/L為最適生根培養(yǎng)基。本研究方法簡便高效,誘導(dǎo)增殖系數(shù)高,成活率高,經(jīng)多次探索試驗(yàn),成功獲得大量紅花槭‘十月光輝新生植株。
關(guān)鍵詞:紅花槭‘十月光輝;組培快繁;增殖;生根;培養(yǎng)基
紅花槭‘十月光輝(Acer rubrum‘October Glory)來源于美國東海岸及加拿大大部分地區(qū),是落葉大喬木,成年樹高12~18m,生長較快,適應(yīng)中性及微酸性土壤,微酸、濕潤、透水性好的壤土生長最理想;適宜生長的pH范圍為6.0~7.5,適合生長的土壤含鹽量<0.2%,土壤EC值<800μs/cm,灌溉水EC值<0.8ms/cm,能耐-15℃左右低溫,適合我國華北、華中、華東大部分地區(qū)種植。因其秋色葉色彩奪目,樹冠整潔,深受設(shè)計(jì)師的喜愛,被設(shè)計(jì)應(yīng)用于公園、小區(qū)及行道栽植。紅花槭‘十月光輝是美國紅楓紅花槭系列品種中綜合性狀及表現(xiàn)最優(yōu)秀品種之一。據(jù)調(diào)查,紅花槭‘十月光輝市場需求量較大,年產(chǎn)能較小,因其種子結(jié)實(shí)率低和播種繁殖易變異等因素的影響,通過組培技術(shù)手段,建立無性繁殖技術(shù)體系加快擴(kuò)繁增殖,就顯得尤為重要。
1? ? ?材料與方法
1.1? ?外植體消毒? ? ? ?本試驗(yàn)在大連市盛世綠源科技有限公司組培室中進(jìn)行,于5~6月份,晴天上午,選生長健壯、樹形優(yōu)美、無病蟲害的優(yōu)良母本,采集1年生枝條,剪成長約2cm的帶腋芽莖段,用中性洗滌劑漂洗后,流水沖洗2h以上,然后置于工作臺(tái)備用。在超凈工作臺(tái)上,先用70%乙醇處理10~30s[1],后用0.1%升汞處理1~5min,然后用無菌水漂洗5次。取出莖段,用無菌濾紙吸去表面水分。
1.2? ?獲取無菌芽苗? ? ? ?切取紅花槭植株的休眠芽進(jìn)行預(yù)處理,接種到MS培養(yǎng)基上,pH值為6,含0.1mg/L 6-BA、0.08mg/L NAA、20g/L蔗糖和7g/L瓊脂;在溫度為20℃、濕度為60%、光照強(qiáng)度為50μmol/m2·s、每天光照12h,20d獲得無菌芽苗。
1.3? ?初代培養(yǎng)? ? ? ?將獲得的無菌芽苗切割成1.5~3.0cm的帶頂芽的莖段,接種到MS培養(yǎng)基上,pH值為5,含0.03 mg/L 6-BA 、0.05mg/L NAA、30g/L蔗糖和6g/L瓊脂;在溫度為25℃、濕度為60%、光照強(qiáng)度為80μmol/m2·s、每天光照18h、每25d更換新鮮培養(yǎng)基的條件下,培養(yǎng)1~3個(gè)月,獲得叢生芽苗;初代培養(yǎng)基的誘導(dǎo)率較高,可達(dá)90%以上。
1.4? ?壯苗及增殖階段? ? ? ?挑選健壯的叢生芽苗,以單個(gè)芽苗為單位進(jìn)行切離,將切離后的單個(gè)芽苗切割成長度為1.5~3.0cm的帶頂芽的莖段,然后將帶頂芽的莖段接種到MS培養(yǎng)基,pH值為5,含有0.5mg/L NAA、0.5mg/L 6-BA、蔗糖30g/L和6g/L瓊脂的壯苗培養(yǎng)基上,在溫度為25℃、濕度為60%、光照強(qiáng)度為70μmol/m2·s、每天光照20h條件下培養(yǎng)20d,獲得健壯芽苗[2];增殖培養(yǎng)基的增殖速度快、增殖系數(shù)高,可達(dá)7.0,壯苗過程培養(yǎng)的苗長勢一致,苗生長量大,健壯有效,生根率高,可達(dá)100%。
1.5? ?生根階段? ? ? ?挑選健壯芽苗,切割成長度為2.0~3.0cm的帶頂芽的莖段,然后將莖段接種到MS培養(yǎng)基,含有0.3mg/L IBA、30g/L蔗糖、6g/L瓊脂的生根培養(yǎng)基上,在溫度為25℃、濕度為60%、光照強(qiáng)度為70μmol/m2·s、每天光照20h條件下培養(yǎng)20d,獲得再生植株。
1.6? ?煉苗階段? ? ? ?將株高達(dá)4cm、根系發(fā)達(dá)、葉片展開的再生植株在煉苗室內(nèi)敞口煉苗3d,然后洗凈根系附著的培養(yǎng)基,再移植到栽培基質(zhì)中并澆透水,栽培基質(zhì)為3份的草炭土和2份的珍珠巖[3],在溫度為25℃、濕度為75%、光照強(qiáng)度為70μmol/m2·s、每天光照16h的條件下,用塑料薄膜覆蓋容器口培養(yǎng)至長出的新葉完全展開后,去掉覆蓋的塑料薄膜,獲得新生紅花槭。此馴化移栽過程簡便,成活率高,可達(dá)90%以上。
2? ? ?結(jié)論
本試驗(yàn)確定了紅花槭‘十月光輝快繁技術(shù)體系,包括適宜的滅菌方案,最適初代培養(yǎng)基,最適繼代培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基及煉苗移栽技術(shù)方法,為紅花槭‘十月光輝快繁體系的建立開辟了新路徑。
參考文獻(xiàn):
[1]M.K.拉茲丹編著,肖尊安,祝洋譯.植物組織培養(yǎng)導(dǎo)論[M].化學(xué)工業(yè)出版社,2006,05.
[2]呂晉慧,孔冬梅.園藝植物組織培養(yǎng)[M].中國農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社
[3]柳振亮主編.苗木培育實(shí)用技術(shù)[M].化學(xué)工業(yè)出版社.
第一作者簡介:張明波(1986-),男,碩士研究生,工程師,主要從事苗木新品種研發(fā)及新品苗木的繁育與養(yǎng)護(hù)。