王曉偉 王艷偉 王海波 宋漢敏 劉瑞新 石巖

中圖分類號R917

文獻標(biāo)志碼A

文章編號1001-0408（2020）02-0153-07

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.02.06

摘要 目的：提高香砂和中丸的藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：在香砂和中丸原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，修訂性狀觀察和顯微鑒定項目;建立組方藥材姜厚樸、廣藿香、蒼術(shù)（土炒）的薄層色譜法（TLC）鑒定方法;建立橙皮苷、厚樸酚、和厚樸酚的高效液相色譜法（HPLC）含量測定方法。結(jié)果：香砂和中丸的外觀性狀描述修改為“黃棕色或棕褐色的水丸”。對顯微鑒別項目的表述進行了少量調(diào)整。姜厚樸、廣藿香、蒼術(shù)（土炒）的TLC圖譜均與相應(yīng)的對照品或?qū)φ账幉脑谙嗤恢蒙巷@現(xiàn)相同顏色的斑點，且陰性樣品無干擾。HPLC法采用色譜柱為Phenomenex LunaC10柱，柱溫為30℃，流動相分別為甲醇一水（40：60，V/V橙皮苷）、乙腈-1%冰醋酸（52：48.V/V，厚樸酚、和厚樸酚），流速為1.0 mL/min，檢測波長分別為284 nm（橙皮苷）、294 nm（厚樸酚、和厚樸酚）。橙皮苷、厚樸酚、和厚樸酚進樣量分別在0.201 8-2.018、0.035 7-0.357 4、0.028 2-0.282 4 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r均為0.999 9）;檢測限分別為2.0、0.72、0.45 ng，定量限分別為7.0、2.45、1.61 ng;精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性、耐用性試驗的RSD均小于3%;平均回收率分別為99.92%、100.49%、102.08%.RSD均小于3%。結(jié)論：本研究在香砂和中丸原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上修訂了性狀觀察、顯微鑒別項目的表述，增加了姜厚樸、蒼術(shù)（土炒）、廣藿香的TLC鑒別方法，并采用HPLC法測定了橙皮苷、厚樸酚、和厚樸酚的含量，能夠有效地提高該制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

關(guān)鍵詞 香砂和中丸;鑒別;含量測定;薄層色譜法;高效液相色譜法;質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

香砂和中丸是由陳皮、姜厚樸、蒼術(shù)（土炒）、麩炒枳殼、醋青皮、焦山楂、砂仁、炙甘草、廣藿香、清半夏、白術(shù)（土炒）、茯苓、六神曲（炒）等13味藥材組方而成的中成藥制劑，于2002年被國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的《第三批非處方藥目錄》所收錄，其具有健脾燥濕、和中消食等功能，主要用于脾胃不和、不思飲食、胸滿腹脹、惡心嘔吐、噫氣吞酸等癥的治療[1]。該品種目前有5個國藥準(zhǔn)字文號，分別來自5家生產(chǎn)企業(yè)，規(guī)格均為每500丸重30g。

香砂和中丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)最早于1977年被《河南省藥品標(biāo)準(zhǔn)》收載，但其項下僅有性狀及丸劑檢查等項目[2];到20世紀(jì)80～90年代，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)被收錄于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑（第二冊）》，與《河南省藥品標(biāo)準(zhǔn)》相比，該版標(biāo)準(zhǔn)的檢驗項目中僅增加了顯微鑒別項[1，3]，顯然，該標(biāo)準(zhǔn)已不適用于現(xiàn)代中藥質(zhì)量評價與控制的需求。藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是對藥品進行質(zhì)量評價與控制的基礎(chǔ)，為使香砂和中丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與現(xiàn)代藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)接軌，并提高該品種質(zhì)量評價的水平，筆者對香砂和中丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進行了系統(tǒng)性研究，包括采用顯微鑒定和薄層色譜法（TIC）對主要組方藥材進行鑒定，并建立了高效液相色譜法（HPIC）測定組方藥材陳皮、麩炒枳殼、醋青皮中的活性成分橙皮苷和姜厚樸中的活性成分厚樸酚、和厚樸酚的含量，以期為相關(guān)研究人員提供參考，更好地推動中藥質(zhì)量監(jiān)管工作。

1 材料

1.1 儀器

Waters 2695型高效液相色譜儀，包括Waters 2998型光電二極管陣列（PDA）檢測器（美國Waters公司）;Digistore 2型薄層色譜數(shù)碼成像系統(tǒng)（瑞士CAMAG公司）;XPE 205型電子天平（美國Mettler-Toledo公司）;GZX-DH-400-BSⅡ型電熱恒溫干燥箱、XMTD-204型數(shù)顯式電熱恒溫水浴鍋（上海市躍進醫(yī)療器械有限公司）;IKA C-MAG HP 7型加熱器（德國IKA公司）;KQ-300型超聲波儀（昆山市超聲儀器有限公司）。

1.2 試劑與藥品

橙皮苷對照品（批號：110721-200512，純度：>98%）、厚樸酚對照品（批號：110729-200411，純度：>98%）、和厚樸酚對照品（批號：110730-201112，純度：>98%）、百秋李醇對照品（批號：110772-200404，純度：>98%）、蒼術(shù)素對照品（批號：111924-201006，純度：>98%）、廣藿香對照藥材（批號：121135-200904）、蒼術(shù)對照藥材（批號：120932-199202）均購自中國食品藥品檢定研究院;硅膠G和硅膠GF 254預(yù)制薄層色譜板分別購自青島海洋化工廠和煙臺市化學(xué)工業(yè)研究所;甲醇、乙腈（德國Merck公司，色譜純）;其余試劑為分析純，水為超純水。

香砂和中丸樣品共9批，分別來自2家生產(chǎn)企業(yè)（企業(yè)代碼為X、Y），樣品信息詳見表1。

2 方法與結(jié)果

2.1 外觀性狀

原標(biāo)準(zhǔn)對香砂和中丸的描述為“土黃色的水丸”[1]，但筆者對樣品實際觀察后認(rèn)為其顏色比土黃色更深，因此將香砂和中丸的外觀性狀描述修改為“黃棕色或棕褐色的水丸”。

2.2 TLC鑒別

2.2.1 姜厚樸的TLC鑒別取本品10 g，研細，加石油醚（30～60℃）50 mL，水浴加熱回流30 min，濾過;濾液用l%氫氧化鈉溶液萃取2次，每次15 mL，合并氫氧化鈉溶液層，加稀鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至2～3;用乙酸乙酯萃取2次，每次20 mL，合并乙酸乙酯液層，水浴揮去溶劑濃縮至1 mL，即得供試品溶液。取相應(yīng)量的缺姜厚樸陰性樣品（由Y廠家提供，以下同），按供試品溶液制備方法處理，即得陰性對照溶液。分別取厚樸酚對照品、和厚樸酚對照品各適量，加乙酸乙酯制成每1 mL含1mg的溶液，即得對照品溶液。吸取上述供試品溶液、陰性對照溶液各8 μL，厚樸酚對照品、和厚樸酚對照品溶液各2 μL，分別點于同一硅膠GF 254預(yù)制薄層板上，以環(huán)己烷一丙酮（10：3，V/V）為展開劑展開，取出，晾干，置于紫外光燈（波長254 nm）下檢視。結(jié)果顯示，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，樣品色譜均顯相同顏色的斑點，且陰性樣品無干擾，詳見圖1。

2.2.2 廣藿香的TLC鑒別 取本品10 g，研細，置于500 mL圓底燒瓶中，加入沸石數(shù)粒，加水200 mL，連接揮發(fā)油測定器;自測定器上端加水至刻度，再加入乙酸乙酯1 mL，連接回流冷凝管，電熱套加熱提取3h，分離乙酸乙酯層，即得供試品溶液。取相應(yīng)量的缺廣藿香陰性樣品，按供試品溶液制備法處理，即得陰性對照溶液。取廣藿香對照藥材1 g，按供試品溶液制備法處理，即得對照藥材溶液。取百秋里醇對照品適量，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，即得對照品溶液。吸取上述供試品溶液、陰性對照溶液各2 μL，對照藥材溶液、對照品溶液各1 μL，分別點于同一硅膠G預(yù)制薄層板上，以石油醚（30～60℃）.乙酸乙酯一冰醋酸（95：5：0.2，V/V）為展開劑展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰，置于日光下檢視。結(jié)果顯示，在與對照品和對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，樣品色譜均顯相同顏色的斑點，且陰性樣品無干擾，詳見圖2。

2.2.3 蒼術(shù)（土炒）的TLC鑒別取“2.2.2”項下供試品溶液作為供試品溶液。取相應(yīng)量的缺蒼術(shù)（土炒）陰性樣品，按“2.2.2”項下供試品溶液制備方法處理，即得陰性對照溶液。取蒼術(shù)對照藥材1 g，按“2.2.2”項下供試品溶液制備法處理，即得對照藥材溶液。取蒼術(shù)素對照品適量，加甲醇制成每1 mL含0.1 mg的溶液，即得對照品溶液。吸取上述溶液各6～8 μL，分別點于同一硅膠G預(yù)制薄層板上，以石油醚（60～90℃）一丙酮（9：2，V/V）為展開劑展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸試液，于105℃下加熱至斑點顯色清晰，置于日光下檢視。結(jié)果顯示，在與對照品和對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，樣品色譜顯相同顏色的斑點，且陰性樣品無干擾，詳見圖3。

2.3 橙皮苷含量測定

2.3.1 溶液制備取橙皮苷對照品適量，加甲醇制成每1 mL含60 μg的溶液，即得對照品溶液。取本品適量，研細，取約0.1 g置于錐形瓶中，精密稱定，精密加入甲醇50 mL，稱定質(zhì)量，水浴加熱回流1h，放冷，再次稱定質(zhì)量，加甲醇補足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。按處方比例稱取相應(yīng)量的缺陳皮、醋青皮、麩炒枳殼的陰性樣品，按供試品溶液制備方法處理，即得陰性對照溶液。

2.3.2 色譜條件色譜柱：Phenomenex Luna C18柱（250mmx4.6 mm，5 μm）;柱溫：30℃;流動相：甲醇一水（40：60，V/V）;流速：1.O mL/min;檢測波長：284 nm。

2.3.3 系統(tǒng)適用性及專屬性試驗取“2.3.1”項下對照品溶液、供試品溶液和陰性對照溶液各適量，按“2.3.2”項下色譜條件進樣測定。結(jié)果顯示，各色譜峰分離良好，理論板數(shù)按橙皮苷峰計不低于2 000，陰性對照溶液在橙皮苷對照品色譜峰相應(yīng)的位置上無干擾色譜峰，表明本方法系統(tǒng)適用性及專屬性均良好。色譜圖見圖4。2.3.4線性關(guān)系考察取橙皮苷對照品適量，加甲醇制成每1 mL含橙皮苷201.8 μg的對照品母液;分別精密吸取該母液1、2、3、4、5、6、7.5、10 mL置于10 mL量瓶中，以甲醇稀釋定容，即得系列線性對照品溶液。分別取上述線性對照品溶液各適量，按“2.3.2”項下色譜條件進樣測定。以橙皮苷峰面積（X）為橫坐標(biāo)、進樣量（y，μg）為縱坐標(biāo)進行線性回歸，得橙皮苷回歸方程為Y= 1.93×106X- 9.72 X10⁴（r= 0.999 9）。結(jié)果表明，橙皮苷進樣量在0.201 8～2.018 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。2.3.5精密度試驗精密吸取同一份供試品溶液（編號：X1）適量，按“2.3.2”項下色譜條件連續(xù)進樣6次。結(jié)果，橙皮苷峰面積RSD為0.1%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.3.6 重復(fù)性試驗取同一批樣品（編號：Y3）共6份，每份0.1g，按“2.3.1”項下方法制備供試品溶液，再按“2.3.2”項下色譜條件分別進樣測定，以外標(biāo)法計算橙皮苷含量。結(jié)果，橙皮苷平均含量為30.2 mg/g，RSD為1.2%（n=6），表明方法重復(fù)性良好。

2.3.7 加樣回收試驗取已知橙皮苷含量的樣品（編號：Y3）共6份，每份約0.05 g，分別置于錐形瓶中，精密稱定，分別精密加入每1 mL含橙皮苷177.02 μg的對照品溶液（按“2.3.1”項下方法重新配制）10 mL、甲醇40mL，按“2.3.1”項下供試品溶液制備法處理，然后按照“2.3.2”項下色譜條件進樣測定并計算加樣回收率，結(jié)果見表2。

2.3.8 檢測限與定量限考察取“2.3.1”項下對照品溶液適量，以甲醇逐級稀釋，按“2.3.2”項下色譜條件進樣測定，分別以信噪比3：1、10：1計算檢測限和定量限。結(jié)果，橙皮苷的檢測限和定量限分別為2.0、7.O ng。2.3.9穩(wěn)定性試驗取同一供試品溶液（編號：Y3）適量，分別在室溫下放置0、2、4、6、10、12 h時，按“2.3.2”項下色譜條件進樣測定。結(jié)果，橙皮苷峰面積RSD為2.3%（n=6），表明供試品溶液在室溫下放置12 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.3.10 色譜柱耐用性試驗取同一供試品溶液（編號：XI）適量，參照“2.3.2”項下色譜條件，分別使用3種不同品牌的色譜柱，即Phenomenex Luna（ 250 mmx4.6 mm，5μm）、YMC-Pack ODS-A（ 250 mmx4.6 mm，5μm）、Kro-masil C18（250 mmx4.6 mm，5μm）進樣測定并計算橙皮苷含量。結(jié)果，橙皮苷含量的RSD為0.5%（n=3），表明本方法中色譜柱耐用性良好。

2.3.11 樣品含量測定取各批次樣品各0.1 g，精密稱定，按“2.3.1”項下供試品溶液制備法處理，再按“2.3.2”項下色譜條件進樣測定并計算橙皮苷含量，平行操作2次，取平均值，結(jié)果見表3。

2.4 厚樸酚、和厚樸酚含量測定

2.4.1 溶液制備取厚樸酚對照品、和厚樸酚對照品各適量，加甲醇制成每1 mL分別含厚樸酚60 μg、和厚樸酚40 μg的溶液，即得2種成分的混合對照品溶液。取本品適量，研細，取約2 g置于索氏提取器中，精密稱定，加甲醇適量，水浴加熱回流提取3h，提取液以水浴揮去溶劑濃縮后，轉(zhuǎn)移至25 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。按處方比例稱取相應(yīng)量的缺姜厚樸陰性樣品，按供試品溶液制備方法處理，即得陰性對照溶液。

2.4.2 色譜條件色譜柱：Phenomenex Luna C18柱（250mmx4.6 mm，5 μm）;柱溫：30℃;流動相：乙腈-l%冰醋酸（52：48，V/V）;流速：1.O mL/min;檢測波長：294 nm。

2.4.3 系統(tǒng)適用性及專屬性試驗取“2.4.1”項下混合對照品溶液、供試品溶液和陰性對照溶液各適量，按“2.4.2”項下色譜條件進樣測定。結(jié)果顯示，各色譜峰分離良好，理論板數(shù)按厚樸酚或和厚樸酚計均不低于2 000，陰性對照溶液在混合對照品色譜峰相應(yīng)的位置上無干擾色譜峰，表明本方法系統(tǒng)適用性及專屬性均良好。色譜圖見圖5。

2.4.4 線性關(guān)系考察取厚樸酚、和厚樸酚對照品各適量，加甲醇制成每1 mL含厚樸酚35.74 μg、和厚樸酚28.24 μg的混合對照品母液;精密吸取上述混合對照品母液1、2、3、4、5、6、7、8、10 mL置于10 mL量瓶中，以甲醇稀釋定容，即得系列線性對照品溶液。分別吸取上述系列對照品溶液各適量，按“2.4.2”項下色譜條件進樣測定。分別以厚樸酚、和厚樸酚峰面積（X）為橫坐標(biāo)、兩者對應(yīng)的進樣量（Y，μg）為縱坐標(biāo)進行線性回歸，得厚樸酚回歸方程為Y= 1.22 X10⁴X- 9.9lx104（ r= 0.999 9），和厚樸酚回歸方程為Y= 1.68×10⁴X- 1.04×104 （r= 0.999 9）。結(jié)果表明，厚樸酚、和厚樸酚進樣量分別在0.035 7～0.357 4 μg、0.028 2～0.282 4μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。2.4.5精密度試驗精密吸取同一供試品溶液（編號：Y4） 10 μL，按“2.4.2”項下色譜條件連續(xù)進樣6次。結(jié)果，厚樸酚、和厚樸酚峰面積RSD分別為1.4%、1.0%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.4.6 重復(fù)性試驗取同一批樣品（編號：Y4）共6份，每份2 g，按照“2.4.1”項下方法制備供試品溶液，并按照“2.4.2”項下色譜條件分別進樣測定，以外標(biāo)法計算厚樸酚、和厚樸酚的含量。結(jié)果，厚樸酚、和厚樸酚的平均含量分別為0.46、0.33 mg/g，RSD分別為2.0%、2.0%（n=6），表明方法重復(fù)性良好。

2.4.7 加樣回收率試驗取已知厚樸酚、和厚樸酚含量的樣品（編號：Y4）共6份，每份約1 g，置于索氏提取器中，精密稱定，分別精密加入每ImL含厚樸酚17.868 μg、和厚樸酚14.120 μg的混合對照品溶液（按“2.4.1”項下方法重新配制）25 mL，按“2.4.1”項下供試品溶液制備法處理，再按“2.4.2”項下色譜條件進樣測定并計算加樣回收率，結(jié)果見表4、表5。

2.4.8 檢測限與定量限考察取“2.4.1”項下混合對照品溶液適量，以甲醇逐級稀釋，按“2.4.2”項下色譜條件進樣測定，分別以信噪比3：1、10：1計算檢測限和定量限。結(jié)果，厚樸酚、和厚樸酚的檢測限分別為0.72、0.45ng，定量限分別為2.45、1.61 ng。

2.4.9 穩(wěn)定性試驗取同一供試品溶液（編號：Y3）適量，分別在室溫下放置O、2、4、6、10、12 h時，按“2.4.2”項下色譜條件進樣測定。結(jié)果，厚樸酚、和厚樸酚峰面積RSD分別為1.7%、1.1%（n=6），表明供試品溶液在室溫下放置12h穩(wěn)定性良好。

2.4.10 色譜柱耐用性試驗取同一供試品溶液（編號：Y3）適量，參照“2.4.2”項下色譜條件，分別使用3種不同品牌的色譜柱，即Phenomenex Luna（ 250 mmx4.6 mm，5μm）、YMC-Pack ODS-A（ 250 mmx 4.6 mm，5μm）、Kro-masil C18（250 mmx4.6 mm，5μm）進樣測定并計算厚樸含量。結(jié)果，厚樸酚、和厚樸酚含量的RSD分別為1.5%、1.3%（n=3），表明本方法中色譜柱耐用性良好。

2.4.11 樣品含量測定取各批次樣品各2 9，精密稱定，按“2.4.1”項下供試品溶液制備法處理，再按“2.4.2”項下色譜條件進樣測定并計算厚樸酚、和厚樸酚的含量，平行操作2份，取平均值，結(jié)果見表6。

3 討論

有關(guān)中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究與建立是一個系統(tǒng)性工程，需要體現(xiàn)藥品本身的安全、穩(wěn)定和有效的必備特性，此外還應(yīng)該體現(xiàn)中藥本身的特色一，。作為用于評價和控制中藥質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)而言，其本身也須具有全面性、特征性、科學(xué)性和通用性。本研究在香砂和中丸原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，開展了較為全面的系統(tǒng)性研究工作，項目包括顯微鑒別，姜厚樸、陳皮、蒼術(shù)（土炒）、白術(shù)（土炒）、廣藿香等的TLC法鑒別，以及橙皮苷、厚樸酚、和厚樸酚的HPLC法含量測定。

3.1 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中顯微特征鑒別項的改進

原標(biāo)準(zhǔn)中顯微特征鑒別較為完善，因此在本研究中僅對其中部分組分的顯微特征進行了術(shù)語上的修改。本品原標(biāo)準(zhǔn)中顯微鑒別項為：石細胞分枝狀，壁厚，層紋明顯;內(nèi)種皮石細胞黃棕色或棕紅色，表面觀類多角形，壁厚，胞腔含硅質(zhì)塊;果皮表皮細胞呈類圓形或類多角形，壁稍厚，胞腔內(nèi)含黃棕色或紅棕色物;中果皮薄壁組織無色，細胞形狀不規(guī)則，壁不均勻增厚，厚約至7 μm，角隅處較厚，細胞中可見黃色類圓形或不規(guī)則形橙皮苷結(jié)晶;非腺毛1～8細胞，壁有疣狀突起;草酸鈣針晶成束，長32～144 μm，存在于黏液細胞中或散在。筆者通過查詢2010年版和2015年版《中國藥典》砂仁的顯微鑒別特征描述，將“內(nèi)種皮石細胞”改為“內(nèi)種皮厚壁細胞”。另經(jīng)筆者調(diào)研，由于現(xiàn)有粉碎技術(shù)的提升，樣品粉末中很難發(fā)現(xiàn)較為完整的陳皮中果皮薄壁組織細胞，也不易發(fā)現(xiàn)成片存在于中果皮薄壁細胞中的草酸鈣方晶;且陳皮、醋青皮、麩炒枳殼及山楂薄壁組織細胞中均有草酸鈣方晶存在，無專屬性，且在成品中檢出率較低。兩種顯微特征專屬性均不強，故建議取消上述顯微特征表述。

3.2 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中TLC法鑒別項的改進

為了評價TLC鑒別方法的適用程度，本研究對各項TLC鑒別法均進行了耐用性試驗，針對影響TLC法的主要影響因素，即溫度、濕度以及不同廠家薄層板三個方面分別進行了考察：溫度考察范圍為7～30℃，濕度考察范圍為25%～75%，薄層色譜預(yù)制板選用了市場相對主流的2家生產(chǎn)企業(yè)（青島海洋化工廠、煙臺市化學(xué)工業(yè)研究所）生產(chǎn)的產(chǎn)品。結(jié)果顯示，本品各項TLC鑒別方法在上述溫度、濕度以及不同品牌薄層色譜預(yù)制板等試驗條件改變的情況下均能得到效果一致的鑒別結(jié)果，各陰性樣品也均未出現(xiàn)干擾色譜斑點。

本課題組前期對樣品中的姜厚樸進行TLC法鑒別時曾采用石油醚（30～60℃）加熱回流提取后濃縮的樣品處理方法，但是所得供試品色譜干擾斑點過多、色譜分離效果較差，而采用本文方法后則能較好地去除干擾斑點，有效地提升了色譜分離效果。

筆者在對廣藿香進行TLC鑒別研究時，曾考察乙醚冷浸法提取和乙醚回流法提取的效果，結(jié)果2種提取方法所得供試品溶液的干擾斑點過多，不易鑒別。而采用本文中的揮發(fā)油提取法進行樣品處理后，能達到較好的TLC分離鑒別效果。

此外，由于本品處方中的陳皮、麩炒枳殼、醋青皮這3種藥材的化學(xué)成分十分接近，均含有橙皮苷、柚皮苷和新橙皮苷等成分[5]，筆者在研究中雖曾嘗試改變供試品溶液制備方法和色譜展開條件，但都無法實現(xiàn)這3種藥材的專屬性鑒別，故未納入本研究，這3種藥材的TLC鑒別法有待進一步研究完善。而在白術(shù)（土炒）的TLC鑒別研究中，筆者通過優(yōu)化供試品溶液制備方法和色譜展開條件后，可使供試品色譜分離良好、斑點清晰，但陰性對照始終有干擾，故亦未納入新標(biāo)準(zhǔn)。

3.3 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含量測定項的改進

在研究本品中橙皮苷的含量測定方法時，分別考察了不同提取溶劑（甲醇、50%甲醇、乙醇）、不同提取方法（超聲提取法、加熱回流提取法、索氏提取法）、不同提取時間（0.5、1、1.5 h）以及不同溶劑與藥材的液料比（500：1、200：1、100：1、50：1、25：1，mL/g）的效果;在研究厚樸酚、和厚樸酚的含量測定方法時，同樣分別考察了不同提取溶劑（甲醇、50%甲醇、乙醇）、不同提取方法（超聲提取法、加熱回流提取法、索氏提取法）、不同提取時間（3、4、5、6 h）的效果。最終，根據(jù)提取效率與提取完全程度確定了本文采用的樣品提取方法進行含量測定。

中藥是典型的源于自然界的產(chǎn)物，主要為動物、植物和菌類等生物整體或部分，并以其生物代謝產(chǎn)物作為藥理藥效以及活性作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，其本身化學(xué)成分十分復(fù)雜。對于多組分的中成藥而言，除了藥材飲片原料自身的復(fù)雜性，還存在生產(chǎn)工藝對其品質(zhì)的影響[6-8]，“一品多家”的情況十分普遍，因此能夠揭示不同生產(chǎn)企業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量差異的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)更有利于優(yōu)劣產(chǎn)品的區(qū)分[9]。本研究對不同廠家來源的9批香砂和中丸樣品的含量測定結(jié)果顯示，2家生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品差異明顯：X企業(yè)的3批產(chǎn)品中橙皮苷含量范圍為18.0～27.7 mg/g，而Y企業(yè)的6批產(chǎn)品中橙皮苷含量范圍為30.2～49.7 mg/g;X企業(yè)3批產(chǎn)品中厚樸酚、和厚樸酚含量范圍分別為0.6～1.1、0.3～0.5 mg/g，Y企業(yè)6批產(chǎn)品中厚樸酚、和厚樸酚含量范圍分別為0.3～1.1、0.2～0.7 mg/g。兩家產(chǎn)品的厚樸酚、和厚樸酚含量范圍看似差別不大，但將各批次樣品的厚樸酚和厚樸酚含量取比值處理后可見，X企業(yè)產(chǎn)品中2種成分含量比值范圍為2.0～2.7，而Y企業(yè)產(chǎn)品為1.3～1.7（如表6所示）。從以上對多批次樣品含量測定結(jié)果的分析可知，所測成分可明顯表征香砂和中丸產(chǎn)品的來源（即生產(chǎn)企業(yè)）特征，這些特征和香砂和中丸的藥材組方原料以及生產(chǎn)工藝具有密切的關(guān)系。雖然本次研究受研究時限以及樣本數(shù)量限制，結(jié)論可能存在一定偏差，尚需進一步收集更多樣本進行分析和驗證，然而通過以上初步分析結(jié)果仍可看出本研究所選取的含量測定指標(biāo)成分（橙皮苷、厚樸酚、和厚樸酚）作為本品質(zhì)量控制指標(biāo)具有一定的合理性和有效性。

綜上所述，本研究在香砂和中丸原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上修訂了性狀觀察、顯微鑒別項目的表述，增加了姜厚樸、蒼術(shù)（土炒）、廣藿香的TLC鑒別方法，并采用HPLC法測定了橙皮苷、厚樸酚、和厚樸酚的含量，能夠有效地提高本品的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

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（收稿日期：2019-07-08修回日期：2019-12-06）

（編輯：段思怡）

△基金項目：國家自然科學(xué)基金資助項目（No.81773892）;河南省自然科學(xué)基金資助項目（No.162300410187）

*主管藥師，碩士。研究方向：中藥材及飲片質(zhì)量控制。電話：0371-655660390

E-mail： wxw0357@163.com

#通信作者：研究員，博士。研究方向：中藥質(zhì)量控制。電話：010-67095995. E-mail： san0373@163.com（1）：25-28.