陳 明 朱愛萍 周 慧 吳 家
江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院,江蘇泰州225300
隨著人們生活水平的提高,對肉食產(chǎn)品的需求量不斷提高,所以飼料工業(yè)在過去的幾十年里迅猛發(fā)展,同時也導(dǎo)致了對飼料原料的需求量大大提升[1-2]。研究[3]表明,我國近幾年禽類年出欄量約1 600 萬t,以產(chǎn)羽量5%~7%計算,則年產(chǎn)羽毛粉在96 萬t 左右。羽毛粉蛋白質(zhì)含量85%以上,有“天然蛋白質(zhì)之冠”之稱。我國作為畜牧業(yè)大國,飼料原料種類繁多,但是缺乏優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)原料。因此,研究羽毛粉中的蛋白質(zhì)利用率,找到最佳的加工方式顯得尤為重要,這不僅能改善對蛋白質(zhì)飼料原料的短缺,而且還能有效地解決因大量羽毛粉的廢棄而出現(xiàn)的環(huán)境污染。
雖然羽毛粉中的蛋白質(zhì)含量高達85%以上,各種氨基酸的含量也在75%以上,但是羽毛中富含大量的角蛋白以及纖維蛋白,動物體內(nèi)的胰蛋白酶和胃蛋白酶以及其他的水解酶并不能對其進行很好地水解。直接飼喂的話,可能會導(dǎo)致動物的消化系統(tǒng)出現(xiàn)不良狀況。目前我國對于羽毛粉的加工方式主要有酶解、酵解以及水解等,這幾種方式可以很好地破壞羽毛蛋白中結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的二硫鍵,以此形成富含容易消化的粗蛋白質(zhì)和必需氨基酸以及生長因子,可以提高在動物體內(nèi)的消化利用率[4]。在實際生產(chǎn)中,用羽毛粉來替代一些價格昂貴的蛋白質(zhì)飼料,可以降低飼料成本。本試驗以不同加工方式的羽毛粉為研究對象,探究其粗蛋白含量以及胃蛋白酶消化率,尋求最佳的加工方式,為羽毛粉的合理開發(fā)利用提供理論依據(jù)[5]。
試驗選取普通羽毛粉、水解羽毛粉、酶解羽毛粉、酵解羽毛粉4 種不同加工方式的羽毛粉,均購于泰州正大飼料有限公司。
1)主要儀器。電子天平(FA1104,上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司)、消化爐(KDY-08,蘇州市天威儀器有限公司)、凱氏蒸餾裝置、電陶爐(H22-X3-C1,Joyoung 九陽)、索氏提取器、水浴鍋(HH-S,金壇市城東新瑞儀器廠)、干燥箱(DHG-9101,常州邁科諾儀器有限公司)、離心機(DL-5C,上海安亭科學(xué)儀器廠)、恒溫式搖床(SHZ-82A,常州金壇友聯(lián)儀器研究所)。
2)主要試劑[6]?;旌洗呋瘎?、NaOH 溶液、甲基紅溴甲酚綠混合指示劑、20%硼酸溶液、0.02 mol/L 鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液、石油醚、1∶10 000 胃蛋白酶溶液、0.075 mol/L 鹽酸溶液;其中胃蛋白酶試劑購于國藥集團化學(xué)試劑有限公司。
1)試驗設(shè)計。本試驗選用普通羽毛粉、水解羽毛粉、酶解羽毛粉、酵解羽毛粉4 組不同加工方式的羽毛粉,分別測定粗蛋白含量及胃蛋白酶消化率。每組做5 次試驗,每次做4 個重復(fù),同時做空白測定。
2)試樣脫脂。試驗中所有樣品脫脂的方法步驟均參考國標(biāo)GB/6433-2006[7]。
3)測定蛋白質(zhì)含量。試驗中測定試驗蛋白質(zhì)的方法步驟均參考國標(biāo)GB/T6432-2018[8]。
4)測定胃蛋白酶消化率含量。測定試樣中的胃蛋白酶消化率的方法步驟均參考國標(biāo)GB/T17811-2008[9]。
5)數(shù)據(jù)分析。將試驗數(shù)據(jù)先用Excel 初步整理,然后使用SPSS 20.0 軟件處理,再用Duncan’s 法進行多重分析比較,以“平均值±均值標(biāo)準(zhǔn)誤(SEM)”表示,以P<0.05 為顯著性標(biāo)準(zhǔn)進行比較[10]。
由表1 可知,4 種不同加工方式的羽毛粉中,普通羽毛粉的粗蛋白含量最高,為97.34%,酶解和水解羽毛粉的粗蛋白含量在87%以上,酵解羽毛粉的粗蛋白的含量最低,為39.20%;經(jīng)酶解、水解、酵解處理以及普通羽毛粉間的粗蛋白含量差異顯著(P<0.05)。
表1 不同加工方式羽毛粉粗蛋白的含量 %
由表2 可知,4 種不同加工方式的羽毛粉,經(jīng)酵解處理的羽毛粉胃蛋白酶消化率最高,為97.17%,水解和酶解羽毛粉在92%以上,而普通羽毛粉的胃蛋白酶消化率為88.79%;經(jīng)酶解、水解、酵解處理以及普通羽毛粉間的粗蛋白含量差異顯著(P<0.05)。
表2 不同加工方式羽毛粉胃蛋白酶消化率含量 %
目前,我國的飼料加工企業(yè)普遍采用的方式是高溫高壓水解法、酶解法以及酵解法,其中,酶解法和微生物發(fā)酵法多與水解法相結(jié)合。高溫高壓水解羽毛粉利用蒸氣將羽毛粉水解成蛋白凝膠,烘干后粉碎再飼喂,但是參數(shù)控制不好的話容易造成氨基酸消化率低或者蛋白質(zhì)嚴(yán)重變性[4]。酶解羽毛粉采用現(xiàn)代水解酶工程,形成優(yōu)質(zhì)高效復(fù)合型酶解蛋白質(zhì)飼料原料,酵解法則是利用菌種對羽毛粉進行發(fā)酵,進一步提高羽毛粉的品質(zhì)。其他的方式如酸堿解法和膨化法,則因為投資成本高、生產(chǎn)效率低以及對氨基酸的破壞較為嚴(yán)重,在我國并沒有進行推廣應(yīng)用[11]。
從試驗結(jié)果中可以看出,不同的加工工藝會對羽毛粉的粗蛋白含量產(chǎn)生不同程度的影響,李曉燕等[12]試驗表明,經(jīng)過水解后的羽毛粉粗蛋白含量為77.91%,酶解羽毛粉的粗蛋白含量為85.58%,在本次試驗中水解羽毛粉粗蛋白含量為87.36%,而酶解羽毛粉粗蛋白含量則與其差不多,在88.55%左右,酶解羽毛粉中粗蛋白含量比水解羽毛粉中粗蛋白含量高,這是一致的。酵解羽毛粉的粗蛋白整體偏低,其原因可能是羽毛粉中有摻假現(xiàn)象。但是高溫高壓水解法易造成熱敏氨基酸的損失,同時耗能大,容易對環(huán)境產(chǎn)生污染。而經(jīng)過酶解法處理的羽毛粉粗蛋白含量高于水解法,這可能是因為酶解羽毛粉加工溫度低,對熱敏性氨基酸的破壞少,增加了可消化氨基酸的含量,從而提高了羽毛粉蛋白質(zhì)消化利用率[11]。
禽類羽毛通過加工可處理成粉狀,充分破壞了角蛋白的空間結(jié)構(gòu),使角蛋白轉(zhuǎn)化成易消化吸收的氨基酸,從而提高蛋白質(zhì)的消化率。本試驗結(jié)果顯示,在這4 種不同加工方式的羽毛粉中,胃蛋白酶消化率最高的是酵解羽毛粉,為97.17%。程福亮等[13]研究發(fā)現(xiàn),采用米曲霉和乳酸桿菌聯(lián)合發(fā)酵羽毛粉60 h,聯(lián)合發(fā)酵的羽毛粉胃蛋白酶消化率可達82%,而本試驗中得到的酵解羽毛粉的胃蛋白酶消化率較高。崔艷紅等[14]研究發(fā)現(xiàn),用加入賴氨酸1%的生物發(fā)酵羽毛粉可完全代替豬飼料中的魚粉,也可替代肉雞飼料中的70%的魚粉。李曉燕等[12]通過試驗得出,經(jīng)角蛋白酶處理的羽毛粉的胃蛋白酶消化率為90.25%,而水解羽毛粉的胃蛋白酶消化率為78.22%,酶解羽毛粉的胃蛋白酶消化率顯著高于水解羽毛粉。但在本試驗中,水解羽毛粉的胃蛋白酶消化率為95.37%,酶解羽毛粉胃蛋白酶消化率為92.24%,并沒有出現(xiàn)酶解羽毛粉高于水解羽毛粉的情況,其原因可能是酶解羽毛粉在消化過程中粗蛋白有損耗,導(dǎo)致最后的結(jié)果偏低。
不同加工方式羽毛粉的生產(chǎn)和應(yīng)用對當(dāng)前蛋白質(zhì)飼料原料短缺的情況有一定的緩解,但是羽毛粉的營養(yǎng)價值取決于其加工方式,所以在實際生產(chǎn)中應(yīng)使用合理的加工方式,減少在加工過程中造成的養(yǎng)分損失,提高加工產(chǎn)品的胃蛋白酶消化率,使之成為一種優(yōu)質(zhì)的動物性蛋白質(zhì)飼料。但在應(yīng)用過程中也要注意添加量和調(diào)節(jié)氨基酸平衡,同時也要進一步研究開發(fā)羽毛粉的加工方式,使羽毛粉的飼喂價值發(fā)揮到最大。目前我國飼料市場上,應(yīng)用最廣泛的是水解和酶解羽毛粉,酵解羽毛粉還有很大的發(fā)展前景和市場。本次試驗,4 種不同加工方式的羽毛粉胃蛋白酶消化率從大到小依次為酵解、水解、酶解、普通,含量依次為:97.17%、95.31%、92.24%、88.79%。由此可知,酵解羽毛粉的品質(zhì)最好。