高 揚(yáng)， 于 亮， 付 悅， 王 璐， 郭春杰

((北京體育大學(xué)運(yùn)動(dòng)人體科學(xué)學(xué)院， 北京100084)

近年來(lái)，肥胖群體罹患心腦血管、高血壓和糖尿病等疾病的風(fēng)險(xiǎn)逐年增加，已成為重要的社會(huì)問(wèn)題。有氧運(yùn)動(dòng)作為“減脂控重”的常規(guī)方法，雖然可以降低體重和體脂含量，改善血脂水平，降低患病風(fēng)險(xiǎn)，但對(duì)于久坐不動(dòng)、心肺功能較差、體重負(fù)荷較大或下肢損傷等特殊人群并不適用。因此，上述人群迫切需要一種安全、有效的調(diào)控脂代謝的方法以滿足其減脂需求。而針刺作為一種傳統(tǒng)的干預(yù)手段，既能誘導(dǎo)瘦素(leptin)等激素的產(chǎn)生調(diào)控體重[1]，又能降低白色脂肪細(xì)胞的炎性反應(yīng)，增加棕色脂肪的含量，起到減脂的作用[1]。但針刺是否通過(guò)白色脂肪“棕色化”達(dá)到減脂效果，以及相應(yīng)機(jī)制尚不明確。

Irisin是一種由含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5重組蛋白(fibronectin type Ⅲ domain containing 5, FNDC5)蛋白酶水解產(chǎn)生的新型肌動(dòng)蛋白，可“crosstalk”多個(gè)組織器官發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，Irisin受有氧運(yùn)動(dòng)等能量狀態(tài)改變條件的影響，當(dāng)AMP/ATP的比值升高時(shí)，腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5'-monophosphate activated protein kinase, AMPK)被激活，可以磷酸化激活下游靶分子，促進(jìn)骨骼肌中過(guò)氧化物酶體增殖激活受體γ輔激活因子1α(peroxisome proliferator activated receptor γ coactivator-1α, PGC-1α)和FNDC5/Irisin的表達(dá)增加，Irisin釋放進(jìn)入血液循環(huán)，上調(diào)脂肪組織中解偶聯(lián)蛋白(uncoupling protein 1, UCP1)的表達(dá)，實(shí)現(xiàn)白色脂肪細(xì)胞向米色樣脂肪細(xì)胞或者棕色樣脂肪細(xì)胞轉(zhuǎn)變[2]。有文獻(xiàn)報(bào)道，針刺不僅能夠激活A(yù)MPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑改善腦能量代謝狀態(tài)[3]，還能增加骨骼肌AMPK-mRNA表達(dá)和AMPK蛋白活性[4]，促進(jìn)脂肪分解，改善肥胖大鼠脂質(zhì)代謝[5]?？紤]到共同涉及的能量狀態(tài)改變問(wèn)題，針刺促進(jìn)Irisin水平表達(dá)的作用及潛在機(jī)制可能與有氧運(yùn)動(dòng)近似。本研究通過(guò)建立電針干預(yù)模型，以有氧運(yùn)動(dòng)作為參照，觀察4周干預(yù)過(guò)程中大鼠體重、體脂以及脂肪組織形態(tài)的變化，檢測(cè)血清Irisin水平及腓腸肌和脂肪組織中蛋白表達(dá)情況，明確白色脂肪“棕色化”的效果及AMPKα-PGC-1α-FNDC5-Irisin-UCP1信號(hào)通路的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取24只8周齡SPF級(jí)雄性SD健康大鼠，體重在290 g～310 g之間(購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，許可證號(hào)SCXK(京)2019-0009)，在溫度20℃～24℃，濕度30%～50%的環(huán)境下進(jìn)行單籠飼養(yǎng)，每日給予普通膳食飼料，自由攝食和飲水，晝夜循環(huán)照射12 h。正式實(shí)驗(yàn)前預(yù)適應(yīng)3 d，隨后將大鼠隨機(jī)分為安靜對(duì)照組(Sed組)、有氧運(yùn)動(dòng)組(Exe組)、電針組(ElA組)，8只/組。

1.2 模型建立

1.2.1 運(yùn)動(dòng)模型 適應(yīng)性跑臺(tái)訓(xùn)練3 d后，根據(jù)Bedford TG[6]等的研究，采用65%最大攝氧量強(qiáng)度的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)，每天以20 m/min的速度進(jìn)行訓(xùn)練，1 h/d，6天/周，實(shí)驗(yàn)進(jìn)行4周。

1.2.2 電針模型 將大鼠固定，電針刺激兩側(cè)腓骨小頭下5 mm(足三里)以及腹正中線，劍突和恥骨聯(lián)合上緣連線的上2/3與下1/3的交界處，旁開(kāi)5 mm(天樞)的位置[7]，32號(hào)1寸毫針刺入3 mm～5 mm，連接電子脈沖針療儀，頻率2/10 Hz，強(qiáng)度1 mA，留針20 min/d，6天/周，實(shí)驗(yàn)進(jìn)行4周(圖1)。

Fig. 1 The position of acupuncture

1.3 樣品的采集與處理

在最后一次跑臺(tái)訓(xùn)練后，禁食12 h，采用腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉大鼠，劑量為50 mg/kg，待大鼠無(wú)自主活動(dòng)時(shí)，心尖和腹主動(dòng)脈取血處死，分離雙側(cè)腓腸肌、腎周和附睪周?chē)咨窘M織并稱濕重，用錫紙包好并標(biāo)記，放入液氮桶中保存，用于Western blot檢測(cè)。

分離肩胛周?chē)窘M織后，切割黃豆粒大小，進(jìn)行OCT包埋，用于脂肪組織HE染色；剩下的肩胛脂肪用錫紙包好，放入液氮桶中保存，用于Western blot檢測(cè)。當(dāng)日取材結(jié)束后，將所有組織移至-80℃的冰箱中貯存。

靜置心尖血1 h后，預(yù)冷離心機(jī)至4℃，將試管對(duì)稱放入離心機(jī)中，12 000 r/min離心5 min，吸出血清移入新的EP管，標(biāo)記并移至-20℃的冰箱中貯存，用于ELISA檢測(cè)。

1.4 實(shí)驗(yàn)指標(biāo)檢測(cè)

1.4.1 體重和脂肪組織的稱量 打開(kāi)天平，將塑料盒放在天平上，數(shù)值歸零后將大鼠放入塑料盒中，待數(shù)值穩(wěn)定后，記錄體重；將錫紙放在天平上，數(shù)值歸零后將每塊脂肪組織放在錫紙上，待數(shù)值穩(wěn)定后，記錄脂肪的濕重。注意每次稱量前都要將數(shù)值歸零。

1.4.2 雙能X線吸收測(cè)量法 適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，采用雙能X線吸收測(cè)量法(DEXA)，記錄大鼠體脂含量。儀器校準(zhǔn)后，用戊巴比妥鈉麻醉大鼠，劑量為50 mg/kg，待大鼠無(wú)自主運(yùn)動(dòng)時(shí)，放在掃描床上，對(duì)其進(jìn)行全身掃描，保存所獲的數(shù)據(jù)和照片；4周實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，再次采用雙能X線吸收測(cè)量法(DEXA)，記錄大鼠體脂含量并保存所有數(shù)據(jù)和照片。

1.4.3 酶聯(lián)免疫(ELISA)檢測(cè)大鼠血清中Irisin水平 先稀釋標(biāo)準(zhǔn)品，在酶標(biāo)包被板上加樣(需要設(shè)置空白孔)。加完樣后用封板膜封板，37℃環(huán)境下孵育30 min。揭掉封板膜，棄去液體拍干。重復(fù)加入洗滌液洗滌，拍干。加入酶標(biāo)試劑(空白孔除外)，孵育30 min后洗滌。加入顯色劑，37℃環(huán)境下避光顯色15 min。加入終止液，終止反應(yīng)，用酶標(biāo)儀進(jìn)行測(cè)定(需在15 min內(nèi)完成)。

1.4.4 蛋白免疫印跡(Western blot) 提取組織蛋白：切取100 mg腓腸肌或脂肪組織，放入EP管中。加入1 ml RAPI裂解液(含有磷酸酶抑制劑和蛋白酶抑制劑)，剪碎勻漿，冰浴靜置30 min。離心機(jī)離心8 min(12 000 r/min，4℃)后取上清。根據(jù)BCA蛋白定量法測(cè)定蛋白濃度，加入樣品緩沖液和裂解液，將各組蛋白濃度調(diào)為一致。沸水煮10 min變性后冷卻分裝，移至-40℃的冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

Western blot檢測(cè)蛋白表達(dá)：制膠(10%的分離膠和濃縮膠)。加樣后進(jìn)行SDS-PAGE電泳90 min(0～60 min 80 V電壓，60～90 min 120 V電壓)。轉(zhuǎn)膜90 min(恒定電流300 A，在冰水中進(jìn)行)。封閉(AMPKα、PGC-1α、FNDC5、UCP1用5%脫脂牛奶封閉70 min，p-AMPKα用5%BSA進(jìn)行封閉2 h)。使用5%BSA配制抗體(AMPKα濃度1∶2 000，p-AMPKα濃度1∶2 000，PGC-1α濃度1∶2 000，F(xiàn)NDC5濃度1∶2 000，GAPDH濃度1∶2 000，β-actin濃度1∶1 000，UCP1濃度1∶4 000)，一抗4℃過(guò)夜。二抗孵育90 min(目的蛋白濃度和內(nèi)參濃度均為1∶2 000)。TBST洗膜3×10 min。曝光并對(duì)條帶灰度值進(jìn)行Image Lab分析和處理。

1.4.5 石蠟切片和HE染色 固定液固定新鮮脂肪組織24 h后，用手術(shù)刀修理平整，放入脫水盒。使用脫水機(jī)進(jìn)行脫水浸蠟。包埋浸好蠟的脂肪組織。將組織放在冷凍臺(tái)，待蠟?zāi)糖衅瑐溆?。將石蠟切片脫蠟至水后，蘇木素染液染色(10 min)，并用自來(lái)水沖洗。依次放入85%、95%的酒精中脫水(各5 min)，放入伊紅染液中染色5 min。最后進(jìn)行脫水封片。顯微鏡下觀察圖像，采集并分析。

1.4.6 脂滴面積的計(jì)算方法 打開(kāi)Case Viewer軟件對(duì)脂肪組織切片進(jìn)行觀察并保存400倍鏡下的圖片，打開(kāi)Image-Pro Plus，點(diǎn)擊文件打開(kāi)保存的脂肪切片，確定標(biāo)尺后，點(diǎn)擊測(cè)量(計(jì)數(shù)/面積)進(jìn)行計(jì)數(shù)，對(duì)于不完整的脂滴需補(bǔ)齊邊緣。每張圖片測(cè)量3次取平均值。

1.5 主要儀器和試劑

Western blot電泳儀、電轉(zhuǎn)儀，Bio-Rad公司；xMark 酶標(biāo)儀，Bio-Rad公司；防脫載玻片，北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。AMPKα抗體，ab80039，Abcam公司；p-AMPKα抗體，ab133448，Abcam公司；PGC-1α，ab54481，Abcam公司，F(xiàn)NDC5抗體，ab174833，Abcam公司；UCP1抗體，ab10983，Abcam公司；Irisin ELISA試劑盒，AD0002RA，Andy gene; 磷酸酶抑制劑，Roche公司；蛋白酶抑制劑，Roche公司；BCA蛋白測(cè)定試劑盒，Thermo公司。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 體重增長(zhǎng)

實(shí)驗(yàn)期間，每周固定時(shí)間稱量并記錄大鼠體重，4周結(jié)束后，與Sed組相比，Exe組、ElA組大鼠體重增長(zhǎng)速度明顯緩慢(P<0.01)，且Exe組從第1周開(kāi)始體重增長(zhǎng)減慢并具有顯著性差異(P<0.01)，而ElA組從第3周出現(xiàn)顯著性差異(P<0.05，表1)。因此電針干預(yù)對(duì)控制體重增長(zhǎng)有一定的作用，并且隨著實(shí)驗(yàn)干預(yù)周期的延長(zhǎng)，電針的效果與有氧運(yùn)動(dòng)相當(dāng)。

Tab. 1 Weight gain in rats after 4 weeks (g, n=8)

2.2 體脂變化

觀察4周干預(yù)前后大鼠體脂百分比發(fā)現(xiàn)(圖2)，4周后Sed組體脂含量增加2.63%，而Exe組體脂含量降低5.23%，ElA組體脂含量降低4.95%，且與Sed組相比均有顯著性差異(P<0.01，表2)。

Fig. 2 The DEXA result of Rats after 4 weeks

Tab. 2 Body fat percentage of rats (%, n=8)

2.3 白色脂肪濕重和脂滴形態(tài)

4周干預(yù)后，與Sed組相比，ElA組白色脂肪減少(P<0.05)，Exe組白色脂肪減少更多(P<0.01，表3)。觀察各組大鼠白色和棕色脂肪組織形態(tài)發(fā)生變化，與Sed組相比，Exe組、ElA組白色和棕色脂肪組織脂滴面積均減小(P<0.01)，ElA組脂滴面積雖然減小，但是效果不及Exe組(P<0.01，表3，圖3)。

Tab. 3 Wet weight of white fat in rats after 4 weeks (g, n=8)

Fig. 3 HE staining of perirenal fat (up) and epididymal fat (down)adipose tissue(counted×400)

2.4 骨骼肌蛋白表達(dá)情況

2.4.1 AMPKα、p-AMPKα蛋白表達(dá) 經(jīng)過(guò)4周干預(yù)后，與Sed組相比，Exe組、ElA組AMPKα蛋白表達(dá)增加(P<0.05)，p-AMPKα、p-AMPKα/AMPKα蛋白表達(dá)顯著增加(P<0.01，表4，圖4)，這表明運(yùn)動(dòng)和電針刺激可以激活腓腸肌中AMPKα，促進(jìn)p-AMPKα蛋白表達(dá)。

2.4.2 PGC-1α、FNDC5蛋白表達(dá) 4周干預(yù)后，Exe組、ElA組大鼠腓腸肌中PGC-1α、FNDC5蛋白表達(dá)均顯著增加，均明顯高于Sed組(P<0.01)，這表明運(yùn)動(dòng)和電針均可以增加腓腸肌中PGC-1α、FNDC5蛋白表達(dá)(表4，圖4)。

Tab. 4 The expressions of AMPKα, p-AMPKα, PGC-1α and FNDC5 in gastrocnemius of n=8)

Fig. 4 The expressions of AMPKα, p-AMPKα, PGC-1α and FNDC5 in gastrocnemius of rats

2.5 大鼠血清Irisin水平的檢測(cè)

經(jīng)過(guò)4周干預(yù)，與Sed組相比，Exe組和ElA組血清中Irisin水平明顯升高(P<0.05)，Exe組和ElA組之間沒(méi)有顯著性差異(P>0.05，表5)。

2.6 脂肪組織蛋白表達(dá)情況

4周干預(yù)結(jié)束后，與Sed組相比，ElA組大鼠腎周白色脂肪UCP1蛋白表達(dá)顯著性增加(P<0.01)；與Exe組相比，ElA組UCP1蛋白表達(dá)顯著增加(P<0.01，表5，圖5)。

經(jīng)過(guò)4周干預(yù)，與Sed組相比，Exe組、ElA組大鼠肩胛棕色脂肪UCP1蛋白表達(dá)均增加，ElA組大鼠肩胛棕色脂肪UCP1蛋白表達(dá)更加顯著(P< 0.01，表5，圖5)。表明電針和有氧運(yùn)動(dòng)不僅可以增加白色脂肪組織UCP1蛋白表達(dá)，而且還能增加棕色脂肪組織UCP1蛋白表達(dá)。

Tab. 5 The expressions of Irisin and UCP1 of n=8)

Fig. 5 The expressions of Irisin and UCP1 in fat tissues of rats

3 討論

在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中，如果出現(xiàn)能量積累，很容易造成體脂和體重增加。目前最常見(jiàn)控制體重的方式是運(yùn)動(dòng)，有規(guī)律的有氧運(yùn)動(dòng)既能降低人體BMI和內(nèi)臟脂肪含量[8]，又能改善低密度脂蛋白和甘油三脂的水平[9]。本研究發(fā)現(xiàn)4周有氧運(yùn)動(dòng)也可以降低大鼠體脂含量，有效控制體重增長(zhǎng)。同樣，針刺作為一種干預(yù)肥胖的方法，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床和試驗(yàn)中，而且Meta分析已經(jīng)評(píng)估并驗(yàn)證針刺治療肥胖的功效和優(yōu)越性[4]，本研究對(duì)大鼠進(jìn)行4周電針干預(yù)，發(fā)現(xiàn)大鼠體脂含量降低，體重緩慢增長(zhǎng)且增長(zhǎng)趨勢(shì)逐漸趨于運(yùn)動(dòng)組，這說(shuō)明電針也能有效控制體重增長(zhǎng)，降低體脂含量，且隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，電針干預(yù)可以達(dá)到有氧運(yùn)動(dòng)減脂的效果。另外，如果能量攝入過(guò)多，多余的能量將以甘油三脂的形式儲(chǔ)存在白色脂肪組織中，造成白色脂肪堆積，引發(fā)肥胖。但是，如果成功誘導(dǎo)白色脂肪組織向棕色脂肪組織轉(zhuǎn)化，可以提高機(jī)體耗能能力、產(chǎn)熱增加、促進(jìn)能量消耗，進(jìn)而降低體脂含量。本研究發(fā)現(xiàn)4周電針和有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)后，大鼠腎周和附睪周?chē)竞繙p少，這說(shuō)明電針和有氧運(yùn)動(dòng)均能有效減少大鼠白色脂肪含量，改善大鼠內(nèi)臟脂肪，提示在減脂中使用電針干預(yù)或許能達(dá)到有氧運(yùn)動(dòng)減脂的效果，而且電針引起的疼痛應(yīng)激的生理生化效應(yīng)對(duì)本研究的影響較小。因此對(duì)于久坐不動(dòng)、心肺功能較差、體重負(fù)荷較大或下肢損傷等特殊人群來(lái)說(shuō)，可以選擇電針“足三里”“天樞”等穴位防治肥胖，且能達(dá)到近似有氧運(yùn)動(dòng)減脂的效果。

脂肪細(xì)胞作為體內(nèi)最大的能源庫(kù)，具有能量代謝、脂肪代謝的功能，對(duì)維持機(jī)體能量代謝具有重要作用。其中白色脂肪細(xì)胞由大量單泡脂肪細(xì)胞聚集而成，在HE染色切片上，脂滴呈空泡樣，具有儲(chǔ)存多余能量的特點(diǎn)。棕色脂肪細(xì)胞由多泡脂肪細(xì)胞組成，含有大量線粒體，具有產(chǎn)熱消耗能量的作用。因此，驅(qū)使白色脂肪細(xì)胞向棕色脂肪細(xì)胞轉(zhuǎn)變，可以增加機(jī)體產(chǎn)熱和能量消耗。諸多研究發(fā)現(xiàn)電針刺激可以誘導(dǎo)米色樣或棕色樣脂肪細(xì)胞生成，增加棕色脂肪含量[1]。本研究觀察棕色脂肪組織切片HE染色，發(fā)現(xiàn)脂滴的大小和數(shù)量發(fā)生顯著變化。與對(duì)照組相比，電針組和運(yùn)動(dòng)組脂滴面積非常顯著減小，這說(shuō)明電針和有氧運(yùn)動(dòng)均能減少白色脂肪含量，促使棕色脂肪含量增加。與運(yùn)動(dòng)組相比，電針組脂滴面積較大、數(shù)量較多，說(shuō)明運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)白色脂肪“棕色化”的效果可能更佳，但也可能是電針時(shí)間較短所致，因此運(yùn)動(dòng)和電針促進(jìn)白色脂肪“棕色化”的效果還有待進(jìn)一步研究。另外，脂肪細(xì)胞中含有一種特定標(biāo)記物——解偶聯(lián)蛋白(UCP1)，促使棕色脂肪組織中的線粒體解偶聯(lián)，增加機(jī)體產(chǎn)熱燃燒能量[10]，因此，電針干預(yù)促進(jìn)白色脂肪“棕色化”的過(guò)程伴隨著解偶聯(lián)蛋白(UCP1)表達(dá)增加，但是其分子機(jī)制尚不清楚。

腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)作為最重要的能量平衡調(diào)節(jié)劑，與肌肉因子和脂肪細(xì)胞因子密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)不僅長(zhǎng)期耐力訓(xùn)練能夠增加機(jī)體骨骼肌細(xì)胞AMPK的水平[11]，而且電針也能夠增加骨骼肌AMPK的活性，增加機(jī)體外周組織線粒體生物合成以及代謝功能等[12]。本研究同樣發(fā)現(xiàn)電針和有氧運(yùn)動(dòng)刺激后骨骼肌中AMPK蛋白表達(dá)增加，提示AMPK的高表達(dá)可能促進(jìn)肌肉因子與脂肪組織“crosstalk”，加速脂肪分解，抑制體重增長(zhǎng)以及減少白色脂肪的重量，維持能量代謝平衡。同時(shí)，肌肉因子在骨骼肌和脂肪“crosstalk”中起著重要作用，對(duì)預(yù)防非傳染性慢性疾病也有很多益處。Irisin作為一種新型肌動(dòng)蛋白，具有減脂效果，運(yùn)動(dòng)后人類和大鼠骨骼肌Irisin分泌增加[13]。Huh[14]等也發(fā)現(xiàn)運(yùn)動(dòng)促進(jìn)過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-γ輔激活因子(PGC-1α)表達(dá)，引發(fā)肌肉編碼膜蛋白FNDC5水解產(chǎn)生Irisin，進(jìn)入血液循環(huán)與其他組織“crosstalk”，從而發(fā)揮作用。目前，不同運(yùn)動(dòng)方案中Irisin的表達(dá)情況仍存在爭(zhēng)議。例如，間歇性短跑[15]、90 min跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)[16]能夠促進(jìn)血清中Irisin的表達(dá)，但是Yoshifumi實(shí)驗(yàn)表明耐力訓(xùn)練后1 h，Irisin水平?jīng)]有發(fā)生變化[17]。另外，諸多研究認(rèn)為小鼠3周自由輪轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)[18]或人類進(jìn)行10周耐力訓(xùn)練[18]也能使Irisin的表達(dá)增加?；谡n題組前期有氧運(yùn)動(dòng)減脂的研究[2]，增加電針干預(yù)，期望探究電針干預(yù)是否通過(guò)調(diào)節(jié)Irisin “crosstalk”脂肪組織達(dá)到減脂的效果。因此本研究對(duì)大鼠進(jìn)行4周電針干預(yù)后，發(fā)現(xiàn)骨骼肌中PGC-1α、FNDC5蛋白表達(dá)顯著增加，血清中Irisin的表達(dá)也顯著升高，這說(shuō)明電針干預(yù)激活骨骼肌AMPK活性后，通過(guò)AMPK-PGC-1α-FNDC5-Irisin信號(hào)通路，促進(jìn)骨骼肌分泌Irisin，改善葡萄糖代謝，增加機(jī)體能量消耗，預(yù)防肥胖。另外，運(yùn)動(dòng)組和電針組之間蛋白表達(dá)沒(méi)有顯著差異，進(jìn)一步說(shuō)明電針可以作為有氧運(yùn)動(dòng)減脂的補(bǔ)充方式，達(dá)到有氧運(yùn)動(dòng)控制體重的效果。

另外，F(xiàn)NDC5/Irisin靶向作用白色脂肪組織，能夠上調(diào)UCP1的表達(dá)，促進(jìn)白色脂肪“棕色化”，可以有效預(yù)防肥胖癥并改善葡萄糖代謝。運(yùn)動(dòng)能夠增加棕色脂肪組織中UCP1蛋白表達(dá)[19]，諸多研究提示電針干預(yù)具有同有氧運(yùn)動(dòng)近似的作用[20]，可能通過(guò)Irisin靶向作用脂肪組織調(diào)節(jié)UCP1蛋白表達(dá)，從而誘導(dǎo)白色脂肪“棕色化”。因此本研究通過(guò)檢測(cè)大鼠的白色脂肪和棕色脂肪中UCP1蛋白表達(dá)，發(fā)現(xiàn)4周干預(yù)后，運(yùn)動(dòng)組和電針組白色脂肪和棕色脂肪組織中UCP1蛋白表達(dá)均顯著升高，這說(shuō)明電針可能通過(guò)AMPK-PGC-1α-FNDC5-Irisin-UCP1信號(hào)通路，刺激骨骼肌分泌并釋放Irisin，與脂肪組織“crosstalk”，促進(jìn)脂肪組織UCP1蛋白表達(dá)增加，實(shí)現(xiàn)白色脂肪“棕色化”(圖6)。與運(yùn)動(dòng)組相比，電針組UCP1蛋白表達(dá)更高，這提示電針誘導(dǎo)白色脂肪“棕色化”的效果可能比單純運(yùn)動(dòng)好，有待進(jìn)一步探究。

Fig. 6 The mechanism of “Browning" white fat induced by electroacupuncture

綜上所述，4周電針干預(yù)具有與4周有氧運(yùn)動(dòng)近似的減脂效果，可以控制大鼠體重增長(zhǎng)，降低體脂百分比，減少白色脂肪組織含量。電針干預(yù)可以通過(guò)AMPK-PGC-1α-FNDC5-Irisin-UCP1信號(hào)通路，促進(jìn)骨骼肌分泌并釋放Irisin，靶向作用脂肪組織，實(shí)現(xiàn)骨骼肌與脂肪組織“crosstalk”，誘導(dǎo)白色脂肪“棕色化”，從而起到減脂作用。這雖為傳統(tǒng)針刺在防治肥胖方面提供理論依據(jù)，但尚需進(jìn)行長(zhǎng)期針刺與有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)對(duì)白色脂肪“棕色化”影響的研究，以進(jìn)一步驗(yàn)證效果明確機(jī)制。