張建華，王 震，李 松，侯俊清

（河南大學(xué)淮河醫(yī)院泌尿外科，河南 開封 475000）

前列腺特異抗原（PSA）是前列腺癌常用篩選標(biāo)志物，然而其在前列腺癌細(xì)胞中的特異性不高，PCA3可在前列腺癌細(xì)胞內(nèi)特異性高表達(dá)[1]，本研究旨在探討外周血PCA3及其聯(lián)合fPSA、tPSA基因檢測(cè)在前列腺疾病患者中早期診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取河南大學(xué)淮河醫(yī)院泌尿外科自2017年3月～2019年3月收治的120名前列腺疾病患者作為研究組，其中前列腺癌38例，年齡47～78歲，平均（65.30±4.44）歲，TMN病理分期：T1～T2期25例，T3～T4期13例；前列腺增生癥82例，年齡46～79歲，平均（65.25±4.50）歲。選取同期在我院接受體檢的50名健康男性作為對(duì)照組，年齡48～80歲，平均（65.88±4.70）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）經(jīng)病理或者活檢確診，前列腺癌患者符合前列腺癌的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，前列腺增生患者符合《良性前列腺增生診斷治療指南》相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；（2）無前列腺藥物或手術(shù)治療史；（3）無其他腫瘤且未行放化療治療；（4）健康對(duì)照組經(jīng)體檢排除前列腺等疾病；（5）知曉本次研究且自愿參與。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）既往前列腺手術(shù)史、前列腺反復(fù)穿刺活檢史；（2）口服5-ɑ還原酶抑制劑患者；（3）3個(gè)月內(nèi)急性前列腺炎、尿路感染患者；（4）依從性差，病例資料不完整者。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，3組的年齡等基本資料比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），可比較。

1.2 方法

受試對(duì)象于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取肘靜脈血3ml，置于干燥試管內(nèi)，室溫下3000 r/min離心，離心10 min，取上清分別裝入Eppedorf管，置于-80oC環(huán)境下待測(cè)。

fPSA及tPSA檢測(cè)：取冷凍保存的血清，室溫解凍，采用化學(xué)發(fā)光免疫染色法檢測(cè)，使用試劑盒由上海信裕生物技術(shù)有限公司提供；嚴(yán)格按照試劑說明書操作。PCA3mRNA檢測(cè)：用Trizol試劑盒（北京博凌科為生物科技有限公司）提取RNA，以逆轉(zhuǎn)錄cDNA（上海生工生物工程有限公司）作為內(nèi)參基因，熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法（RTPCR）對(duì)外周血PCA3 mRNA表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料使用（±s）表示，符合正態(tài)分布，以t檢驗(yàn)分析對(duì)比；計(jì)數(shù)資料以x2檢驗(yàn)分析對(duì)比。P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié) 果

2.1 三組血清fPSA、tPSA、PCA3水平比較

研究組前列腺癌、前列腺增生患者血清fPSA、tPSA、PCA3水平均明顯高于對(duì)照組，差異顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；研究組內(nèi)前列腺癌患者各指標(biāo)水平明顯高于前列腺增生組，差異顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 fPSA、tPSA、PCA3單獨(dú)及聯(lián)合診斷價(jià)值

以病理診斷為金標(biāo)準(zhǔn)（陽(yáng)性代表前列腺癌，陰性代表前列腺增生），則fPSA、tPSA、PCA3聯(lián)合診斷靈敏度、特異度明顯高于上述指標(biāo)單獨(dú)檢測(cè)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

3 討 論

前列腺癌在世界范圍內(nèi)發(fā)病率位居男性惡性腫瘤第2位，且其臨床癥狀與前列腺增生相似，因此準(zhǔn)確鑒別診斷尤為重要。研究發(fā)現(xiàn)，早期局限型前列腺癌患者接受根治性手術(shù)以及內(nèi)分泌治療后，患者5年內(nèi)生存率基本可達(dá)到100%[2]，然而許多前列腺癌患者在確診時(shí)已經(jīng)失去根治機(jī)會(huì)，因此尋找前列腺癌特異的血清腫瘤標(biāo)記物對(duì)其診斷和預(yù)后評(píng)價(jià)具有重要意義。本次研究結(jié)果顯示，前列腺癌患者的fPSA、tPSA、PCA3水平顯著高于前列腺增生組、健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），前列腺增生患者高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示fPSA、tPSA及PCA3能夠作為前列腺疾病的診斷標(biāo)志物。

表1 3組血清fPSA、tPSA、PCA3水平比較（±s）

表1 3組血清fPSA、tPSA、PCA3水平比較（±s）

注：T1、P1代表前列腺癌與對(duì)照組比較，T2、P2代表前列腺癌與前列腺增生比較，T3、P3代表前列腺增生與對(duì)照組比較

組別 例數(shù)（n） fPSA（ng/mL） tPSA（ng/mL） PCA3研究組：前列腺癌 38 2.20±0.55 61.62±10.39 97.89±9.11前列腺增生 82 0.79±0.38 11.28±3.18 5.56±0.71對(duì)照組 50 0.37±0.13 1.70±0.44 1.38±0.26 T1 22.744 40.806 75.007 P1 0.000 0.000 0.000 T2 16.314 40.164 91.623 P2 0.000 0.000 0.000 T3 7.541 21.148 39.977 P3 0.000 0.000 0.000

表2 fPSA、tPSA、PCA3單獨(dú)及聯(lián)合診斷價(jià)值（n，%）

以往研究發(fā)現(xiàn)，單一生物標(biāo)記物易忽略腫瘤的異質(zhì)性，而聯(lián)合多種生物標(biāo)記物時(shí)，尚未對(duì)標(biāo)記物種類進(jìn)行明確，因此探討各類型標(biāo)記物的優(yōu)化組合成為臨床研究熱點(diǎn)。PSA是臨床診斷常用的前列腺癌生物標(biāo)志物，《中國(guó)泌尿外科疾病治療指南2014版》將PSA檢測(cè)聯(lián)合直腸指檢作為前列腺癌篩查的最好辦法，通過上述檢查多可提示早期可疑前列腺癌，然而PSA檢測(cè)易受到各因素的影響，如導(dǎo)尿管刺激、前列腺穿刺、前列腺按摩等[3]，可能出現(xiàn)較高的假陽(yáng)性，無法準(zhǔn)確提示炎癥、良性疾病與腫瘤，本次研究，fSPA、tSPA假陽(yáng)性分別為26例、19例，提示單純PSA檢測(cè)并不理想。有研究表明PSA即使聯(lián)合其一系列衍生物如:前列腺特性抗原密度（PSAD）、前列腺特異性抗原比值（fPSA/tPSA）、前列腺特異性抗原速率（PSAV）等共同檢測(cè)，其診斷特異性仍無明顯提高[4]。PCA3是1999年Bussemakers 等首次在前列腺癌組織中發(fā)現(xiàn)的，在前列腺癌細(xì)胞和轉(zhuǎn)移灶中均呈特異性高表達(dá)，但在正常前列腺組織或增生組織中卻呈現(xiàn)為不表達(dá)或低表達(dá)，在其他組織器官中均檢測(cè)不到PCA3基因表達(dá)，這為前列腺癌的早期篩查和診斷提供新的目標(biāo)方向。本次研究，外周血PCA3基因靈敏度為81.58%，特異度為89.02%，均高于fPSA、tPSA檢測(cè)水平，提示PCA3基因作為特異性標(biāo)志物檢測(cè)前列腺癌效果優(yōu)于PSA。將血清tPSA、fPSA和PCA3優(yōu)化組合，通過聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度為94.74%，特異度為96.34%，均高于其單獨(dú)檢測(cè)指標(biāo)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，由此可見三者聯(lián)合檢測(cè)的效果更加顯著，能夠更為準(zhǔn)確的明確病情，減少漏診及誤診率。

綜上所述，fPSA、tPSA、PCA3三者優(yōu)化組合能夠提高診斷的靈敏度及特異性，更好的鑒別前列腺良性、惡性疾病，通過聯(lián)合檢測(cè)在前列腺疾病的診斷中具有顯著的應(yīng)用價(jià)值。