趙 梅，劉心潔

手足口病是由腸道病毒感染引起的常見傳染性疾病，主要發(fā)生在7歲以下的嬰幼兒。大多數(shù)患兒病情輕微，但部分病例可合并肺炎、腦炎等嚴重并發(fā)癥，威脅患兒生命安全[1]。腸道病毒71型感染引起的手足口病特征為腦炎等并發(fā)癥發(fā)生率高，嚴重時可發(fā)展成腦干腦炎或神經(jīng)源性肺水腫；由于臨床缺乏有效的抗病毒藥物，嚴重手足口病的治療具有挑戰(zhàn)性[2]。炎癥因子等指標在手足口病合并腦炎患兒外周血中水平升高，并可能成為患兒治療效果和預后的有效生物學指標[3]。水通道蛋白4在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中高表達，且在腦水腫發(fā)生和進展中發(fā)揮重要作用[4]。本研究旨在觀察水通道蛋白4水平在手足口病并發(fā)腦炎患兒腦脊液中變化情況及其與外周血的炎癥因子、神經(jīng)損傷指標相關性?，F(xiàn)作報道。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取山東省婦幼保健院2017年2月至2019年2月收治的40例手足口病神經(jīng)系統(tǒng)受累期患兒作為觀察組，其中男23例，女17例；年齡0.8個月至6歲。選取同期收治的40例手足口病出疹期患兒作為單純手足口病組，其中男22例，女18例；年齡0.9個月至7歲。選取36例排除手足口病及腦炎等其他疾病的熱性驚厥患兒作為對照組，其中男14例，女12例；年齡1～6歲；腦炎史1例。3組性別、年齡、腦炎病史等資料均具有可比性。

1.2 選取標準 納入標準：符合手足口病合并腦炎診斷標準[5]：當?shù)爻霈F(xiàn)手足口病流行且存在接觸史，手足口皮膚黏膜存在典型斑丘疹，存在神經(jīng)系統(tǒng)損傷表現(xiàn)，如嗜睡、精神萎靡等；患兒家屬知情研究內(nèi)容且簽署研究同意書；病例資料完整；未合并其他感染性疾病。排除標準：合并其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如腦腫瘤、腦外傷；合并精神疾病、自身免疫性疾??；正在參與其他研究；近3個月服用免疫抑制劑或激素類藥物。

1.3 研究方法 檢測3組患兒腦脊液中水通道蛋白4水平，排除腰椎穿刺禁忌證，進行腰椎穿刺。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法(上海撫生實業(yè)有限公司)對水通道蛋白4進行檢測。抽取患兒外周靜脈血，ELISA法(試劑盒由北京奧維亞生物技術有限公司生產(chǎn))檢測血液中髓鞘堿性蛋白(MBP)、神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)、S-100B蛋白、白細胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-18、C反應蛋白(CRP)、降鈣素原(PCT)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)。比較觀察組、單純手足口病組入院第2天、第7天(恢復期)及對照組入院第2天腦脊液中水通道蛋白4水平，比較3組入院第2天外周血炎癥因子及神經(jīng)損傷指標水平，并分析觀察組入院第2天腦脊液中水通道蛋白4與外周血炎癥因子及神經(jīng)損傷指標水平相關性。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用t檢驗、方差分析、q檢驗和pearson相關分析。

2 結(jié)果

2.1 3組腦脊液中水通道蛋白4水平比較 3組入院第2天腦脊液中水通道蛋白4水平差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，其中觀察組高于單純手足口病組和對照組(P<0.01)，單純手足口病組和對照組差異無統(tǒng)計意義(P>0.05)；入院第7天(恢復期)，觀察組較入院第2天降低，仍高于單純手足口病組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)(見表1)。

分組n入院第2天入院第7天觀察組4017.4±3.1??##11.2±2.9##□□單純手足口病組408.2±2.28.0±2.3對照組367.3±1.9—F—200.145.47△P—<0.01<0.01MS組內(nèi)—6.105—

q檢驗：與對照組比較**P<0.01；與單純手足口病組比較##P<0.01；組內(nèi)檢驗：□□P<0.01；△示t值

2.2 3組外周血炎癥因子水平比較 3組第2天外周血炎癥因子水平差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；觀察組IL-1β、IL-6、IL-18、CRP、PCT、TNF-α高于單純手足口病組及對照組，單純手足口病組IL-1β、IL-6、IL-18、CRP、PCT、TNF-α高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)(見表2)。

2.3 3組神經(jīng)損傷指標水平比較 3組第2天外周血神經(jīng)損傷指標水平差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，觀察組NSE、S-100B、MBP水平高于單純手足口病組及對照組(P<0.01)，單純手足口病組和對照組NSE、S-100B、MBP水平差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)(見表3)。

2.4 觀察組第2天腦脊液中水通道蛋白4與外周血中炎癥因子及神經(jīng)損傷指標相關性 相關性分析顯示，腦脊液中水通道蛋白4水平與外周血中炎癥因子(IL-1β、IL-6、IL-18、CRP、PCT、TNF-α)及神經(jīng)損傷指標(NSE、S-100B、MBP)均呈正相關關系(P<0.05～P<0.01)(見表4)。

表2 3組第2天外周血炎癥因子水平比較

q檢驗：與對照組比較**P<0.01；與單純手足口病組比較##P<0.01

表3 3組第2天外周血神經(jīng)損傷指標比較

q檢驗：與對照組比較**P<0.01；與單純手足口病組比較##P<0.01

表4水通道蛋白4水平與外周血中炎癥因子及神經(jīng)損傷指標相關性

因素rPIL-1β0.298<0.05IL-60.377<0.05IL-180.310<0.05CRP0.349<0.05PCT0.290<0.05TNF-α0.427<0.01NSE0.319<0.05S-100B0.405<0.05MBP0.276<0.05

3 討論

腸道病毒感染引起的手足口病已經(jīng)成為包括中國在內(nèi)的全世界流行病[6]。手足口病相關的并發(fā)癥，包括腦膜炎、腦炎、急性弛緩性麻痹、急性心肺衰竭、呼吸道感染、心肌損傷、腹瀉等是患兒預后較差和死亡的主要原因[7]。YANG等[8]研究對因手足口病死亡的331患兒進行尸體解剖，發(fā)現(xiàn)腦干腦炎是手足口病患兒死亡的主要原因。因此，及時診斷和干預手足口病合并腦炎對改善患兒預后具有重要意義。

水通道蛋白是一類使水和其他小分子溶質(zhì)選擇性遷移的跨膜通道蛋白，在細胞轉(zhuǎn)運中發(fā)揮重要作用。水通道蛋白4是在靈長類動物和嚙齒動物大腦中發(fā)現(xiàn)的最豐富的水通道蛋白，其作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最豐富的分子之一，生物學功能多樣，在腦水腫和腦炎的發(fā)生和進展中發(fā)揮重要作用。水通道蛋白4參與調(diào)節(jié)細胞外間隙容積、鉀緩沖、腦脊液循環(huán)、間質(zhì)液吸收、廢物清除、神經(jīng)炎癥、細胞遷移等多種功能，水通道蛋白4也是視網(wǎng)膜、內(nèi)耳和嗅覺系統(tǒng)正常功能所必需的[9]。本研究證實，手足口病合并腦炎急性期腦脊液中水通道蛋白4水平升高，在恢復期水平降低，但均高于無腦炎合并癥的手足口病患兒和對照組患兒，與王艷萍等[10]研究結(jié)果相符。腦脊液中水通道蛋白4水平是反映腦水腫的重要標志。在腦炎患兒中其水平升高提示水通道蛋白4可能在手足口病患兒腦炎發(fā)生中具有一定作用，在恢復期下降可能與腦炎病情恢復、腦水腫好轉(zhuǎn)有關。

炎癥反應在腦炎和手足口病發(fā)生和進展中作用已經(jīng)得到大量研究證實[11]。本研究中，手足口病合并腦炎患兒及單純手足口病患兒外周血中炎癥因子顯著升高，與既往研究[11]結(jié)果相符。病毒感染神經(jīng)細胞可引起神經(jīng)系統(tǒng)損傷，導致存在神經(jīng)系統(tǒng)中特異性分子進入外周血，使外周血中神經(jīng)損傷相關指標水平升高，成為判斷神經(jīng)損傷的可靠指標[11-12]。本研究觀察到手足口病合并腦炎患兒外周血神經(jīng)損傷指標升高，提示手足口病合并腦炎患兒存在明顯神經(jīng)損傷，而單純手足口病患兒無腦損傷表現(xiàn)。相關性分析證實手足口病并發(fā)腦炎患兒腦脊液中水通道蛋白4水平與炎癥因子、神經(jīng)損傷指標呈正相關，提示水通道蛋白4與患兒神經(jīng)損傷程度及炎癥反應程度有關，可能用于判斷手足口病并發(fā)腦炎嚴重程度，但本研究病例數(shù)較少，還需進一步研究。

綜上所述，手足口病并發(fā)腦炎患兒腦脊液中水通道蛋白4水平在急性期升高，在恢復期降低，且與外周血中炎癥因子、神經(jīng)損傷指標呈正相關。