張娜,田燕歌,劉學(xué)芳*,王琦

(1. 河南中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,鄭州 450046; 2. 河南中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥科學(xué)院,鄭州 450046)

肺癌是目前世界上導(dǎo)致腫瘤相關(guān)死亡的首要原因, 據(jù) 2019 年 09 月國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)(International Agency for Research on Cancer,IARC)發(fā)布的《2018 年全球癌癥統(tǒng)計(jì)報(bào)告》評(píng)估數(shù)據(jù)顯示,2018 年全球癌癥發(fā)病人數(shù)上升至1810 萬(wàn)例,死亡人數(shù)960 萬(wàn)例,其中肺癌是最常見(jiàn)的癌癥類型(占病例總數(shù)的11. 6%)和癌癥死亡的主要原因(占癌癥死亡總數(shù)的18. 4%)[1]。 肺癌的治療迫切需要開(kāi)發(fā)新的藥物制定新的治療方案,在活體內(nèi)動(dòng)物模型上闡明藥物的作用機(jī)制無(wú)疑是最佳途徑,那么有沒(méi)有適合的肺癌動(dòng)物模型就成為制約肺癌相關(guān)藥物臨床療效、轉(zhuǎn)化研究的重要因素。 此外,肺癌高病死率的原因之一是容易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,臨床常見(jiàn)發(fā)生肺轉(zhuǎn)移、腦轉(zhuǎn)移,骨轉(zhuǎn)移,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等[2-3]。 本文就目前國(guó)內(nèi)外報(bào)道的小鼠肺癌轉(zhuǎn)移模型的構(gòu)建方法及在科研領(lǐng)域中的應(yīng)用進(jìn)行綜述,以期為肺癌相關(guān)研究提供模型參考。

1 小鼠肺癌模型的分類

根據(jù)制備方法的不同,肺癌動(dòng)物模型分為許多類型,按照接種部位不同分為：皮下注射、原位注射、心內(nèi)注射、頸內(nèi)動(dòng)脈注射和尾靜脈注射等;按照腫瘤細(xì)胞來(lái)源不同分為：自發(fā)性、誘發(fā)性、移植性和動(dòng)物基因修飾模型等;其中移植性模型是指將腫瘤組織或細(xì)胞移植到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)所形成的腫瘤動(dòng)物模型,根據(jù)腫瘤細(xì)胞或癌組織塊的來(lái)源不同分為：同種移植模型與異種移植模型。 同種移植是指腫瘤細(xì)胞類型與宿主動(dòng)物種屬一致,而異種移植是指腫瘤細(xì)胞類型與宿主動(dòng)物種屬不一致[4]。 此外,按照肺癌轉(zhuǎn)移部位不同分為：肺轉(zhuǎn)移、骨轉(zhuǎn)移、腦轉(zhuǎn)移、淋巴轉(zhuǎn)移模型等,參考國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道發(fā)現(xiàn)不同肺癌類型易發(fā)生轉(zhuǎn)移的部位也不同,其中小細(xì)胞癌主要形成淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,鱗狀細(xì)胞癌主要轉(zhuǎn)移至肝臟和腎臟,腺癌形成肺轉(zhuǎn)移灶[5]。 本文綜合肺癌易轉(zhuǎn)移部位及腫瘤來(lái)源的差異,將小鼠移植性肺癌模型進(jìn)一步分類,如下文闡述。

2 小鼠移植性肺癌轉(zhuǎn)移模型的分類

2.1 肺轉(zhuǎn)移型

理論而言肺癌的原發(fā)部位為肺,原位種植模型也被認(rèn)為是最合適的肺癌治療模型,但原位種植容易發(fā)生并發(fā)癥,并且其在體內(nèi)的成瘤率和轉(zhuǎn)移形成率不穩(wěn)定。 皮下注射仍廣泛應(yīng)用于大多數(shù)模型的建立,尾靜脈也常被用于肺轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型的構(gòu)建。

2.1.1 同種移植性肺轉(zhuǎn)移模型

小鼠Lewis 肺癌模型是目前應(yīng)用最為廣泛的同種來(lái)源的肺癌模型,Lewis 肺癌細(xì)胞株(LLC)最早是從小鼠Lewis 肺癌中分離到的適應(yīng)培養(yǎng)細(xì)胞克隆系,LLC 細(xì)胞在C57BL/6 小鼠體內(nèi)保持高度致瘤性和肺轉(zhuǎn)移性[6],LLC 細(xì)胞采用基因工程技術(shù)修飾后可表達(dá)熒光素酶或綠色熒光蛋白,達(dá)到腫瘤細(xì)胞在活體內(nèi)可視化效果。 Zhu 等[7]將表達(dá)熒光素酶的Lewis 肺癌(LL/2-Luc- M38)細(xì)胞(1 × 106個(gè)/只)接種于7 ～8 周齡雄性SPF 級(jí)C57BL/6 小鼠皮下,注射3 d 和17 d 時(shí)腹腔注射D-熒光素酶(0.6 mg/30 g體重),對(duì)動(dòng)物進(jìn)行全身成像,結(jié)果顯示在注射部位可檢查到生物熒光信號(hào),17 d 時(shí)收集小鼠肺,進(jìn)行器官生物發(fā)光的體外測(cè)量,也可檢測(cè)到明顯的生物熒光信號(hào),對(duì)肺組織勻漿進(jìn)行生物熒光測(cè)量,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,可獲得小鼠肺中癌細(xì)胞負(fù)荷的定量信息,該方案使用活體成像技術(shù)與體外成像相結(jié)合的方法觀察Lewis 癌細(xì)胞在小鼠體內(nèi)的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。馬雪曼等[8]研究顯示接種部位的不同,Lewis 肺癌肺轉(zhuǎn)移率不同,將能夠穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的小鼠LL/2-Luc- M38 細(xì)胞(1 × 106個(gè)/只)分別采用右腋下、右腹股溝下、右腳墊接種三種方法接種到6 ～8周齡SPF 級(jí)雄性C57BL/6 小鼠皮下,接種21 d 時(shí)小動(dòng)物活體成像檢測(cè)顯示,肺轉(zhuǎn)移率右腋下接種組為50%,右腹股溝接種組為70%,右腳墊接種組為0%。 以上研究顯示 Lewis 細(xì)胞皮下接種 C57BL/6小鼠17 ～21 d 后可確定產(chǎn)生肺轉(zhuǎn)移灶,注射部位首選腹股溝與腋下。

2.1.2 異種移植性肺轉(zhuǎn)移模型

將人類肺癌細(xì)胞系移植到免疫缺陷動(dòng)物皮下是進(jìn)行惡性腫瘤實(shí)驗(yàn)研究的首選方法。 姚明等[9]將人肺癌細(xì)胞SPC-A-1(2×106個(gè)/只)右背側(cè)近腋部皮下接種于6 ～8 周齡SPF 級(jí)雄性NOD/SCID 小鼠體內(nèi),隨后切除首代小鼠移植瘤,收集肺轉(zhuǎn)移灶腫瘤細(xì)胞,從第二代起采用肺轉(zhuǎn)移灶-皮下移植-肺轉(zhuǎn)移灶-皮下移植的體內(nèi)循環(huán)篩選方法傳代,第4代NOD/SCID 小鼠在接種后12 周肺轉(zhuǎn)移率100%,該方案成功建立人肺癌皮下移植瘤高轉(zhuǎn)移模型,為肺癌防治研究及抗轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)治療提供了理想的動(dòng)物模型。 Cui 等[10]收集一名45 歲中國(guó)男性肺癌轉(zhuǎn)移患者的腹水,分離獲得肺癌細(xì)胞系(命名為XL-2),取 6 ～ 8 周齡 SPF 級(jí)雄性 BALB/c-nu/nu 裸鼠,將XL-2 細(xì)胞(2 × 106個(gè)/只)注射到小鼠右上側(cè)背部皮下,4 周后切除原發(fā)腫瘤,當(dāng)小鼠瀕臨死亡時(shí),收集肺轉(zhuǎn)移病灶并將其植入新的受體小鼠的右上側(cè)背部皮下,如此反復(fù)傳代,在第5 輪的選擇中,從肺轉(zhuǎn)移灶中分離細(xì)胞并體外增殖(命名為XL-2 sci),各代分離的肺癌細(xì)胞肺轉(zhuǎn)移率檢測(cè)顯示,第一代為30%,第三代為60%,第五代為90%,該轉(zhuǎn)移模型保留了原發(fā)腫瘤的臨床特征,為肺癌的深入研究提供了可靠的模型。

循環(huán)腫瘤細(xì)胞(circulating tumor cells,CTCs)是指從原發(fā)灶或轉(zhuǎn)移灶脫落,在血液和淋巴管中循環(huán)的細(xì)胞,闕祖俊等[11]將人源肺癌循環(huán)腫瘤細(xì)胞CTC-TJH- 01(1×106個(gè)/只)采用尾靜脈注射的方法,注射到C57BL/6 小鼠、Nude 小鼠和 NOD/SCID小鼠體內(nèi),3 種小鼠均為雄性,SPF 級(jí),4 ～6 周齡。注射后第8 周NOD/SCID 小鼠首次觀察到肺部成瘤,第10 周NOD/SCID 小鼠肺部成瘤率為100%,而在Nude 小鼠和C57BL/6 小鼠體內(nèi)均不成瘤。

2.2 腦轉(zhuǎn)移型

肺癌最常見(jiàn)的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移部位之一是腦,腦轉(zhuǎn)移的發(fā)生率為23% ～65%。 腦轉(zhuǎn)移患者放、化療效果不佳,預(yù)后差,生存期短,是患者死亡的重要原因[12],因此構(gòu)建合適的肺癌腦轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型具有重要的研究?jī)r(jià)值。 頸內(nèi)動(dòng)脈注射與心內(nèi)注射兩種方法常用于肺癌腦轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型的構(gòu)建。

2.2.1 同種移植性腦轉(zhuǎn)移模型

徐磊等[13]將穩(wěn)定轉(zhuǎn)染綠色熒光蛋白(GFP)的Lewis 肺癌細(xì)胞,通過(guò)頸內(nèi)動(dòng)脈注射的方法建立C57BL/6 小鼠肺癌腦轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型,注射劑量105個(gè)Lewis 細(xì)胞/只,3 周后腦組織標(biāo)本在熒光顯微鏡下可觀察到綠色熒光蛋白的富集區(qū),證實(shí)已經(jīng)形成Lewis 肺癌細(xì)胞的腦轉(zhuǎn)移灶,病理顯示病灶周?chē)蟹磻?yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞增生,頸內(nèi)動(dòng)脈注射法直接模擬癌細(xì)胞在腦部終末毛細(xì)血管床內(nèi)聚集、粘附、侵襲穿透血腦屏障形成轉(zhuǎn)移灶的真實(shí)過(guò)程,手術(shù)成功的小鼠100%發(fā)生腦部轉(zhuǎn)移癌。 頸內(nèi)動(dòng)脈注射方法的優(yōu)點(diǎn)在于模型的重復(fù)性較好,缺點(diǎn)是顯微外科手術(shù)操作步驟復(fù)雜并且對(duì)操作者手術(shù)技巧要求較高。

2.2.2 異種移植性腦轉(zhuǎn)移模型

Uzunalli 等[14]使用慢病毒感染A549 細(xì)胞使其穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶,采用超聲引心內(nèi)注射的方法,將 A549 細(xì)胞(1 × 106個(gè)/只)接種至 6 周齡的裸鼠體內(nèi),組織學(xué)檢查顯示注射2 周后,裸鼠腦部出現(xiàn)肺癌微轉(zhuǎn)移灶,直徑為64.6 ～ 95.3 μm,3 ～ 4 周時(shí)轉(zhuǎn)移灶直徑增至50.9 ～216.9 μm,5 ～6 周時(shí)轉(zhuǎn)移灶直徑可達(dá)20.6 ～1070.6 μm,心內(nèi)注射的方法可成功構(gòu)建肺癌腦轉(zhuǎn)移模型。 陳愉生等[15]將處于對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)的人肺腺癌 PC-9 細(xì)胞(1 × 106個(gè)/只),經(jīng)左心室注射接種于BALB/c nude 裸鼠體內(nèi),第4 周處死,除2 只裸鼠胸壁見(jiàn)2 ～3 個(gè)散在瘤結(jié)分布,其余胸腔視野正常,肺組織輪廓清楚,未見(jiàn)瘤結(jié)生成,組織學(xué)檢測(cè)顯示心內(nèi)注射法肺癌腦轉(zhuǎn)移率為100%。 心內(nèi)注射這種方法優(yōu)點(diǎn)在于操作簡(jiǎn)單,而且確實(shí)會(huì)產(chǎn)生中樞神經(jīng)系統(tǒng)的轉(zhuǎn)移。 缺點(diǎn)是腫瘤常常轉(zhuǎn)移到中樞神經(jīng)系統(tǒng)以外的器官,并可能導(dǎo)致動(dòng)物死亡,該方法的模型變異性較高[16]。

2.3 骨轉(zhuǎn)移型

骨是各種原發(fā)性腫瘤最常見(jiàn)的轉(zhuǎn)移部位之一,隨著治療手段的提高,患者生存期延長(zhǎng),骨轉(zhuǎn)移的概率也隨之升高,近期報(bào)道顯示小細(xì)胞肺癌患者中骨轉(zhuǎn)移發(fā)生率為38.18%,多發(fā)骨轉(zhuǎn)移灶是小細(xì)胞肺癌骨轉(zhuǎn)移患者發(fā)生骨相關(guān)事件的風(fēng)險(xiǎn)因素[17],骨轉(zhuǎn)移可引起骨痛、骨折嚴(yán)重影響晚期肺癌患者生活質(zhì)量,因而建立肺癌骨轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型對(duì)其預(yù)防與治療的研究具有重要意義。

2.3.1 同種移植性骨轉(zhuǎn)移模型

Kuchimaru 等[18]將表達(dá)熒光素酶小鼠肺癌細(xì)胞LLC/luc 經(jīng)尾動(dòng)脈注射和心內(nèi)注射兩種方法注射進(jìn)入C57BL/6 雄性小鼠體內(nèi),生物發(fā)光活體呈像技術(shù)顯示,尾動(dòng)脈注射組在注射后30 min 即可在后肢骨髓即檢測(cè)到中熒光,尾動(dòng)脈注射腫瘤細(xì)胞的運(yùn)輸效率是心內(nèi)注射的3 倍,尾動(dòng)脈注射后癌細(xì)胞向小鼠下體器官具有顯性傳遞性,而心內(nèi)注射則導(dǎo)致癌細(xì)胞則擴(kuò)散到各種組織。 組織學(xué)分析證實(shí)在小鼠接受尾動(dòng)脈注射后7 d,骨轉(zhuǎn)移病灶數(shù)目的增加。 X 線與CT 成像顯示尾動(dòng)脈注射比心內(nèi)注射的小鼠骨量明顯下降,生存期檢測(cè)顯示,尾動(dòng)脈注射后小鼠生存超過(guò)32 d,而心內(nèi)注射的小鼠注射后25 d 全部死亡。

2.3.2 異種移植性骨轉(zhuǎn)移模型

Yang 等[19]建立一株穩(wěn)定高表達(dá)綠色熒光蛋白(GFP)的人肺癌細(xì)胞系H460(H460-GFP),將5 ×106個(gè)H460-GFP 細(xì)胞接種到 SPF 級(jí)雌性 BALB/c nu/nu 裸鼠皮下,3 周后腫瘤直徑增至 1.5 ～2.1 cm,取1 mm3瘤塊通過(guò)手術(shù)方法原位植入裸鼠的左肺中,3 ～4 周后觀察可見(jiàn)GFP 熒光遍及整個(gè)骨骼系統(tǒng),包括頭骨、椎骨、股骨、脛骨以及股骨和脛骨的骨髓,通過(guò)這種方法成功建立了肺癌骨轉(zhuǎn)移模型同時(shí)揭示了肺癌的廣泛轉(zhuǎn)移潛力。 王靜等[20]將 A549 細(xì)胞(6 × 106個(gè)/只)注射到 NOD/SCID 裸鼠脛骨外貼骨處,6 周后顯示肺癌細(xì)胞浸潤(rùn)到脛骨骨組織及周?chē)浌墙M織,發(fā)生腫瘤侵襲和骨質(zhì)破壞。 Miki 等[21]將8 種人肺癌細(xì)胞系尾靜脈注射入自然殺傷細(xì)胞缺乏性SCID 小鼠體內(nèi),其中只有小細(xì)胞癌細(xì)胞系SBC-5 細(xì)胞可重復(fù)發(fā)生骨轉(zhuǎn)移,經(jīng)X線評(píng)估,第28 天SBC-5 細(xì)胞產(chǎn)生的溶骨性骨轉(zhuǎn)移就被檢測(cè)到,所有受體小鼠在第35 天出現(xiàn)骨轉(zhuǎn)移,而肺腺癌細(xì)胞(PC-14,A549)主要在肺中產(chǎn)生轉(zhuǎn)移灶。

2.4 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移型

2.4.1 同種移植性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移模型

Yamaura 等[22]將Lewis 肺癌細(xì)胞通過(guò)皮膚切口直接置入C57/BL6 小鼠肺實(shí)質(zhì),93%的動(dòng)物在移植部位出現(xiàn)單個(gè)肺結(jié)節(jié),形成肺結(jié)節(jié)的小鼠均出現(xiàn)縱隔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。 小鼠的平均存活時(shí)間為(21 ± 2)d,植入后第17 天和第21 天縱隔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶明顯,遠(yuǎn)處器官或淋巴結(jié)未見(jiàn)轉(zhuǎn)移。

2.4.2 異種移植性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移模型

淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是非小細(xì)胞肺癌最常見(jiàn)的轉(zhuǎn)移途徑,也是影響肺癌分期和預(yù)后重要的因素。Chishima 等[23]建立了穩(wěn)定表達(dá)GFP 的人肺腺癌細(xì)胞Anip 973,將該細(xì)胞皮下接種到裸鼠體內(nèi),5 周后當(dāng)腫瘤的直徑超過(guò)1 cm 時(shí),通過(guò)手術(shù)原位移植的方法將皮下瘤塊植入裸鼠左肺的胸膜臟層,活體成像檢測(cè)顯示經(jīng)淋巴傳播的轉(zhuǎn)移灶激發(fā)出的綠色熒光,在裸鼠肺門(mén)淋巴結(jié)、頸部淋巴結(jié)、縱隔和對(duì)側(cè)胸膜腔清晰可見(jiàn),該方法證實(shí)手術(shù)原位移植肺癌瘤塊確定會(huì)產(chǎn)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,同時(shí)結(jié)合GFP 轉(zhuǎn)染可實(shí)現(xiàn)肺癌轉(zhuǎn)移可視化研究。

3 小鼠移植性肺癌轉(zhuǎn)移模型的應(yīng)用

3.1 肺癌轉(zhuǎn)移模型在腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制中研究

小鼠肺癌轉(zhuǎn)移模型在腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制的研究中具有重要意義,利用缺氧、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子TGF、原癌基因NFkappaB、 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VEGF 等對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行預(yù)處理可以更好探討肺癌的轉(zhuǎn)移機(jī)制,轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β)在腫瘤發(fā)生的早期起抑癌作用,但在疾病的后期變?yōu)槟[瘤啟動(dòng)子。 Khan 等[24]采用轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子TGF-β1 對(duì)肺癌A549 細(xì)胞進(jìn)行體外上皮間質(zhì)化處理,并將其注射到BALB/c 裸鼠的尾靜脈中進(jìn)行轉(zhuǎn)移性傳播研究,TGF-β1 處理組A549 細(xì)胞的分布與未處理組A549 在肺的相對(duì)熒光簇?cái)?shù)較少,在向肝、大腦、卵巢、骨骼和腎上腺轉(zhuǎn)移方面,TGF-β1 處理組轉(zhuǎn)移率是未處理組的 2、3、1.5、2 和 1.7 倍。 Salvo 等[25]報(bào)道 TGF-β 是一種已知的腫瘤細(xì)胞整合素表達(dá)的誘導(dǎo)劑,它有助于癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移擴(kuò)散,TGF-β 暴露后增加了β3-整合素依賴性NSCLC 對(duì)淋巴管內(nèi)皮的粘附,體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明,靶向TGF-β 和β3 整合素可顯著降低淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生率。 Qin 等[26]報(bào)道腫瘤壞死因子超家族15(TNFSF15)是一種主要由血液內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子,TNFSF15 通過(guò)上調(diào)A549 細(xì)胞中VEGF-c 的表達(dá)來(lái)促進(jìn)腫瘤淋巴管生成,促進(jìn)荷瘤小鼠的淋巴轉(zhuǎn)移。

3.2 肺癌轉(zhuǎn)移模型在新藥研究中的意義

使用肺癌轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型,可研究探討藥物是否對(duì)肺癌的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移產(chǎn)生影響,Ren 等[27]利用轉(zhuǎn)基因肺癌細(xì)胞株L9981-Luc 裸鼠肺癌移植模型,檢測(cè)到甲基亞硒酸能抑制L9981-Luc 在裸鼠體內(nèi)種植瘤的生長(zhǎng)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。 Skeberdyte·等[28]利用沙利霉素和二氯乙酸鹽協(xié)同作用可抑制Lewis 肺癌細(xì)胞增殖、腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移,沙利霉素是眾所周知的癌癥細(xì)胞殺手,而二氯乙酸鹽是丙酮酸脫氫酶激酶抑制劑,其專門(mén)針對(duì)線粒體活性改變的腫瘤細(xì)胞,沙利霉素和二氯乙酸鹽在Lewis 肺癌細(xì)胞的2D 和3D 培養(yǎng)物中具有協(xié)同的細(xì)胞毒性,沙利霉素和二氯乙酸鹽的聯(lián)合治療可提高同種異體移植性小鼠的存活率,抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。

3.3 肺癌轉(zhuǎn)移模型在中藥及單體藥物研究中的意義

小鼠Lewis 肺癌轉(zhuǎn)移模型在中藥治療腫瘤性疾病的研究中具有廣泛應(yīng)用,Tang 等[29]報(bào)道中藥郁消散聯(lián)合順鉑顯著抑制Lewis 肺癌移植瘤的生長(zhǎng),減少肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)的數(shù)量,提高對(duì)肺轉(zhuǎn)移的抑制率。Zhao 等[30]報(bào)道黃芪多糖能有效抑制小鼠Lewis 肺癌的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移,改善免疫器官功能,抑制腫瘤組織中 VEGF 和 EGFR 蛋白的表達(dá)。 Zhou 等[31]報(bào)道,中藥冬蟲(chóng)夏草提取物在Lewis 異種移植動(dòng)物模型中可降低腫瘤生長(zhǎng),減少肺轉(zhuǎn)移。

4 小鼠移植性肺癌轉(zhuǎn)移模型在應(yīng)用中值得關(guān)注的問(wèn)題

C57BL/6 小鼠、裸鼠、SCID 小鼠、NOD/SCID 小鼠都是構(gòu)建移植性肺癌轉(zhuǎn)移模型的常用品種,具體選擇哪種類型的小鼠建模,需要充分考慮實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?shí)驗(yàn)周期、接種方法以及檢測(cè)指標(biāo)等因素。 這幾種品系小鼠各有優(yōu)勢(shì),其中C57BL/6 小鼠具有正常的免疫功能,價(jià)格低廉、耐受性強(qiáng),模型成熟,常用于Lewis 細(xì)胞的肺癌轉(zhuǎn)移建模型構(gòu)建。 裸鼠、SCID 小鼠、NOD/SCID 小鼠常用于人源肺癌細(xì)胞的移植性種植,Teraoka 等[32]研究顯示,將人類肺癌小塊組織移植入SCID 小鼠,種植成功率為50%。 吳健彬等[33]研究顯示NOD/SCID 小鼠皮下移植瘤模型成瘤率為55.6%,高于BALB/c 裸鼠的成瘤率,并且肺癌在NOD/SCID 小鼠并且易發(fā)生肺轉(zhuǎn)移與骨轉(zhuǎn)移,NOD/SCID 小鼠仍然是移植性肺轉(zhuǎn)移模型的首選品系。 在接種方法的選擇上,Lewis 細(xì)胞常采用皮下注射、頸內(nèi)動(dòng)脈注射、尾動(dòng)脈注射等方法來(lái)構(gòu)建小鼠肺癌肺轉(zhuǎn)移、腦轉(zhuǎn)移和骨轉(zhuǎn)移模型,成功率較高。 人源性的肺癌細(xì)胞主要通過(guò)皮下注射、尾靜脈注射、心內(nèi)注射、后肢脛骨平臺(tái)注射以及原位移植的方法來(lái)構(gòu)建肺轉(zhuǎn)移、腦轉(zhuǎn)移、骨轉(zhuǎn)移和淋巴轉(zhuǎn)移模型。

5 結(jié)語(yǔ)

綜上所述,小鼠移植性肺癌轉(zhuǎn)移模型是進(jìn)行肺癌研究的重要支撐,對(duì)闡釋肺癌的轉(zhuǎn)移機(jī)制,肺癌相關(guān)藥物的開(kāi)發(fā)和研究都具有重要意義,本文詳細(xì)介紹了同種和異種來(lái)源的小鼠移植性肺癌轉(zhuǎn)移模型的建模方法,評(píng)價(jià)指標(biāo),以及該模型在科研中的廣泛應(yīng)用,對(duì)于從事肺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)研究的科技人員具有非常重要的參考價(jià)值。