陳琳

摘要：目的? 對血培養(yǎng)中病原菌的分布情況及其對主要抗菌藥物的耐藥性進行研究。方法? 對2016年1月～2019年8月我院住院患者送檢的7905例血培養(yǎng)標本，用BacT/ALERT 3D 血培養(yǎng)儀進行血培養(yǎng)，從培養(yǎng)結果陽性的培養(yǎng)瓶中分離出的菌株在VITEK-Compact Ⅱ微生物全自動分析儀中鑒定病原菌的種類，并進行藥敏試驗，從而對血培養(yǎng)陽性標本中病原菌的分布及耐藥性進行分析。結果? 血培養(yǎng)中共檢出768株菌株，其中革蘭氏陰性菌共421株（54.82%），革蘭氏陽性菌共337株（43.88%），真菌10株（1.30%）。分離出的前5位菌株為：大腸埃希菌（152株）、肺炎克雷伯菌（96株）、人葡萄球菌人亞種（79株）、馬耳他布魯菌（64株）及表皮葡萄球菌（50株）。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對氨芐西林的耐藥率最高，分別為73.20%和97.06%;對頭孢替坦、阿米卡星、美羅培南及亞胺培南較敏感。人葡萄球菌人亞、表皮葡萄球菌及金黃色葡萄球菌對芐青霉素的耐藥率最高，分別為88.57%、93.94%及73.68%;對呋喃妥因、利奈唑胺和替加環(huán)素敏感性較高。結論? 血培養(yǎng)中分離出的病原菌種類復雜，以革蘭氏陰性菌居多，大腸埃希菌仍為主要致病菌。藥敏結果顯示病原菌耐藥情況較嚴重，需加強對病原菌的監(jiān)測工作，以指導臨床合理使用抗菌藥物。

關鍵詞：血流感染;血培養(yǎng);耐藥率

Abstract：Objective? To study the distribution of pathogenic bacteria in blood culture and its resistance to major antibacterial drugs.Methods? From January 2016 to August 2019， 7905 blood culture specimens from our hospital patients were examined by BacT / ALERT 3D blood culture instrument.The strains isolated from the culture bottles with positive culture results were used to identify the types of pathogenic bacteria in the VITEK-Compact Ⅱ microbial automatic analyzer， and to conduct drug sensitivity tests， so as to analyze the distribution and drug resistance of the pathogenic bacteria in blood culture positive specimen.Results? A total of 768 strains were detected in blood culture， including 421 Gram-negative bacteria （54.82%）， Gram-positive bacteria 337 （43.88%）， and 10 fungi （1.30%）. The top 5 isolates were： Escherichia coli （152 strains）， Klebsiella pneumoniae （96 strains）， Staphylococcus human subspecies （79 strains）， Brucella malta （64 strains） and epidermis grapes Cocci （50 strains）. The resistance rates of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae to ampicillin were the highest， 73.20% and 97.06% respectively; they were sensitive to cefotetan， amikacin， meropenem and imipenem. Staphylococcus aureus， Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus aureus have the highest resistance rates to benzylpenicillin， 88.57%， 93.94% and 73.68% respectively;they are more sensitive to nitrofurantoin， linezolid and tigecycline.Conclusion? The types of pathogenic bacteria isolated from blood culture are complex， and most are Gram-negative bacteria. Escherichia coli is still the main pathogenic bacteria. The results of drug susceptibility show that the resistance of pathogenic bacteria is serious， and it is necessary to strengthen the monitoring of pathogenic bacteria to guide the rational use of antibacterial drugs in clinic.

Key words：Bloodstream infection;Blood culture;Drug resistance rate

血流感染是影響所有年齡段人群發(fā)病率和死亡率的主要原因[1]，在全球范圍內影響約3000萬人的健康，致約600萬病人死亡[2]，其特征是細菌或真菌入侵血流并引起機體炎癥反應，致菌血癥或敗血癥，嚴重者可出現(xiàn)休克，多器官功能衰竭、DIC等[3]。近年來由于廣譜抗菌藥及有創(chuàng)診療廣泛使用，致血流感染發(fā)生率不斷增加，病原菌種類和耐藥性也隨時間進展而有所變化，給臨床經驗用藥帶來困難。因此，有必要對醫(yī)院的病原菌分布和耐藥性進行監(jiān)測，以有效指導臨床合理使用抗菌藥物。本研究分析我院2016年1月～2019年8月送檢的血培養(yǎng)標本，并對檢出的病原菌進行了菌群分布和耐藥性分析。

1材料和方法

1.1 標本來源? 收集2016年1月～2019年8月天津市第二人民醫(yī)院住院患者送檢血培養(yǎng)標本7905例。

1.2 儀器與試劑? 全自動血培養(yǎng)儀BacT/ALERT 3D和配套的培養(yǎng)瓶，微生物全自動分析儀VITEK-Compact Ⅱ和配套的細菌鑒定卡及藥敏卡均來自法國生物梅里埃公司。血瓊脂平板，麥康凱平板，念珠菌顯色平板來自天津金章科技發(fā)展公司。

1.3 標本采集? 采集有血流感染癥狀者在使用抗菌藥物前的全血標本，成人8～10 ml，兒童1～3 ml，分別注入需氧培養(yǎng)瓶和厭氧培養(yǎng)瓶中，采集過程中嚴格無菌操作，標本采集完成后立即常溫送檢。

1.4 細菌培養(yǎng)及鑒定? 收集到的血培養(yǎng)瓶立即放入BacT/ALERT 3D全自動血液培養(yǎng)儀中進行培養(yǎng)。當儀器報警有陽性標本時，立即將陽性標本轉種到血瓊脂平板和麥康凱平板中，有必要時應加種念珠菌顯色平板，同時進行革蘭氏染色鏡檢，電話通知臨床初步鑒定結果。分離培養(yǎng)18～24 h后，挑取單個可疑菌落，通過VITEK-Compact Ⅱ進行細菌鑒定和藥敏分析。藥敏結果判定根據美國臨床實驗室標準化協(xié)會（CLSI）最新標準判讀。

1.5 質量控制? 質控菌株：大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923、銅綠假單胞菌ATCC27853、 糞腸球菌 ATCC29212、肺炎克雷伯菌ATCC700603。

1.6 統(tǒng)計學方法? 采用WHONET5.4 進行統(tǒng)計分析，數(shù)據使用（n，%）進行描述。

2 結果

2.1病原菌分布? 共分離出768株菌株，前5位為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌，人葡萄球菌人亞種，馬耳他布魯菌，表皮葡萄球菌，見表1。

2.2主要革蘭氏陽性菌對常用抗菌藥物的耐藥情況? 分離出的革蘭氏陽性菌中以人葡萄球菌人亞種最多，其次為表皮葡萄球菌。人葡萄球菌人亞種、表皮葡萄球菌及金黃色葡萄球菌對芐青霉素的耐藥率最高，溶血葡萄球菌對芐青霉素和苯唑西林的耐藥率最高，這4種革蘭氏陽性球菌對克雷霉素和紅霉素的耐藥率均>50%。4種革蘭氏陽性球菌中未發(fā)現(xiàn)對利奈唑胺、替加環(huán)素的耐藥菌株，對呋喃妥因的敏感性較高，見表2。

2.3主要革蘭氏陰性菌對常用抗菌藥物的耐藥率? 革蘭氏陰性菌中大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌在前2位，大腸埃希菌對氨芐西林的耐藥率最高，對復方新諾明和頭孢唑啉耐藥率>50%。肺炎克雷伯菌對氨芐西林的耐藥率最高，其次是對哌拉西林及呋喃妥因。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對頭孢替坦、阿米卡星、美羅培南及亞胺培南較敏感，其中未發(fā)現(xiàn)對頭孢替坦耐藥的肺炎克雷伯菌株，見表3。

3討論

血流感染所導致的菌血癥和敗血癥是引起患者急性死亡的原因之一[4]。血培養(yǎng)是血流感染最直接的診斷方法，對患者后續(xù)治療、病情監(jiān)測及預后都具有重要作用。及時準確的血培養(yǎng)鑒定及藥敏結果有助于臨床有效的控制感染，減少患者的死亡率。同時，對血流感染中檢出的病原菌的分布和耐藥情況進行定期監(jiān)測，可以指導臨床經驗用藥，以達到及時有效控制感染的目的。

本研究從7905例血培養(yǎng)中檢出768株菌株，革蘭氏陰性菌仍是血流感染主要菌株，占54.82%，與陳俊等[3]及唐洪影等[5]報道的血培養(yǎng)結果一致。但與楊士華[6]報道的結果不同，可能是因為病原菌的分布與地域有一定的關系。革蘭氏陰性菌中以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌檢出最多，革蘭氏陽性菌中檢出最多的為人葡萄球菌人亞種，其次為表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌。大腸埃希菌對阿米卡星、美羅培南、哌拉西林/他唑巴坦及頭孢替坦具有較高的敏感性;肺炎克雷伯菌對頭孢替坦、阿米卡星、亞胺培南及美羅培南具有較高的敏感性，其中未發(fā)現(xiàn)對頭孢替坦耐藥的肺炎克雷伯菌株。人葡萄球菌人亞種、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌及溶血葡萄球菌對替加環(huán)素、利奈唑胺均未發(fā)現(xiàn)耐藥。

本研究中發(fā)現(xiàn)表皮葡萄球菌檢出率高于金黃色葡萄球菌，這與陳俊玲[7]、高壁如等[8]報道相一致。表皮葡萄球菌是存在于人皮膚黏膜的正常菌群，如在創(chuàng)傷性診療過程中未嚴格遵守無菌操作，對皮膚消毒不徹底，就會使表皮葡萄球菌進入血液并引發(fā)感染，表皮葡萄球菌的高檢出率提示臨床在進行有創(chuàng)診療時，應加強消毒意識，嚴格無菌操作，避免不必要的感染產生。此外，馬耳他布魯菌檢出率也較高，人布魯式桿菌病是一種人蓄共患病，傳播途徑主要為直接接觸皮膚傳播，也可通過消化道傳播，如未經高溫消毒的奶制品，牛羊肉等，對布魯氏桿菌及時的檢出有助于臨床診斷。布魯氏桿菌也可以通過氣溶膠吸入感染，提示實驗人員一定要做好防護工作。本研究中共檢出10株真菌，其中一半為新生隱球菌，這可能與我院患者構成有關，因其感染常見于免疫功能受損的人群，如艾滋病等，及時準確對血流感染中真菌的檢出有助于更合理的使用抗真菌藥物。

綜上所述，血流感染的病原菌復雜多變，不同病原菌間的耐藥性差異也較大。由于有創(chuàng)診療的廣泛開展及抗菌藥物的不合理應用，導致血流感染的發(fā)病率不斷增加，病原菌的耐藥情況日漸嚴重，且隨時間的推移病原菌的分布和耐藥性都會產生變化。這就使醫(yī)院對血流感染病原菌的的監(jiān)測顯得至關重要，實時了解病原菌的分布和耐藥情況，對幫助臨床合理使用抗菌藥物，提高患者治愈率具有重要意義。

參考文獻：

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[2]Fleischmann C，Scherag A，Adhikari NK，et al.Assessment of Global Incidence and Mortality of Hospital-treated Sepsis. Current Estimates and Limitations[J].Am J Respir Crit Care Med，2016，193（3）：259-272.

[3]陳俊，王燕，錢耀先，等.某院血流感染常見病原菌分布特征及耐藥性分析[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2019，16（2）：200-203.

[4]呂媛，李耘，薛峰，等.衛(wèi)生部全國細菌耐藥監(jiān)測網（Mohnarin）2011-2012年度血流感染細菌耐藥監(jiān)測報告[J].中國臨床藥理學雜志，2014，30（3）：278-288.

[5]唐洪影，胡志東，李靜，等.2014-2017年血培養(yǎng)常見病原菌的菌群分布及其耐藥性變遷[J].中國抗生素雜志，2018，43（5）：566-571.

[6]楊士華.血液培養(yǎng)的病原菌分布及耐藥性分析[J].醫(yī)學理論與實踐，2018，31（3）：329-331.

[7]陳俊玲.表皮葡萄球菌與金黃色葡萄球菌在血流感染患者中分布及耐藥性分析[J].實用醫(yī)技雜志，2019，26（6）：713-714.

[8]高壁如，王夢夢，楊湘越.血培養(yǎng)分離表皮葡萄球菌的分布及耐藥性分析[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志，2019，34（2）：76-78.

編輯/馮清亮