陳 銳，門(mén) 欣，瞿 佳，鄧 媛，趙玲俠，孫曉宇，沈衛(wèi)榮

(1.陜西省微生物研究所微生物資源研究中心,陜西 西安 710043；2.陜西省科學(xué)院秦嶺天然產(chǎn)物工程中心,陜西 西安 710043)

【研究意義】菊酯是一種被廣泛使用的殺蟲(chóng)劑，主要應(yīng)用于家庭、農(nóng)業(yè)、及環(huán)境等區(qū)域內(nèi)蚊、蠅、蚜蟲(chóng)、鱗翅目害蟲(chóng)等的毒殺。菊酯分為天然除蟲(chóng)菊素及擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)，擬除蟲(chóng)菊酯為天然除蟲(chóng)菊素的衍生物，目前共有30余種。高效氯氰菊酯是氯氰菊酯的一個(gè)異構(gòu)體，因其生產(chǎn)成本低、藥效高以及對(duì)哺乳類(lèi)動(dòng)物毒性低等特點(diǎn)，在我國(guó)廣泛使用。菊酯類(lèi)農(nóng)藥有觸殺作用，通過(guò)作用于神經(jīng)突觸和神經(jīng)纖維，擾亂昆蟲(chóng)電位性鈉離子通道使之過(guò)度興奮、運(yùn)動(dòng)失調(diào)繼而麻痹死亡[1]。過(guò)去普遍認(rèn)為菊酯屬低毒殺蟲(chóng)劑，對(duì)環(huán)境友好，但目前許多研究表明菊酯對(duì)斑馬魚(yú)、蜜蜂、水藻等有較高毒性[2-4]，導(dǎo)致脊椎動(dòng)物內(nèi)分泌紊亂[5]，干擾免疫系統(tǒng)[6]，具遺傳毒性[8]，危及孕婦及胎兒[7]。【本研究切入點(diǎn)】利用微生物降解土壤中殘留的菊酯類(lèi)農(nóng)藥是一種經(jīng)濟(jì)的方法，并且該方法不產(chǎn)生二次污染[9]。微生物可將復(fù)雜有機(jī)分子最終分解成為H2O和CO2，利用微生物增殖速度快的特點(diǎn)，在短時(shí)內(nèi)快速降低土壤中農(nóng)藥殘留的水平，使土壤恢復(fù)健康狀態(tài)[10]?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】已有研究表明細(xì)菌[11]、真菌[12]均具有效降解菊酯類(lèi)農(nóng)藥的潛能。但目前均處于實(shí)驗(yàn)室研究階段，尚未發(fā)現(xiàn)適宜應(yīng)用的生產(chǎn)型菌株?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】本研究從土壤中篩選獲得一株真菌菌株，該菌可利用高效氯氰菊酯作為其碳源，對(duì)多種菊酯類(lèi)農(nóng)藥均有作用，或能解決土壤中殘留菊酯類(lèi)農(nóng)藥的問(wèn)題。

1.1 材料

1.1.1 樣本 樣本來(lái)源于陜西省周至設(shè)施棚室、果園及秦嶺田峪植物根際或露地土壤，共收集土壤樣本70余份。

1.1.2 無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基 硫酸銨 0.4 g，硝酸銨 1.2 g，磷酸二氫鉀 0.5 g，磷酸氫二鉀1.5 g，硫酸鎂 0.5 g，氯化鈉 0.5 g，酵母提取物0.05 g，pH 7.0，蒸餾水定容至1 L。121 ℃ 滅菌20 min。

1.1.3 產(chǎn)毒培養(yǎng)基(AFPA) 蛋白胨 1 g，酵母粉1 g，檸檬酸鐵0.05 g，四氯醌0.0002 g，瓊脂2 g，加蒸餾水定容至1 L，121 ℃ 滅菌20 min。滅菌后加入1.5 %的氯霉素。

1.2 方法

1.2.1 高效氯氰菊酯降解菌的分離 在100 mL液體無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基搖瓶中加入1 mL高效氯氰菊酯(終濃度1 g/L，10 %懸浮劑)混勻。加入土樣5 g，28 ℃ 150 r/min 連續(xù)培養(yǎng)7 d，轉(zhuǎn)接1 mL 發(fā)酵液至新?lián)u瓶(含高效氯氰菊酯1g/L 100 mL液體無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基)，連續(xù)轉(zhuǎn)接3次。將發(fā)酵液梯度稀釋?zhuān)?00 μl涂布于含高效氯氰菊酯(1 g/L)的無(wú)機(jī)鹽固體培養(yǎng)基上，28 ℃培養(yǎng)，待菌落形成。真菌進(jìn)行PDA平板劃線純化3次，再接種于PDA斜面保藏。

1.2.2 菌株降解能力的初步測(cè)定 將真菌孢子接種于PDA液體培養(yǎng)基，28 ℃ 150 r/min搖瓶震蕩發(fā)酵24 h，形成微小的菌絲球懸液。90 mL無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液中分別加入終濃度為500 mg/L的高效氯氰菊酯，接入菌絲球懸液10 mL，以無(wú)菌培養(yǎng)液作為空白對(duì)照，3次重復(fù)，28 ℃，150 r/min震蕩培養(yǎng)，第0、12、24小時(shí)測(cè)定高效氯氰菊酯含量。標(biāo)準(zhǔn)試劑購(gòu)自沈陽(yáng)化工研究院(含量大于99.5 %)，方法參照文獻(xiàn)[13]。菌懸液5 mL加石油醚10 mL萃取。振蕩器震蕩1 min，靜置10 min。吸取上層有機(jī)相，紫外235 nm測(cè)定高效氯氰菊酯濃度。

1.2.3 降解菌的形態(tài)鑒定 梯度稀釋孢子懸液，將適量孢子接種于MA及CYA平板，觀察其生長(zhǎng)及菌落形態(tài)。取少量菌絲接種于PDA插片平板，待菌絲長(zhǎng)至蓋玻片上后，鏡檢觀察。取少量菌絲接種于PDA插片平板，待菌絲長(zhǎng)至蓋玻片上后，鏡檢觀察。

1.2.4 黃曲霉毒素測(cè)定 取少量孢子接種于AFPA平板， 28 ℃ 培養(yǎng)，觀察平板背面色澤變化[14]。將菌株在PDA液體培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，第 24、48、120、168、240小時(shí)各取樣1次，120 ℃滅菌，測(cè)定發(fā)酵液中黃曲霉毒素的含量[15]。

1.2.5 降解菌的ITS rDNA序列鑒定 取搖瓶菌絲球2 mL，離心取菌體，液氮研磨法提取菌株的基因組(TIANGEN DP305)。PCR擴(kuò)增ITS序列，引物采用ITS1及ITS4序列，測(cè)序(奧科)。測(cè)序結(jié)果在GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行比對(duì)，用系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)軟件Clustal X及MEGA 4構(gòu)建分類(lèi)系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。

1.2.6 降解菌的生長(zhǎng)特性 搖瓶生長(zhǎng)曲線：轉(zhuǎn)接孢子斜面至平板劃線3次活化菌株，培養(yǎng)120 h待生成孢子。將孢子重懸至生理鹽水，梯度稀釋至10-5，接1 mL孢子懸液入PDA液體搖瓶中， 28 ℃，150 r/min培養(yǎng)，每12 h取樣1次，測(cè)至96 h，設(shè)3個(gè)重復(fù)。將100 mL菌體過(guò)濾至定量濾紙，70 ℃ 烘干恒重，稱(chēng)重計(jì)算菌絲生長(zhǎng)情況。產(chǎn)孢量測(cè)定：以麩皮 50 g，稻殼5 g，水40 mL，豆粕0.1 g∶葡萄糖1 g∶植物油0.5 mL的比例配制固體培養(yǎng)基，107 ℃，滅菌 2 h。取搖瓶菌絲球懸液接種固體發(fā)酵，接種量5 %，28 ℃ 240 h靜置培養(yǎng)，待孢子充分形成。取培養(yǎng)發(fā)酵固體物1 g，放入49 mL 0.5 %的吐溫-80生理鹽水液中(加玻璃珠)，震蕩混勻，梯度稀釋?zhuān)坎加赑DA平板，28 ℃，培養(yǎng)48 h，菌落形成計(jì)數(shù)，計(jì)算產(chǎn)孢量。

1.2.7 HPLC法對(duì)高效氯氰菊酯殘留量測(cè)定 準(zhǔn)確稱(chēng)取 0.0500 g 高效氯氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)品，乙腈溶解，定容至10 mL容量瓶，終濃度5000 mg/L，梯度稀釋?zhuān)琀PLC測(cè)定，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

高效氯氰菊酯乳油500 μl加入90 mL無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中(終濃度為500 mg/L)，接入菌絲球懸液 10 mL，28 ℃、150 r/min震蕩培養(yǎng)。0、12 、24 h分別取樣測(cè)定高效氯氰菊酯含量。在50 mL發(fā)酵液中加入等量石油醚，震蕩萃取1.5 h，轉(zhuǎn)入分液漏斗，取下層有機(jī)相，上層水相轉(zhuǎn)入三角瓶，萃取3次。合并有機(jī)相，加入無(wú)水硫酸鈉去除水份，再轉(zhuǎn)入250 mL燒瓶，56 ℃負(fù)壓旋轉(zhuǎn)蒸干。分3次加入石油醚溶解，定容至20 mL，待HPLC測(cè)定[16]。HPLC檢測(cè)：色譜柱依利特C18柱，粒徑5 μm，流動(dòng)相：水+乙腈(80:20)，流速：1 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：235 nm，進(jìn)樣量：10 μl，柱溫：35 ℃。

1.2.8 降解菌株對(duì)其他菊酯類(lèi)農(nóng)藥耐藥能力測(cè)定 在50 mL無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中分別加入不同濃度的氯菊酯(25 %粉劑)、溴氰菊酯(2.5 %粉劑)、氯氟氰菊酯(10 %粉劑)、氰戊菊酯(20 %乳油)、聯(lián)苯菊酯(5 %乳油)(終濃度為50、100、150、200、250 mL/L)的，接入菌絲球懸液5 mL，28 ℃、150 r/min 培養(yǎng)48 h，觀察菌株的生長(zhǎng)耐受情況。

1.2.9 菌劑制備及土壤室內(nèi)試驗(yàn)驗(yàn)證 將固體發(fā)酵物平攤在臺(tái)面，自然條件下晾干。按照 固體發(fā)酵物∶葡萄糖∶麩皮∶高嶺土=2∶1∶4∶3，攪拌混合均勻，作為出發(fā)菌劑。在室內(nèi)進(jìn)行初步土壤降解試驗(yàn)，土壤盒尺寸為45 cm×30 cm× 20 cm，土壤為無(wú)菌營(yíng)養(yǎng)土，重量約4 kg。首先在土壤中人工添加高效氯氰菊酯，使高效氯氰菊酯含量達(dá)到400 mg/kg，再加入菌劑40 g攪拌均勻，保持室內(nèi)溫度20～34 ℃，定期輕翻土壤、噴施補(bǔ)充水份，保持土壤濕度40 %～60 %，一個(gè)月之后測(cè)定土壤高效氯氰菊酯殘留量。

2 結(jié)果與分析

2.1 高效氯氰菊酯降解菌的分離

從土壤中分離獲得1株在1 g/L高效氯氰菊酯平板上正常生長(zhǎng)的微生物菌株，形態(tài)觀察為真菌。該菌不可在單純無(wú)機(jī)鹽平板上生長(zhǎng)，可以認(rèn)為該菌以高效氯氰菊酯作為其唯一碳源，是化能異養(yǎng)型菌株，將該菌命名為SSCL-3。

2.2 SSCL-3降解能力初步測(cè)定

第0、12及24小時(shí)取發(fā)酵液，石油醚震蕩萃取，取有機(jī)相，紫外分光光度計(jì)235 nm測(cè)定吸光度。與空白對(duì)照相比，SSCL-3顯著降低了高效氯氰菊酯在發(fā)酵液中的含量，12 h發(fā)酵液中殘留量為70 %，空白對(duì)照為99 %。24 h時(shí)殘留量為27 %，空白對(duì)照為89 %，具有顯著差異(圖1，P<0.01)，SSCL-3可有效降解高效氯氰菊酯。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的適用范圍來(lái)看，當(dāng)發(fā)酵液中高效氯氰菊酯含量低于100 mg/L時(shí)，殘留量計(jì)算值不可取信，因此，為了準(zhǔn)確確定發(fā)酵后SSCL-3的降解率，需進(jìn)行HPLC測(cè)定。

表1 發(fā)酵第0、12 及24 小時(shí)發(fā)酵液中高效氯氰菊酯殘留濃度Table 1 β-Cypermethrin residual quantity in fermentation at 0 hour 12 hour and 24 hour

圖1 高效氯氰菊酯殘留率Fig.1 β-Cypermethrin residual rate in fermentation at 0 hour 12 hour and 24 hour

2.3 降解菌SSCL-3形態(tài)鑒定

高效氯氰菊酯降解菌SSCL-3在MA平板上生長(zhǎng)緩慢，在CYA平板上生長(zhǎng)快，絨狀，菌絲松散，背面無(wú)色。具有濃密孢子，起初黃綠色，后期褐色。PDA插片鏡檢觀察其分生孢子囊泡膨大形成球形，頂端放射狀生出小梗，分生孢子圓形。顯示該菌為曲霉(Aspergillussp.)[17](圖2)。形態(tài)接近黃曲霉與米曲霉，需要對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步鑒定。

圖2 SSCL-3菌株形態(tài)鑒定Fig.2 Morphological identification of strain SSCL-3

2.4 黃曲霉毒素測(cè)定

在產(chǎn)毒培養(yǎng)基AFPA上接種培養(yǎng)，該菌背面未產(chǎn)生亮黃色物質(zhì)，培養(yǎng)基呈初始淡黃色(圖3)。黃曲霉毒素測(cè)定顯示該菌發(fā)酵至72 h仍不產(chǎn)生黃曲霉毒素。

圖3 菌株SSCL-3在AFPA培養(yǎng)基上的特征Fig.3 The characteristic on AFPA of strain SSCL-3

2.5 降解菌SSCL-3的ITS序列鑒定

將降解菌ITS 1～4之間序列基因擴(kuò)增測(cè)序，經(jīng)GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)，與米曲霉及黃曲霉其同源性可達(dá)99.79 %。選取CBS、ATCC、NRRL等庫(kù)藏曲霉屬菌株核酸序列作為參考，用系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)軟件Clustal X及MEGA4構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)(圖4)。系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)顯示該菌為曲霉屬(Aspergillussp.)。ITS鑒定顯示接近米曲霉與黃曲霉，產(chǎn)毒試驗(yàn)證明該菌不產(chǎn)黃曲霉毒素，因此可以鑒定該菌為米曲霉(Aspergillusoryzae)。將該序列提交基因bank，登錄號(hào)為： MK 163533。

圖4 SSCL-3與模式菌株建樹(shù)Fig.4 Phylogenetic tree of strain SSCL-3

2.6 降解菌SSCL-3的生長(zhǎng)特性

該菌以孢子懸液接種，28 ℃，150 r/min培養(yǎng)，于48 h進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，大約在60 h進(jìn)入平臺(tái)期，平臺(tái)期可一直維持至72 h(圖5)。在固體發(fā)酵過(guò)程中，適當(dāng)?shù)牡練び欣谕?，易于菌絲深入培養(yǎng)基，大量孢子一般形成于第7天，形成大約 3×1010/g的孢子。

圖5 SSCL-3菌株菌絲生長(zhǎng)特性Fig.5 Mycelial growth characteristics of strain SSCL-3

2.7 米曲霉SSCL-3對(duì)高效氯氰菊酯的降解率測(cè)定

不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)HPLC測(cè)定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線Y=617.54x+2032.1 (R2=0.9999)，曲線適用范圍為5～1000 mg/L。經(jīng)石油醚萃取，HPLC法測(cè)定，搖瓶發(fā)酵24 h后測(cè)定高效氯氰菊酯殘留量(圖6)。12 h后高效氯氰菊酯在SSCL-3發(fā)酵液中殘留量為 74.6 %，與無(wú)菌對(duì)照具極顯著差異(P<0.05)。24 h后，SSCL-3發(fā)酵液中殘留量為11.1 %，空白對(duì)照的殘留量為 85.4 %，具有極顯著差異(P<0.01)?？梢哉J(rèn)為米曲霉在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中將高效氯氰菊酯作為碳源進(jìn)行分解利用。

*同列差異達(dá),顯著水平(P<0.05)，**同列差異達(dá)極顯著水平(P<0.01)*Values are significantly different at the 0.05 probability level；** values are significantly different at the 0.01 probability level

2.8 米曲霉SSCL-3對(duì)其他菊酯類(lèi)農(nóng)藥耐受測(cè)定

對(duì)某一種菊酯農(nóng)藥有降解能力的微生物對(duì)其他菊酯類(lèi)農(nóng)藥也具有一定的降解能力[18]，為了驗(yàn)證米曲霉SSCL-3對(duì)其他菊酯類(lèi)家族的耐受能力，制備了其他5種菊酯類(lèi)農(nóng)藥：氯菊酯、溴氰菊酯、氯氟氰菊酯、氰戊菊酯、聯(lián)苯菊酯。將不同濃度的菊酯農(nóng)藥加入無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基，通過(guò)觀察菌絲球在其中生長(zhǎng)是否受到抑制或增殖判斷米曲霉SSCL-3是否能耐受該濃度的菊酯類(lèi)農(nóng)藥。米曲霉SSCL-3具有廣泛的菊酯類(lèi)農(nóng)藥的耐受能力，并且可能具有降解其他菊酯類(lèi)農(nóng)藥的潛能(表2)，降解能力待進(jìn)一步檢測(cè)驗(yàn)證。

表2 米曲霉SSCL-3對(duì)其他菊酯類(lèi)農(nóng)藥的耐受

2.9 菌劑制備及土壤室內(nèi)試驗(yàn)

SSCL-3固體發(fā)酵后期形成大量褐色孢子，干燥后與麩皮、葡萄糖、高嶺土復(fù)配后形成棕色菌劑。土壤室內(nèi)實(shí)驗(yàn)中依照土壤重量的百分之一施用菌劑，保持室內(nèi)溫度20～34 ℃，保持土壤相當(dāng)?shù)臐穸燃八缮⒍榷ㄆ谶M(jìn)行補(bǔ)水及翻動(dòng)，可以在土壤盒內(nèi)觀察到白色菌絲迅速布滿土壤表面的過(guò)程。經(jīng)石油醚萃取，HPLC法測(cè)定，土壤中400 mg/L的高效氯氰菊酯被降解至222.8 mg/L，降解率達(dá)45.60 % (表3)。延長(zhǎng)測(cè)定時(shí)間或降低土壤中受測(cè)高效氯氰菊酯的原始含量有利于菌劑對(duì)高效氯氰菊酯的降解。

表3 土壤室內(nèi)試驗(yàn)高效氯氰菊酯殘留量及降解率Table 3 β-Cypermethrin residual quantity and degradation rate in soil at lab

3 討 論

農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中使用農(nóng)藥可有效控制作物蟲(chóng)害，提高作物產(chǎn)量，促進(jìn)經(jīng)濟(jì)發(fā)展。然而不當(dāng)使用農(nóng)藥亦引起了一些新問(wèn)題[19]。殘留于土壤中的農(nóng)藥一部分發(fā)生降解轉(zhuǎn)化，其余則通過(guò)各種途徑進(jìn)入環(huán)境，或累積于土壤或揮發(fā)進(jìn)入大氣或進(jìn)入地表、地下水或被植物吸收[20-21]。農(nóng)藥殘留物引起了生態(tài)改變，造成脊椎動(dòng)物發(fā)育和生殖畸形或慢性細(xì)胞毒性等問(wèn)題[22]。研究表明氯氰菊酯在土壤中的消解動(dòng)態(tài)均符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程，原始沉積量與施藥量、施藥次數(shù)密切相關(guān)[23]。

微生物法降解土壤殘留農(nóng)藥對(duì)于恢復(fù)生態(tài)環(huán)境、降低脊椎動(dòng)物風(fēng)險(xiǎn)具有重要意義[24-25]。目前發(fā)現(xiàn)對(duì)菊酯類(lèi)農(nóng)藥具有降解能力的微生物有很多，Tallur等[26]報(bào)道微球菌屬(Micrococcussp.)菌株CPN-1可將1000 mg/L的氯氰菊酯在8 d內(nèi)降解90 %。趙浩宇等[27]報(bào)道小鏈小桿菌屬(Catellibacteriumsp.)菌株CC-5可將500 mg/L的氯氰菊酯在7 d內(nèi)降解56 %。在室內(nèi)土壤實(shí)驗(yàn)中據(jù)Akbar.等[28-29]報(bào)道氯氰菊酯(200 mg/L)在42 d內(nèi)可被醋酸鈣不動(dòng)桿菌(Acinetobactercalcoaceticus)菌株MCm531、鞘氨醇菌屬(Sphingomonassp.)菌株RCm6、副短短芽孢桿菌(Brevibacillusparabrevis)菌株FCm9、巨大芽孢桿菌(Bacillusmegaterium)菌株JCm2、紅球菌屬(Rhodococcussp.)菌株JCm5或人蒼白桿菌(Ochrobactrumanthropic)菌株JCm1降解90 %以上。陳少華等[30]報(bào)道在田間試驗(yàn)中金色鏈霉菌(Streptomycesaureus)菌株HP-S-01可將氯氰菊酯(50 mg/L)降低81.1 %。Tallur、趙浩宇及陳少華等[26-27,30-31]均研究了氯氰菊酯在細(xì)菌(微球菌、芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、鏈球菌、地衣芽孢桿菌和鞘氨醇單胞菌)中的降解途徑。細(xì)菌主要通過(guò)羧酸酯酶的酯鍵水解作用產(chǎn)生羧酸和醇。經(jīng)過(guò)羧酸酯酶的作用可將氯氰菊酯水解，3-苯氧基苯甲酸是氯氰菊酯細(xì)菌降解的主要代謝產(chǎn)物之一。而3-苯氧基苯甲酸屬雌激素類(lèi)物質(zhì)，具有相當(dāng)?shù)纳扯拘訹32]。在本研究中除米曲霉SSCL-3以外也發(fā)現(xiàn)無(wú)色桿菌(Achromobactersp.)、惡臭假單胞菌(Pseudomonasputida)、貝萊斯芽孢桿菌(Bacillusvelezensis)、噬線沙雷氏菌(Serratianematodiphila)等菌株，對(duì)氯氰菊酯具有一定的降解性能。但部分菌株具有條件致病性如蒼白桿菌(Ochrobactrumanthropi)[33]、克雷伯氏菌屬(Klebsiellasp.)[34]等，部分不形成孢子的細(xì)菌例如鞘氨醇桿菌(Sphingobacteriumsp.)[35]、韓國(guó)假單胞菌(Pseudomonaskoreensis)[36]等，不利于應(yīng)用型研究的開(kāi)展。目前有關(guān)真菌降解菊酯類(lèi)農(nóng)藥的研究報(bào)道不多，但真菌可產(chǎn)生大量孢子有利于生產(chǎn)制備及其在土壤環(huán)境中定殖。本研究獲得的米曲霉經(jīng)驗(yàn)證不產(chǎn)生黃曲霉毒素，是較為合適的應(yīng)用型菌株。其代謝途徑及盆栽、田間試驗(yàn)需進(jìn)一步進(jìn)行研究。

4 結(jié) 論

本研究篩選獲得一株可分解利用高效氯氰菊酯的微生物菌株SSCL-3，該菌株可在含1000 mg/L的高效氯氰菊酯無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中正常生長(zhǎng)。經(jīng)鑒定確定該菌為米曲霉(Aspergillusoryzae)，不產(chǎn)生黃曲霉毒素。經(jīng)紫外分光光度法及HPLC證實(shí)，在含高效氯氰菊酯500 mg/L無(wú)機(jī)鹽液體培養(yǎng)基中，28 ℃、150 r/min搖瓶培養(yǎng)24 h，高效氯氰菊酯的降解率為88.9 %。米曲霉SSCL-3可在其他多種菊酯類(lèi)農(nóng)藥中正常生長(zhǎng)。土壤室內(nèi)試驗(yàn)證明：土壤水分含量保持40 %～60 %，室內(nèi)溫度20～34 ℃、30 d條件內(nèi)，米曲霉SSCL-3可將土壤中400 mg/L的高效氯氰菊酯降解45.6 %，顯示該菌具有解決土壤殘留高效氯氰菊酯問(wèn)題的潛能。