馬興璇 唐石伏 陽建伶 黃毅勇 龍 康 張紅雨

[摘要]（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)是作為診斷真菌感染內(nèi)臟器官、皮下組織等深部器官和組織的侵襲性真菌感染指標(biāo)，在輔助臨床的診斷和治療上有很大的幫助，但作為一個(gè)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，在檢測(cè)的過程中，總是存在一定的干擾因素，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)假陽性或假陰性。本文通過查閱國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)關(guān)于（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)干擾因素的研究情況進(jìn)行歸納總結(jié)，并進(jìn)行綜述，為臨床使用（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)指標(biāo)提供指導(dǎo)并為進(jìn)行（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)干擾因素的研究提供參考依據(jù)。

[關(guān)鍵詞]（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn);干擾因素;侵襲性真菌感染

[中圖分類號(hào)] R446.5? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1674-4721（2020）3（c）-0021-03

Research advances in interference factors of （1， 3）-β-D-glucan test

MA Xing-xuan? ?TANG Shi-fu? ?YANG Jian-ling? ?HUANG Yi-yong? ?LONG Kang? ?ZHANG Hong-yu

Department of Clinical Laboratory， Liuzhou Traditional Chinese Medical Hospital， Guangxi Zhuang Autonomous Region， Liuzhou? ?545001， China

[Abstract] （1， 3）-β-D-glucan test is an index of invasive fungal infection for the diagnosis of deep organs and tissues such as internal organs and subcutaneous tissues of fungal infections. It is of great help to clinical diagnosis and treatment， but as an experimental indicator， there are always some interference factors in the process of detection， which makes the test result false positive or false negative. This article summarizes the domestic and foreign literature on the （1， 3）-β-D-glucan test interference factors， and reviews them， so as to provide guidance for the clinical application of （1， 3）-β-D-glucan test and provide reference for the study of interference factors in （1， 3）-β-D-glucan test.

[Key words] （1， 3）-β-D-glucan test; Interference factors; Invasive fungal infection

侵襲性真菌感染（invasive fungal infection）是指致病性真菌侵犯人體深部組織和器官所引起的感染性疾病，又稱深部真菌感染或系統(tǒng)性真菌感染[1]。目前侵襲性真菌感染的輔助診斷主要通過以下的幾種方法：①血清學(xué)檢測(cè)。如真菌表面抗原、抗體等，但該方法檢測(cè)影響因素多，缺乏特異性。②病理學(xué)檢查是否有真菌感染。但病理學(xué)檢查屬于侵入性操作，標(biāo)本不易獲得，患者不易接受，所以臨床應(yīng)用有限。③培養(yǎng)病原菌。真菌的培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)，而且培養(yǎng)結(jié)果不能區(qū)分是致病菌還是原來就存在的定植菌，不能滿足臨床需要[2]。④（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)。該方法使用的標(biāo)本容易獲得，實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)所需要的時(shí)間短，做到了早診斷早治療，極大地滿足了臨床的需要。其克服了以往各種檢測(cè)方法的不足，是目前各個(gè)醫(yī)院普遍開展輔助診斷侵襲性真菌感染的重要實(shí)驗(yàn)。目前認(rèn)為（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)是一個(gè)良好的侵襲性真菌感染的篩查指標(biāo)，具有很高陰性預(yù)測(cè)值[3]，2009年新修訂的歐洲癌癥-侵襲性真菌感染治療研究協(xié)作組和美國(guó)國(guó)立變態(tài)反應(yīng)和感染病研究院真菌病研究組（EORTC/MSG）將（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)納入侵襲性真菌感染擬診的標(biāo)準(zhǔn)之一[4]，可以用來排除侵襲性真菌感染。雖然（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)是目前國(guó)內(nèi)外公認(rèn)用來輔助診斷侵襲性真菌感染的最佳方法，但是實(shí)驗(yàn)總是有其局限性，（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)最大的缺陷是會(huì)產(chǎn)生一定的假陽性和假陰性。因此，研究引起（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)的干擾因素，對(duì)臨床診斷和治療侵襲性真菌感染具有重要意義。

1細(xì)菌感染可影響（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果

部分細(xì)菌感染可影響（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果，使（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果引起假陽性。目前國(guó)外用于（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)的試劑主要有兩種：一種是美國(guó)Cape code公司生產(chǎn)的Fungitell或Glu-Catell試劑，它的cut-off值為≥60 pg/ml或≥80 pg/ml;一種是日本Seikagaku kogyo公司生產(chǎn)的Fungitec-G試劑，它的cut-off值為≥20 pg/ml[4]。據(jù)國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道，Glu-Catell和Fungitell試劑盒對(duì)菌血癥如緩癥鏈球菌、屎腸球菌、大腸埃希菌、沙門菌屬、銅綠假單胞菌、糞產(chǎn)堿桿菌和肺炎鏈球菌引起的菌血癥患者，特別是革蘭陽性菌感染患者的檢驗(yàn)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生假陽性[5]。國(guó)內(nèi)生產(chǎn)（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)的試劑廠家也有兩家：北京金山川科技發(fā)展公司和廣東湛江安度斯生物有限公司，它們的cut-off值分別是20 pg/ml和100.5 pg/ml[6]。國(guó)內(nèi)研究結(jié)果也顯示，引起國(guó)內(nèi)兩家公司試劑（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)假陽性的細(xì)菌有金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、鏈球菌屬、銅綠假單胞菌、鮑鰻不動(dòng)桿菌、大腸埃希菌等。這些細(xì)菌影響（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)的可能原因是這些細(xì)菌感染后產(chǎn)生的某些毒素或者產(chǎn)物的分子結(jié)構(gòu)類似于（1，3）-β-D-葡聚糖，參與了（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)的反應(yīng)，從而產(chǎn)生假陽性[7]。

2血液透析可影響（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)

接受血液透析的患者可影響（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果，使（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果引起假陽性。因?yàn)檠和肝龌际褂玫睦w微素薄膜含有葡聚糖成分，所以干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果[8]。另外，靜脈輸注免疫球蛋白、清蛋白、輸血的患者可影響（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果，使（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果引起假陽性[9]。所有含有葡聚糖和蛋白質(zhì)的物質(zhì)都可以參與（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)的化學(xué)反應(yīng)，從而影響（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，建議接受血液透析的患者和靜脈輸注免疫球蛋白、清蛋白、輸血的患者懷疑深部真菌感染或系統(tǒng)性真菌感染時(shí)，采取經(jīng)驗(yàn)性用藥和密切臨床觀察，不能采用（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果來作為治療依據(jù)。

3標(biāo)本污染可影響（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)

操作者處理標(biāo)本時(shí)存在污染，可影響（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果，使（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果引起假陽性[10-12]。主要是在實(shí)驗(yàn)的過程中不按標(biāo)準(zhǔn)和要求進(jìn)行操作，如不使用含熱原的試管、吸樣槍頭污染、標(biāo)本污染等。因此在進(jìn)行（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的過程中一定要注意無菌操作，嚴(yán)格按照操作標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。試管、吸樣槍頭都需要進(jìn)行高壓滅菌消毒后才能使用，操作過程戴上口罩和手套以防止蛋白質(zhì)污染影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，做（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)人員必須經(jīng)過嚴(yán)格的培訓(xùn)，培訓(xùn)合格后方可授權(quán)上崗，不要隨意更換實(shí)驗(yàn)人員。

4某些抗腫瘤類藥物可影響（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)

β-內(nèi)酰胺類藥物以及香菇多糖，裂殖菌多糖等抗腫瘤類藥物可影響（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果，使（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果引起假陽性。其原因是使用β-內(nèi)酰胺類藥物和多糖類抗癌藥物容易造成黏膜損傷從而導(dǎo)致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌經(jīng)胃腸道進(jìn)入血液等也可能造成假陽性[13-15]。因此，醫(yī)生在懷疑患者深部真菌感染或系統(tǒng)性真菌感染需要做（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要了解患者目前的用藥情況，如果正在使用β-內(nèi)酰胺類藥物以及香菇多糖，裂殖菌多糖等藥物時(shí)，建議停用一周后再進(jìn)行（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。

5 （1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)假陰性

（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)假陰性可見于以下幾種情況[16-18]：①頭霉菌、毛霉菌、跟霉菌、隱球菌等感染。由于頭霉菌、毛霉菌、跟霉菌等真菌屬于接合菌屬，它們天然細(xì)胞壁缺乏（1，3）-β-D-葡聚糖;隱球菌是有莢膜包裹難以釋放（1，3）-β-D-葡聚糖入血從而使（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)假陰性。②曾經(jīng)接受過抗真菌治療。因此，（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果陰性并不代表不是真菌感染，應(yīng)該結(jié)合患者的臨床表現(xiàn)進(jìn)行綜合診斷，如果高度懷疑患者深部真菌感染或系統(tǒng)性真菌感染但（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果又是陰性的情況下，應(yīng)該考慮是否為頭霉菌、毛霉菌、跟霉菌、隱球菌等感染，可采用經(jīng)驗(yàn)性用藥或者針對(duì)頭霉菌、毛霉菌、跟霉菌、隱球菌的特性采用一些特異性的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行確認(rèn)。

6小結(jié)

真菌的細(xì)胞壁中都含有大量的（1，3）-β-D-葡聚糖，當(dāng)其感染了深部的組織和器官后，（1，3）-β-D-葡聚糖就釋放到血液和體液中，使感染者的血液和體液（1，3）-β-D-葡聚糖水平增高。據(jù)此來間接判斷存在真菌感染[19-22]。經(jīng)過多年的臨床實(shí)踐，在使用（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)進(jìn)行深部真菌感染的輔助診斷過程中積累了很多經(jīng)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)了很多引起實(shí)驗(yàn)假陽性的干擾因素，目前比較明確的是部分細(xì)菌感染，如鏈球菌、屎腸球菌、大腸埃希菌、沙門菌屬、銅綠假單胞菌、糞產(chǎn)堿桿菌和肺炎鏈球菌等可引起實(shí)驗(yàn)假陽性，血液透析的患者、標(biāo)本污染、β-內(nèi)酰胺類藥物以及香菇多糖，裂殖菌多糖等抗腫瘤類藥物的應(yīng)用都可以引起實(shí)驗(yàn)假陽性。同時(shí)也還有很多實(shí)驗(yàn)結(jié)果與臨床診斷不符，引起實(shí)驗(yàn)陽性的原因不明[23-26]。因此，還需要對(duì)（1，3）-β-D-葡聚糖實(shí)驗(yàn)的干擾因素進(jìn)行研究，明確更多引起實(shí)驗(yàn)結(jié)果假陽性的原因，以便更好地應(yīng)用于臨床對(duì)深部真菌感染的診斷和治療。同時(shí)也提醒臨床醫(yī)生對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果有疑問時(shí)，需要考慮上述的一些干擾因素，以便結(jié)合實(shí)際情況，對(duì)患者進(jìn)行正確的診斷和治療。

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（收稿日期：2019-07-10? 本文編輯：任秀蘭）