王國強(qiáng)

（南陽農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院，河南 南陽 473000）

霉菌是真菌的一種，霉菌毒素是霉菌產(chǎn)生的具有毒性的次級(jí)代謝產(chǎn)物。當(dāng)作物在田間收獲時(shí)遇到陰雨連綿天氣或者作物在儲(chǔ)存條件不當(dāng)時(shí)可產(chǎn)生大量的霉菌毒素[1]。動(dòng)物采食了被霉菌毒素污染的飼料，會(huì)導(dǎo)致畜禽生長、繁殖、免疫能力下降，甚至引發(fā)疾病和死亡。目前已發(fā)現(xiàn)有300多種霉菌代謝產(chǎn)物會(huì)對(duì)動(dòng)物和人類健康造成不同程度的影響，其中對(duì)動(dòng)物和人類影響較大的霉菌毒素有黃曲霉毒素B1（AFB1）、玉米赤霉烯酮（ZEA）、嘔吐毒素（DON）、伏馬毒素B1（FB1）、T-2毒素等。

霉菌毒素對(duì)飼料及飼料原料的污染程度會(huì)因谷物種類、氣候、地區(qū)而有所不同，為了解霉菌毒素的污染狀況，筆者聯(lián)合江西邁吉生化營養(yǎng)有限公司于2019年1—12月，共收集了來自河南、河北、江西、浙江、廣東、廣西、福建、湖北、山西、山東、湖南、上海12個(gè)省市的樣本693份，其中玉米樣本408份、飼用豆粕樣本18份、飼用麩皮樣本186份、飼料樣本81份。檢測了其中對(duì)畜禽生產(chǎn)影響較大的黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、伏馬毒素B1和T-2毒素5種霉菌毒素含量，以供業(yè)內(nèi)參考。

1 樣品概述

2019年1 —12月，江西邁吉生化營養(yǎng)有限公司共收集來自河南、河北、江西、山東、山西、福建、浙江、廣東、廣西、湖北、上海、湖南12省市的樣本693份，其中飼用玉米樣本408份、飼用豆粕樣本18份、飼用麩皮樣本186份、飼料樣本81份。

2 采樣

霉菌毒素廣義上的檢測，應(yīng)該包括取樣、制樣和分析3步。由于霉菌毒素的污染具有極不均勻性分布而且在農(nóng)產(chǎn)品中的存在是基于“μg/kg”水平，操作不當(dāng)最終樣品的檢測值是不能完全代表最初樣品的真正含量。在檢測的取樣、制樣和分析3個(gè)步驟中都不可避免地存在著誤差。其中，取樣環(huán)節(jié)產(chǎn)生的誤差最大，占總誤差的85%以上，而制樣與分析2個(gè)環(huán)節(jié)共占總誤差的15%以下。因此為了減少誤差，采用四分法取樣，將樣品磨粉，過篩網(wǎng)，然后混合，平鋪成圓形，分成4等分，取相對(duì)的2份混合，然后再平分，直到達(dá)到次分樣重量要求。

3 儀器與試劑

粉碎機(jī)、水浴恒溫振蕩器、電熱恒溫培養(yǎng)箱、電子天平、加樣槍、電腦、甲醇、試劑盒（一種霉菌毒素一個(gè)試劑盒）。

4 檢測方法

次分樣用相應(yīng)的提取液提取毒素，并采用酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)（ELISA）進(jìn)行霉菌毒素檢測分析。具體操作步驟參見霉菌毒素檢測試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)操作程序。各霉菌毒素的檢測限為：黃曲霉毒素B1：1 μg/kg、玉米赤霉烯酮：20 μg/kg、嘔吐毒素：125 μg/kg、伏馬毒素 B1：0.75 mg/kg、T-2 毒素：25 μg/kg。

國標(biāo)黃曲霉毒素B1允許量：≤10 μg/kg（引自GB 13078—2001）。

國標(biāo)玉米赤霉烯酮允許量：≤500 μg/kg（引自GB 13078.2—2006）。國標(biāo)脫氧雪腐鐮刀菌烯醇允許量：≤1 000 μg/kg（引自 GB 13078.3—2007）。國標(biāo)T-2毒素的允許量：≤1 000 μg/kg（引自 GB 21693—2008）。伏馬毒素B1：到目前為止，各國對(duì)伏馬毒素還沒有一個(gè)廣泛的限量標(biāo)準(zhǔn)。

5 檢測結(jié)果

所有408個(gè)玉米樣本、18個(gè)豆粕樣本、186個(gè)麩皮樣本、81個(gè)飼料樣本都進(jìn)行 AFB1、ZEN、DON、FB1和T-2毒素檢測。

5.1 所有樣品檢測結(jié)果

從送檢樣品的檢測結(jié)果來看，全部樣品中的AFB1、ZEN、DON、FB1和 T-2 毒素都呈現(xiàn)高陽性率，表明這5種霉菌毒素在當(dāng)前飼料及原料中的污染很普遍。693份樣品中，沒有同時(shí)低于5種霉菌毒素檢測限的樣品（所有樣品均檢測出霉菌毒素），檢測到1種霉菌毒素的樣品57份，占8.23%；檢測到2種霉菌毒素的樣品102份，占14.72%；檢測到3種及以上霉菌毒素的樣品534份占77.06%。

相對(duì)而言，飼料及原料中的AFB1、ZEN、DON、FB1和T-2毒素這5種毒素污染范圍均較廣。所有樣品霉菌毒素污染情況見表1和表2。樣品AFB1的陽性檢出率達(dá)64.5%，AFB1中值為0.9 μg/kg，低于國家規(guī)定的飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)；ZEN的陽性檢出率達(dá)55.84%，ZEN中值為34.6 μg/kg，低于國家規(guī)定的飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)；DON陽性檢出率為96.54%，DON中值為766.5 μg/kg，低于國家規(guī)定的飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)；FB1陽性檢出率為43.29%，F(xiàn)B1中值為 1 106.0 μg/kg；T-2毒素陽性檢出率為60.54%，T-2毒素中值為38.5 μg/kg，低于國家規(guī)定的飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。

表1 2019年所有樣品霉菌毒素檢測結(jié)果

表2 2019年度全國部分地區(qū)飼料及飼料原料中霉菌毒素污染陽性率

由表3可知，同比2018年、2017年全年霉菌毒素檢測結(jié)果[2-4]，2019年除AFB1和DON污染率有上升外，其余3種霉菌毒素均呈下降趨勢，但DON毒素已高達(dá)95%以上的污染比率，這進(jìn)一步證明飼料及原料霉菌毒素污染仍呈日趨嚴(yán)重走勢。

表3 2019年全年所有樣品霉菌毒素污染陽性率與2018年、2017年同比 %

5.2 玉米樣品霉菌毒素檢測結(jié)果

所檢玉米樣品霉菌毒素檢測結(jié)果見表4。由表4可見，玉米樣品AFB1的陽性檢出率為44.85%，低于2018年玉米全年平均檢出率（46.27%）；玉米樣品ZEN的陽性檢出率為40.44%，低于2018年玉米全年平均檢出率（49.59%）；玉米樣品DON的陽性檢出率為98.53%，高于2018年玉米全年平均檢出率（97.51%）；玉米樣品FB1的陽性檢出率為49.26%，低于2018年玉米全年平均檢出率（74.69%）；玉米樣品T-2毒素的陽性檢出率為53.85%，低于2018年玉米全年平均檢出率（96.27%）。說明2019年全年玉米的霉菌毒素污染率較2018年有所下降（除DON外），污染情況仍然普遍。

表4 2019年玉米樣品霉菌毒素檢測結(jié)果

5.3 豆粕樣品霉菌毒素檢測結(jié)果

所檢豆粕樣品霉菌毒素檢測結(jié)果見表5。由表5可見，豆粕樣品AFB1的陽性檢出率為83.33%，低于2018年豆粕全年平均檢出率（100%）；豆粕樣品ZEN的陽性檢出率為66.67%，低于2018年豆粕全年平均檢出率（100%）；豆粕樣品DON的陽性檢出率為50%，高于2018年豆粕全年平均檢出率（21.05%）；豆粕樣品FB1的陽性檢出率為66.67%，高于2018年豆粕全年平均檢出率（0）；豆粕樣品T-2毒素的陽性檢出率為66.67%，低于2018年豆粕全年平均檢出率（100%）。2019年豆粕的DON和FB1污染率較2018年有所上升，其污染程度仍相對(duì)較低，所有豆粕樣品陽性值均低于國家標(biāo)準(zhǔn)允許量，此結(jié)果與2016年、2017年、2018年檢測結(jié)果均一致[2-4]。

表5 2019年豆粕樣品霉菌毒素檢測結(jié)果

5.4 麩皮樣品霉菌毒素檢測結(jié)果

所檢麩皮樣品霉菌毒素檢測結(jié)果見表6。由表6可見，2019年麩皮樣品AFB1的陽性檢出率為95.16%，高于2018年麩皮全年平均檢出率（81.45%）；麩皮樣品ZEN的陽性檢出率為74.19%，低于2018年麩皮全年平均檢出率（96.77%）；麩皮樣品DON的陽性檢出率為100%，與2018年麩皮全年平均檢出率（100%）持平，陽性樣品中值 2 745.0 μg/kg低于2018 年（4 118.6 μg/kg）；麩皮樣品 FB1的陽性檢出率為17.74%，低于2018年麩皮全年平均檢出率（58.06%）；麩皮樣品T-2毒素的陽性檢出率為70%，低于2018年麩皮全年平均檢出率（100%）。說明2019年麩皮樣品霉菌毒素污染率較2018年有所下降（除AFB1和DON外），污染情況仍然普遍，尤以DON污染最為嚴(yán)重（半數(shù)以上超過國標(biāo)限量），此結(jié)果與2018年、2017年檢測結(jié)果一致。

表6 2019年麩皮樣品霉菌毒素檢測結(jié)果

5.5 飼料樣品霉菌毒素檢測結(jié)果

所檢飼料樣品霉菌毒素檢測結(jié)果見表7。由表7可見，2019年飼料樣品AFB1的陽性檢出率為88.89%，高于2018年飼料全年平均檢出率（82.86%）；飼料樣品ZEN的陽性檢出率為92.59%，低于2018年飼料全年平均檢出率（97.71%）；飼料樣品DON的陽性檢出率為92.59%，高于2018年飼料全年平均檢出率（91.43%）；飼料樣品FB1的陽性檢出率為74.07%，高于2018年全年平均檢出率（64%）；飼料樣品T-2毒素的陽性檢出率為70.37%，低于2018年全年平均檢出率（100%）。說明2019年飼料樣品污染率仍處于較高水平，與其它飼料原料相比較，飼料中霉菌毒素均呈現(xiàn)高陽性率，是污染最為嚴(yán)重的樣品類型。分析其原因，飼料由各種原料加工混合而成，且其流通環(huán)節(jié)較多，因此在其加工、運(yùn)輸中會(huì)增加霉菌毒素生長繁殖，使得飼料霉菌毒素污染明顯高于單一飼料原料。

表7 2019年飼料樣品霉菌毒素檢測結(jié)果

6 討論與結(jié)論

從檢測結(jié)果可以看出，飼料及飼用原料霉菌毒素污染狀況日益嚴(yán)重，高達(dá)100%的飼料及原料已經(jīng)受到霉菌毒素污染；且多種霉菌毒素在同一樣本中共存現(xiàn)象很普遍，91.77%的飼料及原料受到2種及以上霉菌毒素污染。綜合2017年、2018年和2019年霉菌毒素檢測結(jié)果[2-4]，嘔吐毒素仍是污染最為嚴(yán)重的毒素類型，尤其是在麩皮中的污染狀況，一直維持在高水平（污染率90%～100%，半數(shù)以上超出國標(biāo)限量值）；T-2毒素污染程度一直維持較低的水平，從未出現(xiàn)超出國標(biāo)限量的樣本；黃曲霉毒素B1的污染率較高，整體污染程度較低，有少數(shù)超出國標(biāo)限量的毒素樣本存在；玉米赤霉烯酮的污染率相對(duì)較低，主要在飼料樣本中出現(xiàn)少數(shù)超出國標(biāo)限量的樣本；伏馬毒素B1的污染率相對(duì)最低，主要在飼料和玉米及其制品中污染程度較高。

綜上所述，2019年飼料及飼料原料霉菌毒素污染狀況與前幾年相似，呈上升走勢，且多種霉菌毒素共存現(xiàn)象依然普遍。養(yǎng)殖行業(yè)應(yīng)加強(qiáng)對(duì)不同原料易感霉菌毒素的防控，以及對(duì)多種霉菌毒素協(xié)同作用的高度重視，針對(duì)實(shí)際霉菌毒素污染狀況采取相應(yīng)預(yù)防措施。