駱聲秀，孔維忠，孫 萍，*，楊 祺，吳志超，盧道元

(1.江中藥業(yè)股份有限公司，江西 南昌330049；2.九江市第六人民醫(yī)院，江西 九江 332005； 3.江西中醫(yī)藥大學(xué)，江西 南昌 330004)

超微粉碎技術(shù)是20世紀(jì)70年代為適應(yīng)現(xiàn)代高新技術(shù)發(fā)展而產(chǎn)生的一種物料加工新技術(shù)，主要指利用機(jī)械或流體動(dòng)力方法克服固體內(nèi)部凝聚力，將物料粉碎成直徑小于10 μm，甚至更細(xì)的超細(xì)粉體的操作[1]。由于超微粉碎技術(shù)可大幅度提高有些中藥的溶出率及生物利用度，近年來在中藥及其制劑領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用，如靈芝[2]、黃芪[3]、甘草[4]、牡蠣[5]等纖維性強(qiáng)或質(zhì)地堅(jiān)硬不易粉碎的藥材均有大量的超微粉研究及應(yīng)用。目前對中藥及其制劑超微粉的質(zhì)量研究大多集中在粉體學(xué)性質(zhì)[6-8]、溶出度[4，9，10]、有效成分含量[11-12]、藥理藥效[13-14]等方面，而對于重金屬含量方面鮮有報(bào)道，因此，本實(shí)驗(yàn)以甘草為例研究其粗粉與超微粉鉛、鎘、鉻、鎳含量的差異，探討超微粉技術(shù)對中藥材重金屬含量的影響，為中藥超微粉技術(shù)的應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 藥品

硝酸(UP級)；鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 mg/mL)；鎘標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 mg/mL)；磷酸二氫銨-硝酸鈀溶液；磷酸二氫銨-硝酸鎂溶液；超純水。

1.2 儀器

PinA AcLe 900T原子分光光譜儀；Pb、Cd、Cr、Ni空心陰極燈；微波消解儀；SYFM-82型振動(dòng)式藥物超微粉碎機(jī)(濟(jì)南松岳公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 甘草粗粉與超微粉的制備

將甘草藥材采用粉碎機(jī)粉碎，得甘草粗粉；將甘草粗粉采用振動(dòng)式藥物超微粉碎機(jī)粉碎得甘草超微粉。

2.2 供試品溶液制備

取供試品粉末0.5 g，精密稱定，置聚四氯乙烯消解罐內(nèi)，加10 mL濃硝酸溶液，混勻，浸泡過夜，蓋好內(nèi)蓋，旋緊外套，置微波消解爐內(nèi)，進(jìn)行消解(消解程序見表1)。消解完全后，取出消解內(nèi)罐置電熱板上135 ℃緩緩加熱濃縮至1～2 mL，放冷，用水少量多次轉(zhuǎn)入25 mL量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，即得。同法同時(shí)制備試劑空白溶液。

表1 甘草樣品消解程序

2.3 測定條件

鉛的測定波長：283.31 nm；鎘的測定波長：228.80 nm；鉻的測定波長為357.87 nm；鎳的測定波長為232 nm；鉛、鉻以磷酸二氫銨-硝酸鈀作為基體改進(jìn)劑，鎘以磷酸二氫銨-硝酸鎂作為基體改進(jìn)劑，鎳未加基體改進(jìn)劑。具體測定條件見表2。

表2 Pb、Cd、Cr、Ni測定程序升溫條件

2.3.1 基體改進(jìn)劑選擇 實(shí)驗(yàn)考察了不加基體改進(jìn)劑及分別加磷酸二氫銨-硝酸鈀、磷酸二氫銨-硝酸鎂作為基體改進(jìn)劑對鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線測定的峰形及線性的影響，結(jié)果不加基體改進(jìn)劑及分別加磷酸二氫銨-硝酸鈀為基體改進(jìn)劑時(shí)峰形均較好，磷酸二氫銨-硝酸鎂作為基體改進(jìn)劑前沿有一小肩峰，三者的線性相關(guān)系數(shù)分別為0.830 674、0.997 518、0.989 979，以磷酸二氫銨-硝酸鈀為基體改進(jìn)劑的線性較好，因此，選擇磷酸二氫銨-硝酸鈀作為基體改進(jìn)劑。

2.3.2 灰化溫度和原子化溫度的選擇 分別考察了灰化溫度為850 ℃、600 ℃、550 ℃及原子化溫度1 600 ℃、1 700 ℃對吸光度值及峰形的影響，結(jié)果表明灰化溫度為550 ℃，原子化溫度為1 700 ℃時(shí)峰形較好，吸光度值較高，故選擇550 ℃作為灰化溫度，1 700 ℃作為原子化溫度。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線的制備

2.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 取鉛標(biāo)準(zhǔn)貯備液(1 mg/mL)0.1 mL置于100 mL容量瓶中，用2%硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，制成質(zhì)量濃度為1 mg/L的鉛標(biāo)準(zhǔn)液，精密量取鉛標(biāo)準(zhǔn)液0.8 mL置于10 mL容量瓶中，用超純水稀釋至刻度，搖勻，制成80 μg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作母液。在最佳測定條件下，用石墨爐原子吸收分光光度法，儀器自動(dòng)將80 μg/L鉛標(biāo)準(zhǔn)工作母液用超純水稀釋成濃度分別為0.0 μg/L、4.0 μg/L、8.0 μg/L、20.0 μg/L、40.0 μg/L、60 μg/L的系列鉛標(biāo)準(zhǔn)工作液，結(jié)果鉛在0～60.0 μg/L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為Y=0.004 30X+0.007 51(R2= 0.997 8)；同法制得濃度分別為0.0 μg/L、0.8 μg/L、2.0 μg/L、4.0 μg/L、6.0 μg/L、8.0 μg/L的系列鎘標(biāo)準(zhǔn)工作液，結(jié)果鎘在0～8.0 μg/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為Y= 0.06 544X-0.010 94(R2= 0.998 3)；鉻在0～50.0 μg/L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為Y=0.012 11X+0.012 37(R2=0.999 3)；鎳在0～100 μg/L范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，回歸方程為Y=0.004 68X+0.003 75(R2= 0.999 8)。

2.4.2 樣品測定 以自動(dòng)進(jìn)樣器分別吸取待測樣品液20 μL進(jìn)樣，按設(shè)定條件測定，結(jié)果見表3。

表3 甘草樣品中鉛、鎘、鉻、鎳含量測定結(jié)果

3 討論及結(jié)論

本研究首次采用原子吸收石墨爐法測定超微粉與粗粉中鉛、鎘、鉻、鎳的含量，探討超微粉碎過程對重金屬含量的影響，由結(jié)果可知產(chǎn)自不同地區(qū)的甘草鉛、鎘、鉻、鎳含量差異不明顯，樣品中鉛、鎘、鉻、鎳元素的含量分別為2.62～9.34 mg/kg、0.03～0.60 mg/kg、0.01～5.39 mg/kg、0.106～2.04 mg/kg，粗粉與超微粉甘草鉛鎘含量差異不大，但超微后的甘草鉻及鎳含量明顯高于粗粉甘草。此外，筆者還分別測定了靈芝及太子參粗粉與超微粉鉛、鎘含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)靈芝超微粉的鉛鎘含量明顯高于粗粉靈芝，而太子參粗粉與超微粉鉛鎘含量無明顯差異，實(shí)驗(yàn)過程中甘草和太子參均超微粉碎了5 min，粗粉與超微粉鉛鎘含量均無明顯差異，而靈芝由于粉碎較為困難，超微粉碎了25 min，超微時(shí)間的延長使得超微粉的鉛鎘含量明顯高于粗粉，推測超微粉碎過程對鉛鎘含量影響與超微時(shí)間密切相關(guān)。

因此，超微粉碎對中藥重金屬含量有影響，超微粉碎對不同重金屬元素含量的影響不盡相同，對鉻、鎳含量的影響較大，對鉛、鎘的影響較小；且超微粉碎過程對重金屬含量的影響與超微時(shí)間有密切關(guān)系，在超微粉碎過程中需密切監(jiān)測中藥中重金屬的含量，在符合制劑要求的情況下應(yīng)盡量縮短超微時(shí)間。