陳 霞， 熊智強(qiáng)， 夏永軍， 艾連中， 王光強(qiáng)

上海理工大學(xué) 醫(yī)療器械與食品學(xué)院 上海食品微生物工程技術(shù)研究中心，上海 200093

世界衛(wèi)生組織預(yù)測，到2030年，心血管疾病仍是導(dǎo)致死亡的主要原因，全球?qū)?huì)有約2.3億人受到影響[1]。據(jù)報(bào)道，從1999年到2003年，高膽固醇血癥導(dǎo)致西歐45%的心臟病發(fā)作，中歐和東歐35%的心臟病發(fā)作[2]。目前，有許多體外的研究結(jié)果表明微生物具有一定的降膽固醇作用[3,4]，其中益生乳酸菌(主要是乳桿菌和雙歧桿菌)的作用較強(qiáng)[5]。例如，從泡菜中篩選出兩株植物乳桿菌LpT1和LpT2，其膽固醇去除率分別為49.11%和50.03%[6]。以發(fā)酵食品(發(fā)酵香腸、酸菜及酸奶)為材料，篩選出一株嗜酸乳桿菌S-59，膽固醇去除率高達(dá)69.20%[7]。從健康人群糞便中篩選出五株雙歧桿菌，其中，乳雙歧桿菌FB001膽固醇去除率最高為67.10%，而FB014的膽固醇去除率只有2.4%[8]。高膽固醇血癥患者有望通過長期服用益生乳酸菌及其制品來降低心腦血管疾病的發(fā)病率[9]，避免服用降膽固醇藥物引起的副作用。

膽固醇是構(gòu)成細(xì)胞的重要成分，對人體發(fā)揮重要的生理功能。如果其含量過高也會(huì)造成一定的危害，容易引起冠心病、動(dòng)脈硬化等心腦血管疾病，嚴(yán)重威脅人類的健康[10]。隨著人們的生活水平的提高，人們平時(shí)飲食攝入的膽固醇量也普遍增加，可以通過調(diào)節(jié)飲食結(jié)構(gòu)、服用降膽固醇藥物、依靠物理/化學(xué)方法降低食物中的膽固醇含量等方式降低膽固醇水平，還有依靠一些具有降膽固醇功能的微生物(如益生乳酸菌)，利用其特殊的生理功能研發(fā)出新型微生態(tài)制劑，使其能夠發(fā)揮降低機(jī)體膽固醇水平的作用，這一措施取得非常顯著的效果，而且?guī)缀鯚o任何副作用[11,12]。雖然很多體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)益生菌能有效降膽固醇，但是由于菌株自身的穩(wěn)定性、菌株之間差異性以及體內(nèi)生長條件的不同等因素，很難在體內(nèi)進(jìn)行機(jī)理研究，因此很多學(xué)者為方便研究簡化體系，常利用體外實(shí)驗(yàn)研究其機(jī)理，但目前通過體外實(shí)驗(yàn)獲得很多數(shù)據(jù)或者假設(shè)，但還沒有一個(gè)統(tǒng)一的結(jié)論，有一些甚至相互矛盾，因此亟需進(jìn)行總結(jié)歸納，為后來的研究者提供參考依據(jù)。

1 體外降膽固醇作用益生菌概述

1.1 體外降膽固醇益生菌種類

目前，科研人員發(fā)現(xiàn)的益生菌大體上可分為：乳桿菌屬、雙歧桿菌屬、鏈球菌屬、乳球菌屬、片球菌屬和明串珠菌屬等。此外，還有一些酵母[13](如釀酒酵母、發(fā)酵畢赤酵母、漢遜德巴利酵母和馬克斯克魯維酵母等)和革蘭氏陰性菌(如大腸桿菌Nissle 1917)也可以歸入益生菌的范疇。其中，大腸桿菌Nissle 1917是非乳酸益生菌中研究最多的益生菌[14]。

據(jù)報(bào)道用于體外降膽固醇研究的益生菌菌種如表1所示(不完全統(tǒng)計(jì))。肖晨等人[15]報(bào)道植物乳桿菌LH-511和卷曲乳桿菌OF48-2pH5具有較高的體外降膽固醇能力，膽固醇降解率分別為57.50%和41.90%。嗜酸乳桿菌S-59和鼠李糖乳桿菌DM9054膽固醇降解率分別為69.20%和55.48%[7,16]。韋云路等人[17]研究的動(dòng)物雙歧桿菌LPL-RH、長雙歧桿菌 TTF和植物乳桿菌LPL-1的體外膽固醇去除率分別為23.80%、24.50%、20.90%，三者之間沒有顯著性差異。王秀娟等人[18]研究2株益生菌保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌的體外降膽固醇能力，優(yōu)化高效降膽固醇的條件，發(fā)現(xiàn)按2%接種量，培養(yǎng)基的pH為6.7，37 ℃培養(yǎng)48 h后，降膽固醇效果最好，膽固醇的降解率分別為4.12%和4.53%。還有的研究表明，與嗜熱鏈球菌相比，嗜酸乳桿菌和植物乳桿菌是具有高效同化膽固醇能力的菌株，可用于降低食品中的膽固醇[19]。國立東等人[20]研究乳酸乳球菌乳亞種HUCM 201的體外降膽固醇特性，該菌株能夠從培養(yǎng)基中去除33.10%膽固醇，其中發(fā)生共沉淀作用去除14.30%的膽固醇，菌體細(xì)胞吸收18.10%的膽固醇到細(xì)胞內(nèi)。植物乳桿菌YXB23和乳酸片球菌YDA12，降解率分別為35.33%和33.53%[21]。何永巖等人[22]研究的5株益生菌從培養(yǎng)基中去除膽固醇都在27.00%以上，糞腸球菌L14-3為35.90%，乳酸乳球菌L14-3為35.90%。從泡菜汁中分離得到3株鏈球菌株(D1、D4和D6)和3株明串珠菌株(D2、D3和D5)，6株菌株都具有降膽固醇特性，其中D1培養(yǎng)48h的膽固醇降解率高達(dá)81.57%，可應(yīng)用于發(fā)酵食品的生產(chǎn)[23]。張灝等人[24]研究的15株植物乳桿菌，能夠不同程度的降低培養(yǎng)基中的膽固醇，膽固醇降解量從0.00 μg/mL～90.50 μg/mL。嗜酸乳桿菌CH1和干酪乳桿菌MUH117沒有降低培養(yǎng)基中的膽固醇[25]。BELVISO等人[26]的研究中發(fā)現(xiàn)6株植物乳桿菌和2株副干酪乳桿菌完全沒有降低培養(yǎng)基中的膽固醇。此外，有研究發(fā)現(xiàn)釀酒酵母K11、發(fā)酵畢赤酵母K14、漢遜德巴利酵母H2和馬克斯克魯維酵母Z17，大腸桿菌Nissle 1917和凝結(jié)芽孢桿菌MTCC 5856都有降膽固醇的能力[13-14,27]。

體外研究表明益生乳酸菌中乳桿菌屬、雙歧桿菌屬、鏈球菌屬、乳球菌屬、片球菌屬、芽孢桿菌屬和明串珠菌屬都包含降膽固醇特性的菌株，其中關(guān)于乳桿菌屬和雙歧桿菌的報(bào)道較多；一些酵母[13](釀酒酵母K11、發(fā)酵畢赤酵母K14、漢遜德巴利酵母H2和馬克斯克魯維酵母Z17)和非乳酸益生菌[14](大腸桿菌Nissle 1917)也具有降膽固醇的能力，但是它們的降膽固醇能力存在一定差異。還有一些菌株沒有降解膽固醇的能力，如嗜酸乳桿菌CH1、干酪乳桿菌MUH117、植物乳桿菌ST1003等。對于具有降解膽固醇活性的益生菌菌株而言，不同菌種具有不同的降膽固醇能力，即使同屬于乳桿菌屬中的植物乳桿菌，其降膽固醇的能力也存在很大差異，因此膽固醇的去除也具有菌株特異性。

表1 被報(bào)道的具有降膽固醇能力的部分益生菌菌種

1.2 影響益生菌體外降解膽固醇作用的因素

1.2.1膽汁鹽的種類與濃度的影響

有研究發(fā)現(xiàn)菌株在含有膽鹽的培養(yǎng)基中具有更高的降膽固醇活性。在LE B 和YANG S H的研究中，與不含0.3% (w/t) oxgall相比，植物乳桿菌FB003、鼠李糖乳桿菌GG和戊糖片球菌KACC 12311在含有0.3% (w/v) oxgall的條件下，3株菌的降膽固醇能力均顯著提高了1.5倍[43]。呂兵等人[45]研究了從Kefir中分離得到的植物乳桿菌的降膽固醇能力與膽鹽之間關(guān)系，發(fā)現(xiàn)植物乳桿菌在不含膽鹽的培養(yǎng)基中幾乎沒有降膽固醇能力，而在添加膽鹽(3 g/L TCA)后能夠從培養(yǎng)基中去除60%的膽固醇，其中共沉淀50%的膽固醇，菌體吸收10%的膽固醇；隨后設(shè)置TCA濃度梯度研究膽鹽濃度與降膽固醇能力的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)膽鹽濃度在0～4 g/L范圍內(nèi)，上清液中膽固醇含量隨著膽鹽濃度的增加而減小，但膽鹽濃度超過4 g/L時(shí)膽固醇的含量又會(huì)增加；沉淀洗滌液中膽固醇含量呈現(xiàn)先增加后減小的趨勢。此外，還有研究中發(fā)現(xiàn)干酪乳桿菌Shirota在含有0.4% oxgall的培養(yǎng)基中膽固醇的吸收量增大，與0.2% oxgall相比具有顯著性意義，而對于短乳桿菌NR1C1684、植物乳桿菌NDV和發(fā)酵乳桿菌F53等菌株無顯著性意義[3]。培養(yǎng)基中oxgall的濃度影響嗜酸乳桿菌NCFM的降膽固醇能力，上清液中膽固醇含量隨著oxgall濃度的增加而減少，在oxgall 濃度為0.4% 時(shí)降解膽固醇能力最強(qiáng)[46]。發(fā)酵乳桿菌KC5b分別在6種膽鹽中的膽固醇去除率從2.8%(oxgall)提高到53.6%(DCA)，通過分析在oxgall、TCA、GCA和TDCA中膽固醇去除率無顯著差異，而在CA和DCA中差異顯著[40]。從Kefir中分離的一株植物乳桿菌在含有TDCA(72%)、TCA(60%)、GDCA(54%)和GCA(39%)的培養(yǎng)基膽固醇去除率也是不同的[45]。因此，一些菌株在含有膽鹽時(shí)降膽固醇能力比不含膽鹽時(shí)的高，并且因膽鹽種類和濃度的不同而產(chǎn)生差異。但由于菌株自身特性、膽鹽耐受性等的不同，膽鹽濃度與降膽固醇能力之間并沒有明顯的相關(guān)性。

1.2.2菌株的種類及其不同生長階段的影響

目前，有很多研究報(bào)道了益生菌菌株的降膽固醇作用，發(fā)現(xiàn)不同的益生菌菌株的降膽固醇作用具有差異性[47]。益生乳酸菌是一類龐大且復(fù)雜的細(xì)菌，目前超過200個(gè)種。不同的益生菌菌株或同一菌株不同生長階段，其降膽固醇效果也不同[48]。BELVISO等人[26]的研究中，2株植物乳桿菌降膽固醇含量平均為19.40%，而3株副干酪乳桿菌降膽固醇含量平均為6.80%。唐雅茹等人[30]的研究中，植物乳桿菌KLDS1.0386降解膽固醇能力高達(dá)55.71%。林斌等人[49]的研究表明植物乳桿菌HLX37在6 h、12 h、24 h和48 h均具有降解膽固醇的能力，并且其降膽固醇能力隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長而逐漸提高，到48 h膽固醇去除率達(dá)最大值。這和劉娟等人的研究結(jié)果一致，菌體的不同生長階段對降膽固醇能力有著很大影響[3,50-51]。因此，影響菌株的膽固醇的去除不僅與菌株的種類有關(guān)，而且還與菌株的生長階段有關(guān)，菌株生長量導(dǎo)致降膽固醇能力也不同[3]。

1.2.3pH的影響

很多研究結(jié)果表明膽固醇的去除與培養(yǎng)基的pH有關(guān)[25]。在不控制pH值的條件下，兩株干酪乳桿菌N19和E5從培養(yǎng)基中去除膽固醇的量分別為36.3 mg/mL和56.6 mg/mL。但是在控制pH(6.0)的條件下，兩株菌的膽固醇去除量都很小，分別為10.4 mg/mL和8.0 mg/mL，二者之間呈現(xiàn)顯著差異[52]。從Kefir中分離的一株植物乳桿菌在恒定pH(6.0)時(shí)膽固醇含量減少了0.02 mg/mL；而在自然pH時(shí)膽固醇含量減少了0.18 mg/mL[45]。而在另一項(xiàng)研究中呈現(xiàn)與之矛盾的觀點(diǎn)，植物乳桿菌ST-III在不控制pH的條件，菌株從培養(yǎng)基中去除膽固醇的量為0.112 mg/mL,其中沉淀0.041 mg/mL的膽固醇，同化0.071 mg/mL的膽固醇；在控制pH為6.0的條件下，菌株從培養(yǎng)基中去除膽固醇的量為0.132 mg/mL，其中沉淀0.029 mg/mL的膽固醇，同化0.103 mg/mL的膽固醇。張玢研究了不同pH(pH在3.0～7.0之間)對植物乳桿菌KF5降解膽固醇的影響，結(jié)果表明膽固醇降解率隨pH的升高先增加后減小，以pH 5.0為分界點(diǎn)，此時(shí)降解率最高達(dá)到34.65%，而pH 3.0降解率最低(5.94%)，可能是因?yàn)檫^低的pH抑制菌株的生長[53]。這表明一些菌株降膽固醇能力與菌株生長過程中培養(yǎng)基的pH有關(guān)。但對于不同的益生菌菌株，培養(yǎng)過程維持pH穩(wěn)定機(jī)制以及pH的變化是不同的，那么降膽固醇能力就具有菌株特異性。

1.2.4膽鹽水解酶的作用

體外的研究表明，益生菌產(chǎn)生的膽鹽水解酶(Bile Salt Hydrolase，BSH)可將甘氨酸和?；撬岬冉Y(jié)合型膽汁酸鹽水解生成游離膽汁酸和氨基酸殘基，再通過膽固醇與游離膽汁酸、菌體細(xì)胞形成復(fù)合物發(fā)生共沉淀作用去除培養(yǎng)基中的膽固醇。目前，具有BSH活性的細(xì)菌主要有乳桿菌屬、雙歧桿菌屬、腸球菌屬等。TAHRI等人[54]研究嗜酸乳桿菌RP32分別在酸化和pH控制在6.0的條件下培養(yǎng)，都觀察到膽鹽的完全去除，只有在膽鹽去結(jié)合作用后才能觀察到明顯的膽鹽沉淀。并且在酸化條件下去結(jié)合膽鹽的沉淀程度(50%)高于pH控制的條件下(30%)，膽固醇與膽鹽發(fā)生共沉淀，而在pH控制的對照培養(yǎng)基中未發(fā)現(xiàn)膽固醇的沉淀。在沒有細(xì)菌細(xì)胞的情況下，膽固醇是由于去結(jié)合膽鹽的溶解度降低而沉淀的。這表明菌株嗜酸乳桿菌RP32從培養(yǎng)基中去除的膽固醇不是由于細(xì)菌細(xì)胞對膽固醇的吸收，而是由于細(xì)菌的膽鹽水解酶對結(jié)合膽鹽的去結(jié)合作用所致，使膽固醇發(fā)生共沉淀[25]。TARANTO等人[55]的研究也發(fā)現(xiàn)羅伊氏乳桿菌體外清除膽固醇的主要機(jī)制與細(xì)胞的BSH活性有關(guān)，釋放去結(jié)合的膽汁酸(在低pH值下不易溶解)，誘導(dǎo)膽固醇沉淀。在另一項(xiàng)體外研究也評價(jià)了BSH在植物乳桿菌80(pCBH1)中的降膽固醇作用[56]。但是有的研究表明BSH的作用與益生菌降解膽固醇之間沒有相關(guān)性。雞乳桿菌I 16、I 26和兔乳桿菌C17具有較高的去結(jié)合膽鹽活性卻不能去除培養(yǎng)基中的膽固醇，在這些菌株中膽固醇去除與膽鹽去結(jié)合之間沒有相關(guān)性[57]。釀酒酵母K11、發(fā)酵畢赤酵母K14、漢遜德巴利酵母H2和馬克斯克魯維酵母Z17以及大腸桿菌Nissle 1917等菌株的降膽固醇并非BSH的參與，可能還存在別的降膽固醇機(jī)制[14]。

1.2.5其他因素

除了上述的影響因素外，不同的培養(yǎng)基、游離膽汁酸的量和添加益生元等也會(huì)影響益生菌菌株的降膽固醇能力。植物乳桿菌HLX37在MRS、MRS+1 g/L TCA、MRS+Cholesterol和MRS+Cholesterol+1 g/L TCA培養(yǎng)基中均具有降解膽固醇作用，在MRS+Cholesterol+1 g /L TCA培養(yǎng)基中培養(yǎng)48 h膽固醇降解能力最強(qiáng)[49]。植物乳桿菌C8能夠降解甘氨膽酸鈉、?；悄懰徕c和混合膽鹽，在含有甘氨膽酸鈉的條件下，膽固醇去除率最高，同時(shí)測得的游離膽汁酸生成量也最多，然后是混合膽鹽和?；悄懰徕c。它們的膽固醇去除率與游離膽汁酸生成量成正比關(guān)系[58]。7中益生元都能夠促進(jìn)植物乳桿菌KF5的降解，添加聚葡萄糖與對照相比，膽固醇降解率提高了6.56%[53]。LIONG等人[59]研究了在6種益生元存在的培養(yǎng)基中，干酪乳桿菌ASCC 292對膽固醇的去除作用，通過響應(yīng)面分析添加多種益生元更有助于膽固醇的降解。

綜上所述，益生菌降膽固醇的能力受到多種因素的影響，其影響方式因菌株和菌種的不同而異。

2 益生菌體外降膽固醇的機(jī)制研究進(jìn)展

許多體外研究已經(jīng)報(bào)道益生菌降解膽固醇作用的一些機(jī)制，包括(1)膽固醇摻入菌體的細(xì)胞膜/壁[3,60]；(2)菌體含有的膽鹽水解酶(Bile salt hydrolase，BSH)使結(jié)合膽鹽發(fā)生去結(jié)合作用，生成游離膽酸與膽固醇發(fā)生共沉淀作用的共沉淀理論[61]；(3)菌體直接吸收膽固醇的吸收理論[62]；(4)其他理論：除共沉淀和吸收作用等非代謝途徑外，還存在著復(fù)雜的代謝降解機(jī)制[50]。此外，還有研究表明同化作用和共沉淀作用共同起作用[63]。

2.1 膽固醇摻入/粘附菌體的細(xì)胞膜(壁)

根據(jù)體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果，證明了膽固醇的去除量與膽鹽的去結(jié)合作用二者之間沒有相關(guān)關(guān)系，因此推測出另外一種降膽固醇理論，膽固醇摻入/粘附細(xì)胞膜(壁)上來去除培養(yǎng)基中的膽固醇[64]。例如，嗜酸乳桿菌ATCC 43121可以將生長過程中從培養(yǎng)基中的去除的部分膽固醇合并到細(xì)胞膜中[65]。KIMOTO等人[66]的研究中將活細(xì)胞和生長細(xì)胞與休眠細(xì)胞(活細(xì)胞懸浮在磷酸鹽緩沖液中)和死細(xì)胞(熱死細(xì)胞)進(jìn)行比較，與死亡的細(xì)胞相比，雖然生長中的細(xì)胞能夠清除更多的膽固醇，但是熱致死的細(xì)胞仍然可以清除培養(yǎng)基中的膽固醇，這表明一些膽固醇的去除是通過與細(xì)胞表面結(jié)合在一起的。USMAN和HOSONO研究的28株加氏乳桿菌菌株都具有結(jié)合膽固醇的能力，但不同菌株之間的結(jié)合能力存在顯著差異，但是目前還不清楚是由于細(xì)胞膜的差異還是其他細(xì)胞成分的差異引起的[39]。其中SBT10241、SBT10240、SBT10238等菌株可以通過與細(xì)胞表面結(jié)合來去除培養(yǎng)基中的膽固醇，此外還研究了不同濃度的乙醇對粘附性的影響，發(fā)現(xiàn)粘附在細(xì)胞上的膽固醇隨著乙醇濃度的增加而減小。TARANTO等人[55]對羅伊氏乳桿菌CRL 1098的細(xì)胞壁/膜和細(xì)胞質(zhì)液進(jìn)行了評估，發(fā)現(xiàn)大約有20%最初添加的[3H]膽固醇在壁/膜部分中被檢測到，并且菌體沉淀的膽固醇在pH 7.0磷酸鈉緩沖液下洗滌后沒有分離，充分說明20%的沉淀膽固醇摻入到菌體的細(xì)胞膜/壁上。

2.2 共沉淀理論

KLAVER和VAN DER MEER[25]通過對多株雙歧桿菌和嗜酸乳桿菌的體外實(shí)驗(yàn)，提出了膽固醇的共沉淀作用，游離膽汁酸能夠在酸性條件(pH<5.5)下共沉淀膽固醇，而在偏中性條件下，這種共沉淀作用會(huì)減弱。湯慧勤等人[67]對5株產(chǎn)BSH的植物乳桿菌降膽固醇作用進(jìn)行分析，測定發(fā)酵上清液、菌體洗滌液和菌體破碎液三部分膽固醇含量，進(jìn)一步驗(yàn)證了是BSH水解結(jié)合膽鹽生成的游離膽汁酸與膽固醇的共沉淀作用。乳酸乳球菌乳亞種HUCM201從培養(yǎng)基中去除膽固醇的機(jī)制之一是由BSH引起的共沉淀作用，并且發(fā)現(xiàn)其對甘氨膽酸鈉的水解作用更強(qiáng)，在共沉淀作用中發(fā)揮重要作用[20]。在pH 3.5和pH 4.0的條件下，通過游離膽汁酸與膽固醇的共沉淀曲線，發(fā)現(xiàn)共沉淀膽固醇的量隨著膽汁酸濃度的升高而增加[68]。

2.3 吸收理論

一些體外研究結(jié)果表明，益生菌在含有膽鹽和膽固醇的培養(yǎng)基中厭氧培養(yǎng)時(shí)，菌體細(xì)胞能夠吸收膽固醇，達(dá)到從培養(yǎng)基中去除膽固醇的作用。菌體吸收膽固醇能力依賴于其生長特性，并且膽鹽的存在是菌體細(xì)胞吸收膽固醇的前提條件。TAHRI等人[37]通過對雙歧桿菌的生長細(xì)胞和靜息細(xì)胞進(jìn)行了體外降膽固醇的實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)生長細(xì)胞能吸收6%～50%不等的膽固醇，而休眠細(xì)胞則沒有。用放射性標(biāo)記檢測發(fā)現(xiàn)酯化的膽固醇能夠被雙歧桿菌吸收，但酯化的膽固醇不會(huì)與游離膽鹽發(fā)生共沉淀作用，這充分說明膽固醇確實(shí)被菌體細(xì)胞所吸收了。在KIMOTO等人[66]的研究中，7株乳球菌菌株都能夠從含有?；悄懰徕c和膽固醇的培養(yǎng)基中去除膽固醇，一方面乳球菌菌株沒有從?；悄懰徕c中產(chǎn)生?；撬?，表明乳球菌去除膽固醇與游離膽鹽對膽固醇的沉淀無關(guān)；另一方面生長細(xì)胞去除膽固醇的能力高于靜息細(xì)胞和熱殺死細(xì)胞，表明培養(yǎng)基中的膽固醇是通過菌體細(xì)胞吸收作用去除的。

2.4 其他理論

益生菌體外降膽固醇機(jī)制除共沉淀和吸收作用等非代謝途徑外，還存在著復(fù)雜的代謝降解機(jī)制。代謝降解機(jī)制可能是益生菌菌株處于生長狀態(tài)時(shí)產(chǎn)生特殊的酶，將膽固醇降解并轉(zhuǎn)化為其他物質(zhì)，這部分可以通過代謝組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)來進(jìn)一步分析。植物乳桿菌菌株LpT1和LpT2在三種培養(yǎng)基中的上清液、沉淀和破碎細(xì)胞中的膽固醇含量總和與未接種的空白培養(yǎng)基中的膽固醇含量0.1 mg/mL相比，二者不相等，可以看到6組都有部分膽固醇“消失”，其中菌株LpT2在含有膽固醇的MRS培養(yǎng)基中總膽固醇含量為0.045 mg/mL遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于對照的0.1 mg/mL，這可能是由于菌體細(xì)胞利用膽固醇并轉(zhuǎn)化成其他物質(zhì)[69]。益生菌體外降膽固醇不僅僅是一種機(jī)制起作用，而是多種機(jī)制一起發(fā)揮作用的，以菌體同化作用和共沉淀作用為主要作用機(jī)制。

3 結(jié)論

益生菌被廣泛用于評估其對降膽固醇的作用，然而其作用效果因菌株和菌種的不同而產(chǎn)生差異。有一些益生菌菌株表現(xiàn)出降膽固醇的特性，而另一些則沒有。值得注意的是具有高BSH活性的菌株卻沒有降膽固醇能力，為具有高降膽固醇能力益生菌的篩選增加難度。通過體外研究揭示益生菌對降低膽固醇的作用機(jī)制有多種，但對于不同菌株仍然存在爭議。因此，后續(xù)需要通過一系列實(shí)驗(yàn)來進(jìn)一步驗(yàn)證并完善其降低膽固醇的機(jī)制。