康 意，張 靜，王曉玲，汪 濤

(天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津 300193)

隨著飲食結(jié)構(gòu)變化、環(huán)境污染加重、人口老齡化趨勢加速，惡性腫瘤的發(fā)病率在全球呈上升趨勢。據(jù)2013年統(tǒng)計，世界人口標(biāo)準(zhǔn)化惡性腫瘤發(fā)病率為186.15/10萬，中國人口標(biāo)準(zhǔn)化惡性腫瘤發(fā)病率為190.17/10萬[1]。目前治療惡性腫瘤的手段包括化療藥物控制、放療、免疫治療等，其中藥物治療有不可替代的作用，利用化療藥物誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞死亡和(或)抑制腫瘤細(xì)胞存活是癌癥治療的主要原則。但是大劑量化療藥物的毒副作用及藥物的多耐藥性(multidrug resistance，MDR)已成為臨床治療腫瘤的瓶頸，也是臨床腫瘤化療失敗的主要原因，因此探究有效預(yù)測腫瘤化療敏感性的分子標(biāo)志物以及多藥耐藥逆轉(zhuǎn)的分子靶點是惡性腫瘤治療研究的重點[2]。腫瘤細(xì)胞對化療藥物的耐藥性已成為腫瘤研究迫切需要解決的問題，參與細(xì)胞抗氧化應(yīng)激反應(yīng)的核轉(zhuǎn)錄相關(guān)因子2-抗氧化反應(yīng)元件(nuclear factor erythroid-2 related factor 2-antioxidant response element，Nrf2-ARE)通路在腫瘤細(xì)胞MDR的產(chǎn)生中發(fā)揮關(guān)鍵作用。Nrf2-ARE通路能通過Keap1、Nrf2等信號節(jié)點基因的突變影響Ⅱ相解毒酶、抗氧化酶系及藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體等蛋白的表達(dá)和(或)與腫瘤細(xì)胞自噬的交互作用參與腫瘤細(xì)胞MDR的每個環(huán)節(jié)。針對Nrf2-ARE通路開展腫瘤細(xì)胞MDR的研究有重要意義?，F(xiàn)就Nrf2-ARE通路與腫瘤耐藥的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 Nrf2-ARE通路及其調(diào)控機(jī)制

Nrf2-ARE通路是細(xì)胞抗氧化應(yīng)激反應(yīng)的中樞調(diào)控點，是細(xì)胞抵抗各種環(huán)境及內(nèi)源性應(yīng)激機(jī)制中必不可少的部分。在細(xì)胞遭受氧化損傷后，激活Nrf2可誘導(dǎo)ARE依賴性的多種解毒酶和抗氧化防御蛋白表達(dá)，以增強(qiáng)細(xì)胞降解或清除有害物質(zhì)的能力，在抗腫瘤、抗炎癥及抗應(yīng)激反應(yīng)等方面發(fā)揮廣泛的細(xì)胞保護(hù)作用。Nrf2-ARE通路已成為腫瘤化療作用的靶點，但Nrf2在腫瘤細(xì)胞中過度激活也與腫瘤的演進(jìn)及腫瘤化療耐藥有關(guān)。Nrf2-ARE通路主要有兩種基本的激活途徑：經(jīng)典通路是指Nrf2在與其負(fù)調(diào)控蛋白Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白1(Kelch like ECH associated protein 1，Keap1)的非活性復(fù)合物解離后，入核易位發(fā)揮核轉(zhuǎn)錄因子作用的過程，這是Nrf2激活的主要機(jī)制；非典型通路是指許多蛋白通過與Nrf2競爭結(jié)合Keap1，穩(wěn)定核內(nèi)Nrf2的量，參與此通路的激活[3-8]。

1.1Nrf2-ARE通路經(jīng)典激活途徑 細(xì)胞內(nèi)Nrf2含量和功能主要受Keap1分子調(diào)控。Keap1是與胞質(zhì)肌動蛋白結(jié)合的一種多肽，分子量為69 000，在轉(zhuǎn)錄后水平對Nrf2的活性進(jìn)行負(fù)向調(diào)節(jié)[3]。核轉(zhuǎn)錄因子Nrf2是一種帽和領(lǐng)家族成員，分子量為 66 000，分子C端含有一個高度保守的堿性亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)有助于其形成異源二聚體與細(xì)胞DNA上的ARE元件結(jié)合。在正常生理狀態(tài)下，Nrf2被Keap1錨定在肌動蛋白細(xì)胞骨架上滯留于細(xì)胞質(zhì)，作為Cul3-E3泛素蛋白酶體底物，經(jīng)泛素化降解，核中僅有少量的Nrf2發(fā)揮維持基本轉(zhuǎn)錄水平的作用。當(dāng)細(xì)胞遭受氧化應(yīng)激或在化學(xué)親電子試劑作用后，由于Cul3-E3泛素蛋白酶失活或Nrf2與Keap1解離，不能被泛素化降解的Nrf2大量入核，與ARE序列結(jié)合，啟動受ARE調(diào)控的一系列內(nèi)源性抗氧化酶、Ⅱ相解毒酶及藥物轉(zhuǎn)運(yùn)泵等相關(guān)基因的表達(dá)，如過氧化氫酶、超氧化物歧化酶、血紅素氧化酶1、醌氧化還原酶1、谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶及多藥耐藥蛋白等[4-6]。

1.2Nrf2-ARE通路非經(jīng)典激活途徑 研究表明，Nrf2-ARE通路也可通過不同的蛋白激酶磷酸化Nrf2被激活。促分裂原活化的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases，MAPK)、磷脂酰肌醇-3-激酶及蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)等蛋白激酶均能直接磷酸化Nrf2，使其從Keap1復(fù)合物上解離，發(fā)生核易位來調(diào)控ARE下游靶基因的表達(dá)，進(jìn)而活化Nrf2-ARE通路[7]。此外，自噬相關(guān)蛋白p62亦能通過激活Nrf2-ARE通路參與細(xì)胞抗氧化應(yīng)激反應(yīng)。p62蛋白中Keap1作用區(qū)(Keap1-interacting region,KIR)結(jié)構(gòu)的S351磷酸化后，p62與Keap1親和力增強(qiáng)，與Nrf2競爭更多地結(jié)合于Keap1，并通過自噬途徑將Keap1降解，使Nrf2大量入核并在細(xì)胞核內(nèi)穩(wěn)定累積，激活Nrf2通路[8]。因p62轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)子上含ARE序列，p62在蛋白質(zhì)表達(dá)水平上也被Nrf2調(diào)控，p62與Nrf2-ARE通路形成一個抗氧化反應(yīng)的正反饋環(huán)路[9]。

2 腫瘤細(xì)胞的多耐藥機(jī)制

臨床腫瘤化療失敗的主要原因是腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生MDR，腫瘤細(xì)胞不僅對一種抗癌藥物產(chǎn)生抗藥性，也對其他結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制不同的抗癌藥物產(chǎn)生交叉耐藥。腫瘤多耐藥機(jī)制復(fù)雜，涉及多個方面，如腫瘤細(xì)胞內(nèi)藥物的濃度降低，藥物代謝解毒，DNA損傷修復(fù)功能失衡、腫瘤細(xì)胞自噬及凋亡異常等。

2.1腫瘤細(xì)胞藥物轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白的異常表達(dá) 藥物轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白能夠?qū)⒓?xì)胞內(nèi)的化學(xué)藥物外排，降低細(xì)胞內(nèi)藥物濃度，減弱藥物的細(xì)胞作用，使細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性。MDR1基因編碼的P-糖蛋白是目前研究最多的多藥耐藥蛋白之一，屬于ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族成員之一，存在于細(xì)胞膜上，是與藥泵作用類似的能量依賴性轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。高表達(dá)P-糖蛋白的腫瘤細(xì)胞能將不同結(jié)構(gòu)和作用方式的化療藥物排出細(xì)胞，降低細(xì)胞內(nèi)化療藥物濃度，致使腫瘤細(xì)胞對許多化療藥物的敏感性降低而產(chǎn)生耐藥性。研究發(fā)現(xiàn)，蛋白激酶抑制劑LY294002能通過減少P-糖蛋白蛋白表達(dá)，直接抑制P-糖蛋白功能，使腫瘤細(xì)胞內(nèi)化療藥物的濃度升高，逆轉(zhuǎn)耐藥株KB/VCR細(xì)胞的多藥耐藥性[10]。研究發(fā)現(xiàn)，短發(fā)夾RNA可以有效抑制MDR1信使RNA的轉(zhuǎn)錄和P-糖蛋白的表達(dá)，使耐藥株BIU-87/阿霉素細(xì)胞對阿霉素的敏感性增加而產(chǎn)生耐藥[11]。研究提示，miR-451能夠負(fù)向調(diào)節(jié)P-糖蛋白的信使RNA及蛋白的表達(dá)，從而提高卵巢癌細(xì)胞A2780的耐藥性[12]。

2.2體內(nèi)化療藥物代謝酶系統(tǒng)的異常表達(dá) 與腫瘤耐藥相關(guān)的體內(nèi)酶系統(tǒng)有3類：①抗氧化及解毒酶系，如谷胱甘肽/谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶體系。研究表明，許多腫瘤的耐藥細(xì)胞內(nèi)高表達(dá)谷胱甘肽/谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶，使用各種谷胱甘肽系統(tǒng)的抑制劑與谷胱甘肽類似的谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶前藥能有效降低腫瘤耐藥細(xì)胞對化療藥物的敏感性?；衔?ATA(3β-acetyl tormentic acid)能通過降低小細(xì)胞癌GLC4/阿霉素耐藥細(xì)胞株內(nèi)谷胱甘肽的水平，使腫瘤細(xì)胞的死亡率明顯提高[13]。②Ca2+依賴性蛋白激酶體系，如MAPK、PKC等。研究證實，MAPK通路的多個主要家族成員(胞外信號調(diào)節(jié)激酶、c-Jun氨基端激酶及p38激酶)的調(diào)節(jié)劑能通過影響P-糖蛋白的表達(dá)或藥物轉(zhuǎn)運(yùn)活性干預(yù)腫瘤多藥耐藥過程[14-16]。PKC廣泛分布于各種組織細(xì)胞，介導(dǎo)細(xì)胞間信號轉(zhuǎn)導(dǎo)并調(diào)控多種重要基因的表達(dá)，與腫瘤發(fā)生和化療耐藥關(guān)系密切。PKC參與胰腺癌、結(jié)腸癌、卵巢癌、乳腺癌等多種腫瘤細(xì)胞耐藥相關(guān)蛋白的合成。PKC系統(tǒng)抑制劑可有效提高化療藥物殺死腫瘤耐藥細(xì)胞的比例，PKCα的抑制劑Ro-31-7549可增加乳腺癌巨噬細(xì)胞趨化因子7/阿霉素耐藥細(xì)胞株對阿霉素的敏感性，且PKCα的活性與耐藥呈正相關(guān)[17]。③可催化切斷DNA磷酸二酯鍵的核酶，如拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(topoisomerase Ⅱ，TopoⅡ)。TopoⅡ不僅與惡性腫瘤細(xì)胞無限增殖調(diào)控機(jī)制有關(guān)，還參與具有外排功能膜蛋白的合成過程，使腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性導(dǎo)致化療失敗。許多化療藥物均以TopoⅡ為重要靶點，通過影響TopoⅡ的功能而產(chǎn)生抗癌作用。抑制人腫瘤細(xì)胞TopoⅡ活性可降低耐藥株細(xì)胞化學(xué)抵抗，加速腫瘤細(xì)胞凋亡[18]，如在多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞上敲低TopoⅡ可顯著降低腫瘤細(xì)胞對化療藥阿霉素的耐藥性[19]。

2.3腫瘤細(xì)胞DNA損傷的異常修復(fù) 臨床治療腫瘤時，常使用的化療藥物如順鉑、阿霉素及5-氟尿嘧啶等均可造成腫瘤細(xì)胞DNA損傷，發(fā)揮抑制細(xì)胞增殖或促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用，但腫瘤細(xì)胞DNA反復(fù)損傷可誘發(fā)DNA修復(fù)系統(tǒng)活性異常活躍，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生化療耐藥。臨床研究發(fā)現(xiàn)，通過同源重組方式修復(fù)DNA雙鏈斷裂損傷能使肺癌患者發(fā)生順鉑耐藥[20-21]。陳遞林等[22]通過對比耐藥組、化療敏感組宮頸癌患者術(shù)后標(biāo)本修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(excision repair cross complementing 1，ERCC1)的基因表達(dá)檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與化療敏感組患者相比，耐藥組ERCC1基因核酸以及蛋白水平均明顯偏高，ERCC1基因異常表達(dá)可能是鉑類藥物化療治療宮頸癌產(chǎn)生耐藥的主要因素。試驗研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)ERCC1-干擾小RNA轉(zhuǎn)染的肺腺癌細(xì)胞對順鉑敏感性升高[23]。

2.4自噬 自噬貫穿于真核細(xì)胞生長發(fā)育和生理病理過程，是普遍存在的重要生命現(xiàn)象，是細(xì)胞為應(yīng)對不利的微環(huán)境壓力而被激活的溶酶體降解過程，類似于一種自身適應(yīng)機(jī)制。對于細(xì)胞穩(wěn)態(tài)維持機(jī)制，自噬是重要的參與者，但對腫瘤細(xì)胞，自噬發(fā)揮抑制作用還是促進(jìn)作用尚未有明確定論，許多學(xué)者認(rèn)為自噬具有“雙刃劍”效應(yīng)[24]。在機(jī)體處于健康狀態(tài)下，細(xì)胞通過自噬途徑來清除已損壞的細(xì)胞器，回收可利用的生物大分子，防止細(xì)胞惡變，進(jìn)而預(yù)防機(jī)體產(chǎn)生腫瘤；但若機(jī)體已產(chǎn)生腫瘤，腫瘤細(xì)胞能利用自噬途徑應(yīng)對腫瘤生長過程中的營養(yǎng)缺乏、缺氧、缺乏生長因子等代謝壓力，或通過自噬清除放化療時受損的生物大分子或細(xì)胞器，使腫瘤細(xì)胞耐受放化療毒性作用，逃避細(xì)胞凋亡而生存下來。研究發(fā)現(xiàn)，多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的Kruppel樣因子4能與泛素化連接蛋白p62/SQSTM1(Sequestosome 1)基因的啟動子結(jié)合，增強(qiáng)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞自噬能力，使多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞對化療藥蛋白酶體抑制劑carfilzomib產(chǎn)生耐藥[25]。研究證實某些miRNAs能逆轉(zhuǎn)白血病細(xì)胞株的化療耐藥性。miRNAs是一類通過信使RNA轉(zhuǎn)錄后調(diào)控來影響基因表達(dá)的小RNA分子，其中miR-30A可通過調(diào)控短發(fā)夾RNA模擬或敲低Beclin 1和自噬基因5等自噬基因，下調(diào)自噬基因的表達(dá)，抑制伊馬替尼誘導(dǎo)的自噬，逆轉(zhuǎn)慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞耐藥性產(chǎn)生[26]。

2.5細(xì)胞凋亡通路阻斷 細(xì)胞凋亡是一種程序化的細(xì)胞死亡形式，其結(jié)果是有序而有效地移除體內(nèi)受損的組織細(xì)胞。細(xì)胞凋亡改變不僅影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展，也是腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性的重要原因之一。目前用于臨床治療的大多數(shù)抗癌藥都是通過調(diào)控凋亡途徑來誘發(fā)癌細(xì)胞死亡，但在治療過程中由于某些原因腫瘤細(xì)胞凋亡受到抑制，造成腫瘤細(xì)胞化療耐藥。腫瘤多耐藥機(jī)制與細(xì)胞凋亡的兩種核心途徑均有關(guān)，即外源性死亡受體途徑和內(nèi)源性死亡受體途徑。細(xì)胞凋亡途徑由多種調(diào)節(jié)和執(zhí)行元件構(gòu)成，是精細(xì)而復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控系統(tǒng)，任何凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)異?；蚬δ苋毕菥蓪?dǎo)致腫瘤細(xì)胞凋亡抵抗，進(jìn)而產(chǎn)生化療耐藥，促凋亡因子和抑制凋亡因子的穩(wěn)態(tài)維持在腫瘤耐藥過程中起重要作用。針對骨肉瘤的敏感細(xì)胞株和耐藥細(xì)胞株進(jìn)行Bcl-2基因的含量測定，發(fā)現(xiàn)敏感細(xì)胞株中Bcl-2的含量遠(yuǎn)低于耐藥細(xì)胞株[27]。利用RNA干擾技術(shù)下調(diào)鼻咽癌細(xì)胞株CNE1抗凋亡蛋白Bcl-2基因的表達(dá)后，發(fā)現(xiàn)CNE1細(xì)胞的增殖不受影響，但對順鉑的藥物敏感性顯著增強(qiáng)[28]。

3 Nrf2-ARE通路參與腫瘤細(xì)胞的耐藥過程

在腫瘤演進(jìn)過程中，腫瘤細(xì)胞會因基因突變或通過化療藥物的選擇對臨床放化療治療產(chǎn)生耐受性，而Nrf2-ARE通路可參與其中的每個環(huán)節(jié)。

3.1Keap1/Nrf2基因突變與腫瘤耐藥 在食管、皮膚及肺等器官的鱗狀細(xì)胞癌中常出現(xiàn)Nrf2基因突變，突變后Nrf2蛋白仍保留轉(zhuǎn)錄活性，卻失去與Keap1的結(jié)合能力，其下游靶基因的表達(dá)不受Keap1介導(dǎo)的負(fù)性調(diào)控，進(jìn)而使腫瘤細(xì)胞能耐受放化療。腫瘤耐藥細(xì)胞不僅存在高表達(dá)Nrf2的情況，也在肺、肝膽、卵巢及乳腺等腫瘤中發(fā)現(xiàn)因Keap1突變引起的Nrf2-ARE通路激活，Keap1的突變或異常低表達(dá)也是腫瘤耐藥的重要機(jī)制之一。在生理狀態(tài)下，野生型Keap1可以結(jié)合到IκB激酶β抑制劑分子上，抑制IκB激酶β磷酸化和介導(dǎo)自噬依賴的IκB激酶β降解，參與有促炎和促癌作用核因子κB信號的負(fù)調(diào)控。若Keap1基因發(fā)生突變，腫瘤細(xì)胞內(nèi)的核因子κB通路被激活，腫瘤細(xì)胞增殖能力增強(qiáng)，可耐受化療藥物的作用[29]。研究發(fā)現(xiàn)，與正常呼吸道上皮細(xì)胞相比，Keap1在肺癌細(xì)胞系和組織中的表達(dá)降低，且Keap1的啟動子呈高甲基化狀態(tài)，Keap1表達(dá)量降低可能與癌細(xì)胞表觀遺傳學(xué)變化有關(guān)[30]。

3.2Nrf2-ARE通路的活化與腫瘤耐藥 在長期的化療藥物治療過程中，腫瘤細(xì)胞往往通過多種途徑獲得耐藥能力，使適應(yīng)性的腫瘤細(xì)胞群體選擇性增多?；熕幬锎碳つ[瘤細(xì)胞產(chǎn)生高水平的活性氧類，在持續(xù)的氧化應(yīng)激條件下，腫瘤細(xì)胞激活氧化還原敏感的轉(zhuǎn)錄因子Nrf2，使Nrf2-ARE通路下游靶基因如Ⅱ相解毒酶、抗氧化酶系及藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體等蛋白表達(dá)上調(diào)，而這些蛋白大多在抗腫瘤藥物的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ相代謝過程中發(fā)揮作用，能增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對抗氧化應(yīng)激和化療藥物的能力，導(dǎo)致耐藥性逐漸增強(qiáng)。順鉑及烷化劑等抗癌藥物通過激活腫瘤細(xì)胞Nrf2-ARE通路，使受其調(diào)控的抗氧化酶、Ⅱ相解毒酶及藥物流出泵蛋白的表達(dá)增加，從多個步驟促進(jìn)化療藥物體內(nèi)代謝，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的MDR?？梢?，Nrf2是一種可被腫瘤細(xì)胞在解毒、抗氧化及化療藥物泵出等多個環(huán)節(jié)利用的保護(hù)性轉(zhuǎn)錄因子。研究發(fā)現(xiàn)利用藥物控制Nrf2的表達(dá)水平和活性可抑制胰腺癌細(xì)胞的生長，并能增加其對化療的敏感性[31]?；熕幬?-氟尿嘧啶通過激活Nrf2-ARE通路，可顯著增加人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞的耐藥性[32]；研究發(fā)現(xiàn)，Nrf2抑制劑鴉膽子苦醇可加速Nrf2的泛素化過程，降低細(xì)胞內(nèi)Nrf2水平，增強(qiáng)順鉑對肺癌A549細(xì)胞毒性，進(jìn)而使順鉑對癌細(xì)胞的殺傷程度進(jìn)一步加強(qiáng)[33]。與單用順鉑的異種移植A549細(xì)胞的裸鼠組相比，鴉膽子苦醇和順鉑共處理組在誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和抑制腫瘤生長方面有顯著效果；Nrf2低表達(dá)的A549-K異種移植裸鼠對鴉膽子苦醇處理無反應(yīng)，表明鴉膽子苦醇介導(dǎo)的對順鉑的致敏作用依賴于Nrf2的表達(dá)[34]。藥物能通過抑制Keap1或Nrf2的功能有效干預(yù)Keap1-Nrf2-ARE通路，克服腫瘤細(xì)胞化療耐藥，因此在未來臨床治療腫瘤時Keap1-Nrf2-ARE通路是潛在的抗癌藥物作用的靶點，是提高化療效果的新途徑。

3.3Nrf2-ARE通路與自噬串話參與腫瘤耐藥 研究發(fā)現(xiàn)，自噬和Nrf2-ARE通路存在交互作用，通過發(fā)揮增強(qiáng)防御、加速藥物代謝等作用促進(jìn)腫瘤的演進(jìn)，參與放化療的耐受過程。多功能蛋白p62是參與細(xì)胞自噬體構(gòu)成的調(diào)節(jié)因子之一，可將綁定的泛素化蛋白聚合體運(yùn)送至自噬體進(jìn)行酶解。p62可直接與Keap1相互作用，使Keap1與泛素化合物-自噬體連接降解，轉(zhuǎn)錄因子Nrf2入細(xì)胞核后，激活A(yù)RE調(diào)控的下游一系列細(xì)胞保護(hù)性基因的表達(dá)。在丙型肝炎病毒陽性患者的肝癌細(xì)胞內(nèi)，持續(xù)磷酸化的p62與Keap1親和力增強(qiáng)，介導(dǎo)Keap1降解后，激活Nrf2-ARE通路參與肝癌細(xì)胞的發(fā)生、發(fā)展；若敲除肝癌細(xì)胞細(xì)胞系中的p62可顯著抑制腫瘤生長[35]。此外，Nrf2還誘導(dǎo)p62表達(dá)，導(dǎo)致Nrf2通過p62-Nrf2-Keap1通路的正反饋環(huán)持續(xù)激活。與卵巢癌A2780細(xì)胞相比，A2780cp耐藥細(xì)胞過表達(dá)Nrf2及其靶基因醌氧化還原酶1和血紅素氧化酶1，抑制A2780cp細(xì)胞Nrf2通路可降低p62mRNA和蛋白的表達(dá)，增加A2780cp細(xì)胞對順鉑治療的敏感性，Nrf2激活的自噬可能是引起卵巢癌耐藥細(xì)胞株A2780cp順鉑抗性的原因[36]。但也存在不同的結(jié)論，用哺乳動物雷帕霉素和天然植物產(chǎn)物烯丙基巰基半胱氨酸干預(yù)結(jié)直腸癌HCT-116細(xì)胞和結(jié)直腸癌鼠模型時，發(fā)現(xiàn)激活的Nrf2-ARE通路上調(diào)其下游抗氧化基因醌氧化還原酶1的轉(zhuǎn)錄表達(dá)，同時p62表達(dá)下調(diào)，提示p62在Nrf2與自噬之間存在負(fù)調(diào)控作用[37]?？拱┧幬锟稍诓煌潭壬险T導(dǎo)多種類型癌細(xì)胞發(fā)生自噬和(或)激活Nrf2通路，進(jìn)而對細(xì)胞存活產(chǎn)生不同的影響，關(guān)系極為復(fù)雜，這可能與癌細(xì)胞的遺傳背景、決定細(xì)胞命運(yùn)的相關(guān)通路間的交互作用有關(guān)。基于自噬途徑和Nrf2-ARE通路探討腫瘤細(xì)胞化療耐藥機(jī)制，解析腫瘤細(xì)胞耐藥原因，對研發(fā)新型抗癌靶標(biāo)藥物有重要的現(xiàn)實意義。

4 小 結(jié)

腫瘤的演進(jìn)過程與腫瘤細(xì)胞基因突變、表觀遺傳學(xué)改變及多條通路交互作用積累有關(guān)，是一個漸進(jìn)式過程。在臨床治療過程中，腫瘤細(xì)胞MDR也同樣涉及以上各個環(huán)節(jié)，宿主因素、癌細(xì)胞的特定遺傳背景改變、調(diào)控細(xì)胞增殖分化及應(yīng)對應(yīng)激因素等相關(guān)信號通路的交互反應(yīng)都決定著癌細(xì)胞命運(yùn)轉(zhuǎn)歸，其中Nrf2-ARE通路是參與腫瘤MDR各個環(huán)節(jié)的關(guān)鍵通路，并與自噬相關(guān)蛋白p62有復(fù)雜的交互作用。目前腫瘤細(xì)胞MDR機(jī)制已初步明確，但仍未得到有效的解決途徑，故進(jìn)一步針對Nrf2-ARE通路導(dǎo)致腫瘤化療抵抗與耐藥的研究仍非常必要。