◆作者:鄒勝龍 黃志毅 龔紅 陳杰* 陳達圖
農(nóng)業(yè)農(nóng)村部第194 號公告明確指出,自2020 年1 月1 日起退出除中藥外的所有促生長類藥物飼料添加劑品種,這標志著促生長類抗生素在2020 年將全部退出我國市場。在無抗條件下,畜牧行業(yè)的各位學者、企業(yè)家及養(yǎng)殖戶開始不斷尋求綠色天然環(huán)保飼料添加劑,以推動畜牧行業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。植物甾醇存在于所有植物中,具有十分廣泛和強大的生物學功能,在禁抗的大環(huán)境下備受關注,其在2008 年進入飼料添加劑目錄,至今應用將近12 年了,在817肉雞、清遠麻雞、AA 肉雞上已有研究報道,但是對快大黃雞的試驗研究卻鮮有報道。本試驗根據(jù)前人的研究結果,以200g/t(5%植物甾醇)的添加量為準,旨在研究在飼糧中添加植物甾醇對快大黃雞生長性能、屠宰性能、免疫器官指數(shù)以及血清生化指標及抗氧化指標的影響,為植物甾醇在快大黃雞飼糧中的合理利用提供理論依據(jù),豐富植物甾醇在不同品種肉雞應用的試驗素材。
試驗選用300 只1 日齡快大黃雞,隨機分為2 組,每組3個重復,每個重復50 只雞。對照組飼喂基礎飼料,試驗組在基礎飼料中添加200g/t 植物甾醇(商品名為蔚萊1 號,含5%植物甾醇),飼養(yǎng)周期45 天。
試驗分三個階段,每個階段的基礎飼糧組成與營養(yǎng)水平見表1。
2020 年 1 月 7 日 -2020 年 2月 20 日,為期 45 天。
試驗期間雞舍保持通風、清潔,定期做好清洗和消毒,免疫程序按雞場常規(guī)程序進行。試驗過程中采取分欄飼養(yǎng),自由采食,保證水源充足,每天定時巡視,觀察雞只采食情況,試驗過程中若發(fā)現(xiàn)死雞或病雞淘汰時,稱取淘汰雞重量,并結算飼料消耗量。觀察雞只健康狀況和糞便情況,做好詳細記錄。
1.4.1 血清樣品采集
試驗結束時,每個重復取2只雞,頸動脈采血,取5mL 放入離心管,靜置30min 后,3 000 r/min離心10 min 分離血清, 液氮速凍,- 20 ℃冰箱保存,用于血清生化指標和抗氧化指標的測定。
1.4.2 組織樣品采集
采血后,將雞處死,進行屠宰稱重,分離黃雞胸肌、腿肌和腹脂,根據(jù)《家禽生產(chǎn)性能名詞術語和度量統(tǒng)計方法》(NY/T823-2004)測定屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率;分離出脾臟、法氏囊,剔除脂肪后稱重,計算免疫器官指數(shù)。
表1 基礎飼糧組成及部分營養(yǎng)水平
1.5.1 生長性能的測定
以重復為單位,在試驗開始前和結束時,對各重復組黃雞進行空腹稱重,記錄各欄的投料量和剩料量,計算平均日增重、平均日采食量和料肉比。同時統(tǒng)計死淘雞只數(shù),計算成活率。
平均日增重(ADG)=(平均末重- 平均初重)/ 試驗天數(shù)
平均日采食量(ADFI)=(總耗料量- 死淘雞耗料量)/(試驗天數(shù)×雞只數(shù))
料肉比=100%×平均日采食量/ 平均日增重
成活率=100%×(雞只總數(shù)- 死淘雞數(shù))/ 雞只總數(shù)
1.5.2 屠宰性能的測定
屠宰率(%)= 屠體重(g)×100/ 活重(g)
半凈膛率(%)= 半凈膛重(g)×100/ 活重(g)
全凈膛率(%)= 全凈膛重(g)×100/ 活重(g)
胸肌率(%)= 胸肌重(g)×100/ 全凈膛重(g)
腿肌率(%)= 腿肌重(g)×100/ 全凈膛重(g)
腹脂率(%)= 腹脂重(g)×100/(全凈膛重 + 腹脂重)(g)
1.5.3 免疫器官指數(shù)
免疫器官指數(shù)(%)=器官重(g)/活重(g)×100
1.5.4 血脂含量的測定
采用試劑盒測定甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)。測定方法按照試劑盒使用說明。
1.5.5 血清生化指標的測定
采用試劑盒法測定葡萄糖、尿素氮、總蛋白和堿性磷酸酶。測定方法按照試劑盒使用說明。
1.5.6 血清抗氧化指標的測定
試劑盒法測定超氧化物歧化酶活性(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。測定方法按照試劑盒使用說明。
試驗數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 初步統(tǒng)計,采用SPSS17.0 軟件進行方差分析,用Duncan 法進行多重比較。以P<0.05 作為差異顯著性判斷標準,結果以平均值±標準差表示。
植物甾醇對快大黃雞生長性能的影響見表2。
由表2 可以看出,在前期1-16 日齡,快大黃雞基礎飼料中添加200 g/t 植物甾醇,試驗組雞的末重比對照組高10.13 克/只,提高了2.79%;平均日增重比對照組高 0.64 g·只-1·天-1,提高了3.23%;平均日采食量比對照組高 0.41g·只-1·天-1,提高了1.28%;料肉比比對照組低0.03,降低了1.90%。
在中期17-30 日齡,快大黃雞基礎飼料中添加200 克/噸植物甾醇,試驗組雞的末重比對照組高 23.53 克 / 只,提高了2.48%;平均日增重比對照組高0.95g·只-1·天-1,提高了 2.28%;平均日采食量比對照組高1.13g·只 -1·天-1,提高了 1.28%;料肉比比對照組低0.02,降低了0.93%。
表2 植物甾醇對快大黃雞生長性能的影響
在后期31-45 日齡,快大黃雞基礎飼料中添加200 克/噸植物甾醇,試驗組雞的末重比對照組高41.79 克/只,提高了2.38%;平均日增重比對照組高1.22g·只-1·天-1,提高了2.26%;平均日采食量比對照組高1.32g·只-1·天-1,提高了1.00%;料肉比比對照組低0.03,降低了1.23%。
在全期1-45 日齡,快大黃雞基礎飼料中添加200g/t 植物甾醇,試驗組雞的平均日增重比對照組高 0.93g·只-1·天-1,提高了2.45%;平均日采食量比對照組高 0.94 克 / 只 / 天,提高了1.13%;料肉比比對照組低0.03,降低了1.28%;試驗組雞的成活率比對照組高1.33%。
植物甾醇對快大黃雞屠宰性能的影響見表3。由表3 可知,在快大黃雞基礎飼料中添加200g/t 植物甾醇,對快大黃雞的屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率均無顯著性影響(P>0.05)。
表3 植物甾醇對快大黃雞屠宰性能的影響
植物甾醇對快大黃雞免疫器官指數(shù)的影響見表4。由表4可知,在快大黃雞基礎飼料中添加200g/t 植物甾醇,對快大黃雞的脾臟指數(shù)無顯著影響,試驗組的法氏囊指數(shù)顯著高于對照組(P<0.05)。
植物甾醇對快大黃雞血脂含量的影響見表5。由表5 可知,在快大黃雞基礎飼料中添加200g/t 植物甾醇,試驗組快大黃雞血清中甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇含量均低于對照組,高密度脂蛋白膽固醇含量高于對照組,但差異不顯著(P>0.05)。
植物甾醇對快大黃雞血清生化指標的影響見表6。由表6可知,在快大黃雞基礎飼料中添加200g/t 植物甾醇,試驗組快大黃雞血清中葡萄糖含量顯著低于對照組(P<0.05)。試驗組快大黃雞血清中尿素氮的含量低于對照組,總蛋白和堿性磷酸酶均高于對照組,但差異均不顯著(P>0.05)。
植物甾醇對快大黃雞血清抗氧化指標的影響見表7。由表7 可知,在快大黃雞基礎飼料中添加200g/t 植物甾醇,試驗組快大黃雞血清超氧化物歧化酶的活性升高,丙二醛的含量降低,但差異不顯著(P>0.05);試驗組快大黃雞血清中谷胱甘肽過氧化物酶的活性顯著高于對照組(P<0.05)。
表4 植物甾醇對快大黃雞免疫器官指數(shù)的影響
表5 植物甾醇對快大黃雞血脂含量的影響
表6 植物甾醇對快大黃雞血清生化指標的影響
表7 植物甾醇對快大黃雞血清抗氧化指標的影響
早在上個世紀八九十年代就有研究表明,植物甾醇能調(diào)節(jié)動物生長。Maitani 等(1995)研究發(fā)現(xiàn)植物甾醇能顯著改善應激大鼠的生長。近年來植物甾醇作為綠色天然飼料添加劑,廣泛應用在畜禽水產(chǎn)養(yǎng)殖中,提高動物生長性能。陳颋等(2013)在育肥豬飼料中添加植物甾醇可顯著提高育肥豬生長性能。朱麗娜等(2016)研究表明,在優(yōu)質(zhì)黃雞飼料中添加 30mg/kg 和 60mg/kg 植物甾醇能提高黃雞的生長性能,尤其在36 日齡之前增重效果尤為明顯。黃志毅等(2019)在817肉雞飼料中添加200 g/t 植物甾醇,肉雞的末重顯著提高,料肉比也有降低趨勢。本試驗結果顯示,在快大黃雞基礎飼料中添加200 g/t 植物甾醇,在 1-16 日齡、17-30 日齡和 31-45 日齡黃雞的平均日增重均高于對照組,采食量也有所增加,料肉比降低,從全期來看,試驗組快大黃雞的平均日增重比對照組高0.93g·只-1·天-1;平均日采食量比對照組高 0.94g·只-1·天-1;料肉比降低了1.28%;成活率比對照組高1.33%,本試驗結果與前人研究結果一致。
屠宰性能是衡量家禽商品價值的重要指標。有研究表明添加植物甾醇能降低肉雞腹脂率。本試驗在快大黃雞基礎飼糧中添加植物甾醇對快大黃雞的屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率均無顯著影響,但腹脂率相比于對照組降低了7.16%,與前人研究結果一致,這可能與植物甾醇促進機體脂質(zhì)代謝有關。
脾臟和法氏囊是禽類重要的免疫器官,免疫器官的發(fā)育狀態(tài)直接決定著動物的免疫水平(程相朝等,2002),免疫器官相對重量的增加表明機體細胞的免疫機能增強(樸香淑等,2004)。在本試驗中,在快大黃雞基礎飼料中添加200g/t 植物甾醇,快大黃雞的脾臟指數(shù)無顯著影響,但法氏囊指數(shù)顯著的高于對照組,說明植物甾醇能能顯著增強快大黃雞的免疫功能。
早在1953 年,植物甾醇被首次報道具有降低膽固醇的作用,迄今為止,諸多研究表明植物甾醇可有效降低血液總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇含量(盛漪等,2006;薛延團等,2019)。AA 肉雞飼料中中添加植物甾醇,試驗結果表明植物甾醇可降低血清中TC 和LDL-C 的水平,但對HDL-C 和TG 的含量沒有影響。黃志毅等(2019)在清遠麻雞飼料中添加200 和300 g/T 植物甾醇顯著降低了清遠麻雞血清中 LDL-C 含量,200g/t 添加組血清中TG 含量顯著降低,HDL-C 顯著升高,總膽固醇TC含量沒有顯著性差異。本試驗結果顯示,在快大黃雞飼料中添加200 g/t 植物甾醇,快大黃雞血清中甘油三酯TG、總膽固醇TC 和低密度脂蛋白膽固醇LDL-C 的含量有所降低,高密度脂蛋白膽固醇HDL-C 含量也高于對照組,這與植物甾醇與膽固醇結構相似,在動物腸腔內(nèi)競爭性的與膽汁酸微粒結合,使膽固醇不能被運送到小腸絨毛的吸收部位,從而抑制膽固醇的吸收有關。
植物甾醇對機體蛋白質(zhì)水平的影響研究報道不多,有研究表明,植物甾醇能促進蛋白質(zhì)的合成。王黎文等(2014)研究表明,在肉雞飼料中添加植物甾醇顯著增加21 日齡肉雞血漿總蛋白水平,對21 日齡和42 日齡肉雞血漿葡萄糖和堿性磷酸酶均無顯著性影響。本研究結果,飼糧中添加植物甾醇,試驗組快大黃雞血清中總蛋白和堿性磷酸酶略有增加,與上述研究報道一致,而葡萄糖含量顯著低于對照組,這可能與植物甾醇促進機體代謝,利用機體葡萄糖氧化分解促進蛋白質(zhì)合成有關。
超氧化物歧化酶SOD 和谷胱甘肽過氧化物酶GSH-Px 是機體內(nèi)重要的抗氧化酶,能清除機體內(nèi)的氧自由基,丙二醛MDA 是脂質(zhì)過氧化物的最終產(chǎn)物,因此 SOD、GSH-Px 活性及丙二醛含量能間接反映機體的抗氧化能力(傅夢月等,2013)。黃志毅等(2019)在 817 肉雞基礎飼料中添加200 g/t 植物甾醇,顯著提高了817 肉雞血清中SOD的活性,GSH-Px 活性高于對照組且丙二醛含量降低。本試驗結果顯示,添加200g/t 植物甾醇,快大黃雞血清中GSH-Px 活性顯著提高,SOD 活性也高于對照組,丙二醛含量也低于對照組,與前人報道一致。劉曉飛等(2019)從發(fā)芽糙米中提取植物甾醇,研究其抗氧化性,結果表明,發(fā)芽糙米中提取的植物甾醇對羥自由基、超氧陰離子自由基具有較強的抗氧化作用。因此,植物甾醇能提高快大黃雞血清中抗氧化酶的活性,清除機體內(nèi)的自由基,并減少氧化產(chǎn)物丙二醛的含量,減輕機體的氧化損傷。
在快大黃雞基礎飼糧中添加200g/t 植物甾醇能促進快大黃雞的生長,降低料肉比,并提高成活率,能促進快大黃雞的脂質(zhì)代謝,降低甘油三酯和膽固醇含量,減少腹脂沉積,并提高快大黃雞的抗氧化能力。