馬慶芳 張介馳 馬銀鵬 劉佳寧 王玉文 戴肖東韓增華 孔祥輝 張丕奇 *

（1黑龍江省科學(xué)院應(yīng)用微生物研究所，黑龍江哈爾濱150010；2黑龍江省科學(xué)院高技術(shù)研究院，黑龍江哈爾濱150010）

黑龍江省是我國農(nóng)業(yè)大省，年水稻種植面積300多萬hm2[1]，每年會產(chǎn)生大量秸稈。自2015年“秸稈禁燒令”實(shí)施以來，稻草的資源化再利用已成研究熱點(diǎn)。草菇又稱為“中國蘑菇”，味道鮮美、營養(yǎng)豐富、食藥兼用[2]。草菇是一種草腐菌。草菇菌絲分解纖維素、半纖維素等為其生長提供營養(yǎng)物質(zhì)。栽培草菇技術(shù)簡單，成本低。草菇是所有食用菌中生產(chǎn)周期最短、原料降解最為徹底的一個高溫菇種。最初草菇栽培是以稻草為基質(zhì)，產(chǎn)量較低[3]。黑龍江省科學(xué)院應(yīng)用微生物研究所自2009年起進(jìn)行草菇轉(zhuǎn)化農(nóng)業(yè)有機(jī)廢棄物的研究。稻草用強(qiáng)堿處理，殺菌殺蟲卵，可降低栽培草菇病蟲害[4]，添加發(fā)酵牛糞，能提高草菇產(chǎn)量。試驗(yàn)以生產(chǎn)區(qū)引進(jìn)18個草菇菌株為供試菌株，夏季閑置的水稻育秧棚為栽培棚，進(jìn)行草菇菌株比較試驗(yàn)。旨在篩選出適于寒區(qū)強(qiáng)堿性稻草生料栽培的草菇優(yōu)良菌株，推進(jìn)草菇栽培在寒區(qū)發(fā)展，同時加速秸稈的循環(huán)再利用。現(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果總結(jié)如下。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

引進(jìn)保存草菇菌株25株（編號1號～25號），初篩選出18株作為試驗(yàn)草菇菌株（表1）。

表1 供試草菇菌株及來源

1.2 供試培養(yǎng)基

母種培養(yǎng)基：PDA；原種配方：麥粒98%，石灰2%，培養(yǎng)基含水量55%[5]；栽培料配方：稻草80%（石灰水浸泡處理），牛糞20%，培養(yǎng)料含水量70%。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 二級種培養(yǎng)

谷物培養(yǎng)基配方為麥粒98%，石灰2%。麥粒50℃溫水浸泡12 h，沸水煮至熟透（要求麥粒內(nèi)部無白心，外部表皮不破裂），淋干水分，加入石灰，混合均勻，裝瓶滅菌。菌種瓶為500 mL小口玻璃瓶，裝料至瓶肩，121℃滅菌2.5 h。滅菌后冷卻至30℃，接種草菇試驗(yàn)菌株，每一菌株接種20瓶。暗光28℃恒溫培養(yǎng)，菌絲長滿瓶備用。

1.3.2 栽培試驗(yàn)

栽培試驗(yàn)于7月12日播種。以稻草和牛糞為栽培料，稻草與牛糞的比例為3∶1（干料）。取干燥無霉變的稻草（已暴曬2～3 d），截段30 cm左右，加入生石灰，注水浸泡3～5 d，撈出瀝水，無須滅菌直接栽培草菇。牛糞曬干粉碎，加水混拌均勻，使其含水量達(dá)60%后建堆蓋塑料膜發(fā)酵，堆溫達(dá)63℃以上后維持24 h，翻堆后繼續(xù)發(fā)酵。如此進(jìn)行3次，至牛糞呈黑褐色、沒有臭味即完成發(fā)酵，一般需10～12 d。

采用棚內(nèi)溝畦式栽培草菇[6]。鋪一層（10 cm）浸泡好的稻草料，撒一層發(fā)酵牛糞（2 cm），撒一層草菇麥粒二級菌種，如此重復(fù)一次，將培養(yǎng)料壓實(shí)，使其表面呈龜背狀，料高25 cm左右，表面再均勻撒一層草菇麥粒二級菌種。接種量為2瓶/m2。每一菌株接種6 m2，分三個重復(fù)。

觀察供試草菇菌株菌絲生長、出菇能力和子實(shí)體性狀，計(jì)算生物轉(zhuǎn)化率（%）=鮮菇質(zhì)量（鮮重）/培養(yǎng)料（干重）×100。試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS軟件處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試草菇菌株二級種（麥粒）生長情況比較

供試草菇菌株麥粒二級種接種第2天均萌發(fā)。菌絲長勢：3號、5號、7號、11號、17號、18號、23號菌株菌絲長勢最好，氣生菌絲旺盛、白色粗壯濃密，長速快，18～19 d長滿瓶；其次是2號、4號、6號、8號、10號、13號、15號、16號，長勢較好，氣生菌絲旺盛、白灰色較濃密，長速較快，20 d長滿瓶；1號、12號菌株菌絲長勢差，氣生菌絲細(xì)弱、灰白色，長速慢，23 d長滿瓶，而且12號菌株培養(yǎng)后期有粉狀物產(chǎn)生；9號菌株長勢最差，氣生菌絲數(shù)量少、灰白色細(xì)弱，長速最慢，25 d長滿瓶。厚垣孢子：2號、4號、6號、8號、11號、13號、15號、16號、17號菌株麥粒二級種產(chǎn)生厚垣孢子；1號、3號、5號、7號、9號、10號、12號、18號和23號菌株未產(chǎn)生厚垣孢子。厚垣孢子的產(chǎn)生和菌絲長勢豐滿度無密切關(guān)聯(lián)性（表2）。

表2 供試草菇菌株二級（麥粒）種生長情況比較

圖1 供試草菇菌株二級（麥粒）種生長情況比較

2.2 供試草菇菌株強(qiáng)堿性稻草生料栽培結(jié)果

2.2.1 供試草菇菌株接種栽培料菌絲生長情況比較

接種菌種萌發(fā)情況：12號菌株（銀絲草菇）接種后第3天開始萌發(fā)吃料，其余草菇菌株接種后第2天開始萌發(fā)吃料。接種后5 d，18個草菇菌株吃料情況差異很大，依據(jù)菌絲生長差異可將其分為四組，第一組：長勢最好，菌絲呈絮狀、潔白粗壯，前端舒展，長速快，包括2號、5號、8號、11號、17號和23號6個菌株；第二組：長勢較好，菌絲呈絨毛狀、白色濃密，前端舒展，長速較快，包括3號、6號、13號、15號和18號5個草菇菌株；第三組：長勢較差，菌絲呈絨毛狀，灰白色細(xì)弱稀疏，前端舒展，長速慢，包括1號、4號、7號、9號、10號和16號6個草菇菌株；第四組：12號菌株長勢最差，菌絲呈絨毛狀、白色細(xì)弱稀疏，前端不舒展，長速最慢（表3）。

表3 供試草菇菌株播種后菌絲生長情況比較

表4 供試草菇菌株出菇能力比較（8月30日結(jié)束采收）

2.2.2 供試草菇菌株出菇能力

試驗(yàn)菌絲培養(yǎng)后期遇連續(xù)陰雨天氣，溫度記錄顯示清晨最低料溫只有22℃。遇低溫后，18個草菇菌株出菇能力差異較大：1號、8號、9號和12號菌株培養(yǎng)后期菌絲死亡退菌，4號、7號、10號和16號菌株，接種后吃料正常，遇低溫后菌絲未死亡，但不出菇，說明這8個菌株耐低溫能力差，不宜在寒區(qū)栽培；15號菌株能出菇，只采收兩潮，后期因低溫幼菇萎縮死亡，產(chǎn)量低，需要進(jìn)一步馴化；其他菌株遇低溫后可正常出菇，采收3～4潮菇（表4）。

播種后6 d現(xiàn)原基有15號和23號菌株，23號菌株子實(shí)體長速快，播種后11 d采收第1潮菇，15號菌株播種后12 d采收第1潮菇；播種后7 d現(xiàn)原基有5號和18號菌株，這2個菌株均在接種后12 d采收第1潮菇；播種后8 d現(xiàn)原基有2號、6號、11號和13號菌株，且均在接種后13 d采收第1潮菇；播種后9 d現(xiàn)原基有3號和17號菌株，且在接種后14 d采收第1潮菇。

10個出菇的草菇菌株生物轉(zhuǎn)化率由高到低可分為7組，第1組是23號菌株，產(chǎn)量最高，生物轉(zhuǎn)化率為27.73%；第2組是2號、11號菌株，生物轉(zhuǎn)化率分別為24.37%、24.72%，與23號菌株相比差異顯著；第3組是5號菌株，生物轉(zhuǎn)化率為23.33%，與23號菌株相比差異顯著；第4組是17號、18號菌株，生物轉(zhuǎn)化率分別為20.45%、20.65%；第5組是6號、13號菌株，生物轉(zhuǎn)化率分別為19.98%、19.76%；第6組是3號菌株，產(chǎn)量較低，生物轉(zhuǎn)化率為16.20%；第7組是15號菌株，產(chǎn)量最低，生物轉(zhuǎn)化率僅為14.34%。由此可見，23號、2號、11號和5號菌株產(chǎn)量較高，可作寒區(qū)栽培草菇菌株。

2.2.3 供試草菇菌株子實(shí)體性狀比較

10個出菇的草菇菌株，其子實(shí)體性狀可分為4類（表5）。第1類是鼠黑色品系：出菇密集、簇生，菇體大，外包被厚、不易開傘，宜鮮銷，包括2號、3號、5號、11號、17號和23號菌株。第2類是麻褐色品系：18號菌株。其出菇密度大，簇生，多數(shù)集中在畦床邊緣。菇體大小中等，外包被中等，不易開傘，顏色淺，可鮮銷，亦可凍干或加工成罐頭。要求高濕。第3類是鼠灰色品系：出菇密，簇生，多數(shù)集中在畦床邊緣。菇體小，外包被薄，易開傘，顏色淺，可凍干或加工成罐頭，包括6號和13號菌株。要求高濕。第4類是灰白色品系：15號菌株。出菇分散，數(shù)量少，菇體大，外包被較薄，易開傘，不建議推廣。

圖2 草菇23號出菇

圖3 草菇5號出菇

圖4 草菇2號出菇

圖5 草菇23號小面積中試出菇

表5 供試草菇菌株子實(shí)體性狀比較

3 小結(jié)

草菇是高溫型食用菌，其生長發(fā)育需高溫高濕環(huán)境，且對環(huán)境的變化尤其是溫度的變化非常敏感，栽培期都要控制溫度28℃以上。另外，以秸稈為基質(zhì)栽培草菇還存在生物轉(zhuǎn)化率較低的問題，生物轉(zhuǎn)化率在20%以下[3-4，8-9]。篩選出適于強(qiáng)堿性稻草生料栽培的耐低溫草菇菌株，是在寒區(qū)推廣稻草栽培草菇能否成功的關(guān)鍵。

研究以強(qiáng)堿性稻草生料添加發(fā)酵牛糞栽培草菇，比較分析供試草菇菌株菌絲生長、出菇能力和子實(shí)體性狀，初步篩選出可在寒區(qū)推廣的草菇菌株：2號（草菇1172）、5號（草菇V97）、11號（草菇9715）和23號（草菇V35）菌株，子實(shí)體鼠黑色，生物轉(zhuǎn)化率高于23.33%；6號（草菇V106）、13號（草菇V9）和18號（大草32）菌株，子實(shí)體顏色淺，做凍干品或加工成罐頭商品性好。