馬永珍 王芳 王艦

摘要：為了研究不同光周期處理對馬鈴薯生長的影響及光敏性，以國外2號、閩薯1號和青薯9號3個馬鈴薯品種為試驗材料，設定3種不同光周期分別為8、12、16 h/d，通過分析馬鈴薯的表型性狀（株高、莖粗、莖節(jié)數、葉片數、根長、根數、鮮質量、干質量）和生理生化指標（可溶性蛋白含量、過氧化氫酶活性、超氧化物歧化酶活性、脯氨酸含量、丙二醛含量）篩選出能夠反映馬鈴薯光周期敏感性的指標性狀，對3個馬鈴薯品種的光周期相對敏感性進行分析。結果表明：3個馬鈴薯品種表型性狀鮮質量、干質量、莖粗和根長均隨光照時數的延長而增加。方差分析表明，光周期對馬鈴薯的干質量、根數有極顯著影響（P<0.01），對鮮質量以及總根長有顯著影響（P<0.05）;品種對株高和根數有極顯著影響（P<0.01）;光周期與品種互作效應對莖粗、可溶性蛋白含量、過氧化氫酶（CAT）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量和脯氨酸（Pro）含量均有極顯著影響（P<0.01）。篩選干質量、鮮質量、根數和根長4個表型性狀作為光周期相對敏感度指標，計算得出青薯9號相比閩薯1號和國外2號為光周期不敏感材料。

關鍵詞：馬鈴薯;光周期;表型性狀;生理生化指標;敏感性分析

中圖分類號： S532.01;S532.032 ?文獻標志碼： A ?文章編號：1002-1302（2020）03-0106-06

馬鈴薯（Solanlum tuberosum L.）是茄科（Solanaceae）茄屬（Solanum）雙子葉多年生草本植物，是繼水稻、小麥、玉米第四大世界糧食作物，也可作為蔬菜，同時馬鈴薯還是化工原料和動物飼料的重要原料[1-2]。馬鈴薯喜光、喜冷涼性環(huán)境，對光周期和溫度反應的敏感性是影響其資源引進能否成功的重要環(huán)境因子[3]，研究和科學評價馬鈴薯對光周期反應的敏感性，為開展馬鈴薯光周期敏感性及其相關性狀的遺傳研究奠定基礎。

目前，相關光周期的研究表明，延長光照時間可以增加浮萍干物質的積累[4]，增加茄子幼苗的株高、莖粗和生長速率還能通過提高過氧化物酶（POD）和過氧化氫酶（CAT）活性來增強抗逆性[5]?？s短光照時間會使苦瓜POD活性和可溶性蛋白質含量升高，CAT和超氧化物歧化酶（SOD）活性降低[6]。番茄幼苗生長發(fā)育難以適應短日照光周期，對番茄生長發(fā)育處理效果最好的是1 ∶ 1紅藍光配比的 14 h/10 h處理，光同期是影響番茄小苗生長發(fā)育的主要因素[7]。菜豆短日照（SD）處理能夠促進開花，抑制營養(yǎng)生長;長日照（LD）則相反[8]。模擬8、12、16 h/d 3種光周期處理金線蓮后發(fā)現(xiàn)，短日照8 h/d處理使初花期延遲8 d，而長日照16 h/d處理使初花期提前3 d，且成花率較高[9]。不同的光周期條件下，光周期反應的敏感時期不同，如玉米自交系CML28，短日照9 h/d處理下7葉期為光周期反應敏感的時期，長日照15 h/d處理下9葉期為光周期反應敏感的時期[10]。谷子農藝性狀光周期相對敏感程度依次為穗數>抽穗期>穗長>株高>葉片數>穗粒質量，以穗數、穗長和抽穗期為光周期敏感指標[11]。對馬鈴薯的研究表明，短光周期培養(yǎng)有利于試管薯的誘導，但產生的試管薯較小，適當地延長光照時間有利于誘導較大的試管薯[12]。青薯9號壯苗培養(yǎng)30 d后，在無激素添加的MS固體培養(yǎng)基上10 h/d光照周期試管薯結薯效果最好，平均結薯1個/株，單瓶結薯率為92%[13]。在光照12 h、黑暗12 h處理下，弗烏瑞它微型薯植株徒長，凈光合速率、氣孔導度等指標升高，且塊莖干物質及淀粉含量最高，而還原糖含量最低;光照16 h、黑暗8 h處理下，產量最高，薯塊大，平均單薯質量最大[14]。

本研究模擬3種不同的光周期，觀察和分析光周期對馬鈴薯表型性狀和生理生化指標的影響，并利用方差分析3種不同光周期處理下8個表型性狀和5個生理生化指標的差異，篩選出光周期相對敏感度指標，評價3個馬鈴薯品種光周期敏感性，為開展馬鈴薯光周期敏感性及其相關性狀的遺傳研究奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗材料、儀器與試劑

1.1.1 試驗材料 試驗材料為培養(yǎng)30 d的青薯9號（Q9）、閩薯1號（M1）和國外2號（G2號）組培苗，由青海省農林科學院生物技術研究所提供。

1.1.2 試驗儀器 智能光照培養(yǎng)箱（MGC-300A），購自上海一恒科技有限公司;冷凍離心機（Bio-rad），購自上海凌儀生物科技有限公司;恒溫水浴鍋（THZ-82），購自常州國華電器有限公司;紫外可見風光光度計（T6新世紀），購自北京普析通用儀器有限責任公司;電子精密天平（PL203），購自梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司;漩渦混合器（XW-80A），購自上海精科實業(yè)有限公司;-80 ℃超低溫冰箱（Forma 900），購自賽默飛世爾（蘇州）儀器有限公司;高通量動植物組織研磨機（SPEX Geno/Grinder 2010），購自美國SPEX SamplePrep公司;豐量牌電子數顯游標卡尺（GB/T 1214.2—1996《游標類卡尺 游標卡尺》）、直尺（20 cm）等。

1.1.3 試劑 植物可溶性蛋白（Sp）定量測定試劑盒（A045-2）、過氧化氫酶（CAT）測試盒（A007-1）、超氧化物歧化酶（SOD）測試盒（A001-1）、丙二醛（MDA）測試盒（A003-1）和脯氨酸（Pro）測試盒（A107-1-1）均購自江蘇省南京建成生物工程研究所，濃硫酸由筆者所在實驗室提供。

1.2 試驗處理

試驗于2018—2019年在青海大學生物技術研究所實驗室內進行。試驗材料除頂，剪取2～3 cm帶葉莖段，接種MS培養(yǎng)基（pH值6.0），置于光照時長為8、12、16 h/d條件下，光照度為4 950 lx，溫度晝夜分別為18、16 ℃，濕度保持75%左右，每瓶接種5株，每個處理接種42瓶，處理35 d后取樣，3次重復，葉片混裝在1.5 mL離心管中用于測定不同處理下的生理生化指標。

1.3 試驗方法

（1）表型性狀測定。株高、莖粗、莖節(jié)數、葉片數、總根長和根數直接觀察測量。（2）植株干鮮質量測定。將試管苗用無菌水清洗，吸去表面的水分，稱量鮮質量;然后將植株放入錫箔紙中于105 ℃殺青40 min，85 ℃烘干至恒質量，稱干質量[15]。（3）生理生化指標測定。Sp含量測定采用考馬斯亮藍法[16];CAT活性測定采用可見光法[16];SOD活性測定采用羥胺法[16];Pro含量測定采用酸性茚三酮法[16];MDA含量測定采用硫代巴比妥酸（TBA）法[16]。所有表型性狀和生理生化指標重復測定3次，結果取平均值。

1.4 數據分析

數據處理與方差分析均采用均Excel 2007和DPS 9.50軟件進行處理。

2 結果與分析

2.1 不同光周期處理對不同馬鈴薯品種組培苗表型性狀的影響

由圖1、表1可知，不同光周期處理下不同馬鈴薯品種組培苗之間的表型性狀表現(xiàn)是不同的。G2、M1和Q9的鮮質量和干質量均隨著光照時間的延長而增加，表明延長光照時間有利于馬鈴薯組培苗的生長，同時3個馬鈴薯品種的鮮干質量均表現(xiàn)為Q9>M1>G2。G2的株高在8 h/d處理下顯著高于12、16 h/d處理（P<0.05）;M1的株高在12 h/d處理下顯著低于8、16 h/d處理（P<0.05），且在 16 h/d 處理下最大;Q9的株高在不同光周期處理下差異不顯著，但在16 h/d處理下達到最大，表明短日照處理有利于G2伸長生長，而長日照處理有利于M1和Q9的伸長生長。G2、M1、Q9的莖粗也隨著光照時間的延長而增加，表明長日照處理有利于馬鈴薯組培苗莖粗的生長，也就是說長日照處理有利于培育馬鈴薯壯苗。G2的葉片數在不同光周期處理下沒有顯著差異，但在16 h/d處理下達到最大;M1的葉片數在16 h/d處理下顯著高于8、12 h/d 處理（P<0.05）;Q9的葉片數在12 h/d處理下顯著高于8、16 h/d處理（P<0.05），表明長日照處理有利于G2和M1葉的生長，而在日中性下有利于Q9葉的生長。G2、M1和Q9莖節(jié)數均在 16 h/d 處理下達到最大，且M1在12 h/d處理下顯著低于8、16 h/d處理（P<0.05）。G2、M1和Q9的根長均隨著光照時間的增加而延長。G2和Q9的根數均在12 h/d處理下達到最大，M1的根數隨著光照時間的延長而增加。表明日中性處理有利于G2和Q9根的生長，長日照處理有利于M1根的生長。

2.2 不同光周期處理對不同馬鈴薯品種生理生化指標的影響

由表2可知，不同光周期對不同馬鈴薯品種生理生化指標的影響是不同的。馬鈴薯G2和Q9的MDA含量均在8 h/d處理下顯著高于12、16 h/d處理（P<0.05），M1在16 h/d處理下顯著高于8、12 h/d 處理（P<0.05），表明短日照處理有利于G2和Q9 MDA含量的提高，長日照有利于M1 MDA含量的提高。G2和Q9的CAT活性在 8 h/d 處理下顯著高于12、16 h/d處理（P<0.05），M1在12 h/d處理下顯著高于8、16 h/d處理（P<0.05），表明短日照處理有利于G2和Q9 CAT活性的提高，日中性處理有利于M1 CAT活性的提高。M1和Q9的Sp含量在8 h/d處理下顯著高于12、16 h/d處理（P<0.05），G2在16 h/d處理下顯著高于8、12 h/d處理（P<0.05），表明短日照處理有利于M1和Q9 Sp的合成，長日照有利于G2 Sp的合成。G2的SOD活性在12 h/d處理下顯著高于8、16 h/d處理（P<0.05），M1在8 h/d處理下顯著高于12、16 h/d處理（P<0.05），Q9則在 16 h/d 處理下顯著高于8、12 h/d處理（P<0.05），表明短日照處理有利于M1 SOD活性的提高，日中性處理有利于G2 SOD活性的提高，長日照有利于Q9 SOD活性的提高。G2和Q9的Pro含量在16 h/d處理下顯著高于8、12 h/d處理（P<0.05），M1在8 h/d處理下顯著高于12、16 h/d處理（P<0.05），表明長日照處理有利于G2和Q9 Pro含量的提高，短日照有利于M1 Pro含量的提高。

2.3 馬鈴薯表型性狀和生理生化指標方差分析

由表3可知，光周期對馬鈴薯的干質量、根數有極顯著影響（P<0.01），對鮮質量、總根長有顯著影響（P<0.05），對株高、莖節(jié)數、莖粗、葉片數、可溶性蛋白含量、CAT活性、SOD活性、MDA含量和Pro含量無顯著影響;品種對株高和根數有極顯著性影響（P<0.01），對莖節(jié)數、葉片數、Pro含量的影響顯著（P<0.05），對莖粗、總根長、鮮質量、干質量、可溶性蛋白含量、CAT活性、MDA含量和SOD活性無顯著影響;光周期與品種互作效應對莖粗、可溶性蛋白含量、CAT活性、SOD活性、MDA含量和Pro含量有極顯著影響（P<0.01），對株高、莖節(jié)數、鮮質量的影響顯著（P<0.05），對干質量、根數、總根長無顯著影響。

2.4 馬鈴薯光周期相對敏感度

光周期相對敏感度（PS）的計算公式如下：PS日中性=某日中性性狀測量值/某短日照性狀測量值;PS長日照=某長日照性狀測量值/某短日照性狀測量值。數值越大，說明該品種光周期越敏感;數值越小，說明光周期越不敏感[17]。對光周期具有顯著或極顯著差異的干質量、根數、鮮質量、根長和呈規(guī)律性增長的莖粗5個表型性狀的相對光周期敏感度之和作為評價1個品種對光周期的敏感程度，分析3個馬鈴薯品種在日中性（12 h/d）和長日照（16 h/d）條件下光周期的敏感性。在日中性（12 h/d）條件下，3種供試馬鈴薯品種光周期相對敏感度依次為G2（1.649）>M1（1.510）>Q9（1.409），在長日照條件下，光周期相對敏感度依次為M1（1.967）>G2（1.775）>Q9（1.630），日中性條件變?yōu)殚L日照條件，G2、M1和Q9的光周期相對敏感值均遞增，但是Q9在日中性和長日照下光周期相對敏感值比G2和M1都低。

3 討論與結論

光周期不僅可以影響植物的生長發(fā)育，同時也可以影響植物生理生化特性。有研究表明，延長光周期可以提高芽苗菜油葵的株高與葉面積[18]以及黃瓜幼苗的生長速率、莖粗與根冠比[19]，適當延長光周期也可使植物進行光合作用的時間延長，從而產生更多碳水化合物支持植株生長發(fā)育。本試驗中以馬鈴薯組培苗的干質量、株高、莖節(jié)數、根數、鮮質量、根長和莖粗為主要表型性狀，研究不同光周期對不同馬鈴薯品種表型性狀的影響，結果表明，隨著光照時數的增長，G2、M1和Q9的鮮質量、干質量、莖粗以及根長均有所增加，這說明光照不僅有利于植株的生長，還能促進根系發(fā)育。這與光周期影響生菜生長的研究結果[20]一致。不同光周期對不同品種生理生化特性的影響也是不一致的。本研究發(fā)現(xiàn)，在短日照處理下，G2的MDA含量及CAT活性最高，M1的可溶性蛋白含量、SOD活性、Pro含量以及Q9的MDA含量、CAT活性、可溶性蛋白含量最高;在長日照處理下，G2的可溶性蛋白含量及Pro含量、M1的MDA含量以及Q9的SOD活性、Pro含量較其他光周期處理有所增加;在日中性處理下，G2的SOD活性以及M1的CAT活性也較其他光周期處理有所增加。

對作物光周期敏感性進行研究，是開展種質的適應性評價及篩選、揭示光周期敏感性遺傳規(guī)律、光周期敏感相關性狀QTL定位及基因克隆的基礎性工作[17，21-23]。目前對馬鈴薯光周期敏感性鑒定的研究還未見報道，以往按照科研經驗和地域性劃分馬鈴薯光周期的敏感性，本研究選擇3種不同馬鈴薯品種，模擬了3種日照長度，調查研究了8個表型性狀和5個生理生化指標，研究模擬的日照長度差異大，適合研究馬鈴薯光周期敏感性。通過對干質量、根數、鮮質量和根長4個表型性狀用來評價馬鈴薯的光周期敏感性，得出青薯（Q9）相比閩薯1號（M1）和國外2號（G2）為光周期不敏感材料。

參考文獻：

[1]單建偉. 光誘導的馬鈴薯試管薯形成相關基因的轉錄組分析[D]. 武漢：華中農業(yè)大學，2013：8-9.

[2]邊 紀. 世界馬鈴薯產業(yè)現(xiàn)狀[J]. 新農村，2005（6）：22.

[3]陳亞蘭，張 健，李 定，等. 國外馬鈴薯種質資源的引進及利用[J]. 農業(yè)科技與信息，2013（16）：26-28.

[4]陳曉儀，楊千葉，趙 琦. 不同光周期對浮萍生長及淀粉積累的影響[J]. 北方園藝，2017（22）：50-54.

[5]陳 敏，李海云. 不同光周期對茄子幼苗生長的影響[J]. 北方園藝，2010（16）：53-55.

[6]陳瑤瑤，嚴良文，劉智成，等. 苗期不同光周期處理對苦瓜性別分化及相關生理特性的影響[J]. 福建農業(yè)學報，2016，31（2）：135-139.

[7]何 蔚，陳丹艷，胡曉婷，等. 不同光周期與光質配比對番茄植株生長發(fā)育的影響[J]. 西北農業(yè)學報，2018，27（4）：562-570.

[8]楊曉旭，劉大軍，閆志山，等. 不同光周期對菜豆生長的影響[J]. 黑龍江大學工程學報，2019，10（1）：80-83.

[9]許恩婷. 金線蓮開花生理與花期調控初步研究[D]. 杭州：浙江農林大學，2019：4-18.

[10]任永哲，陳彥惠，庫麗霞，等. 玉米光周期反應研究簡報[J]. 玉米科學，2005，13（4）：86-88.

[11]賈小平，李劍峰，全建章，等. 不同光周期條件下谷子農藝性狀的光周期敏感性評價[J]. 植物遺傳資源學報，2018，19（5）：919-924.

[12]馬偉清，董道峰，陳廣俠，等. 光照長度、強度及溫度對試管薯誘導的影響[J]. 中國馬鈴薯，2010，24（5）：257-262.

[13]張小川，張建虎，郭志乾，等. 光照周期對馬鈴薯試管薯誘導的影響[J]. 現(xiàn)代農業(yè)科技，2017（12）：65，68.

[14]李秋琛. 水肥供應及光照對馬鈴薯微型薯生長發(fā)育的影響[D]. 銀川：寧夏大學，2018：4-14.

[15]李鵬程，畢真真，梁文君，等. DNA甲基化參與調控馬鈴薯干旱脅迫響應的初步研究[J]. 作物學報，2019，45（9）：1-10.

[16]鄒 琦. 植物生理學實驗指導書[M]. 北京：中國農出版社，2000：127-168.

[17]賈小平，全建章，王永芳，等. 不同光周期環(huán)境對谷子農藝性狀的影響[J]. 作物學報，2019，45（7）：1119-1127.

[18]張 歡，章麗麗，李 薇，等. 不同光周期紅光對油葵芽苗菜生長和品質的影響[J]. 園藝學報，2012，39（2）：297-304.

[19]李海云，韓國徽，任秋萍，等. 不同光周期對黃瓜幼苗生長的影響[J]. 西北農業(yè)學報，2009，18（3）：201-203.

[20]嚴 妍. 溫度和光周期對水培生菜生長的影響及生長模型初探[D]. 武漢：華中農業(yè)大學，2008：7-13.

[21]夏正俊. 大豆光周期反應與生育期基因研究進展[J]. 作物學報，2013，39（4）：571-579.

[22]孫朝輝. 玉米光周期敏感相關性狀的QTL定位與分析[D]. 鄭州：河南農業(yè)大學，2009：8-13.

[23]庫麗霞，孫朝輝，王翠玲，等. 玉米光周期敏感相關性狀發(fā)育動態(tài)QTL定位[J]. 作物學報，2010，36（4）：602-611.