陳海霞 白曉紅

摘要：目的 ?評(píng)估ICSI顯微操作技術(shù)在體外助孕Half-ICSI治療中的有效性。方法 ?回顧性分析2007年4月～2018年12月于我院接受Half-ICSI治療的不孕患者中213例周期，同一患者卵子分為兩組分別采用IVF和ICSI兩種受精方式，比較IVF組和ICSI組的受精情況、胚胎發(fā)育潛能、臨床妊娠結(jié)局及出生缺陷。結(jié)果 ?納入研究的213個(gè)取卵周期共獲卵4374枚，平均獲卵（19.97±7.53）枚，2159枚卵行IVF，2215枚卵行ICSI，其中成熟卵1840枚。Half-ICSI治療中，ICSI組的正常受精率（74.62%）高于IVF組（68.18%）（P<0.05）;兩組間卵裂率，優(yōu)胚率，每周期優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），ICSI組異常受精率（1PN率2.28%，3PN率2.23%）低于IVF組（1PN率3.84%，3PN率8.31%）（P<0.05）。兩組種植率、出生缺陷率、累積妊娠率、累積活產(chǎn)率、流產(chǎn)率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;兩組活產(chǎn)單胎、活產(chǎn)雙胎的體重比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 ?在Half-ICSI治療中，ICSI可獲得較為滿意的受精結(jié)局，但臨床妊娠結(jié)局無(wú)明顯改善。

關(guān)鍵詞：體外受精-胚胎移植;Half-ICSI;卵子;臨床結(jié)局;出生缺陷

中圖分類號(hào)：R714 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.05.022

文章編號(hào)：1006-1959（2020）05-0074-03

Abstract：Objective ?To evaluate the effectiveness of ICSI micromanipulation technology in Half-ICSI in vitro fertility treatment. Methods ?A retrospective analysis of 213 cycles of infertility patients who were treated with Half-ICSI in our hospital from April 2007 to December 2018. The eggs of the same patient were divided into two groups using IVF and ICSI respectively.The fertilization status， embryo development potential， clinical pregnancy outcomes and birth defects were compared between the IVF and ICSI groups. Results ?A total of 4374 eggs were obtained from the 213 egg retrieval cycles included in the study， with an average of （19.97±7.53） eggs， 2159 eggs lined IVF， 2215 eggs lined ICSI， of which 1，840 mature eggs. In Half-ICSI treatment， the normal fertilization rate of ICSI group （74.62%） was higher than that of IVF group （68.18%）（P<0.05）. There was no difference in cleavage rate， superior embryo rate， and number of high-quality embryos per cycle between the two groups（P>0.05）. The abnormal fertilization rate （1PN rate 2.28%， 3PN rate 2.23%） in the ICSI group was lower than that in the IVF group （1PN rate 3.84%， 3PN rate 8.31%）（P<0.05）. There was no significant difference in implantation rate， birth defect rate， cumulative pregnancy rate， cumulative live birth rate， and miscarriage rate between the two groups（P>0.05）.There was no significant difference in body weight between single and twin births between the two groups（P> 0.05）.Conclusion ?In Half-ICSI treatment， ICSI can obtain satisfactory fertilization outcomes， but clinical pregnancy outcomes have not improved significantly.

Key words：In vitro fertilization-embryo transfer;Half-ICSI;Eggs;Clinical outcome;Birth defect

ICSI技術(shù)自1992年被提出并成功用于男性不育癥，使該病治療有了較大突破[1]，此后逐漸擴(kuò)展用于體外受精（IVF）周期失敗、受精低下等方面，逐漸成為輔助生殖技術(shù)領(lǐng)域中的主要組成部分。原發(fā)不孕時(shí)間較長(zhǎng)（≥5年），不明原因不孕或僅有輕度弱精子癥的患者可能存在精卵結(jié)合障礙[2]，因此根據(jù)取卵日獲卵數(shù)情況建議采用Half-ICSI受精方式[3]。但I(xiàn)CSI的選擇指征尚不明確，常規(guī)IVF受精方式可能存在受精失敗的風(fēng)險(xiǎn)，受精一旦失敗，患者可能因無(wú)可移植胚胎而被迫放棄周期，精神壓力較大。ICSI顯微操作技術(shù)屬于一項(xiàng)侵入性操作，其有效性和安全性目前尚無(wú)統(tǒng)一定論。本研究結(jié)合我中心接受Half-ICSI治療的患者臨床資料，分析這兩種方式受精情況、臨床妊娠和出生缺陷等，評(píng)估實(shí)行ICSI顯微操作技術(shù)在Half-ICSI治療中的有效性和安全性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 ?選擇2007年4月～2018年12月天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院婦產(chǎn)科生殖醫(yī)學(xué)中心接受輔助生殖助孕治療行Half-ICSI受精方式的患者312例，納入患者均為原發(fā)不孕5年以上不明原因性不孕，排除受精率小于60的99個(gè)周期，剩余213個(gè)取卵周期。

1.2方法

1.2.1促排方案 ?根據(jù)患者基礎(chǔ)性激素、卵巢竇卵泡數(shù)等病情制定個(gè)性化促排方案，包括長(zhǎng)方案、短方案、拮抗劑方案。當(dāng)主導(dǎo)卵泡直徑1個(gè)≥18 mm或者3個(gè)≥17 mm時(shí)，當(dāng)天予以HCG 5000～10000 IU板機(jī)，扳機(jī)后36～38 h取卵。

1.2.2受精方案 ?每位患者所獲卵子隨機(jī)分為2部分，其中IVF組2159枚，ICSI組2215枚。IVF方案：采用過(guò)夜受精，ICSI方案：取卵后2 h后，用透明質(zhì)酸酶去除顆粒細(xì)胞，以第一極體是否排出判定是否為成熟卵，進(jìn)行單精子顯微操作，次日觀察受精情況。

1.3胚胎評(píng)分以及移植 ?根據(jù)伊斯坦布爾共識(shí)對(duì)胚胎進(jìn)行形態(tài)學(xué)評(píng)分，取卵后第2天或第3天選取優(yōu)質(zhì)胚胎進(jìn)行移植或者冷凍。在新鮮周期中，將評(píng)估符合移植條件者進(jìn)行新鮮胚胎移植，如果有嚴(yán)重的卵巢過(guò)度刺激綜合征、內(nèi)膜厚度太薄、子宮內(nèi)膜容受性差、促排方案不適合新鮮移植，則將胚胎冷凍，在下1個(gè)解凍周期中，將胚胎解凍，進(jìn)行胚胎移植。在1個(gè)移植周期中優(yōu)先選擇IVF來(lái)源胚胎進(jìn)行移植，在IVF無(wú)可移植胚胎的情況下選擇移植ICSI來(lái)源的胚胎。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 ?采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，組間比較采用？字2檢驗(yàn);計(jì)量資料采用（x±s），比較采用t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較 ?納入研究的213個(gè)取卵周期共獲卵4374枚，平均獲卵（19.97±7.53）枚，其中成熟卵1840枚。IVF組和ICSI組在受精率、正常受精率、1PN率、3PN率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;兩組間卵裂率，優(yōu)質(zhì)胚胎率，優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表1。

2.2 兩組新鮮移植周期中妊娠結(jié)局分析 ?IVF組和ICSI組的種植率、臨床妊娠率、活產(chǎn)率、流產(chǎn)率、活產(chǎn)單胎及活產(chǎn)雙胎的體重比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表2。

2.3 兩組新鮮加解凍移植周期中妊娠結(jié)局分析 ?IVF組累積移植周期242例，ICSI組累積移植周期83例。IVF組和ICSI組累積妊娠率、累積活產(chǎn)率、流產(chǎn)率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表3。

3討論

ICSI技術(shù)避開(kāi)了受精和精子選擇所需要的自然步驟如精子透明帶結(jié)合及卵黃膜的融合與穿透，對(duì)于男性因素不孕有明顯的治療效果，應(yīng)用范圍包括臨界精液質(zhì)量、常規(guī)IVF受精失敗、不明原因不孕及非男性因素不孕等多個(gè)方面，但其在顯微操作過(guò)程中有可能損傷細(xì)胞骨架或紡錘體或人為的不適當(dāng)精子優(yōu)選，外源物質(zhì)及污染物的侵入等[4]。因此ICSI技術(shù)的和有效性和安全性是臨床關(guān)注的熱點(diǎn)。

本研究中213例行Half-ICSI的不孕患者，同一患者的卵母細(xì)胞分配到IVF組和ICSI組兩個(gè)治療組。每個(gè)患者以自身為對(duì)照，從而減少女方年齡、卵巢刺激方案選擇、卵母細(xì)胞質(zhì)量和精子質(zhì)量及實(shí)驗(yàn)室環(huán)境等因素影響。研究顯示[5]，ICSI正常受精率高于IVF，異常受精率降低，ICSI保證較高的受精率同時(shí)顯著的降低多精受精率的發(fā)生。本研究中ICSI組的正常受精率（74.62%）高于IVF組（68.18%），異常受精率（1PN率2.28%，3PN率2.23%）低于IVF組（1PN率3.84%，3PN率8.31%）（P<0.05）。ICSI操作需對(duì)卵母細(xì)胞裸化后進(jìn)行成熟度評(píng)估，只有成熟的卵母細(xì)胞才進(jìn)行顯微操作，而IVF則是所有卵子均進(jìn)行常規(guī)過(guò)夜受精，次日觀察受精情況，這種選擇偏移可能是導(dǎo)致ICSI受精率高的原因之一。ICSI操作是直接將單根精子注射到卵母細(xì)胞中，理論上避免了多精受精的發(fā)生，從而降低異常受精率。

本研究中兩組在種植率、卵裂率、優(yōu)胚率、妊娠率、活產(chǎn)率、累積妊娠率、累積活產(chǎn)率、出生缺陷例比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），說(shuō)明ICSI對(duì)卵母細(xì)胞受精、胚胎發(fā)育潛能、臨床妊娠結(jié)局及出生缺陷與IVF相比并無(wú)明顯差異，與Foong SC等[6]報(bào)道結(jié)果一致。Bonduelle M等[7]對(duì)2995例IVF和2889例ICSI出生的孩子進(jìn)行隨訪顯示，ICSI并未增加出生嬰兒畸形風(fēng)險(xiǎn)。另有研究顯示[8]，IVF和ICSI出生的2周歲左右的兒童在發(fā)育方面無(wú)明顯差異。但Catford SR等[9]的研究表明行ICSI的兒童發(fā)生自閉癥和智力受損的風(fēng)險(xiǎn)可能會(huì)增加。本研究中對(duì)出生半年以后的孩子通過(guò)電話隨訪未發(fā)現(xiàn)出生后代缺陷的發(fā)生，但本研究樣本量比較小并且隨訪僅追蹤到出生階段，仍需進(jìn)一步長(zhǎng)期隨訪研究觀察ICSI對(duì)胚胎的潛在影響及ICSI來(lái)源的后代是否出生缺陷。

總之，Half-ICSI治療中，ICSI顯微操作較IVF可獲得較為滿意的受精結(jié)局，但臨床妊娠結(jié)局無(wú)明顯改善。本研究對(duì)研究對(duì)象均來(lái)自本中心且納入研究周期數(shù)少，有待進(jìn)一步多中心、大樣本的研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]Esteves SC，Roque M，Bedoschi G，et al.Intracytoplasmic sperm injection for male infertility and consequences for offspring[J].Nat Rev Urol，2018，15（9）：535-562.

[2]Tannus S，Son WY，Gilman A，et al.The role of intracytoplasmic sperm injection in non-male factor infertility in advanced maternal age[J].Hum Reprod，2017，32（1）：119-124.

[3]Larbuisson A，Raick D，Demelenne S，et al.ICSI diagnostic：a way to prevent total fertilization failure after 4 unsuccessful IUI[J].Basic and Clinical Andrology，2017，27（1）：18.

[4]Sánchez-Calabuig MJ，López-Cardona AP，F(xiàn)ernández-González R，et al.Potential Health Risks Associated to ICSI： Insights from Animal Models and Strategies for a Safe Procedure[J].Front Public Health，2014（2）：241.

[5]Ohgi S，Hagihara C，Anakubo H，et al.A comparison of the clinical outcomes of embryos derived from intracytoplasmic sperm injection after early fertilization check and conventional insemination using sibling oocytes[J].Arch Gynecol Obstet，2016，293（4）：887-892.

[6]Foong SC，F(xiàn)leetham JA，O'Keane JA，et al.A prospective randomized trial of conventional in vitro fertilization versus intracytoplasmic sperm injection in unexplained infertility[J].Journal of Assisted Reproduction and Genetics，2006，23（3）：137-140.

[7]Bonduelle M，Liebaers I，Deketelaere V，et al.Neonatal data on a cohort of 2889 infants born after ICSI （1991-1999） and of 2995 infants born after IVF （1983-1999）[J].Human Reproduction，2002，17（3）： 671-694.

[8]Zheng Z，Chen L，Yang T，et al.Multiple pregnancies achieved with IVF/ICSI and risk of specific congenital malformations： a meta-analysis of cohort studies[J].Reprod Biomed Online，2018，36（4）：472-482.

[9]Catford SR，McLachlan RI，O'Bryan MK，et al.Long-term follow-up of intra-cytoplasmic sperm injection-conceived offspring compared with in vitro fertilization-conceived offspring： a systematic review of health outcomes beyond the neonatal period[J].Andrology，2017，5（4）：610-621.

收稿日期：2019-12-06;修回日期：2020-01-09

編輯/肖婷婷