(沈陽藥科大學(xué)藥學(xué)院，遼寧 沈陽 110015)

替米沙坦片為非肽類血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑[1]，是一種長(zhǎng)效、高效、低毒的新型抗高血壓藥，最早由德國(guó)勃林格殷格翰公司開發(fā)并上市，商品名美卡素。替米沙坦片能夠較好地治療老年原發(fā)性高血壓[2]，患者通過口服替米沙坦片可以得到理想的治療效果。替米沙坦對(duì)血管緊張素Ⅰ受體位點(diǎn)無任何部位激動(dòng)劑效應(yīng)，選擇性與血管緊張素Ⅱ受體結(jié)合，因該部位結(jié)合牢固而作用持久。替米沙坦降壓機(jī)理對(duì)人體血漿腎素水平、鈣離子通道均無影響，不抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶Ⅱ，降低了因緩激肽作用增強(qiáng)而引起的不良反應(yīng)發(fā)生率。高血壓患者應(yīng)用替米沙坦治療期間,晚間給藥可最大化實(shí)現(xiàn)降壓效果,血壓控制良好,可有效避免發(fā)生非杓型高血壓,醫(yī)學(xué)價(jià)值高[3]。此外在服用替米沙坦片治療高血壓過程中，如中斷或漏服替米沙坦片數(shù)天后血壓會(huì)逐漸恢復(fù)到治療前水平，而不會(huì)出現(xiàn)迅速的反彈性高血壓，可有效防止血壓劇烈波動(dòng)的出現(xiàn)。生產(chǎn)工藝對(duì)替米沙坦片體內(nèi)外的溶出影響較為關(guān)鍵，特別是替米沙坦鈉鹽的制備工藝將影響替米沙坦溶出和離子化速度，對(duì)藥物的藥動(dòng)學(xué)產(chǎn)生影響。本實(shí)驗(yàn)通過研究不同的替米沙坦鈉鹽制備方法，并通過紫外分光光度法[4]檢測(cè)不同溶劑、不同干燥工藝制備的替米沙坦片與參比制劑的溶出曲線，優(yōu)化替米沙坦鈉鹽的制備工藝，同時(shí)使替米沙坦鈉鹽的制備工藝更高效、更環(huán)保。

1 儀器與試藥

實(shí)驗(yàn)儀器：UV-2501 紫外分光光度計(jì)(日本島津制作所)、 CP114型電子天平[奧豪斯儀器(上海)有限公司]、 RC806D 型溶出試驗(yàn)儀(天大天發(fā)科技有限公司)、MINI流化制粒包衣機(jī)(深圳市信宜特科技有限公司)、真空干燥箱(FZG15，常州干燥設(shè)備有限公司)、GZL100-25L干法制粒機(jī)(石家莊科源機(jī)械設(shè)備有限公司)、 ZPT-15壓片機(jī)(遼寧天億機(jī)械設(shè)備有限公司)。

實(shí)驗(yàn)試劑：替米沙坦(江蘇中邦制藥有限公司，批號(hào)D10011-C20180701)、氫氧化鈉(成都華邑藥用輔料制造有限責(zé)任公司，批號(hào)20180203)、葡甲胺(Merk KgaA，批號(hào)6143K028)、聚維酮K30(湖州展望藥業(yè)有限公司，批號(hào)20181010 )、山梨醇 (默克，批號(hào)MP18023683 )、硬脂酸鎂(湖州展望藥業(yè)有限公司，批號(hào)20181205)、 無水乙醇(安徽安特食品股份有限公司，批號(hào)1811123203 )、參比制劑替米沙坦片(商品名美卡素，規(guī)格80 mg，批號(hào) 601849)，分析試劑鹽酸、冰醋酸、醋酸鈉、磷酸二氫鉀、氫氧化鈉均為國(guó)產(chǎn)分析純。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 替米沙坦鈉鹽的制備

根據(jù)阿根廷藥監(jiān)局公布替米沙坦氨氯地平片中替米沙坦部分處方比例設(shè)定替米沙坦鈉鹽實(shí)驗(yàn)處方，具體處方見表1。稱取處方量的溶劑加熱到(70±2) ℃，然后加入氫氧化鈉并持續(xù)攪拌，待氫氧化鈉全部溶解后加入葡甲胺，如處方中需加入聚維酮K30則待葡甲胺完全溶解后加入聚維酮K30 ；待以上物料全部溶解后再加入替米沙坦，并持續(xù)攪拌直到替米沙坦全部溶解。

表1 3 000片替米沙坦片(規(guī)格80 mg)的成鹽工藝處方

2.2 真空干燥箱干燥工藝

將上述處方1與處方2配制的溶液放入不銹鋼干燥盒中，設(shè)定干燥溫度(65±5)℃，真空壓力(-0.08±0.01) MPa，進(jìn)行干燥24 h，控制殘留溶劑在0.5%以內(nèi)。將上述干燥后檢測(cè)殘留溶劑合格的替米沙坦鈉鹽先進(jìn)行粉碎，再過60目篩備用。

2.3 流化床干燥工藝

將表1中處方3、處方4、處方5配制的溶液持續(xù)保溫70 ℃，通過蠕動(dòng)泵將上述溶液逐批泵入流化床頂噴噴槍中，設(shè)定流化床物料溫度(80±10) ℃，風(fēng)機(jī)頻率2 500～3 500 r/min，噴槍壓力(0.2±0.05) MPa，霧化壓力(0.3±0.1) MPa，蠕動(dòng)泵轉(zhuǎn)速10～20 Hz。噴霧完成后，流化床中物料的殘留溶劑在0.5%即為合格。將上述干燥合格的替米沙坦鈉鹽分別過60目篩，如不能通過60目篩的替米沙坦鈉鹽需經(jīng)粉碎后再過60目篩，備用。

2.4 干法制粒

將表1中各批過60目篩后的替米沙坦鈉鹽與外加輔料山梨醇、聚維酮K30、硬脂酸鎂按照表2設(shè)定處方預(yù)混15 min后，經(jīng)干法制粒機(jī)制粒，控制20～60目的顆粒率在70%以上，控制干法制粒機(jī)參數(shù)如下：水平送料速度70 r/min；主壓力15 MPa ；主輪轉(zhuǎn)速14 r/min。

表2 2 500片替米沙坦片(規(guī)格80 mg)的預(yù)混工藝處方 g

2.5 壓片

將上述顆粒每批分別加入外加硬脂酸鎂 12.5 g混合5 min，按照理論片重483 mg/片進(jìn)行壓片，控制片重差異±5%，壓制片硬度(20±3) kgf；將上述壓制合格的片芯放置在雙層鍍鋁膜袋內(nèi)密封保存，防潮、備用。

3 結(jié)果

3.1 替米沙坦鈉鹽晶型的檢測(cè)

替米沙坦、氫氧化鈉、葡甲胺、聚維酮K30共溶，通過流化床噴霧干燥，獲得的替米沙坦鈉鹽晶型的X射線衍射圖譜如圖1；替米沙坦、氫氧化鈉、葡甲胺共溶，通過流化床噴霧干燥，獲得的替米沙坦鈉鹽晶型的X射線衍射圖譜如圖2。從兩種替米沙坦鈉粉末的X射線衍射圖譜可以看出，粘合劑聚維酮K30在成鹽過程中的加入與否對(duì)替米沙坦鈉鹽的晶型沒有影響，均為無定型結(jié)晶。但在生產(chǎn)過程中，如將聚維酮K30加入到替米沙坦成鹽的處方中，無論是用乙醇做溶劑的真空箱干燥還是用純化水做溶劑的頂噴干燥工藝，聚維酮K30的加入均使替米沙坦成鹽的干燥時(shí)間延長(zhǎng)。

圖1 含聚維酮K30的替米沙坦鈉鹽的X射線衍射圖譜

圖2 不含聚維酮K30的替米沙坦鈉鹽的X射線衍射圖譜

3.2 紫外分光光度法的建立

3.2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

對(duì)照品儲(chǔ)備液的配制：取替米沙坦約10 mg，精密稱定，置于100 mL的容量瓶中，加0.005 mol/L氫氧化鈉甲醇溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL,置50 mL容量瓶中，用溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻得不同溶出介質(zhì)替米沙坦?jié)舛葹?.010 mg/mL的對(duì)照品溶液。

pH1.2鹽酸溶液的配制：精密量取鹽酸7.65 mL，加水至1 000 mL，混勻，即得。

pH4.5醋酸鹽溶液的配制：精密稱取醋酸鈉2.99 g，加2 mol/L醋酸溶液14.0 mL，加水至1 000 mL，混勻，即得。

pH6.8磷酸鹽溶液的配制：取0.2 mol/L磷酸二氫鉀溶液250 mL,加0.2 mol/L氫氧化鈉溶液112.0 mL混合，用水稀釋至1 000 mL，混勻，即得。

測(cè)定波長(zhǎng)的選擇：取上述pH1.2、pH4.5、pH6.8和水4種介質(zhì)的替米沙坦對(duì)照品溶液,按照紫外分光光度法(UV)，在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，確定替米沙坦在pH1.2、 pH4.5、 pH6.8和水4種介質(zhì)中的最大吸收波長(zhǎng)。最終確定其在pH1.2、pH4.5、pH6.8和水4種介質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)分別為290.0 nm、 295.0 nm、 295.0 nm和295.0 nm。

3.2.2 線性關(guān)系考查

取替米沙坦對(duì)照品10 mg，精密稱定，置100 mL容量瓶中，加0.005 mol/L氫氧化鈉甲醇溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1、2、4、6、8、10、12 mL，置100 mL容量瓶中，分別用不同的溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，即得替米沙坦?jié)舛确謩e為1、2、4、6、8、10、12 μg/mL的系列對(duì)照品溶液。以替米沙坦的吸光度(y)對(duì)其濃度(x ，μg/mL)進(jìn)行回歸，得各溶出介質(zhì)中線性回歸方程(表3)，結(jié)果表明，替米沙坦在1.0 ～ 12.0 μg/mL 濃度內(nèi)線性關(guān)系良好。

表3 替米沙坦在各溶出介質(zhì)中的線性回歸方程

3.3 替米沙坦片溶出曲線的檢測(cè)

根據(jù)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局(CFDA)2016年第61號(hào)文《普通口服固體制劑溶出曲線測(cè)定與比較指導(dǎo)原則》 的規(guī)定進(jìn)行pH1.2、 pH4.5、 pH6.8和水4種溶出介質(zhì)的配制，選取介質(zhì)體積900 mL、槳法75 r/min進(jìn)行溶出曲線檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果見表4—7。采用非模型依賴法中的相似因子(f2)法進(jìn)行不同溶出介質(zhì)中自制制劑平均溶出量與參比制劑(批號(hào)601849)的平均溶出量進(jìn)行比較。

f2計(jì)算公式：

Rt為t時(shí)間參比樣品平均溶出量；

Tt為t時(shí)間受試樣品平均溶出量；

n為取樣時(shí)間點(diǎn)的個(gè)數(shù)。

表4 自制制劑與參比制劑在pH1.2溶出介質(zhì)中累積溶出量(%)及f2對(duì)比

表5 自制制劑與參比制劑在pH4.5溶出介質(zhì)中累積溶出量(%)及f2對(duì)比

表6 自制制劑與參比制劑在pH6.8溶出介質(zhì)中累積溶出量(%)及f2對(duì)比

表7 自制制劑與參比制劑在水中累積溶出量(%)及f2對(duì)比

根據(jù)相似因子(f2)法對(duì)溶出曲線相似性判斷標(biāo)準(zhǔn)，當(dāng)f2<50時(shí)判定兩條溶出曲線不相似；當(dāng)f2≥50時(shí)可以判定兩條溶出曲線相似，而且f2數(shù)值越大，兩條溶出曲線的相似度越高。根據(jù)這一原則，可以判定按照處方1、處方2生產(chǎn)的替米沙坦鈉鹽制備的替米沙坦片與參比制劑溶出曲線相似度不高，特別是按照處方2制備的替米沙坦片在pH6.8和水溶出介質(zhì)中的溶出曲線與參比制劑的溶出曲線不相似。相比較而言，同處方用流化床噴霧干燥獲得的替米沙坦鈉鹽所制備的替米沙坦片的溶出曲線與參比制劑溶出曲線相似，而且用水或乙醇作溶劑制備替米沙坦鈉鹽對(duì)制劑的溶出曲線影響不大，聚維酮K30與替米沙坦、氫氧化鈉、葡甲胺共溶成鹽對(duì)提高溶出曲線相似性有一定促進(jìn)作用。

4 討論

替米沙坦的成鹽工藝路線對(duì)替米沙坦片的溶出曲線有一定影響，通過研究不同成鹽處方和工藝路線對(duì)指導(dǎo)替米沙坦片的一致性評(píng)價(jià)工作具有重要的技術(shù)指導(dǎo)意義。首先在成鹽處方中是否加入粘合劑聚維酮K30，從替米沙坦鈉粉末的X射線衍射圖譜可以看出干燥后的替米沙坦鈉均可形成無定型結(jié)晶，因此替米沙坦成鹽處方中是否增加粘合劑聚維酮K30對(duì)替米沙坦鈉晶型沒有影響，從而避免了替米沙坦鈉鹽晶型對(duì)制劑的影響[5]。其次，無水乙醇和純化水均可做為替米沙坦成鹽處方的溶劑，所不同的是無水乙醇做溶劑可以選擇采用真空干燥箱和流化床作為干燥設(shè)備，而用純化水作為溶劑則需要流化床作為干燥設(shè)備，而選用真空干燥箱作為干燥設(shè)備則生產(chǎn)周期長(zhǎng)、生產(chǎn)效率低。此外，作為工藝技術(shù)開發(fā)人員選擇采用無水乙醇作為溶劑則需要考慮最終替米沙坦鈉鹽中有機(jī)溶劑殘留的問題和成鹽過程中乙醇的回收問題，特別是選擇采用流化床干燥替米沙坦鈉鹽，無水乙醇的回收問題將是較為麻煩的問題。最后，從不同工藝生產(chǎn)的替米沙坦片的溶出曲線可以看出，在不同的溶出介質(zhì)中采用真空干燥箱生產(chǎn)的替米沙坦鈉鹽所制備的制劑溶出速度要略慢于流化床干燥工藝生產(chǎn)的替米沙坦鈉鹽所制備的制劑。這一點(diǎn)與替米沙坦鈉鹽在流化床中干燥環(huán)境的風(fēng)系統(tǒng)控制有關(guān)，流化床中的氣流流動(dòng)導(dǎo)致替米沙坦鈉鹽干燥的微粒較為疏松，相對(duì)比表面積更大，因此在同樣的制劑處方中與溶出介質(zhì)的接觸面積也就更大，相同時(shí)間里替米沙坦片的溶出量也就越多。通過對(duì)比參比制劑與不同干燥工藝生產(chǎn)的替米沙坦片的溶出曲線可以發(fā)現(xiàn)，流化床干燥的替米沙坦鈉鹽所制備的替米沙坦片與參比制劑的溶出曲線較為一致。因此，替米沙坦鈉鹽最佳的生產(chǎn)工藝路線是以純化水為溶劑，采用流化床噴霧干燥工藝作為干燥方式是最為合理的工藝路線。