李金陽 高穎 張強強 劉剛 戴雁峰

摘要：針對性地分析了豬藍耳病的發(fā)病、預(yù)防和控制措施，提出了對應(yīng)的生物安全管理及防控方法，以期為研究豬藍耳病的對應(yīng)疫苗奠定基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：豬;藍耳病;PRRSV病毒;生物安全

中圖分類號：S858.28? ? ? ? 文獻標識碼：B? ? ? ? 文章編號：1007-273X（2019）11-0015-03

豬藍耳病又稱豬的繁殖與呼吸障礙綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS），是由動脈炎病毒科中的豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起的，主要侵害豬肺臟的巨噬細胞、淋巴細胞、嗜中性粒細胞等淋巴組織，進一步導致免疫器官失去吞噬、殺滅病毒和細菌的能力，造成免疫抑制反應(yīng)。在病豬的發(fā)病過程中，主要表現(xiàn)為個體發(fā)熱、耳朵藍紫、母豬繁殖障礙、孕豬流產(chǎn)或早產(chǎn)以及仔豬呼吸困難等，而且在發(fā)病過程中易并發(fā)其他傳染病。與此同時，豬藍耳病病毒易變異、毒株多樣性，防控難度大，疾病致病率高，病豬死亡率可達100%[1，2]。

1996年世界動物衛(wèi)生組織（World organisation for animal health，OIE）將豬藍耳病列為法定報告疫病，2006年在我國南方多個省份發(fā)生了藍耳病疫情，作為一種易感染且傳播速度非常快的傳染病，豬藍耳病已經(jīng)嚴重阻滯了我國生豬養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展[3]。如何在日常的生產(chǎn)過程中提升豬藍耳病的生物安全管理及預(yù)防成為目前我國生豬養(yǎng)殖業(yè)的重中之重。

1? 豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）

1.1? PRRSV的病原學特點

作為動脈炎病毒科動脈炎病毒屬成員之一，PRRSV是一種具有囊膜結(jié)構(gòu)的單股正鏈RNA病毒，其直徑為50～70 nm;與此同時PRRSV的核衣殼呈立體對稱的二十面體結(jié)構(gòu)，直徑為25～35 nm[4]。該病毒家族成員如小鼠乳酸脫氫酶病毒（Lactatedehydrogenase elevating virus，LDV）、馬動脈炎病毒（Equine Arteritis virus，EAV）以及猴出血熱病毒（Simian hemorrhagic fever virus，SHFV）均可在巨噬細胞內(nèi)快速增殖，并進一步引起機體發(fā)生病毒血癥和持續(xù)感染。

在豬體內(nèi)，PRRSV病毒對豬肺泡巨噬細胞（Porcine alveolar macrophages，PAM）等單核巨噬細胞的親嗜性較高，該病毒可在Marc-145、MA-104和CL2621等多種永生化細胞系中快速增殖，但產(chǎn)生的細胞吸附病毒特性（Cytopathic effect，CPE）并不明顯，而高致病性藍耳病毒株在Marc-145細胞中增殖1～3代即可產(chǎn)生明顯的CPE[5]。

1.2? PRRSV分型及結(jié)構(gòu)

根據(jù)PRRSV的基因組、抗原性及致病性的差異性，可以將PRRSV劃分為兩種血清型，即美洲型（VR-2332株）和歐洲型（LV株）。PRRSV基因組長約15 kb，其結(jié)構(gòu)中存在9種開放閱讀框（Open reading frame，ORF），分別為ORF1a、ORF1b、ORF2a、ORF2b、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6 及ORF7，分別編碼7種蛋白，即GP2a、GP2b、GP3、GP4、GP5、M 和 N病毒蛋白。M蛋白的抗原決定簇是所有保守毒株的共同決定簇，而N蛋白的抗原決定簇與機體抗體的產(chǎn)生及其特異性密切相關(guān)[6]。

PRRSV的結(jié)構(gòu)及病原學特性決定了其在生豬生產(chǎn)、生物安全管理及預(yù)防過程中的種種難題。另外，對于PRRSV的體內(nèi)免疫應(yīng)答機制的相關(guān)研究仍不深入，更使當前對該病的防控研究沒有可靠的理論依據(jù)。因此，深入研究PRRSV免疫機制，開發(fā)出安全有效的新型疫苗以及提升豬藍耳病的生物安全管理，對豬藍耳病的免疫預(yù)防尤為重要。同時，在免疫應(yīng)答機制研究的基礎(chǔ)上，進行疫苗免疫佐劑的研究和開發(fā)，也是今后需要做的重要工作之一。

2? PRRSV感染機體機理

2.1? PRRSV感染豬的機理

嚴格的生物安全管理是豬場疫病防疫的重要保障之一，當豬場生物安全級別未達到合格要求時，豬場病原開始傳播，而PRRSV病毒的傳播途徑主要包括豬群之間接觸、飛沫、飼料以及飲水等媒介[7]。

在PRRSV傳播過程中，PRRSV首先進入并破壞鼻腔第一防御屏障即鼻腔黏膜及纖毛，導致纖毛失去過濾空氣雜質(zhì)、病毒、細菌、灰塵和調(diào)節(jié)溫度、濕度的生理功能，進一步導致PRRSV的感染;然后進入第二防御屏障即咽喉及支氣管腔，定植于支氣管腔上皮細胞纖毛，引起豬咳嗽、喘氣。此階段豬群極易同時感染支原體肺炎，支原體定植于支氣管腔上皮細胞的纖毛上，造成纖毛脫落及纖毛上皮的損壞，使纖毛萎縮、變短甚至脫落，同時抑制纖毛擺動， 致使纖毛喪失甩動黏液的功能。

在支原體或其他抗原的催化作用推動下，PRRSV的3個受體與硫酸乙酰肝素、唾液酸黏附素和CD163蛋白進一步結(jié)合，進而經(jīng)胞吞作用進入肺泡巨噬細胞，并在肺泡巨噬細胞中快速增殖。異常的PRRSV增殖導致了肺泡巨噬細胞的破裂、溶解，從而導致豬肺泡巨噬細胞數(shù)量顯著下降，抑制了肺泡的生理功能，并引發(fā)免疫抑制;與此同時，肺泡巨噬細胞的破裂、溶解導致PRRSV進入個體的血液循環(huán)系統(tǒng)及淋巴循環(huán)系統(tǒng)，并在血液巨噬細胞和單核細胞中異常復(fù)制和增殖，進一步造成全身性敗血癥狀、淋巴結(jié)腫大及相應(yīng)肺臟器官損傷等，嚴重時個體死亡[8，9]。

2.2? PRRSV感染豬的途徑

PRRSV病毒感染豬的途徑較多，主要可以劃分為環(huán)境應(yīng)激、垂直傳播及水平傳播等途徑。

（1）環(huán)境應(yīng)激。主要存在于晝夜溫差大、環(huán)境條件惡劣等因素引起的豬流感及繼發(fā)感染細菌、病毒性疾病。

（2）垂直傳播。主要病源在生產(chǎn)母豬，生產(chǎn)母豬感染PRRSV后，通過胎盤傳播傳遞給仔豬，哺乳期的仔豬由于母源抗體保護而健康無病，斷奶1周后仔豬由于失去母源抗體保護導致抗體水平降低、感染風險增大，在保育后期抗體水平降至最低時誘發(fā)PRRSV的感染，感染后仔豬表現(xiàn)為咳嗽、發(fā)熱及全身發(fā)紅等癥狀。

（3）水平傳播。與外界病原的感染密切相關(guān)，在豬感染PRRSV的同時，機體極易感染偽狂犬病毒、圓環(huán)病毒、支原體、傳染性胸膜肺炎、副豬嗜血桿菌等病毒或細菌，與此同時，在上述細菌或病毒的感染過程中，PRRSV可以促進圓環(huán)病毒的復(fù)制，增強圓環(huán)病毒的感染能力;而支原體的感染可以顯著增強PRRSV感染肺泡巨噬細胞的能力，進一步加重病情[10，11]。

3? 豬藍耳病的生物安全管理及預(yù)防存在的問題

3.1? 防疫意識薄弱，飼養(yǎng)管理不善

最近幾年，藍耳病主要發(fā)生在散養(yǎng)戶和中小型養(yǎng)豬場中，這是由于散養(yǎng)戶和中小型養(yǎng)豬場沒有正式規(guī)范的飼養(yǎng)標準，飼養(yǎng)人員疏于防范或防疫措施不當導致的。近年來生豬養(yǎng)殖行業(yè)經(jīng)濟衰退現(xiàn)象嚴重，因此許多養(yǎng)殖人員為了縮減飼養(yǎng)成本，常常購入低價劣質(zhì)的飼料，導致豬群體內(nèi)長期缺乏維生素以及各種微量元素等營養(yǎng)物質(zhì)，使豬群處于營養(yǎng)不良的狀況，免疫力急劇下降，感染疾病的概率增大，許多低價劣質(zhì)的飼料中甚至可能含有細菌、寄生蟲或病毒等病原體，豬群一旦食入就會感染，特別是幼小的豬群更容易遭受病原體的感染[12]。

3.2? 免疫接種程序不規(guī)范

對豬群進行免疫接種時常有漏接、疫苗劑量不足等現(xiàn)象，導致免疫失敗或抗體保護力不夠。一些養(yǎng)殖場未對豬舍進行定期滅菌或滅菌工作不完善、通風不到位、衛(wèi)生方面的不正確管理、豬場的不合理布局、無害化處理工作的不落實到位等等，都可能降低豬群抗病能力，誘發(fā)其感染藍耳病。

3.3? 濫用抗生素

在日常生產(chǎn)過程中，一些散養(yǎng)戶由于過度擔憂豬群感染藍耳病，進而盲目、過量地使用氯霉素、磺胺類藥物，這樣會增加豬群體內(nèi)耐藥性，降低豬群抗病能力，可能誘發(fā)并加重藍耳病的感染。

3.4? 頻繁調(diào)運使病原傳入

非養(yǎng)殖人員進入豬場時不及時滅菌，很可能將病毒帶入豬群;此外，養(yǎng)殖戶引進異地豬種，若沒有嚴格地進行檢疫，就可能使染病豬群進入，進而危害到健康豬群。

3.5? 混合感染和繼發(fā)感染

豬場大規(guī)模感染藍耳病的原因很大比例是由于豬首先被具有可對其免疫系統(tǒng)造成傷害或感染后會激發(fā)寄生在豬體內(nèi)的藍耳病病毒的病原感染引起，這些病原主要包括偽狂犬病病毒、豬瘟病毒、細小病毒、圓環(huán)病毒等病原，豬感染上述病原后可增加感染藍耳病的幾率。

藍耳病可通過豬與豬接觸傳播，多暴發(fā)于混合感染和繼發(fā)感染的豬群中，一旦傳播便難以控制，因此早治早防尤為重要。針對豬場藍耳病防控的重要一點是既要針對性地防控藍耳病，同時也要針對其他可引起豬群免疫力降低或誘發(fā)藍耳病的病原進行盡早防治，避免藍耳病暴發(fā)。

3.6? 不良應(yīng)激

普通的豬舍普遍存在通風不暢，養(yǎng)殖密度較高等問題，因此會造成豬舍環(huán)境高熱高濕等，這樣的環(huán)境就容易加大藍耳病感染的概率。特別是夏季高熱高濕且蚊蠅大量孳生，更是大大促進了疫病在豬群中的傳播，極大地增加了藍耳病的感染概率。同時在飼養(yǎng)過程中要避免饑餓、饑渴、轉(zhuǎn)群、驅(qū)趕等問題，以免引起不良應(yīng)激造成豬群抵抗力降低，增加感染率[13]。

4? 豬藍耳病的生物安全管理及預(yù)防的有效措施

4.1? 豬場選址及設(shè)計

選擇一個合適的地址建設(shè)豬場，是建設(shè)一個生物安全體系完備、具有抵抗疫病能力的豬場的先決條件。如建設(shè)豬場要考慮其天然地形、面積、周圍設(shè)施、內(nèi)部分區(qū)及設(shè)備等因素。

好的地形可以為豬群提供最天然的保護屏障，在建場時應(yīng)該選擇地勢高、地形開闊、背風向陽的地方。場地面積一定要可以滿足豬場的生產(chǎn)量。同時要控制豬場與附近的屠宰場、居民區(qū)、家禽養(yǎng)殖場等人流車流較大地方之間的距離。

豬場建設(shè)除了考慮外部環(huán)境的因素外也要對豬場內(nèi)部環(huán)境合理設(shè)計，有效防控豬藍耳病的重要手段之一是豬場內(nèi)部設(shè)計完善。一個設(shè)計完備的豬場其內(nèi)部一般要包擴生活管理區(qū)、生活配套區(qū)和生產(chǎn)區(qū)等三大區(qū)域，并且生產(chǎn)區(qū)必須備有防疫隔離區(qū)。在豬場生產(chǎn)區(qū)母豬舍、保育舍和育成舍應(yīng)該分開，這樣可為高效凈化豬藍耳病奠定基石[14]。

針對豬藍耳病的防控，豬場內(nèi)部建議使用機械通風+空氣過濾設(shè)備的方式，將豬場的核心繁殖區(qū)設(shè)置于豬場的上風口，有效地防止豬場的氣體“倒流”。同時在日常的生產(chǎn)過程中，在維持豬舍溫度的基礎(chǔ)上，保證通風。

4.2? 加強豬場引種

引種工作是防控豬群感染藍耳病的重中之重，引種不善常造成病原體在豬群間的傳播。據(jù)統(tǒng)計我國有相當概率的豬場感染、暴發(fā)豬藍耳病是由于引種工作不細致造成。

選擇具有《種豬生產(chǎn)許可證》的種豬場，是切斷病原體從引種這一傳播途徑進入豬場的重要因素。建議與固定的種源供應(yīng)單位合作，引進的種源豬應(yīng)先做好豬藍耳病的血清檢測、隔離、馴化等前期工作，確定種源豬安全后再使用[15]。

4.3? 建立生物安全措施

傳染源是造成豬場呼吸道疾病的主要原因，消滅傳染源是豬場安全運行的基礎(chǔ)，因此一定要做好衛(wèi)生消毒工作。在日常的生產(chǎn)過程中，每周應(yīng)該對豬舍及周圍進行2次全面徹底的消毒;定期更換消毒液，可交替使用0.3%消特靈溶液、戊二醛及聚維酮碘等;消毒場所設(shè)置衣帽更換間、貨物中轉(zhuǎn)間，嚴格管理員工出入及攜帶物品，定期對飼料間和工具間進行熏蒸消毒，做到無縫隙全方位消毒。

4.4? 加強疫苗免疫

疫苗免疫是當前最主要的防控豬藍耳病的手段。由于藍耳病毒株多樣性和易變異，因此藍耳病病毒陽性或不穩(wěn)定場建議3～4周時使用減毒活疫苗免疫一次，間隔4 周可再免疫一次;藍耳病發(fā)病豬場建議及時免疫減毒活疫苗，嚴重情況下可4周后補充免疫1次，但免疫不可超過3 次。由于活疫苗禁止用于妊娠母豬的免疫中，因此在母豬配種前的一個月內(nèi)應(yīng)該補注一次滅活疫苗，之后的標準免疫流程可以根據(jù)養(yǎng)殖場的實際情況及生產(chǎn)需求進行優(yōu)化。

4.5? 加強藥物控制

目前市場上對PRRSV有效的控制藥物主要有替米考星、泰萬菌素等。當養(yǎng)殖場發(fā)生呼吸道疾病時建議采用泰萬菌素搭配多西環(huán)素及氟苯尼考來抑制疾病的進展，也可適度采用泰萬菌素搭配呼吸特效、中藥止咳制劑使用。替米考星和泰萬菌素均屬大環(huán)內(nèi)脂類藥物，兩者通過自身獨特堿基團能改變肺泡巨噬細胞偏酸性環(huán)境，從而抑制PRRSV的復(fù)制與增殖，達到控制藍耳病病毒的目的。同時，該藥物對藍耳病、支原體、回腸炎的治療等均有良好效果，也可顯著性地抑制因藍耳病引起的呼吸道疾病癥狀。

在治療因藍耳病引起的呼吸道疾病的同時，養(yǎng)殖場管理者也要考慮機體的免疫力，可以適當將板青顆粒、黃連解毒散、黃芪多糖等抗病毒藥物添加至日常飼料中，提高機體免疫能力和抗病毒能力，增強巨噬細胞的吞噬能力，從而增強機體的免疫力。

5? 小結(jié)

在目前豬藍耳病防治過程中，應(yīng)該進一步加強其生物安全管理及預(yù)防。需要指出的是，生物安全管理并不是一個簡單的說法，而是由多方面、多層次構(gòu)成的保護體系。加強豬藍耳病的生物安全管理及預(yù)防，應(yīng)該化被動為主動，多方面、多層次地強化豬場各方面的防控，從而降低豬的感染幾率。

參考文獻：

[1] LUNNEY J K，F(xiàn)ANG Y，LADINIG A，et al. Porcine reproductive and respiratory syndrome virus （PRRSV）：pathogenesis and interaction with the immune system[J].Annual review of animal biosciences，2016，4：129-154.

[2] RAHE M C，MURTAUGH M P. Mechanisms of adaptive immunity to porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J].Viruses，2017，9 （6）：148.

[3] 周? 洪.重大動物疫病預(yù)防的措施[J].養(yǎng)殖技術(shù)顧問，2014（12）：265.

[4] ZHANG Q，YOO D. PRRS virus receptors and their role for pathogenesis[J].Veterinary microbiology，2015，177（3-4）：229-241.

[5] 吳國華.豬繁殖與呼吸綜合征病毒分子診斷與分子疫苗研究[D].北京：中國農(nóng)業(yè)科學院，2009.

[6] LOVING C L，OSORIO F A，MURTAUGH M P，et al. Innate and adaptive immunity against porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J].Veterinary immunology and immunopathology，2015，167（1-2）：1-14.

[7] HALL W，NEUMANN E. Fresh pork and porcine reproductive and respiratory syndrome virus：factors related to the risk of disease transmission[J].Transboundary and emerging diseases，2015， 62（4）：350-366.

[8] SHI C，LIU Y，DING Y，et al. PRRSV receptors and their roles in virus infection[J].Archives of microbiology，2015，197（4）：503-512.

[9] BURKARD C，LILLICO S G，REID E，et al. Precision engineering for PRRSV resistance in pigs：macrophages from genome edited pigs lacking CD163 SRCR5 domain are fully resistant to both PRRSV genotypes while maintaining biological function[J].PLoS pathogens，2017，13（2）：e1006206.

[10] STOIAN A M M，ROWLAND R R R. Challenges for porcine reproductive and respiratory syndrome （PRRS） vaccine design：reviewing virus glycoprotein Interactions with CD163 and targets of virus neutralization[J].Veterinary sciences，2019，6（1）：9.

[11] NYMAN T A，MATIKAINEN S. Proteomics to study macrophage response to viral infection[J].Journal of proteomics，2018，180：99-107.

[12] GUO Z，CHEN X X，LI R，et al. The prevalent status and genetic diversity of porcine reproductive and respiratory syndrome virus in China： a molecular epidemiological perspective[J].Virology journal，2018，15（1）：2.

[13] GUO C，WANG M，ZHU Z，et al. Highly efficient generation of pigs harboring a partial deletion of the CD163 SRCR5 domain，which are fully resistant to porcine reproductive and respiratory syndrome virus 2 infection[J].Frontiers in immunology，2019，10：1846.

[14] 王宇翔.新建規(guī)模豬場選址布局的生物安全風險管控措施[J].養(yǎng)殖與飼料，2019（9）：34-35.

[15] 周朝萍.規(guī)?；i場引種防疫措施[J].養(yǎng)殖與飼料，2018（6）：72.