牛病毒性腹瀉病在規(guī)?；翀鲋袃艋奶剿?/h1>
2020-07-15 10:00:50劉彩娟王永信付文國胡格吉勒高滿慧
中國乳業(yè) 2020年6期
文/劉彩娟 任 亮 王永信 付文國 胡格吉勒 高滿慧
（黑龍江克東和平原生態(tài)牧業(yè)有限公司）
牛病毒性腹瀉/黏膜?。˙VDM D）是由牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）引發(fā)的一種牛的傳染病。BVDV可以引起各階段牛群或其他反芻動物病毒性腹瀉，急、慢性黏膜病，持續(xù)性感染，免疫耐受、免疫抑制，繁殖障礙及母畜流產(chǎn)、死胎和畸形等。我國有研究調(diào)查表明，超過46．7%的牧場存在BVDV抗原陽性牛，其中2．2%的牛只為持續(xù)性感染牛（PI）[1]。我國牧場BVDV感染程度遠高于大多數(shù)其他亞洲國家，感染率也高于歐美國家，給畜牧業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失[2]。國內(nèi)外有關(guān)BVDV在奶牛上的研究已取得了初步成績，我國在該領(lǐng)域的研究多集中在病原特性和實驗室診斷方法以及BVDV對生產(chǎn)效益產(chǎn)生的影響等方面，但在實際生產(chǎn)中凈化方案的可行性尚不清楚。因此，本文旨在通過研究規(guī)?；翀鲈诓煌A段牛群的篩查結(jié)果，探討B(tài)VDV凈化方案的合理性，為防控和凈化該病提供參考數(shù)據(jù)。
1 材料與方法
1．1 試驗動物
試驗共進行4 個階段的篩查。第一階段是對泌乳牛群進行篩查，第二階段是對滿3 月齡犢牛進行篩查，第三階段是對8 月齡以上牛群進行篩查，第四階段是對新生犢牛進行篩查。
1．2 樣品采集
采集目標(biāo)凈化牧場牛群的牛耳組織、切口組織和血清等樣品。泌乳牛和3 月齡犢牛采集血清樣品進行檢測，其他類型牛群采集牛耳組織樣品進行檢測。若篩查出抗原陽性的牛只，則立即進行隔離，待15天后再次采樣，并與第1次結(jié)果進行復(fù)核；兩次結(jié)果均為陽性者，則進行淘汰處理。
1．3 試劑
BVDV抗原檢測試劑盒：北京市IDEXX元亨生物科技有限公司。
1．4 儀器設(shè)備
酶標(biāo)儀：ELX808，美國寶特公司生產(chǎn)；電熱恒溫培養(yǎng)箱：DHP-9082，上海一恒科技有限公司生產(chǎn)。
2 試驗結(jié)果
2．1目標(biāo)凈化牧場泌乳牛群篩查結(jié)果
本凈化程序所使用的檢測樣品均為血清樣品，初檢和復(fù)檢時間間隔至少15 天。A、B、C、D為目標(biāo)凈化牧場，未進行BVDV疫苗免疫，有國外引種經(jīng)歷。由表1可以看出，在進行泌乳牛群篩查時，除D牧場外，其他牧場均有不同程度的檢出，但陽性率均低于0．10%，其中B牧場檢出陽性牛頭數(shù)較高，陽性率達到0．08%。
表1 目標(biāo)凈化牧場泌乳牛群篩查檢測結(jié)果
表2 目標(biāo)凈化牧場滿3 月齡牛群篩查結(jié)果
表3 目標(biāo)凈化牧場8 月齡以上牛群篩查結(jié)果
2．2 目標(biāo)凈化牧場滿 3 月齡牛群篩查結(jié)果
由表2可以得出，在進行滿3 月齡牛群篩查時，除D牧場外，其他牧場均有不同程度的檢出，但是陽性率均低于0．30%。其中，2013年B牧場檢出陽性牛頭數(shù)較高，檢出6 頭，陽性率達到0．24%；而A牧場檢出陽性率在0．30%。隨后，各牧場滿3 月齡陽性檢出率在逐漸降低，其中C牧場的陽性檢出率在2016年達到0．00%。
2．3 目標(biāo)凈化牧場 8 月齡以上牛群篩查結(jié)果
表3顯示，在進行8 月齡以上牛群篩查時，2017—2019年B牧場雖有陽性檢出，但檢出率呈現(xiàn)下降趨勢，在2017年，A牧場陽性率達到0．01%，隨后陽性檢出率逐漸降低到0．00%，而C、D牧場的陽性檢出率一直穩(wěn)定在0．00%。
2．4 目標(biāo)凈化牧場新生犢牛的檢測結(jié)果
由表4可以看出，A、B牧場新生犢牛陽性檢出率均呈現(xiàn)下降趨勢，其中A組陽性檢出率下降相對明顯，而C、D組均維持在0．00%狀態(tài)。
3 討論
BVDV會影響奶牛生產(chǎn)性能，增加奶牛感染其他多種疾病風(fēng)險，導(dǎo)致奶牛過早淘汰，以及造成經(jīng)濟損失[3]。奶牛感染BVDV主要分為3 種不同形式。一是 PI牛，該類牛只在其母親早期懷孕（30～120天）時感染，其終身帶有大量的病毒[4]。二是暫時性感染牛只（TI牛），該類牛只在出生后被感染，帶有少量病毒，在15 天后即可消除[5]。三是特洛伊母牛（TR牛），其胎兒為PI牛[6]。
表4 目標(biāo)凈化牧場新生犢牛檢測結(jié)果
BVDV在牛群中的傳播主要是以PI牛為重要的傳染源，因此，淘汰PI牛是控制BVDV感染及傳播的首要任務(wù)。被感染母?？梢酝ㄟ^母嬰傳播將病毒傳染給胎兒，或者傳播給有直接接觸的其他懷孕母牛，因此，篩查出牛群的PI牛，并將其清除，可以有效防止垂直傳播，同時切斷水平傳播途徑，減少與其他懷孕母牛接觸的幾率，防止發(fā)生水平傳播使懷孕母牛感染，進而發(fā)展為垂直傳播。從本試驗第一階段、第二階段的泌乳牛群和滿3 月齡犢牛的篩查結(jié)果也驗證了這點。若牧場存在不同程度的感染風(fēng)險，牛群內(nèi)存在傳播，也必然會對犢牛造成影響。而對于已清除干凈的凈化牧場，其群體內(nèi)不存在傳播風(fēng)險，出生的犢牛不會被感染。對牛群進行抗原篩查，篩選出所有抗原呈陽性的牛只，并予以淘汰，可以徹底清除BVDV的傳染源，可以使存在感染情況的牧場也逐漸得到凈化，但是需要持續(xù)維持。如若在“篩查+淘汰”后較長一段時間內(nèi)，如5年，檢測不出抗原陽性牛，則說明該“篩查+淘汰”方案成功，否則應(yīng)繼續(xù)進行篩查和淘汰，直至徹底清除為止。同時還需要配合實施嚴(yán)格的生物安全管理和防疫制度，才能徹底凈化BVDV。根據(jù)本文方案對新生犢牛進行不斷檢測和8 月齡以上牛群的持續(xù)監(jiān)控，已經(jīng)初見成效，大部分牧場雖已達到預(yù)期的凈化目標(biāo)，但還需繼續(xù)進行監(jiān)測。此外，個別牧場仍存在PI牛風(fēng)險，需要繼續(xù)執(zhí)行篩查-淘汰方案。新生犢牛在檢出陽性時，需要追溯其母親和姐妹進行個體BVDV抗原檢測[7]。在凈化BVDV的過程中，還需要加強BVDV的免疫?！懊庖?淘汰”方案的核心是使用疫苗進行高強度免疫，同時配合血清抗原檢測，免疫后一段時間進行血清或者耳組織抗原檢測，若發(fā)現(xiàn)抗原呈陽性個體則立即清除，執(zhí)行嚴(yán)格的生物安全控制和防疫制度，可以逐步實現(xiàn)BVDV凈化。血清的抗體檢測、評估需要在免疫前進行，這是因為注射疫苗后會產(chǎn)生抗體干擾檢測結(jié)果。
進行BVDV凈化，還需要提高養(yǎng)殖者對該病的認知程度。有調(diào)查顯示，即使在養(yǎng)牛業(yè)非常發(fā)達的澳大利亞，也有30．0%的養(yǎng)殖者對該病一無所知[8]，而我國的認知率更低。從北歐國家開展非免疫凈化工作的經(jīng)驗看，利益相關(guān)者特別是養(yǎng)殖者對BVDV的認知程度，是決定工作能否取得成功的關(guān)鍵因素。這是因為對于非免疫牧場，除嚴(yán)格的生物安全措施外，沒有設(shè)置第二道防線控制BVDV的傳播[9]。
4 小結(jié)
不同牧場可以根據(jù)自身實際和資金支持情況，采取“篩查+淘汰”或“免疫+淘汰”方案。但是無論何種方式，均需要普及BVDMD的有關(guān)知識，提高牧場管理者的生物安全預(yù)防意識，嚴(yán)格按照流程進行篩查和轉(zhuǎn)群防疫。
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1．2 樣品采集
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1．3 試劑
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2 試驗結(jié)果
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本凈化程序所使用的檢測樣品均為血清樣品，初檢和復(fù)檢時間間隔至少15 天。A、B、C、D為目標(biāo)凈化牧場，未進行BVDV疫苗免疫，有國外引種經(jīng)歷。由表1可以看出，在進行泌乳牛群篩查時，除D牧場外，其他牧場均有不同程度的檢出，但陽性率均低于0．10%，其中B牧場檢出陽性牛頭數(shù)較高，陽性率達到0．08%。
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表2 目標(biāo)凈化牧場滿3 月齡牛群篩查結(jié)果
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2．2 目標(biāo)凈化牧場滿 3 月齡牛群篩查結(jié)果
由表2可以得出，在進行滿3 月齡牛群篩查時，除D牧場外，其他牧場均有不同程度的檢出，但是陽性率均低于0．30%。其中，2013年B牧場檢出陽性牛頭數(shù)較高，檢出6 頭，陽性率達到0．24%；而A牧場檢出陽性率在0．30%。隨后，各牧場滿3 月齡陽性檢出率在逐漸降低，其中C牧場的陽性檢出率在2016年達到0．00%。
2．3 目標(biāo)凈化牧場 8 月齡以上牛群篩查結(jié)果
表3顯示，在進行8 月齡以上牛群篩查時，2017—2019年B牧場雖有陽性檢出，但檢出率呈現(xiàn)下降趨勢，在2017年，A牧場陽性率達到0．01%，隨后陽性檢出率逐漸降低到0．00%，而C、D牧場的陽性檢出率一直穩(wěn)定在0．00%。
2．4 目標(biāo)凈化牧場新生犢牛的檢測結(jié)果
由表4可以看出，A、B牧場新生犢牛陽性檢出率均呈現(xiàn)下降趨勢，其中A組陽性檢出率下降相對明顯，而C、D組均維持在0．00%狀態(tài)。
3 討論
BVDV會影響奶牛生產(chǎn)性能，增加奶牛感染其他多種疾病風(fēng)險，導(dǎo)致奶牛過早淘汰，以及造成經(jīng)濟損失[3]。奶牛感染BVDV主要分為3 種不同形式。一是 PI牛，該類牛只在其母親早期懷孕（30～120天）時感染，其終身帶有大量的病毒[4]。二是暫時性感染牛只（TI牛），該類牛只在出生后被感染，帶有少量病毒，在15 天后即可消除[5]。三是特洛伊母牛（TR牛），其胎兒為PI牛[6]。
表4 目標(biāo)凈化牧場新生犢牛檢測結(jié)果
BVDV在牛群中的傳播主要是以PI牛為重要的傳染源，因此，淘汰PI牛是控制BVDV感染及傳播的首要任務(wù)。被感染母?？梢酝ㄟ^母嬰傳播將病毒傳染給胎兒，或者傳播給有直接接觸的其他懷孕母牛，因此，篩查出牛群的PI牛，并將其清除，可以有效防止垂直傳播，同時切斷水平傳播途徑，減少與其他懷孕母牛接觸的幾率，防止發(fā)生水平傳播使懷孕母牛感染，進而發(fā)展為垂直傳播。從本試驗第一階段、第二階段的泌乳牛群和滿3 月齡犢牛的篩查結(jié)果也驗證了這點。若牧場存在不同程度的感染風(fēng)險，牛群內(nèi)存在傳播，也必然會對犢牛造成影響。而對于已清除干凈的凈化牧場，其群體內(nèi)不存在傳播風(fēng)險，出生的犢牛不會被感染。對牛群進行抗原篩查，篩選出所有抗原呈陽性的牛只，并予以淘汰，可以徹底清除BVDV的傳染源，可以使存在感染情況的牧場也逐漸得到凈化，但是需要持續(xù)維持。如若在“篩查+淘汰”后較長一段時間內(nèi)，如5年，檢測不出抗原陽性牛，則說明該“篩查+淘汰”方案成功，否則應(yīng)繼續(xù)進行篩查和淘汰，直至徹底清除為止。同時還需要配合實施嚴(yán)格的生物安全管理和防疫制度，才能徹底凈化BVDV。根據(jù)本文方案對新生犢牛進行不斷檢測和8 月齡以上牛群的持續(xù)監(jiān)控，已經(jīng)初見成效，大部分牧場雖已達到預(yù)期的凈化目標(biāo)，但還需繼續(xù)進行監(jiān)測。此外，個別牧場仍存在PI牛風(fēng)險，需要繼續(xù)執(zhí)行篩查-淘汰方案。新生犢牛在檢出陽性時，需要追溯其母親和姐妹進行個體BVDV抗原檢測[7]。在凈化BVDV的過程中，還需要加強BVDV的免疫?！懊庖?淘汰”方案的核心是使用疫苗進行高強度免疫，同時配合血清抗原檢測，免疫后一段時間進行血清或者耳組織抗原檢測，若發(fā)現(xiàn)抗原呈陽性個體則立即清除，執(zhí)行嚴(yán)格的生物安全控制和防疫制度，可以逐步實現(xiàn)BVDV凈化。血清的抗體檢測、評估需要在免疫前進行，這是因為注射疫苗后會產(chǎn)生抗體干擾檢測結(jié)果。
進行BVDV凈化，還需要提高養(yǎng)殖者對該病的認知程度。有調(diào)查顯示，即使在養(yǎng)牛業(yè)非常發(fā)達的澳大利亞，也有30．0%的養(yǎng)殖者對該病一無所知[8]，而我國的認知率更低。從北歐國家開展非免疫凈化工作的經(jīng)驗看，利益相關(guān)者特別是養(yǎng)殖者對BVDV的認知程度，是決定工作能否取得成功的關(guān)鍵因素。這是因為對于非免疫牧場，除嚴(yán)格的生物安全措施外，沒有設(shè)置第二道防線控制BVDV的傳播[9]。
4 小結(jié)
不同牧場可以根據(jù)自身實際和資金支持情況，采取“篩查+淘汰”或“免疫+淘汰”方案。但是無論何種方式，均需要普及BVDMD的有關(guān)知識，提高牧場管理者的生物安全預(yù)防意識，嚴(yán)格按照流程進行篩查和轉(zhuǎn)群防疫。
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