秦志清,樊海平,林建斌,梁萍
(福建省淡水水產(chǎn)研究所,福建 福州 350002)
半刺厚唇魚Acrossocheilius hemispinus 是《南浦溪半刺厚唇魚國家級水產(chǎn)種質(zhì)資源保護區(qū)》、《松溪河厚唇魚國家級水產(chǎn)種質(zhì)資源保護區(qū)》和《麻溪半刺厚唇魚國家級水產(chǎn)種質(zhì)資源保護區(qū)》的主要保護物種,也是福建省溪河重要的小型經(jīng)濟魚類,具有較高的經(jīng)濟、生態(tài)和遺傳育種價值。由于傳統(tǒng)的棲息生存環(huán)境遭破壞,非法捕撈和濫捕等違法行為屢禁不止,及各種污染源加劇了其生活環(huán)境的惡化等,該魚的野生種質(zhì)資源量銳減[1]。而有關半刺厚唇魚的相關研究資料較少,除本項目組開展的前期研究報道外,目前僅見有半刺厚唇魚精子活力研究[2]、人工繁育試驗[3]、肌肉營養(yǎng)成分分析[4]、胚胎及胚后發(fā)育觀察[5]等。為了有效保護和開發(fā)利用半刺厚唇魚種質(zhì)資源,有必要開展其人工繁育與養(yǎng)殖技術(shù)等研發(fā)。
培育優(yōu)質(zhì)苗種是水產(chǎn)種業(yè)發(fā)展的重要技術(shù)環(huán)節(jié)之一。魚類仔魚從孵化出膜到開口攝食期間,伴隨著與攝食、消化等相關的器官功能發(fā)育,一般要經(jīng)歷內(nèi)源性營養(yǎng)期(endogenous nutrition stage)、混合營養(yǎng)期(mixed nutrition stage)和外源性營養(yǎng)期(exogenous nutrition stage)三個階段[6]。仔魚能否從內(nèi)源營養(yǎng)期安全過渡到外源營養(yǎng)期直接關系到育苗的成敗,其中開口餌料是影響仔魚生長與存活的關鍵因子[7]。半刺厚唇魚仔魚從出膜到開口攝食期,不經(jīng)歷混合營養(yǎng)期而直接從內(nèi)源性營養(yǎng)期過渡到外源性營養(yǎng)期[8],育苗生產(chǎn)中選擇適宜的開口餌料更為重要和關鍵。本試驗通過研究淡水輪蟲、水蚯蚓漿、蛋黃、魚苗開口料和蝦奶粉對半刺厚唇魚仔魚生長和存活率的影響,以期為規(guī)?;绾腿斯ゐB(yǎng)殖提供技術(shù)支持。
試驗用仔魚為項目組自繁的同一批次能平游的5 日齡半刺厚唇魚仔魚。
試驗在福建省淡水水產(chǎn)研究所苗種繁育協(xié)作基地進行。根據(jù)育苗生產(chǎn)實際、半刺厚唇魚的攝食習性[1]和開口期仔魚口裂(0.3~0.4mm),以淡水輪蟲、水蚯蚓漿、蛋黃、魚苗開口料和蝦奶粉等5 種開口餌料。淡水輪蟲撈自生物餌料培育池,主要為臂尾輪蟲Brachionus、多肢輪蟲Polyarthra(輪蟲占90%以上)和橈足類無節(jié)幼體,經(jīng)孔徑150μm 的篩網(wǎng)過濾后投喂,日投喂量為10 只/mL 左右;水蚯蚓漿為清洗消毒后的水蚯蚓經(jīng)豆?jié){機研磨(5~6s)后,用清水經(jīng)孔徑150μm 篩網(wǎng)過濾后投喂;蛋黃經(jīng)孔徑250μm 的紗布揉洗成蛋黃水后,再用清水經(jīng)孔徑150μm 篩網(wǎng)過濾后投喂。魚苗開口料和蝦奶粉均購自某飼料生產(chǎn)企業(yè)。
試驗容器為60cm(長)×50cm(寬)×50cm(高)的玻璃缸,水深30cm。試驗用水為曝氣24h 后的地下井水。試驗期間微充氣增氧,培育水溫為23~25℃,溶解氧5mg/L 以上,至27 日齡仔魚結(jié)束,共22d。
將仔魚隨機分為輪蟲組、水蚯蚓漿組、蛋黃組、開口料組和蝦奶粉組5 個試驗組,每個缸中放魚300 尾,每個試驗組設4 個平行組,1 個平行組用于測定初次攝食率。每天7:00、12:00 和17:00 各飽食投喂1 次,具體投喂量以仔魚1h 內(nèi)攝食完為宜。投喂2h 后吸污,換水1/3~1/2,記錄各組仔魚死亡情況。
試驗前10d 每天10:00 每組隨機抽取10 尾仔魚,用Leica 雙目體視顯微鏡測量全長,之后則隔天測量,統(tǒng)計各試驗組仔魚的存活。為降低仔魚的開口率(已開口仔魚與未開口仔魚的比率)對測量初次攝食率的干擾,選擇開口第2 天的仔魚(100%開口)進行初次攝食率測定試驗,測定方法參考殷名稱(1995)[7]。每個試驗組每次隨機抽取30 尾仔魚(重復3 次),投喂開口餌料2h 后,在Leica 生物顯微鏡下逐尾檢查仔魚消化道的攝食情況。
初次攝食率(%)=100%×(消化道內(nèi)含有餌料的仔魚尾數(shù)/測定總尾數(shù));
成活率(%)=100%×(終尾數(shù)/始尾數(shù));
全長日增長(mm)=(終均全長-始均全長)/試驗天數(shù);
全長增長率(%)=100%×(終均全長-始均全長)/始均全長;
全長特定增長率(SGRTL)(%/d)=100%×[(lnLt2-lnLt1)/(t2-t1)]。
式中,Lt1和Lt2分別為t1和t2時的全長。
各組數(shù)值以平均值±標準差(X±SD)表示,用Excel 2007 和SPSS 17.0 軟件進行統(tǒng)計分析,各試驗組之間的差異顯著性采用單因素方差分析(One-way ANOVA)檢驗,組間差異顯著性采用LSD法檢驗。
不同開口餌料對半刺厚唇魚仔魚初次攝食率的影響見表1。結(jié)果表明:輪蟲組的初次攝食率最高,平均達98.89%;其次為水蚯蚓漿組,平均為95.56%;蛋黃組亦達到90.00%,三者之間差異不顯著(P>0.05);開口料組的平均初次攝食率僅52.22%,蝦奶粉組最低,平均僅21.11%,這2 個組的平均初次攝食率均顯著低于其他3 組(P<0.05),其中蝦奶粉組中的一個重復組僅有16.67%的個體有攝食,為所有試驗組中最低值。
不同開口餌料對半刺厚唇魚仔魚生長的影響結(jié)果詳見圖1 和表2。結(jié)果表明:攝食不同開口餌料的半刺厚唇魚仔魚在開口后3d 內(nèi)(7~9 日齡)全長生長差異不顯著(P>0.05);從第4d(10 日齡)起,各試驗組之間的仔魚全長開始分化,差異逐漸擴大,仔魚最終平均全長從大到小依次為:輪蟲組(18.40mm)>水蚯蚓漿組(17.07mm)>蝦奶粉組(13.15mm)>開口餌料組(12.82 mm)>蛋黃組(12.13 mm)。
表1 不同開口餌料對仔魚初次攝食率的影響Tab.1 Effects of different weaning diets on initial feeding rate of the larvae
表2 不同開口餌料對仔魚全長生長與存活的影響Tab.2 Effects of different weaning diets on total length growth and survival of the larvae
經(jīng)過22d 的培育,攝食5 種開口餌料的半刺厚唇魚仔魚的生長速率從快到慢依次為:輪蟲組>水蚯蚓組>蝦奶粉組>開口料組>蛋黃組,其中,輪蟲組生長速率最高,仔魚的全長日增長、全長增長率和特定增長率分別達0.43mm、91.46%和3.14%/d,顯著高于其他4 組(P<0.05);水蚯蚓組仔魚的全長日增長、全長增長率和特定增長率分別為0.36mm、76.66%和2.80%/d,顯著低于輪蟲組(P<0.05),但顯著高于其他3 個試驗組(P<0.05);蛋黃組仔魚生長最慢,其全長日增長、全長增長率和特定增長率分別僅為0.13mm、25.39%和1.25%/d,顯著低于其他4 個組(P<0.05)。開口料組和蝦奶粉組之間的全長增長差異不顯著(P>0.05),雖然各生長指標略好于蛋黃組,但顯著低于輪蟲組和水蚯蚓組(P<0.05)。
由表2 可知,攝食5 種開口餌料的半刺厚唇魚仔魚的平均存活率差異顯著(P <0.05),其中,輪蟲組平均存活率最高,達97.33%,其次為水蚯蚓漿組(85.44%),蝦奶粉組最低,僅40.78%。蛋黃組雖然有較高的平均初次攝食率(90.00%),但存活率僅為57.00%,其生長指標呈正相關的態(tài)勢。
在魚類的開口攝食期,給仔魚投喂營養(yǎng)全面、適口性好、可消化性好的外源餌料,保持良好的水質(zhì)及采用合適的投喂方法,對仔魚的存活和生長非常重要[9]。魚類仔魚的開口餌料根據(jù)來源分為天然餌料和人工餌料,其中天然餌料主要為小型浮游動物(輪蟲、牡蠣幼體、貽貝幼體、橈足類無節(jié)幼體、小型橈足類、小型枝角類)或底棲動物(水蚯蚓、搖蚊幼蟲)[10],而人工餌料主要有蛋黃、豆?jié){和人工配合飼料等。在苗種培育階段應根據(jù)魚的種類選擇最適開口餌料,以保證苗種的成活率[11,12]。目前的一些研究結(jié)果顯示,采用天然餌料作為開口餌料時,仔魚的生長和成活率要優(yōu)于人工餌料,如中華鱘Acipenser sinensis[13]、羅非魚Oreochromis niloticus[14]、西伯利亞鱘Acipenser baeri Brandt[11]、泥鰍Missgurnus arguillicaudatus[12]和四川裂腹魚Schizothorax kozlovi Nikolsky[15]等。本研究結(jié)果亦表明,天然餌料試驗組(淡水輪蟲組和水蚯蚓組)的半刺厚唇魚仔魚的攝食、生長與存活等指標均顯著優(yōu)于人工餌料組(蛋黃組、開口料組及蝦奶粉組)。因此,本試驗的天然餌料(淡水輪蟲和水蚯蚓)是半刺厚唇魚的適宜開口餌料,而人工餌料(蛋黃、開口料及蝦奶粉)不宜作為半刺厚唇魚的開口餌料。
有研究表明,輪蟲與仔魚的氨基酸組成比例相近,個體大小與仔魚口徑也相近,且活餌能保持水質(zhì)清新[16],這是輪蟲常被用作魚苗開口餌料的主要原因之一。同時,輪蟲具有一定的游泳能力,在水體中分布較均勻,既符合開口期仔魚的生理生態(tài)習性,又能確保仔魚的捕食成功率。在本研究的5 組開口餌料中,以淡水輪蟲組的半刺厚唇魚仔魚的生長速率最快、初次攝食率和成活率最高,說明淡水輪蟲作為半刺厚唇魚仔魚的開口餌料明顯優(yōu)于其他各試驗組。這與泥鰍[12]、暗紋東方鲀Takifugu obscurus[17]和江鱈Lota lota Linnaeus[18]的開口餌料研究結(jié)果相同。
水蚯蚓同樣具有一定的游泳能力,易于捕獲,誘食性好。本研究結(jié)果說明,經(jīng)豆?jié){機5~6s 研磨后形成以碎段為主的水蚯蚓漿,適宜作為半刺厚唇魚的開口餌料。雖然在仔魚開口初期水蚯蚓漿組的成活率比開口料組和蝦奶粉組低,這可能由于水蚯蚓漿使培育水體變渾濁而導致的;但隨著仔魚的發(fā)育,其攝食能力大幅提高,在試驗結(jié)束時水蚯蚓漿組仔魚的生長速率和成活率顯著高于除輪蟲組外的其他3 個試驗組。由此可見,水蚯蚓漿在淡水輪蟲缺乏時能在一定程度上替代作為半刺厚唇魚的開口餌料。這與姜建湖[19]等對光唇魚Acrossocheilius fasciatus 的研究結(jié)論一致。
蛋黃成本低廉、制作簡單,適口性較好,是一種常見的人工開口餌料,廣泛應用在淡水漁業(yè)育苗生產(chǎn)中。本研究中,蛋黃組的半刺厚唇魚仔魚雖然有較高的平均初次攝食率(90.00%),但存活率較低(僅為57.00%),生長指標最差。這與蘇應兵等[12]對泥鰍仔魚及李池陶等[20]對興凱湖翹嘴鲌Culter alburnus Basilewsky 仔魚的研究結(jié)果相似。分析認為,蛋黃在水中為靜止狀態(tài),長期投喂會弱化仔魚的活力和游泳能力[21];殘餌常常沉積在養(yǎng)殖水底,極易敗壞水質(zhì),導致其存活率較低;生長較差則可能是因為蛋黃的營養(yǎng)成分與半刺厚唇魚仔魚生長發(fā)育的營養(yǎng)需求不符有關。
人工微顆粒飼料最早開始用作水產(chǎn)動物早期的開口餌料是為了替代生物餌料,提高大規(guī)模培育水產(chǎn)動物苗種的效果[22]。在仔魚開口階段,餌料的適口性、可得性與營養(yǎng)水平對仔魚的生長與存活有很大影響[23]。雖然開口料和蝦奶粉等人工餌料試驗組仔魚的餌料利用率和成活率比較低,但也有一部分魚苗攝食成功并轉(zhuǎn)化為魚體自身成分,這說明以人工餌料投喂半刺厚唇魚仔魚有一定的可行性。但是,若要做到在育苗生產(chǎn)上用人工餌料替代天然生物餌料,還有很長的路要走,比如需結(jié)合仔魚的開口特征、營養(yǎng)學、消化生理學和組織結(jié)構(gòu)特點等進一步優(yōu)化餌料配方,繼續(xù)深入研究人工餌料的營養(yǎng)成分、適口性、可消化性與水中穩(wěn)定性等問題,研發(fā)針對性強的人工開口餌料,以達到提高仔魚成活率與苗種質(zhì)量、降低育苗成本,解決水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展瓶頸的目的[24,25]。