李依然 張明海 曲鳳儀 宋昊卓 田 野

(東北林業(yè)大學，哈爾濱，150040)

目前我國人工繁育的野生動物沒有專用的飼料添加劑，人工繁育過程中大多使用畜禽專用制劑，雖然在促進生長發(fā)育、提高繁殖率等方面起到了很大作用，但也伴隨而來一些負面影響，如在飼料中長期或過度使用抗生素，導(dǎo)致動物產(chǎn)品中抗生素殘留、超標等問題，給動物產(chǎn)品和公共衛(wèi)生帶來安全隱患[1-2]。所以科研工作者極力尋求野生動物飼養(yǎng)過程中抗生素類飼料添加劑的安全替代品。

中草藥因其具有藥食同源、低殘留等特性，近年來在飼料行業(yè)中作為添加劑應(yīng)用很廣泛。中草藥飼料添加劑在動物飼養(yǎng)中能夠起到預(yù)防疾病、提高動物機體對外界病原體侵害的抵抗能力以及對機體損傷的修復(fù)起到重要作用。研究和開發(fā)中草藥飼料添加劑，并應(yīng)用于動物養(yǎng)殖，已被飼料行業(yè)普遍認同[3]。

動物由于各種不同應(yīng)激因素(如飼料改變、低溫、過熱、低氧、使役過度、生活環(huán)境改變、疫苗接種等)的影響，容易引發(fā)全身性的非特異性反應(yīng)，這是生物機體對外界以及內(nèi)在應(yīng)激反應(yīng)的一種適應(yīng)性機制[4]。在動物飼養(yǎng)繁育過程中，過強的應(yīng)激反應(yīng)可造成動物生長發(fā)育停滯及繁殖障礙，降低產(chǎn)品質(zhì)量，甚至造成死亡。

本實驗采用灌胃的方式對不同組別的小白鼠直接灌服不同濃度的中草藥飼料添加劑，在不同應(yīng)激條件下與生理鹽水對照組動物進行對比實驗，并對實驗數(shù)據(jù)進行數(shù)理統(tǒng)計分析。本實驗旨在探討項目組所研制的添加劑對動物應(yīng)激反應(yīng)的影響，以期為野生動物飼養(yǎng)繁育中利用中草藥制劑提供可靠的參考依據(jù)。

1 材料

1.1 實驗動物

昆明種健康小白鼠200只，體重18—22 g，由黑龍江省中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供，飼養(yǎng)觀察3—5 d確定健康后用于實驗。

1.2 飼料

機制鼠料塊，由哈爾濱市萬方實驗動物廠提供。

1.3 藥品

項目組自行研制的中草藥飼料添加劑，主要成分為黃芪多糖、板藍根、黃芩、甘草等。

1.4 主要儀器

超凈工作臺(型號為SW-CZ-2F型)，上海博訊實業(yè)有限公司；電熱恒溫水浴鍋，江蘇常熟醫(yī)療器械廠生產(chǎn)；立式自動電熱壓力蒸汽滅菌器(型號為YXQ—LS—50SⅡ)，上海博訊實業(yè)有限公司生產(chǎn)；真空干燥箱(型號為DIF-6050)，上海一恒科技有限公司生產(chǎn)。

2 方法

2.1 抗熱應(yīng)激實驗

選取昆明種小白鼠40只，雌雄各半，隨機分為4組，每組10只，即中草藥飼料添加劑高、中、低劑量組和生理鹽水對照組，每組分別灌服0.4%、0.2%、0.1%本添加劑的水溶液和生理鹽水。每日灌服1次，每次灌服劑量為0.2 mL/10 gbw，連續(xù)給藥10 d。給藥結(jié)束后，將小白鼠逐個放入55 ℃恒溫鼓風干燥箱中，觀察并記錄小白鼠死亡時間。

2.2 小鼠負荷游泳實驗

選取雄性昆明種小白鼠40只，隨機分為4個實驗組，每組10只，即中草藥飼料添加劑高、中、低劑量組和生理鹽水對照組，每組分別灌服0.4%、0.2%、0.1%本添加劑的水溶液和生理鹽水。每日灌胃1次，每次灌藥體積為0.1 mL/10 kg，連續(xù)灌藥30 d。于末次灌胃30 min后，將小白鼠尾根部負荷5%體重的鉛塊，然后將其放入水深30 cm、水溫25 ℃的游泳箱中，觀察并記錄小白鼠開始游泳至死亡的時間。

2.3 小白鼠常壓耐缺氧實驗

選取雄性昆明種小白鼠40只，隨機分為4個實驗組，每組10只，即中草藥飼料添加劑高、中、低劑量組和生理鹽水對照組，每組分別灌服0.4%、0.2%、0.1%本添加劑的水溶液和生理鹽水。每日灌胃1次，每次灌藥體積為0.1 mL/10 kg，連續(xù)灌藥10 d。末次灌胃1 h后，取250 mL廣口瓶，加入鈉石灰30 g，每瓶放入1只小白鼠，將其蓋用凡士林密封，觀察并記錄每只小白鼠的死亡時間。

3 結(jié)果與分析

3.1 抗熱應(yīng)激實驗

結(jié)果見表1。

表1 抗熱應(yīng)激實驗結(jié)果Tab.1 Experimental results of heat stress resistance

由表1可見，與生理鹽水對照組相比較，中草藥飼料添加劑高、中劑量組差異極顯著(P<0.01)，中草藥飼料添加劑低劑量組差異顯著(P<0.05)，說明本項目所研制的中草藥飼料添加劑具有良好的抗熱應(yīng)激作用。

3.2 小鼠負荷游泳實驗

實驗結(jié)果見表2。

表2 小白鼠負荷游泳實驗結(jié)果Tab.2 Results of load swimming experiment on mice

由表2可見，與生理鹽水對照組相比較，中草藥飼料添加劑高劑量組差異極顯著(P<0.01)；中劑量組差異顯著(P<0.05)；低劑量組差異不顯著，中草藥高、中、低劑量組都能延長小鼠負重游泳時間，說明本項目所研制的中草藥飼料添加劑具有抗疲勞作用。

3.3 小白鼠常壓耐缺氧實驗

實驗結(jié)果見表3。

表3 小白鼠常壓耐缺氧實驗結(jié)果Tab.3 Results of hypoxia tolerance under normal pressure in mice

由表3可見，添加劑各劑量組與生理鹽水對照組相比，可明顯延長小白鼠在窒息性缺氧環(huán)境下的存活時間(P<0.05)，表明本項目所研制的中草藥飼料添加劑具有良好的耐缺氧能力。

4 討論

中草藥飼料添加劑具有促進動物機體生長、抗病防疫、增強抵抗力、改善肉質(zhì)等多種功效[5-6]。復(fù)方制劑作為多藥劑的聯(lián)合用藥形式，能發(fā)揮不同成分的藥性，副作用極小，每種成分相互協(xié)同，部分中草藥如藍樹(Wrightialaevis)、馬齒莧(Portulacaoleracea)、青羊參(Cynanchumotophyllum)、山楂(Crataeguspinnatifida)等具有補氣健胃，祛風除濕，涼血解毒等功效。以板藍根為主的復(fù)方制劑能提高肉仔雞料肉比、繁殖率等生產(chǎn)性能，同時有效增強法氏囊、胸腺等器官的免疫能力[7]。

5 結(jié)論

本實驗研究表明項目組所研制的中草藥飼料添加劑能夠顯著提高小白鼠抗應(yīng)激能力，在野生動物人工繁育中可完全或部分替代抗生素類飼料添加劑，為中草藥飼料添加劑在野生動物人工繁育的臨床應(yīng)用提供了實驗數(shù)據(jù)。