董天津 譚華清 修青永

支氣管哮喘又簡稱為哮喘，是由多種細胞及細胞因子參與的氣道慢性炎癥性疾病。研究顯示，多種炎癥趨化因子可參與嗜酸性粒細胞趨化和募集，在哮喘的發(fā)生中發(fā)揮重要作用[1]。CC趨化因子(CC cehemokine，CCL)3即巨噬細胞炎性蛋白-1α(macrophage inflammatory protein-1αMIP-1α)、CCL5即正常T細胞表達和分泌因子(regulated upon activation normal T cell expressed and secreted factor，RANTES)是重要的趨化因子，參與介導嗜酸性粒細胞、T淋巴細胞和肥大細胞轉移，促使炎癥產(chǎn)生，與哮喘患者的呼吸道炎癥反應有關[2-3]。呼出氣一氧化氮(fractional exhaled nitric oxide，F(xiàn)eNO)是可反映氣道炎癥的重要生物指標，常用于臨床協(xié)助評估哮喘患兒氣道炎癥，對治療具有一定指導意義[4]。肺功能測定可對哮喘患者氣道阻塞可逆性及支氣管痙攣情況進行評估[5]。本研究通過檢測哮喘患兒血清CCL3 、CCL5水平，并分析其與FeNO及肺功能的關系，旨在為進一步研究哮喘的發(fā)病機制及治療積累臨床數(shù)據(jù)。

資料與方法

一、臨床資料

選取2015年3月-2018年3月本院門診就診的急性發(fā)作期、緩解期哮喘患兒242例為研究對象，其中急性發(fā)作期患者129例，男63例，女66例，年齡4～13歲，平均年齡(8.29±3.74)歲；緩解期患者113例，男56例，女57例，年齡5～12例，平均年齡(8.47±3.68)歲。急性發(fā)作期評估標準[6]：患者有突發(fā)的氣促、喘息、咳嗽、胸悶等癥狀，常有呼吸困難、肺部哮鳴音，呼氣流量降低；緩解期評估標準[6]：患者經(jīng)治療后氣促、喘息、咳嗽、胸悶等癥狀消失，患者呼氣相延長、肺部哮鳴音等體征消失，肺功能恢復到PEF≥80%預計值，且持續(xù)3個月以上。

納入標準：①患者診斷標準符合《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南》(2008年版)[6]；②年齡4～13歲；③患者臨床資料完整，配合治療；排除標準：①具有哮喘家族史患者；②免疫系統(tǒng)疾病患者；③血液系統(tǒng)疾病患者；④肺部感染患者。2組患者年齡、性別差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準；所有受試者及家屬知情同意并自愿簽署知情同意書。

二、方法

1 樣本采集 所有受試者均采取肘靜脈血5 mL，室溫下放置30 min，1000轉/min離心15 min，分離血清于無菌EP管內(nèi)，-20℃。

2 血清指標檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法檢測研究者血清CCL3、CCL5水平，為保證檢測結果精確性，所有操作均由同一工作人員在同一臺儀器上操作完成，所有樣本均三孔檢測，檢測結果取平均值。

3 FeNO測定 利用呼出氣一氧化氮測定儀按照歐洲呼吸學會與美國胸科學會2005年聯(lián)合制定的操作標準檢測FeNO[7]。

利用肺功能檢測儀檢測受試者第一秒用力呼氣容積(forced expiratory volume in one second，F(xiàn)EV1)：最大吸氣至肺總量位后，開始呼氣第一秒內(nèi)的呼出氣量，即容積測量；最大呼氣流量(peak expiratory flow，PEF)：受試者用力肺活量測定過程中，呼氣流速最快時的瞬間流速，可反映氣道有無阻塞。

三、統(tǒng)計學分析

結 果

一、2組一般資料比較

2組年齡、性別、病程、BMI指數(shù)差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 2組一般資料比較

二、2組血清CCL3、CCL5水平比較

與緩解組比較，發(fā)作組哮喘患兒血清CCL3、CCL5水平顯著升高且差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組血清CCL3 、CCL5水平比較

三、2組FeNO及肺功能比較

與緩解組比較，發(fā)作組哮喘患兒FeNO顯著升高(P<0.05)，F(xiàn)EV1、PEF顯著降低且差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 2組FeNO及肺功能比較

四、哮喘患兒血清CCL3 、CCL5水平與FeNO及FEV1、PEF相關性分析

哮喘患兒血清CCL3與FeNO正相關(r=0.496，P<0.05)，與FEV1、PEF負相關(r=-0.433，r=-0.417；P均<0.05)；哮喘患兒血清CCL5與FeNO正相關(r=0.573，P<0.05)，與FEV1、PEF負相關(r=-0.596，r=-0.504；P均<0.05)。見圖1。

圖1 哮喘患兒血清CCL3 、CCL5水平與FeNO指標及FEV1、PEF相關性分析

討 論

哮喘是一種可逆性氣流受限性疾病，主要是由各種因素導致體內(nèi)炎癥因子激活后，多種細胞及細胞組分參與的慢性特異性炎癥性疾病。近年來，其發(fā)病率不斷升高，發(fā)病患兒多表現(xiàn)為呼吸困難、反復發(fā)作性喘息。該病發(fā)病因素較為復雜，有研究顯示，哮喘患兒血清IgE水平較健康兒童顯著升高，患兒發(fā)病可能與炎癥反應及特異性抗原吸入有關[8]。

FeNO在肺部炎癥性疾病患者的病理生理過程中發(fā)揮重要作用，具有擴張血管、舒張血管的作用。臨床研究中常將FeNO作為哮喘氣道炎癥檢測的標志物。研究顯示，F(xiàn)eNO主要是由嗜酸性粒細胞分泌產(chǎn)生，當炎癥刺激氣道產(chǎn)生炎癥反應時，F(xiàn)eNO水平增高[15]。另有研究表明，F(xiàn)eNO與氣道嗜酸性粒細胞炎性反應有顯著相關性[16]。哮喘患兒臨床癥狀嚴重程度與氣道炎癥反應程度無明顯相關性，臨床癥狀并不能全面反映患兒氣道的炎癥情況，因此患兒肺功能檢查對于肺和氣道病變、疾病嚴重程度具有重要作用。本研究檢測結果顯示，與緩解組比較，發(fā)作組哮喘患兒FeNO顯著升高，F(xiàn)EV1、PEF顯著降低，與張惠琴等[4]研究結果一致，進一步提示FeNO及肺功能指標FEV1、PEF可能與疾病發(fā)生、發(fā)展有關。Pearson分析結果顯示，哮喘患兒血清CCL3、CCL5與FeNO正相關，與FEV1、PEF負相關，推測可能由于趨化因子水平升高，導致氣道炎癥加重，呼吸阻塞情況加重，但具體機制需進一步研究。

綜上所述，急性發(fā)作期哮喘患兒血清CCL3、CCL5、FeNO水平較緩解組兒童升高，F(xiàn)EV1、PEF降低，哮喘患兒血清CCL3、CCL5與FeNO正相關，與FEV1、PEF負相關。本研究不足之處：本研究僅從臨床水平對哮喘患兒血清CCL3、CCL5水平與FeNO及肺功能的關系進行了分析，其具體機制尚需進一步深入研究。