文 敏 張 芬 舒 剛* 徐 丹 唐子婷 黃遠(yuǎn)玲 孫弟芬 楊志勤

（1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，四川成都611130；2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，四川成都611130）

鵪鶉產(chǎn)業(yè)是僅次于雞、鴨的第三大養(yǎng)禽業(yè)[1]，但我國(guó)養(yǎng)殖鵪鶉的時(shí)間并不長(zhǎng)，直到20 世紀(jì)70 年代后才得到較快的發(fā)展，在此期間引進(jìn)一些新的蛋用、肉用型家鶉，建立專門的種鶉生產(chǎn)基地[2]。鵪鶉作為一種大規(guī)模飼養(yǎng)的禽類具有許多優(yōu)點(diǎn)，如繁殖能力強(qiáng)、生長(zhǎng)速度快、飼養(yǎng)周期短、產(chǎn)蛋量高。鵪鶉蛋、肉的營(yíng)養(yǎng)豐富，膽固醇含量低，蛋白質(zhì)含量高；鵪鶉肉質(zhì)細(xì)嫩，含有多種人體必需的氨基酸，具有較高的藥用價(jià)值。此外，相較于雞蛋和雞肉，鵪鶉蛋和鵪鶉肉中的B 族維生素、膽固醇和卵磷脂含量更高[3]，在我國(guó)素有“動(dòng)物人參”的美譽(yù)[4]。集約化養(yǎng)殖下，受到商業(yè)利益的驅(qū)使，不少養(yǎng)殖戶都長(zhǎng)期使用抗生素來(lái)預(yù)防疾病和促進(jìn)生長(zhǎng)，但使用抗生素會(huì)導(dǎo)致農(nóng)副產(chǎn)品藥物殘留和細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)。為消除抗生素帶來(lái)的不利影響，研發(fā)新的抗生素替代品以保證動(dòng)物的健康生長(zhǎng)是目前各國(guó)研究者研究的熱點(diǎn)方向之一，現(xiàn)有不少研究人員將目光投到了我國(guó)傳統(tǒng)的治療藥物中草藥上來(lái)，使用中草藥代替抗生素，是未來(lái)研究的重要方向。丹參為唇形科植物，以干燥根及根莖入藥，具有活血化瘀、通經(jīng)止痛、涼血消癰的作用[5]，丹參的活性成分及代謝產(chǎn)物豐富，因具有降血脂、抗氧化、抗腫瘤活性、抗炎和保護(hù)肝臟的藥理學(xué)作用而受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注[6-10]。

本文通過(guò)在鵪鶉飲用水中添加不同水平的丹參水提液，研究丹參水提液對(duì)鵪鶉育雛期生長(zhǎng)性能、免疫器官和血清生化指標(biāo)的影響，為丹參作為中草藥添加劑提供理論依據(jù)，減少抗生素使用造成的農(nóng)副產(chǎn)品藥物殘留和細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)等亟待解決的問(wèn)題。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

120只1日齡健康無(wú)病的日本雛期鵪鶉購(gòu)自嘉祥縣友民鵪鶉養(yǎng)殖場(chǎng)。

1.2 藥品與試劑

1.2.1 藥品

丹參（Salvia miltiorrhiza）干燥根莖（購(gòu)自四川省成都市金牛區(qū)荷花池中藥材專業(yè)市場(chǎng)，經(jīng)四川農(nóng)業(yè)大學(xué)藥學(xué)系鑒定為正品參）。丹參水提液的制備：將丹參1 000 g 按煎煮法提取水提液，先用冷水浸沒(méi)藥材并超過(guò)藥材2～3 cm，浸泡50 min 左右。浸泡后開(kāi)始第一次煎煮，遵循先“武”后“文”的原則，開(kāi)始用大火，煮沸后改用小火，保持微沸狀態(tài)，為防止藥物被煎糊，煎煮過(guò)程中應(yīng)不斷用玻璃棒進(jìn)行攪拌。第一次煮沸20 min后用脫脂紗布過(guò)濾，收集頭煎濾液約2 500 ml。第二次煎煮以剛好浸沒(méi)藥材，煮沸15 min后收集濾液約2 000 ml，然后將頭煎和二煎得到的濾液合并、濃縮。制成生藥濃度為1 g/ml的丹參水提液。

1.2.2 試劑

谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）試劑盒（南京建成生物工程研究所，貨號(hào)C009-1，批號(hào)201811）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）試劑盒（南京建成生物工程研究所，貨號(hào)C010-1，批號(hào)201811）、血尿素氮（BUN）試劑盒（南京建成生物工程研究所，貨號(hào)C013-2，批號(hào)201811）、血清總蛋白（TP）試劑盒（南京建成生物工程研究所，貨號(hào)A045-4，批號(hào)201811）。

1.3 主要儀器

AG 135電子天平(賽多利斯公司)、高速冷凍離心機(jī)（Thermo Fisher 貨號(hào)75004380）、多功能酶標(biāo)儀（varioskan flash ,美國(guó)）、移液槍（TopPette 單道移液槍）、恒溫培養(yǎng)箱（北京中興偉業(yè)儀器有限公司）。

1.4 試驗(yàn)動(dòng)物和分組

試驗(yàn)選取120 只狀態(tài)良好、體重均勻的1 日齡日本雛期鵪鶉，隨機(jī)分為4 個(gè)組，每組3 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10 只。Ⅰ組為空白對(duì)照組，不對(duì)其飲用水做處理；Ⅱ組為低劑量組，在飲用水中按照2%添加丹參水提液；Ⅲ組為中劑量組，在飲用水中按照4%添加丹參水提液；Ⅳ組為高劑量組，在飲用水中按照8%添加丹參水提液。試驗(yàn)從雛雞1 日齡開(kāi)始，試驗(yàn)期35 d。

1.5 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)方式采用3 層疊層式籠養(yǎng)，自由飲水，自由采食粉料。育雛期的鵪鶉對(duì)溫度敏感，因此要做好保溫工作，試驗(yàn)按照1～3 日齡35～38 ℃，4～7 日齡33～35 ℃，8～14 日齡30～33 ℃。室內(nèi)恒溫保持在28～30 ℃為宜。育雛舍內(nèi)及育雛設(shè)備的消毒和防疫是保證鵪鶉生長(zhǎng)健康的重要因素之一，保證鵪鶉舍內(nèi)保溫隔熱性能好，濕度合理，空氣好采光好通風(fēng)好。育雛期從1 d 飼喂5 次（每隔3 h 一次）逐漸過(guò)渡到1 d 3 次（每隔5 h 一次），每天早上7：00 飼喂第一次，由同一組人員飼養(yǎng)，減少鵪鶉的應(yīng)激。

育雛期鵪鶉的免疫程序是保證鵪鶉健康生長(zhǎng)的必要程序，免疫程序如下：7 d，新城疫傳染性支氣管炎二聯(lián)苗，二倍量滴鼻點(diǎn)眼；12 d，法氏囊多價(jià)苗，二倍量飲水；19 d 新城疫Ⅳ系，二倍量飲水。基礎(chǔ)日糧及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)日糧及營(yíng)養(yǎng)水平（以風(fēng)干基記）

1.6 測(cè)定指標(biāo)及測(cè)定方法

1.6.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定

試驗(yàn)期間每天觀察、記錄各組試驗(yàn)鵪鶉的精神、活動(dòng)、采食及飲水等基本情況。試驗(yàn)全程監(jiān)測(cè)記錄各組鵪鶉的死亡情況，并在試驗(yàn)第35 d 稱量鵪鶉體重，計(jì)算平均日增重。按如下公式計(jì)算：平均日增重=(終末體重-初始體重)/飼養(yǎng)日齡。

1.6.2 臟器指數(shù)測(cè)定

分別于試驗(yàn)第35 d，每組每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取8 只，解剖并分離心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、法氏囊、胸腺，剝離周圍脂肪后用濾紙吸干水分后稱重。按如下公式計(jì)算：器官指數(shù)（g/kg）=器官重（g）/體重（kg）

1.6.3 血清生化指標(biāo)監(jiān)測(cè)

分別在試驗(yàn)第35 d，每組每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取8只，翅靜脈采血1 ml，置于無(wú)抗凝劑的采血管中，靜置2 h，3 000 r/min 離心10 min，分離血清，置于-20 ℃保存?zhèn)溆谩Ｓ迷噭┖袦y(cè)定血清GPT、GOT、BUN、TP含量。

1.7 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)利用SPSS19.0 單因素方差分析(oneway ANO-VA)，用Duncan's 法多重檢驗(yàn)分析組間差異顯著性，數(shù)據(jù)以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”組成，P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 一般觀察

整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程鵪鶉未出現(xiàn)死亡或食欲不振、精神萎靡等異常情況，所有鵪鶉采食和飲水情況正常。

2.2 生長(zhǎng)性能測(cè)定結(jié)果

表2 丹參水提液對(duì)生長(zhǎng)性能的影響(g/只)

由表2可知，與空白組相比，在飲用水中添加低、中、高水平的丹參水提液后，鵪鶉體重分別提高了5.4%、4.4%、5.2%，差異顯著（P＜0.05）；平均日增重分別提高了7%、5.7%、6.7%，差異顯著（P＜0.05）。

2.3 臟器指數(shù)測(cè)定結(jié)果

由表3可得，與空白組相比，中劑量和高劑量組鵪鶉心臟、肝臟、肺臟、腎臟指數(shù)均顯著性的降低（P＜0.05），低劑量組心臟、肝臟指數(shù)有所降低但并不顯著（P＞0.05），腎臟指數(shù)顯著降低（P＜0.05）。在飲用水中添加低、中、高水平的丹參水提液，鵪鶉的胸腺指數(shù)分別提高了4.3%、8.7%、25%（P＜0.05）；各試驗(yàn)組的法氏囊指數(shù)差異不顯著（P＞0.05）；中劑量組和高劑量組脾臟指數(shù)較空白組分別提高了70.9%、90.9%，差異顯著（P＜0.05）。

2.4 血清生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果

表3 丹參水提液對(duì)臟器指數(shù)的影響(g/kg)

表4 丹參水提液對(duì)血清生化指標(biāo)的影響

由表4可知，中劑量組TP含量相比于空白組升高13.60%，差異顯著（P＜0.05）；低劑量組和高劑量組有增加趨勢(shì)但差異不顯著（P＞0.05）。對(duì)于血清GOT、GPT、BUN 的含量，各試驗(yàn)組之間差異不顯著（P＞0.05）。中劑量組GOT、GPT 含量和高劑量組GPT、BUN含量均呈下降趨勢(shì)（P＞0.05）。

3 討論

3.1 丹參水提液對(duì)鵪鶉生長(zhǎng)性能的影響

有研究表明以中草藥作為飼料添加劑, 可以明顯的改善動(dòng)物生產(chǎn)性能[11]。雖然目前研究報(bào)道丹參對(duì)鵪鶉生產(chǎn)性能的影響文章并不多，但有一些關(guān)于將丹參作為飼料添加劑在飼料中添加19.5%可以使雞鴨產(chǎn)蛋率提高10%～15%，增加肉雞的體重的報(bào)道[11-12]。靖吉強(qiáng)等[13]在丹參復(fù)方中藥制劑對(duì)肉雞生產(chǎn)性能及新城疫抗體效價(jià)的影響研究中，給肉雞飼喂丹參復(fù)方中藥制劑的結(jié)果表明肉雞的生長(zhǎng)性能、抗病能力以及成活率均得到了不同程度的提高。林仁穗等[14]的中草藥制劑與丁香羅勒對(duì)鵪鶉產(chǎn)蛋性能影響的研究中，在復(fù)方中藥制劑中添加當(dāng)歸、川芎、山楂、淫羊藿等補(bǔ)氣益血等中藥能改善鵪鶉精神、羽毛狀態(tài)，增強(qiáng)機(jī)體功能，改善生長(zhǎng)性能。本研究結(jié)果與上述報(bào)道中的結(jié)果一致，在鵪鶉飲用水中添加不同水平的丹參水提液，可顯著提高鵪鶉日增重，促進(jìn)鵪鶉的生長(zhǎng)，改善鵪鶉的生長(zhǎng)性能。丹參活血化瘀、通經(jīng)止痛，可以促進(jìn)血液循環(huán), 氣為血帥, 血為氣母，使氣血調(diào)暢以令機(jī)體功能得以增強(qiáng)，這或許是丹參改善生長(zhǎng)性能的原因之一。

3.2 丹參水提液對(duì)鵪鶉臟器指數(shù)的影響

臟器指數(shù)是反映動(dòng)物機(jī)體系統(tǒng)發(fā)育情況的重要指標(biāo)，臟器指數(shù)的高低與臟器發(fā)育的正常與否密切相關(guān)，臟器發(fā)育正常直接決定了臟器的正常功能。此外，臟器指數(shù)直接體現(xiàn)了機(jī)體的代謝水平，其越高說(shuō)明臟器的代謝作用越強(qiáng)，有利于機(jī)體的發(fā)育?，F(xiàn)有許多學(xué)者研究丹參對(duì)臟器作用效果和影響機(jī)理，羅紅等[15]研究證實(shí)丹參的使用可以顯著減少細(xì)胞中Ⅲ型膠原的生成，從而發(fā)揮抗心肌纖維化的作用。肝纖維化發(fā)生的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是肝星狀細(xì)胞的活化，而丹參可以促使肝細(xì)胞程序性的死亡，同時(shí)抑制肝組織基因的表達(dá)，由此達(dá)到防治肝纖維化的作用[16-18]。張旭等[19]的研究表明丹參可明顯減輕糖尿病大鼠腎纖維化，改善腎功能。這些研究都表明丹參對(duì)動(dòng)物體的作用都是有利的，可以不同程度的改善動(dòng)物體臟器的狀態(tài)，從而影響臟器指數(shù)。在本研究結(jié)果中，與空白對(duì)照組相比，丹參低劑量對(duì)鵪鶉心臟、肝臟、肺臟和腎臟指數(shù)均無(wú)顯著影響，中劑量和高劑量對(duì)臟器指數(shù)有降低作用。

免疫器官發(fā)育是否良好以及機(jī)能強(qiáng)弱直接決定了禽類的免疫水平，Rivas 等[20]和Montzouris 等[21]研究表明，器官指數(shù)的高低決定了其中淋巴細(xì)胞增殖的程度，可用于評(píng)價(jià)免疫功能的強(qiáng)弱，其指數(shù)越大，表明機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫力越強(qiáng)。胸腺和法氏囊是重要的中樞免疫器官，胸腺的主要功能是產(chǎn)生T淋巴細(xì)胞和分泌胸腺素，參與細(xì)胞免疫[22-23]；法氏囊是B淋巴細(xì)胞發(fā)育和分化的主要場(chǎng)所，對(duì)維持機(jī)體的體液免疫功能很重要[24-25]。脾臟是外周免疫器官，主要是參與免疫應(yīng)答，形成針對(duì)血液中抗原的抗體[26]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在飲用水中添加低、中、高水平丹參水提液均能促進(jìn)鵪鶉法氏囊、胸腺和脾臟的發(fā)育，從而提高免疫力，增強(qiáng)對(duì)疾病的抵抗能力，其中高劑量組效果最顯著。

3.3 丹參水提液對(duì)鵪鶉血清生化指標(biāo)的影響

動(dòng)物機(jī)體血清生化指標(biāo)的變化直接反映了動(dòng)物健康及代謝情況，血清中總蛋白（TP）主要用于機(jī)體能量供給和組織修補(bǔ)，是衡量蛋白質(zhì)在體內(nèi)代謝狀況的主要指標(biāo)，在維持血漿滲透壓、緩沖血液pH 值等調(diào)節(jié)機(jī)體穩(wěn)態(tài)方面具有重要功能[27]。該試驗(yàn)結(jié)果顯示丹參水提液可提高鵪鶉血液中的TP 含量，說(shuō)明在飲用水中添加丹參可以促進(jìn)鵪鶉機(jī)體蛋白質(zhì)合成代謝增強(qiáng)，組織蛋白沉積能力上升, 氨基酸降解作用減弱。

血清GOT 和GPT 活性是動(dòng)物機(jī)體肝臟功能正常的一種體現(xiàn)，肝細(xì)胞受損會(huì)導(dǎo)致血中GOT和GPT含量升高，引起肝臟代謝和解毒能力降低，導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)的毒素不能及時(shí)排出體外。本研究結(jié)果表明，飲用水中添加丹參水提液對(duì)GOT和GPT的活性無(wú)顯著影響，說(shuō)明丹參對(duì)鵪鶉肝功能無(wú)不良影響。

血清尿素氮（BUN）通過(guò)鳥(niǎo)氨酸循環(huán)途徑生成, 可作為蛋白質(zhì)、氨基酸代謝的終產(chǎn)物衡量標(biāo)準(zhǔn)。劉彥慈等[28]研究發(fā)現(xiàn)BUN 是檢測(cè)動(dòng)物體內(nèi)氨基酸降解狀況的重要指標(biāo)，反映了動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝情況和日糧氨基酸之間的代謝平衡情況。Takahashi S 等[29]的研究發(fā)現(xiàn)血液尿素氮含量與蛋白質(zhì)的利用率之間呈顯著的負(fù)相關(guān),蛋白質(zhì)代謝異常時(shí),血液尿素氮濃度升高,蛋白質(zhì)代謝良好時(shí),血液尿素氮在血清中含量維持在一定范圍內(nèi)。堵光瑩等[30]的研究表明當(dāng)動(dòng)物機(jī)體BUN含量較低時(shí)，說(shuō)明氨基酸代謝穩(wěn)定，機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)合成代謝功能較強(qiáng)，動(dòng)物日糧中氮利用率高。此外，BUN 含量的高低還是衡量腎功能正常與否的重要指標(biāo)。正常情況下,BUN的生成和排泄處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)并保持在正常的生理水平；而且腎臟的代償與儲(chǔ)備能力強(qiáng)，只有當(dāng)腎功能明顯受損時(shí),血清中尿素氮才會(huì)明顯升高。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,低劑量和高劑量組在一定程度上降低了血清BUN含量,說(shuō)明丹參水提液可以使鵪鶉體內(nèi)蛋白質(zhì)的代謝保持在較強(qiáng)狀態(tài)，提高鵪鶉對(duì)日糧中氨基酸的利用率,并保持腎功能正常。

4 結(jié)論

在鵪鶉飲用水中添加一定濃度的丹參水提液可促進(jìn)鵪鶉機(jī)體蛋白質(zhì)的合成代謝，提高鵪鶉對(duì)飼料中氨基酸的利用率，從而促進(jìn)鵪鶉的生長(zhǎng)，提高育雛期鵪鶉的生長(zhǎng)性能，可以促進(jìn)鵪鶉免疫系統(tǒng)器官的發(fā)育，增強(qiáng)機(jī)體的免疫機(jī)能。綜合考慮，在鵪鶉的飲用水中添加4%丹參水提液較適宜。