李德濤，周 密，侯玉磊△

重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院：1.檢驗科；2.藥學(xué)部，重慶 400016

胸腔積液和腹水總蛋白測定是鑒別滲出液和漏出液的重要指標(biāo)之一[1]，一般認(rèn)為胸腔積液和腹水總蛋白高于25 g/L為滲出液，低于25 g/L則為漏出液[2]。清蛋白在胸腔積液和腹水中的檢測主要用于提示血清-清蛋白梯度，能夠比較真實地反映門靜脈壓力，有利于提高胸腔積液和腹水性質(zhì)鑒別的準(zhǔn)確性[3-4]?；阡寮追泳G的比色法檢測清蛋白水平操作簡單，特異性強，目前在國內(nèi)常用于清蛋白的水平檢測。本院檢驗科發(fā)現(xiàn)基于溴甲酚綠比色法檢測胸腔積液和腹水清蛋白假性增高1例，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料 患者，女，25歲，因肝部腫瘤住院。患者因上腹部腹脹伴惡心1周入院。查體：體溫36.5 ℃，心率98次/分，呼吸18次/分，血壓113/72 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)。輔助檢查：婦科彩超顯示肝右前葉實性占位，增強CT顯示肝右前葉肝左外葉占位。血清肝功結(jié)果：總蛋白64 g/L、清蛋白38 g/L、總膽紅素(TBIL) 14.9 μmol/L、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT) 160 U/L、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)105 U/L。該患者胸腔積液和腹水外觀呈淺綠色，在全自動生化分析儀RL7600上進(jìn)行生化檢驗，檢測結(jié)果為總蛋白 46.6 g/L、清蛋白 533.3 g/L、TBIL 15.7 μmol/L、乳酸脫氫酶(LDH) 1 876 U/L、腺苷脫氨酶(ADA) 28 U/L。因該胸腔積液和腹水標(biāo)本清蛋白水平高于總蛋白，根據(jù)清蛋白反應(yīng)曲線初步懷疑為清蛋白假性增高，分別用稀釋不同倍數(shù)的生理鹽水、其他患者血清，以及胸腔積液和腹水標(biāo)本進(jìn)行檢測。

1.2方法 本次檢測分別在本實驗室3個檢測系統(tǒng)下進(jìn)行總蛋白和清蛋白濃度檢測：系統(tǒng)1為日立7600儀器加四川邁克單試劑，系統(tǒng)2為羅氏Cobas c701封閉檢測系統(tǒng)，系統(tǒng)3為強生干化學(xué)Vitros 5.1 FS封閉檢測系統(tǒng)。以上檢測系統(tǒng)清蛋白的檢測實驗原理均是基于溴甲酚綠的比色法。

2 結(jié) 果

2.1該標(biāo)本使用不同方法稀釋在系統(tǒng)1的總蛋白和清蛋白結(jié)果 系統(tǒng)1使用不同稀釋液稀釋后檢測該標(biāo)本后總蛋白和清蛋白結(jié)果見表1，經(jīng)不同稀釋液稀釋，隨著稀釋倍數(shù)增加，總蛋白無趨勢性變化，但清蛋白結(jié)果逐漸降低。隨著稀釋倍數(shù)增加，不同稀釋方法下清蛋白均呈趨勢性降低，由此推測該標(biāo)本使用系統(tǒng)1清蛋白檢測可能存在干擾。見圖1。

2.2該胸腔積液和腹水使用不同方法稀釋在不同檢測系統(tǒng)總蛋白和清蛋白結(jié)果 在系統(tǒng)2和系統(tǒng)3上檢測該標(biāo)本發(fā)現(xiàn)，清蛋白結(jié)果均小于總蛋白結(jié)果，符合預(yù)期。但2個系統(tǒng)清蛋白結(jié)果相差較大。見表2。

表1 使用不同稀釋液稀釋系統(tǒng)1總蛋白和清蛋白結(jié)果(g/L)

表2 使用不同稀釋液在3個檢測系統(tǒng)中的總蛋白和清蛋白結(jié)果(g/L)

注：-表示此項無數(shù)據(jù)。

圖1 不同方法稀釋胸腔積液和腹水后不同稀釋倍數(shù)下清蛋白結(jié)果

3 討 論

胸腔積液和腹水中檢測清蛋白有利于胸腔積液和腹水良惡性的判斷，溴甲酚綠是檢測清蛋白水平最常用的方法之一[5-6]。溴甲酚綠的檢測原理是在pH4.2左右的緩沖溶液里，溴甲酚綠與清蛋白結(jié)合形成藍(lán)綠色復(fù)合物，藍(lán)綠色復(fù)合物顏色的深淺與清蛋白的濃度成正比。據(jù)此可計算樣本中清蛋白的水平[7-8]。然而在本案例中，基于單試劑的開放檢測系統(tǒng)1胸腔積液和腹水清蛋白結(jié)果高于總蛋白結(jié)果，這有違常識，經(jīng)觀測胸腔積液和腹水顏色同試劑顏色比較相似，初步推測該異常結(jié)果可能受標(biāo)本顏色的影響，胸腔積液和腹水本底對清蛋白的檢測造成了影響。但分別使用生理鹽水，已知結(jié)果的血清、胸腔積液和腹水標(biāo)本稀釋該胸腔積液和腹水標(biāo)本后在檢驗科3個檢測系統(tǒng)上進(jìn)行檢測，最大稀釋到10倍，經(jīng)計算檢測系統(tǒng)1無論哪種稀釋方法清蛋白結(jié)果均大于總蛋白，且稀釋倍數(shù)越大，清蛋白結(jié)果越低。系統(tǒng)2和系統(tǒng)3檢測結(jié)果顯示該胸腔積液和腹水標(biāo)本清蛋白低于總蛋白，符合常識，但不同稀釋方法和稀釋倍數(shù)下相差較大。另外發(fā)現(xiàn)，使用胸腔積液和腹水稀釋的系列結(jié)果偏差最小，可能與本底效應(yīng)相關(guān)。有研究報道，基于溴甲酚綠的單試劑受標(biāo)本質(zhì)量的影響比較大，而雙試劑受影響相對較小，并且雙試劑在抗維生素C和血紅蛋白干擾中強于單試劑[9-10]。另外，基于溴甲酚綠方法檢測清蛋白的試劑在一定程度上受標(biāo)本中非清蛋白類的其他蛋白的干擾，如α和β類球蛋白的非特異性干擾[11]。但是本研究缺少該胸腔積液和腹水蛋白電泳的結(jié)果，以及基于免疫比濁法檢測清蛋白的結(jié)果，沒有辦法排除該胸腔積液和腹水是否存在其他球蛋白影響檢測結(jié)果。

綜上所述，對于基于溴甲酚綠檢測清蛋白的方法，出現(xiàn)異常結(jié)果時，可選擇雙試劑檢測系統(tǒng)或者干化學(xué)試劑檢測系統(tǒng)，也可做基于免疫法的清蛋白檢測，以綜合判斷，為臨床醫(yī)生出具真實可靠的結(jié)果以供診斷病情。