陳秀紅，郭亞男，司朵朵，徐婧祎，姜肖軍，郭 磊，何生虎*

（1. 寧夏大學(xué) 農(nóng)學(xué)院臨床獸醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室，寧夏 銀川 750000；2. 寧夏曉鳴農(nóng)牧股份有限公司，寧夏 銀川 750000）

雞滑液囊支原體病是由滑液囊支原體（Mycoplasma Synoviae，MS）引起的一種影響雞健康生長的急性或慢性傳染病。該病可引起雞滑液囊及肌腱發(fā)炎和部分實(shí)質(zhì)器官的腫大，此外還會造成生長發(fā)育遲緩和呼吸道癥狀[1-3]。單一的MS 感染很少致雞直接死亡，但會導(dǎo)致雞的機(jī)體免疫力下降，并易與其他病原并發(fā)或繼發(fā)感染最終導(dǎo)致雞的死亡率上升。MS 不同菌株之間的致病力差異較大，成年雞常常呈隱形感染[4]。病雞和隱性感染雞是主要的傳染源，MS 水平傳播感染率有時(shí)高達(dá)100%，并可發(fā)生垂直傳播[5-6]。

最新的流行病學(xué)調(diào)查顯示，在東歐、荷蘭、墨西哥、阿根廷，均有MS 感染發(fā)生[7-8]。據(jù)報(bào)道，美國商品蛋雞MS 感染率為100%[9]。西歐弗蘭德斯等地的商品雞MS 感染率已達(dá)到76.3%[10]。在我國陜西、北京、河南等地均有分離到MS 的報(bào)道，多個(gè)地區(qū)血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示均存在雞MS 感染，據(jù)統(tǒng)計(jì)國內(nèi)雞MS 的感染率于2008 年就達(dá)到20.7%[11]。2009 年7 月，山東省東平縣一肉雞養(yǎng)殖場相繼發(fā)生MS 感染，死亡率為3%左右[12]。2011 年～2012 年，哈爾濱地區(qū)肉仔雞發(fā)生多起MS 感染，死淘率為5%～10%[13]。2010 年～2015 年之間，馬爽等的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，吉林MS 陽性率已達(dá)到了42.00%，河南為54.67%，陜西為40.09%，遼寧為43.15%，江蘇為38.54%，廣西為34.28%，北京為30.23%，安徽為43.66%，山東為47.33%，廣東為53.11%，四川為30.58%[14]。2016 年，程小果等在山東、河南、江蘇、河北等蛋雞養(yǎng)殖較為密集的省份調(diào)查顯示，商品蛋雞中MS 感染病例明顯增多[15]。2018 年6 月，山東德州某蛋雞場約10 000 只雞陸續(xù)發(fā)生MS 感染，發(fā)病雞占雞群總數(shù)的15%[16]。丁美娟等對江蘇部分地區(qū)雞MS 進(jìn)行血清學(xué)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，雞血清抗體陽性率為57.7%[17]。

因MS 現(xiàn)階段無法根治，且雞群中一旦出現(xiàn)陽性感染雞后傳播速度極快，給國內(nèi)養(yǎng)禽業(yè)的健康發(fā)展帶來了諸多危害并造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。目前為止，尚無針對寧夏地區(qū)MS 流行病學(xué)的相關(guān)報(bào)道。因此，為了解寧夏地區(qū)MS 的感染狀況，為防治該病提供依據(jù)，本實(shí)驗(yàn)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）針對寧夏地區(qū)石嘴山、銀川、吳忠、中衛(wèi)、固原5 個(gè)市的部分雞群進(jìn)行了雞MS 的血清抗體水平檢測，并對寧夏不同地區(qū)MS 的流行現(xiàn)狀進(jìn)行分析，為MS 病的防控提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要試劑 雞MS ELISA抗體檢測試劑盒購自北京愛德士元亨生物科技有限公司，批號：06728-MJ491。

1.2 血清樣品來源 1 289 份血清樣品來自寧夏地區(qū)5 個(gè)市不同規(guī)?；酿B(yǎng)雞場。其中銀川市184份，石嘴山市461 份，吳忠市184 份，中衛(wèi)市305份，固原市155 份，樣品采集時(shí)間均為2018 年。采樣雞均未進(jìn)行過MS 的免疫接種。

1.3 雞MS 抗體的檢測 利用MS ELISA 抗體檢測試劑盒對收集的血清樣品進(jìn)行檢測，檢測前將待檢血清用樣品稀釋液作500 倍稀釋，同時(shí)設(shè)陽性和陰性對照樣品，S/P 值小于或等于0.5，判為陰性。樣品的S/P 值大于0.5，判為陽性。

1.4 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析 采用EXCEL2016 對檢測結(jié)果進(jìn)行處理，并采用SAS 8.2 卡方檢驗(yàn)對處理結(jié)果從區(qū)域、日齡、季節(jié)等因素進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 結(jié) 果

2.1 寧夏地區(qū)不同市雞MS 血清抗體檢測及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果 ELISA 檢測結(jié)果顯示，雞MS 血清陽性樣品的數(shù)量達(dá)到886 份，血清抗體陽性率為46.23%～89.67%，平均陽性率為67.18%。其中銀川市MS 血清抗體陽性率最高為89.67%，其次是固原市、石嘴山市和吳忠市，MS 血清抗體陽性率分別為81.29%、69.85%和60.87%，中衛(wèi)市MS 血清抗體陽性率最低為46.23%。不同市之間MS 血清抗體陽性率不同，各市之間雞MS 血清抗體陽性率差異均顯著（p＜0.05）（圖1）。表明寧夏各地區(qū)均發(fā)生MS 感染，且感染率較高。

圖1 寧夏地區(qū)不同市MS 血清抗體檢測及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果Fig.1 Serological test of MS infection in lying hens collected from different cities in Ningxia

2.2 不同月齡蛋雞MS 血清抗體檢測及統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果 根據(jù)雞月齡對MS 血清抗體檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果顯示，2 月齡抽檢雞血清抗體陽性率最低為28.35%，3 月齡、4 月齡、6 月齡、8 月齡和10月齡雞的血清抗體陽性率分別為42.16%、53.54%、63.78%、82.43%和85.53%，12 月齡時(shí)達(dá)到了100%（圖2）。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示，3 月齡與4 月齡、4月齡與6 月齡、8 月齡與10 月齡蛋雞之間MS 血清抗體陽性率差異不顯著（p＞0.05），其他月齡雞之間MS血清抗體陽性率差異均顯著（p＜0.05）。結(jié)果表明，蛋雞MS 血清抗體陽性率隨月齡增大呈上升趨勢。

圖2 不同月齡蛋雞MS 血清抗體檢測結(jié)果及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析Fig.2 Serological test of MS infection in lying hens at different ages

2.3 不同用途雞MS 血清抗體檢測及統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果結(jié)果 統(tǒng)計(jì)分析蛋雞、肉雞、種雞MS 血清抗體情況。結(jié)果顯示，種雞MS 血清抗體平均陽性率最高為90.26%，其中蛋種雞為90.74%，肉種雞為89.66%。其次蛋雞MS 血清抗體陽性率為64.86%，肉雞最低為55.50%。MS 血清抗體陽性率在種雞、肉雞和蛋雞之間差異均顯著（p＜0.05），而在蛋種雞和肉種雞之間差異不顯著（p＞0.05）（圖3）。結(jié)果表明，3 種不同用途的雞均可以發(fā)生MS 的感染，其中以種雞MS 感染率最高。

圖3 不同用途雞MS 血清抗體檢測及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果Fig.3 Serological test of MS infection in different types of chickens

2.4 不同季節(jié)雞MS 血清抗體檢測結(jié)果 統(tǒng)計(jì)分析春秋兩季雞MS 血清抗體情況。結(jié)果顯示，抽檢雞MS 血清抗體陽性率春季和秋季分別為72.22%和62.50%，春秋兩季雞MS 陽性率差異顯著（p＜0.05）（圖4）。結(jié)果表明春秋兩季是MS 感染高峰期，其中春季感染更為嚴(yán)重。

圖4 不同季節(jié)MS 血清抗體檢測及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果Fig.4 Serological test of MS infection in chickens in different seasons

3 討 論

通過對寧夏地區(qū)雞MS 血清抗體檢測結(jié)果顯示，寧夏地區(qū)不同市之間MS 血清抗體陽性率差異均顯著，分析其原因除了在飼養(yǎng)密度，環(huán)境控制，管理水平上有差異外，其差異可能還受到各地氣溫和降水量等因素的影響。MS 血清抗體陽性率較低的中衛(wèi)市和吳忠市在寧夏氣候區(qū)劃圖上位于中部干旱帶，其特點(diǎn)為干旱少雨、日照充足和蒸發(fā)較強(qiáng)。其多年平均降雨量在200 mm～400 mm，年蒸發(fā)量1 335.4 mm～2 201.9 mm。蒸發(fā)量是降雨量的3 倍～10 倍，這使MS 在體外經(jīng)空氣傳播的可能性極大降低[18]。而固原市大部分地區(qū)降雨量在400 mm 以上，六盤山地區(qū)可達(dá)600 mm 以上。氣候潮濕，溫差較大，應(yīng)激反應(yīng)的發(fā)生和利于MS 傳播的條件可能是固原地區(qū)MS 血清抗體陽性率較高的部分原因[19-20]。

不同月齡蛋雞感染MS 的血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，隨著月齡的增大MS 血清抗體陽性率呈上升趨勢，這與牛玉娟等對山東某雞場不同日齡的雞群檢測MS 陽性率的結(jié)論相吻合[21]。其可能原因是MS 長期潛伏在雞體內(nèi)通過不斷排毒，以水平傳播方式感染同一雞群中的易感雞，使MS 陽性率不斷增高，最終造成雞群的大幅度感染。按照正常的飼養(yǎng)管理，一般蛋雞6 個(gè)月后出現(xiàn)產(chǎn)蛋高峰期且在產(chǎn)蛋高峰期的持續(xù)時(shí)間段內(nèi)，MS 感染的陽性率一般呈上升趨勢。

本研究結(jié)果顯示蛋雞、肉雞、種雞3 種不同用途的雞均可感染MS，其中種雞MS 血清抗體陽性率最高為90.26%，其次是蛋雞為63.28%，肉雞最低為62.20%。蛋雞、肉雞、種雞感染MS 的陽性率差異顯著，可能與這3 種不同用途的雞飼養(yǎng)管理目標(biāo)差異較大有關(guān)。肉雞的血清抗體陽性率最低，可能與肉雞的生長期較短有關(guān)：為了追求雞肉的食用口感好，肉雞養(yǎng)殖一般追求增重速度快、增重量大，根據(jù)營養(yǎng)指標(biāo)白羽肉雞飼養(yǎng)至40 d 左右即可出欄[22]，MS 的水平傳播還未來得及傳染全部存欄雞就出欄了；蛋雞血清抗體陽性率較高，可能最主要的原因還是在于蛋雞的生長期較長，一般在72 周左右[23]。若飼養(yǎng)過程中對MS 病的防控措施不到位，雞群中一旦出現(xiàn)被感染的陽性雞，傳染源就會不斷排毒，最終污染飲用水、飼草、墊料，并通過空氣由呼吸道傳播感染整個(gè)雞群乃至周邊的雞舍；而種雞的MS 血清抗體陽性率最高，其可能原因是種雞種源沒有對MS 病進(jìn)行徹底凈化，同種群中雞通過呼吸道等進(jìn)行水平傳播，最終引起大范圍的雞MS 病的感染。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示種雞MS 血清抗體率最高，這與丁美娟等對江蘇部分地區(qū)雞MS 血清抗體陽性率檢測結(jié)果一致[17]。而本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示MS 血清抗體陽性率蛋雞次之，肉雞最低。這與丁美娟等的結(jié)果不同，其原因可能是受到了地區(qū)差異的影響，如環(huán)境、溫度等因素對雞的生長造成了不同程度的應(yīng)激反應(yīng)，以致雞的抵抗力降低從而誘發(fā)MS 病的發(fā)生[24]；且本實(shí)驗(yàn)中蛋雞與肉雞的樣本數(shù)目差異較大，可能也導(dǎo)致了對結(jié)果分析與統(tǒng)計(jì)的差異。

通過對春秋兩季雞MS 血清抗體進(jìn)行檢測，結(jié)果表明，春季雞MS 血清抗體陽性率較秋季偏高，這與馬爽等雞MS 春季易感染發(fā)病的結(jié)論相一致[14]。可能原因是春季氣溫波動(dòng)幅度較大，雞易發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致雞的抗病力下降致雞對MS 病的易感性增加[24-25]；且春季氣候干燥，呼吸道黏膜的屏障作用減弱，為雞MS 的侵入提供了便利條件。加之春季是其它禽類的疫病如禽流感的高發(fā)季節(jié)，其它疫病的感染使雞的免疫力下降，成為MS 的易感群體。

本研究對寧夏地區(qū)MS 病的流行情況及發(fā)生規(guī)律進(jìn)行了調(diào)查和分析，為后續(xù)MS 病的防控及凈化提供參考依據(jù)。