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凝結(jié)芽孢桿菌的生物學(xué)特性及在仔豬生產(chǎn)中的應(yīng)用

2020-03-04 13:14:54作者王曉佳
廣東飼料 2020年6期

◆作者:王曉佳

凝結(jié)芽孢桿菌 (Bacillus coagulans)能夠抑制腸道致病菌,維持腸道菌群平衡,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化,降低動(dòng)物腹瀉,是一種新型飼用益生菌。隨著飼料中禁止添加促生長(zhǎng)藥物抗生素日程的臨近,飼料行業(yè)中有關(guān)替抗方法的研究加速,其中微生態(tài)制劑的應(yīng)用就是主要方向之一。凝結(jié)芽孢桿菌作為新開(kāi)發(fā)出的飼用微生態(tài)制劑,以其良好的抗逆性、產(chǎn)乳酸抑菌性、安全性等綜合優(yōu)勢(shì),備受廣大研究者的關(guān)注。

1 凝結(jié)芽孢桿菌的生物學(xué)特性

凝結(jié)芽孢桿菌,不僅具有調(diào)節(jié)腸道內(nèi)菌群平衡、促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝和利用、提高免疫力等保健特性,更重要的是具有耐高溫、耐酸和耐膽鹽等高抗逆性特點(diǎn)。姚勇芳(2017)研究表明凝結(jié)芽孢桿菌在 pH 值為 2~6 及0.2%~1.4%豬膽鹽溶液環(huán)境中存活率超過(guò)100%。汪攀(2017)研究也表明凝結(jié)芽孢桿菌在pH 2.5 的模擬胃液中處理12 h 存活率為71.9%,在膽鹽濃度為0.3%的模擬腸液中處理12 h,存活率為84.4%。其還能在50~55℃溫度條件下生產(chǎn)穩(wěn)定高效的高光學(xué)純度L- 乳酸。盧濤等(2002)研究某凝結(jié)芽孢桿菌能在55℃生長(zhǎng)并能分泌α- 淀粉酶,其發(fā)酵液經(jīng)90℃處理60min,酶活性仍保持在90%以上。以上研究皆表明凝結(jié)芽孢桿菌具有耐高溫、耐酸和耐膽鹽等特點(diǎn),因?yàn)槟Y(jié)芽孢桿菌可以形成芽孢,進(jìn)入胃腸道系統(tǒng)后,以芽孢的形式存在,對(duì)胃酸有很強(qiáng)的抵抗力,不易失活,所以在胃腸道系統(tǒng)中可以很好的發(fā)揮其生物學(xué)特性。除此之外,凝結(jié)芽孢桿菌菌株還具有廣譜抗菌性。其最佳抑菌發(fā)酵時(shí)間為18 h,在最適溫度37℃,最適pH=6.0 條件下具有最強(qiáng)的抑菌活性。抑菌產(chǎn)物對(duì)革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌均有明顯的抑菌效果。它還能降低抗生素的殘留和耐藥性,并能產(chǎn)生多種維生素、酶,可有效地提高飼料轉(zhuǎn)化率和利用率。金迅(2018)研究表明某凝結(jié)芽孢桿菌菌株對(duì)有害菌株 (金黃色葡萄球菌和大腸桿菌)具有一定抗菌活性,對(duì)青霉素、鏈霉素、四環(huán)素三種抗生素具有不同程度的耐藥性。張韻等(2017)從健康仔豬糞便中分離獲得凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)大腸桿菌K88、雞腸炎沙門菌、豬腸炎沙門菌、金黃色葡萄球菌、鼠傷寒沙門菌均表現(xiàn)出良好的抑菌作用,并具有良好黏附能力,其中對(duì)仔豬腸黏液的黏附率高達(dá)41.67%,菌株還均具有一定的蛋白酶、淀粉酶和纖維素酶產(chǎn)生能力。曹艷子(2017)研究表明凝結(jié)芽孢桿菌菌株有強(qiáng)抗逆性、營(yíng)養(yǎng)體對(duì)抗生素敏感且有強(qiáng)產(chǎn)酸能力,可產(chǎn)生乙酸、琥珀酸等多種有機(jī)酸。已有研究并未觀察到凝結(jié)芽孢桿菌具有毒性和產(chǎn)毒能力,臨床實(shí)驗(yàn)也未見(jiàn)不良臨床反應(yīng)報(bào)告。高書鋒等(2017)從健康豬腸道中分離出1 株對(duì)仔豬大腸桿菌和沙門菌有較強(qiáng)拮抗作用的凝結(jié)芽孢桿菌菌株,研究表明該菌株在人工胃液、人工腸液、豬膽鹽和80℃高溫表現(xiàn)出很強(qiáng)的耐受能力,急性毒性試驗(yàn)結(jié)果該菌株為無(wú)毒菌株。

綜上所述,凝結(jié)芽孢桿菌具有耐高溫、耐酸和耐膽鹽等高抗逆性特點(diǎn)。抑菌效果強(qiáng),耐藥性低,并能產(chǎn)生多種維生素、酶和多種有機(jī)酸,安全無(wú)毒性,可做為良好的益生菌飼料添加劑。

2 凝結(jié)芽孢桿菌在仔豬生產(chǎn)中的應(yīng)用

2.1 不同劑量的凝結(jié)芽孢桿菌在仔豬生產(chǎn)中的應(yīng)用

日糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌可提高斷奶仔豬小腸道吸收轉(zhuǎn)運(yùn)能力及抗氧化能力,改善斷奶仔豬小腸內(nèi)菌群結(jié)構(gòu)。吳夢(mèng)郡探究日糧中添加不同劑量(2×106cfu/g、2×107cfu/g)凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)斷奶仔豬小腸功能的影響,結(jié)果表明兩種劑量添加組與未添加對(duì)照組相比都可使仔豬血漿二胺氧化酶(DAO)活力顯著降低,回腸谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)的活力顯著增加,回腸及結(jié)腸腸球菌、雙歧桿菌數(shù)量均顯著升高,回腸黏膜水通道蛋白3(AQP3),堿性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體(b0,+AT)、鈉葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(SGLT-1)的mRNA 表達(dá)量均顯著增加。余魁研究結(jié)果同樣顯示添加不同劑量(2×106cfu/g、2×107cfu/g)凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)斷奶仔豬血漿超氧化物歧化酶(SOD)活性、空腸和回腸絨毛高度與隱窩深度的比值、回腸總蛋白(TP) 含量及 RNA 與 DNA 的比值均顯著提高。張?jiān)窖芯咳占Z中添加不同水平的凝結(jié)芽孢桿菌(2×106、2×107CFU/g)均顯著降低了斷奶仔豬的腹瀉率,提高了仔豬回腸內(nèi)容物中乳酸菌的數(shù)量,降低了回腸內(nèi)容物中梭菌的數(shù)量和磷酰乙醇銨的含量,提高了血漿中磷酸絲氨酸、胱氨酸、酪氨酸等多種氨基酸的含量。以上研究結(jié)果說(shuō)明日糧中添加不同劑量凝結(jié)芽孢桿菌都有提高斷奶仔豬的抗氧化能力,調(diào)節(jié)斷奶仔豬的腸道菌群,改善腸道黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu),降低仔豬的腹瀉率的作用。但是以上研究并沒(méi)有明確指出多少添加量更加實(shí)用合理。高書鋒研究飼糧中添加0.15%凝結(jié)芽孢桿菌制劑結(jié)果表明,飼糧中添加0.15%凝結(jié)芽孢桿菌制劑可提高斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、降低糞樣致病菌數(shù)量、提高糞樣有益菌數(shù)量和改善養(yǎng)殖環(huán)境。仔豬平均日增質(zhì)量,平均日采食量,平均飼料增質(zhì)量均有所提高。糞樣大腸桿菌數(shù)量、沙門菌數(shù)量降低,乳酸菌數(shù)量提高,平均腹瀉率降低,糞樣氨氣含量和豬舍氨氣含量降低。這進(jìn)一步確定了在飼糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌能夠提高仔豬生長(zhǎng)性能,改善微生態(tài)菌群的效果,與之前的結(jié)論剛好一致。黃海強(qiáng)(2014)試驗(yàn)分別給仔豬添加0.1%、0.2%凝結(jié)芽孢桿菌制劑結(jié)果表明仔豬的毛色狀態(tài)和精神狀態(tài)指標(biāo)較未添加組均有所改善,0.2%組平均日增重最高,腹瀉率和死亡率也有所下降,在凝結(jié)芽孢桿菌添加量為0.2%的日糧中效果優(yōu)于添加量為0.1%的日糧。洪文(2016)研究飼料分別添加低、中、高劑量凝結(jié)芽孢桿菌 (以 0.5×108、2.5×108、12.5×108cfu/kg 飼料),結(jié)果表明高劑量組在日增重和料肉比上,顯著優(yōu)于低劑量組,腹瀉率上各組之間無(wú)顯著差異,數(shù)值上以高劑量組最優(yōu)。這說(shuō)明在動(dòng)物健康的條件下,有可能日糧中凝結(jié)芽孢桿菌添加劑量越高,作用效果越理想。但是也有結(jié)果正好相反,周映華(2012)研究顯示基礎(chǔ)日糧中添加0.05%凝結(jié)芽孢桿菌試驗(yàn)效果比添加0.1%凝結(jié)芽孢桿菌試驗(yàn)效果要好。出現(xiàn)不同的結(jié)果有可能是因?yàn)檠挎邨U菌菌株差別,凝結(jié)芽孢桿菌來(lái)源與質(zhì)量差異,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物個(gè)體不同,飼糧組成成分,飼養(yǎng)管理環(huán)境條件等多種因素造成的。

綜上所述,日糧中添加不同劑量的凝結(jié)芽孢桿菌,都有調(diào)節(jié)仔豬腸道菌群,促進(jìn)腸道發(fā)育的作用,也有改善仔豬生產(chǎn)性能的趨勢(shì)。有可能添加劑量越高,效果越顯著。

2.2 凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的影響

王乙茹(2018)研究結(jié)果表明飼料單一添加凝結(jié)芽孢桿菌(2×106cfu/g)飼料干物質(zhì)與總能表觀消化率最高,豬生長(zhǎng)性能最佳,單一添加同樣劑量的枯草芽孢桿菌、或組合添加枯草芽孢桿菌與凝結(jié)芽孢桿菌,生長(zhǎng)性能沒(méi)有獲得進(jìn)一步改善。黃遵錫(2017)研究凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用,對(duì)28-56 d 斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響。結(jié)果顯示單一添加凝結(jié)芽孢桿菌組、添加凝結(jié)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌組合的平均日增重指標(biāo)均顯著高于組合抗生素組和單一添加枯草芽孢桿菌組。單一添加凝結(jié)芽孢桿菌組料肉比指標(biāo)顯著低于其他三個(gè)處理組。仔豬對(duì)飼料的干物質(zhì)表觀消化率,凝結(jié)芽孢桿菌組高于枯草芽孢桿菌組。王志祥(2017)研究結(jié)果也表明單一添加凝結(jié)芽孢桿菌組和同時(shí)添加凝結(jié)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌組合的試驗(yàn)組平均日增重指標(biāo)差異不顯著,均顯著高于抗生素組和枯草芽孢桿菌組。料肉比指標(biāo),凝結(jié)芽孢桿菌組顯著低于其他3 個(gè)處理組。凝結(jié)芽孢桿菌組仔豬對(duì)飼料的干物質(zhì)表觀消化率與抗生素組差異不顯著,均顯著高于枯草芽孢桿菌組。以上結(jié)果表明仔豬飼料在組合使用多種常規(guī)飼用抗生素的基礎(chǔ)上,單一添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌能夠進(jìn)一步改善斷奶仔豬的生產(chǎn)性能。然而,單一添加枯草芽孢桿菌或添加凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合,均沒(méi)有獲得進(jìn)一步改善仔豬生長(zhǎng)性能的顯著正效應(yīng)。這可能是因?yàn)檫x用優(yōu)質(zhì)的凝結(jié)芽孢桿菌才有可能獲得良好生產(chǎn)性能。再者,與枯草芽孢桿菌不同,凝結(jié)芽孢桿菌具有乳酸菌和芽孢桿菌的雙重特點(diǎn),能產(chǎn)L- 乳酸和乙酸,穩(wěn)定性好,作用效果明顯,不僅能快速在腸道定植,適應(yīng)能力強(qiáng),且能夠快速繁殖,并產(chǎn)生多種維生素、酶,可有效地提高飼料轉(zhuǎn)化率和利用率,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,抑菌效果好。所以,在改善斷奶仔豬的生產(chǎn)性能方面能夠表現(xiàn)出比枯草芽孢桿菌突出的特點(diǎn)。而有研究表明凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)枯草芽孢桿菌也有抑制作用,這有可能是兩菌種組合使用的效果不如單一使用凝結(jié)芽孢桿菌的原因。

綜上所述,日糧中組合使用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌,或者單一使用枯草芽孢桿菌,沒(méi)有單一添加凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)改善斷奶仔豬的生產(chǎn)性能的效果好。所以,在生產(chǎn)實(shí)踐中凝結(jié)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌的復(fù)合菌劑應(yīng)用效果有待進(jìn)一步研究。

2.3 凝結(jié)芽孢桿菌替代日糧中抗生素對(duì)斷奶仔豬的作用

生長(zhǎng)肥育豬飼料中添加凝結(jié)芽孢桿菌制劑可顯著提高豬的平均日增重,降低飼料成本,飼養(yǎng)效果與某些抗菌藥沒(méi)有顯著差異。楊保和(2018)研究生長(zhǎng)豬日糧中添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌(2.5×106cfu/g)能夠完全替代飼用金霉素,并且能保障生長(zhǎng)豬的正常生長(zhǎng)性能。單一添加金霉素60 ppm 和單一添加凝結(jié)芽孢桿菌250 ppm 比較,其末體重、平均日增重、料肉比等三指標(biāo)之間差異不顯著,同時(shí)添加金霉素60 ppm 和凝結(jié)芽孢桿菌250 ppm 的試驗(yàn)組顯著優(yōu)于無(wú)抗生素和無(wú)凝結(jié)芽孢桿菌的處理組,處理組之間平均日采食量指標(biāo)差異不顯著。王向榮(2013)研究表明用凝結(jié)芽孢桿菌800 mg/kg 替代斷奶仔豬飼糧中喹乙醇100 mg/kg、50%吉他霉素50 mg/kg 和10%硫酸粘桿菌素100 mg/kg 較為適宜于目前生產(chǎn)。同時(shí),余冬友(2017)研究給含有組合抗生素的商業(yè)仔豬飼料額外添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌結(jié)果表明在末體重指標(biāo)方面,組合抗生素組+凝結(jié)芽孢桿菌1×107cfu/g和組合抗生素組+凝結(jié)芽孢桿菌2×107cfu/g 分別比組合抗生素組提高了3.2%和4.2%。在平均日增重指標(biāo)方面,分別提高了5.5%和7.0%。試驗(yàn)期為28 d,組合抗生素組仔豬腹瀉頭數(shù)最多,組合抗生素組+凝結(jié)芽孢桿菌2×107cfu/g 腹瀉頭數(shù)最少。在斷奶仔豬日糧組合使用多種常規(guī)飼用抗生素的基礎(chǔ)上, 額外添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌2×107cfu/g (全價(jià)配合飼料),具有進(jìn)一步減少仔豬腹瀉、提高生長(zhǎng)速度的作用,而且比添加凝結(jié)芽孢桿菌1×107cfu/g 的效果要好。以上研究再次說(shuō)明添加凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)仔豬生長(zhǎng)有促進(jìn)作用,還可以減少腹瀉率。凝結(jié)芽孢桿菌具有廣譜抗菌性,其抑菌產(chǎn)物對(duì)革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌,例如:腐敗希瓦氏菌、大腸桿菌、沙門氏菌和銅綠假單胞菌等腸道致病菌均有顯著的抑菌效果。除此之外,該結(jié)果也再次指出了前面討論的劑量問(wèn)題,添加凝結(jié)芽孢桿菌2×107cfu/g 的效果要好與添加凝結(jié)芽孢桿菌1×107cfu/g 的試驗(yàn)組。這說(shuō)明在合理的實(shí)用范圍內(nèi),添加高劑量凝結(jié)芽孢桿菌要比低劑量作用效果好。

綜上所述,凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)大腸桿菌等腸道致病菌有顯著的抑菌作用,可以替代某些抗生素,降低腹瀉率,進(jìn)而促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)。此外,在合理的實(shí)用范圍內(nèi),添加高劑量凝結(jié)芽孢桿菌可能對(duì)提高仔豬生產(chǎn)性能效果較好。

小結(jié):凝結(jié)芽孢桿菌能夠抑制腸道致病菌,維持腸道菌群平衡,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化,降低動(dòng)物腹瀉率,安全無(wú)毒性,是良好的抗生素替代產(chǎn)品。因其具有耐高溫、耐酸和耐膽鹽等高抗逆性特點(diǎn),在無(wú)抗綠色生產(chǎn)中有深遠(yuǎn)發(fā)展前景。但是因凝結(jié)芽孢桿菌質(zhì)量,菌種來(lái)源等多種原因,其使用最佳劑量也會(huì)因生產(chǎn)實(shí)際的差別而不同。除此之外,凝結(jié)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌的復(fù)合菌劑在生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用效果也有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn):(略)

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