趙勇竣 徐術(shù)菁 王釗

摘要：以番茄品種愛美特、佳美、飛天為試材，在人工模擬高溫環(huán)境下研究38 ℃高溫在不同時(shí)長下對(duì)各品種番茄幼苗根長、株高、滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量、保護(hù)酶活性的影響。結(jié)果表明，隨著高溫脅迫時(shí)間（0、1、3、5、7、9 d）的延長，3個(gè)品種抗高溫脅迫能力排序?yàn)閻勖捞?佳美>飛天。具體表現(xiàn)為番茄葉片內(nèi)丙二醛（MDA）含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量上升幅度大，且變化幅度與高溫處理時(shí)間相關(guān);SOD、POD、CAT活性則總體表現(xiàn)為先升后降，高溫處理9 d時(shí)活性下降到最低點(diǎn)。綜上，高溫處理5 d為各品種番茄幼苗感受高溫脅迫的轉(zhuǎn)折點(diǎn)，本試驗(yàn)為秋延遲高溫番茄設(shè)施栽培和耐熱品種選育提供了理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：番茄;高溫脅迫;抗氧化酶;滲透調(diào)節(jié);生長量;生理指標(biāo)

中圖分類號(hào)： Q945.78;S641.201 ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A ?文章編號(hào)：1002-1302（2019）17-0147-03

番茄（Solanum lycopersicum）別稱西紅柿、柿子，屬茄科番茄屬草本植物，營養(yǎng)豐富、風(fēng)味獨(dú)特、口感極佳[1]。番茄屬喜溫蔬菜，生長適溫為20～25 ℃，喜溫不耐熱，因此夏季成為番茄生產(chǎn)的淡季，夏季栽培常使番茄遭受高溫迫害，導(dǎo)致植株生長緩慢、果實(shí)品質(zhì)降低、病蟲害頻發(fā)等一系列問題，因此加強(qiáng)對(duì)番茄耐熱性方面的研究，提高番茄的抗逆性對(duì)我國農(nóng)業(yè)未來的發(fā)展具有重要意義。在番茄的高溫生理方面，前人曾做過大量的研究。孫保娟等的研究表明，在高溫脅迫下，不同品種番茄幼苗的株高、根長、莖粗和鮮質(zhì)量的相對(duì)生長量均受到不同程度的抑制;不同品種的番茄幼苗隨著高溫脅迫時(shí)間的延長其熱害指數(shù)逐漸上升[2-4]。本研究以番茄夏季安全優(yōu)質(zhì)種植作為努力的方向，以期為培育抗性更強(qiáng)、品質(zhì)更優(yōu)、經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量更高的番茄品種提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

番茄品種愛美特、佳美、飛天的種子由壽光生物工程研發(fā)中心提供，試驗(yàn)地點(diǎn)為青島農(nóng)業(yè)大學(xué)海都學(xué)院實(shí)驗(yàn)室，試驗(yàn)材料于2018年3月17日播種，溫水浸種催芽后進(jìn)行穴盤基質(zhì)育苗，每個(gè)品種取100粒種子，按每穴2粒的標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)播于150穴聚乙烯塑料穴苗盤中，裝約3/4濕潤育苗基質(zhì)，播后覆蓋0.5～0.8 cm的干基質(zhì)，待幼苗長至3張真葉時(shí)，即20 d的苗齡（2018年4月10日），將番茄幼苗移植于花盆中進(jìn)行高溫處理。先放置人工氣候培養(yǎng)箱中，進(jìn)行濕度65%，晝溫 38 ℃/夜溫30 ℃脅迫[5]，并根據(jù)脅迫時(shí)間的不同將其分為6個(gè)處理，分別測定脅迫0、1、3、5、7、9 d的番茄植株根系、株高相對(duì)生長量及番茄植株功能葉片（倒數(shù)第3張葉）的生理指標(biāo)。采取隨機(jī)取樣，每處理重復(fù)3次。

1.2 試驗(yàn)指標(biāo)的測定

1.2.1 根系、株高相對(duì)生長量測定 使用0～150 mm量程的數(shù)顯游標(biāo)卡尺，測量20 d苗齡的番茄幼苗。根長是測量土壤以下部分的主根長度，株高是測量在土壤以上部位莖稈一直到番茄頂部生長點(diǎn)的距離。

1.2.2 各項(xiàng)生理指標(biāo)的測定 MDA含量測定采用硫代巴比妥酸法[6]，可溶性糖含量測定采用蒽酮比色法[7]，可溶性蛋白含量測定采用考馬斯亮藍(lán)G-250法[8]?？寡趸富钚詼y定：SOD活性測定采用NBT光化法[9]，POD活性測定采用愈創(chuàng)木酚法[10]，CAT活性測定采用愈創(chuàng)木酚法[10]，光合色素含量測定采用乙醇比色法[11]。

2 結(jié)果與分析

2.1 在高溫脅迫下番茄相對(duì)生長量的變化

由圖1、圖2可知，高溫處理前番茄根長為4 cm、株高為 5 cm，經(jīng)過高溫脅迫后，根長、株高的相對(duì)生長量均呈下降趨勢。在高溫脅迫3～5 d時(shí)植株根長、株高相對(duì)生長量下降幅度較平緩;高溫脅迫5～7 d時(shí)植株根長、株高相對(duì)生長量下降幅度較大;而高溫脅迫7～9 d時(shí)，根長、株高相對(duì)生長量不再變化;在高溫脅迫9 d時(shí)，愛美特株高、根長均比佳美和飛天的相對(duì)生長量高，說明番茄品種愛美特抗高溫脅迫能力更強(qiáng)。

2.2 在高溫脅迫下番茄MDA含量變化

由圖3可知，高溫處理前番茄葉片內(nèi)MDA含量呈現(xiàn)最低狀態(tài)，經(jīng)高溫處理后番茄葉片內(nèi)MDA含量便表現(xiàn)出持續(xù)上升趨勢。高溫處理1 d時(shí)愛美特、佳美、飛天差異不顯著，隨著高溫處理時(shí)間的延長，高溫脅迫處理9 d時(shí)番茄葉片內(nèi)MDA含量較處理1 d時(shí)明顯升高，與未處理番茄植株相比，愛美特、佳美、飛天的MDA含量分別增加了49.00%、4936%、51.58%。根據(jù)在高溫脅迫下MDA含量增加越多植株受害程度越嚴(yán)重，得出在高溫脅迫的情況下植株的受害程度排序?yàn)轱w天>佳美>愛美特。

2.3 在高溫脅迫下番茄可溶性糖含量變化

由圖4可知，番茄幼苗經(jīng)高溫處理后，可溶性糖含量呈現(xiàn)出先增加后降低的趨勢，當(dāng)處理5 d時(shí)可溶性糖含量達(dá)到最高，且愛美特的可溶性糖含量顯著高于佳美。5 d后隨著高溫處理時(shí)間的延長，可溶性糖含量不斷下降，愛美特、佳美、飛天的可溶性糖含量在處理9 d時(shí)較處理5 d分別下降了6494%、69.55%、67.17%?？扇苄蕴呛肯陆档陌俜直仍酱髣t說明抗性越小，所以飛天在高溫脅迫情況下抗性最差，愛美特在高溫脅迫下抗性更強(qiáng)。

2.4 在高溫脅迫下番茄可溶性蛋白含量變化

由圖5可知，愛美特、佳美、飛天的可溶性蛋白含量呈現(xiàn)出先增加后降低的變化，到后期隨著高溫處理時(shí)間的延長，可溶性蛋白含量表現(xiàn)出明顯的差異性。至脅迫5 d，可溶性蛋白含量達(dá)到最大值，愛美特、佳美、飛天的可溶性蛋白含量分別為0.40、0.39、0.36 mg/g。可溶性蛋白含量在一定時(shí)間的高溫處理下會(huì)逐漸升高，說明植株抗高溫脅迫增強(qiáng)。3個(gè)品種中愛美特的可溶性蛋白含量最高，抗高溫脅迫比其他2個(gè)品種強(qiáng)。

2.5 在高溫脅迫下番茄抗氧化酶活性變化

由圖6、圖7、圖8可知，隨著高溫脅迫時(shí)間的延長，番茄植株內(nèi)SOD、POD、CAT活性呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢。在番茄可接受高溫范圍內(nèi)，體內(nèi)SOD、POD、CAT大量合成來抵抗高溫，至脅迫5 d，SOD、POD、CAT活性值達(dá)到最大，隨著脅迫時(shí)間的不斷延長，超出了番茄本身的承受能力，活性值大幅度下降甚至植株死亡。愛美特品種3種抗氧化酶活性在不同脅迫時(shí)間均要高于其他2個(gè)品種，說明在高溫脅迫環(huán)境下愛美特表現(xiàn)得更優(yōu)越。

3 討論

3.1 試驗(yàn)選材

前人關(guān)于番茄高溫的研究大多選用耐熱性品種[12]，如金棚一號(hào)等，而耐寒抗病毒品種的耐熱能力研究鮮有涉及，且前人研究選材多集中于番茄的2月齡大苗，對(duì)番茄幼苗的研究較少，本試驗(yàn)所采用的試驗(yàn)材料為20 d苗齡的耐寒抗病毒番茄品種飛天、美佳、愛美特，可為秋延遲番茄栽培和耐熱番茄品種的篩選提供依據(jù)。

3.2 高溫脅迫方法

雖然前人在番茄耐熱性及機(jī)理上有研究，但較多涉及自然高溫脅迫，且研究方法多參考自然溫度設(shè)計(jì)溫度梯度[13]，然而，實(shí)際番茄生產(chǎn)多集中于如北方日光溫室、塑料大棚等設(shè)施育苗區(qū)，越夏溫度常高達(dá)38 ℃，本試驗(yàn)采用晝溫 38 ℃/夜溫30 ℃制造人工脅迫條件，設(shè)定的高溫脅迫方法與實(shí)際生產(chǎn)相結(jié)合，對(duì)番茄設(shè)施栽植更有指導(dǎo)意義。

3.3 試驗(yàn)的相關(guān)生理指標(biāo)

3.3.1 相對(duì)生長量 前人將坐果率、花粉活力等[14]指標(biāo)列入番茄高溫脅迫的研究指標(biāo)中，本研究選取的植株根長、株高相對(duì)生長量這2種指標(biāo)能最直觀、最快速體現(xiàn)番茄高溫脅迫后生長的狀態(tài)。植株根長、株高相對(duì)生長量隨高溫脅迫時(shí)間的延長出現(xiàn)滯留，在高溫脅迫5 d時(shí)植株葉片出現(xiàn)失綠，在高溫脅迫7 d時(shí)葉片逐漸出現(xiàn)褐色和黃色，在脅迫9 d時(shí)多數(shù)植株出現(xiàn)枯萎死亡，飛天品種枯萎較多，其次是佳美，最后是愛美特。在3個(gè)耐寒抗病毒品種中愛美特耐熱性比較好，適合秋延遲階段種植。本試驗(yàn)結(jié)果與吳麗君等研究的高溫脅迫對(duì)番茄幼苗生長結(jié)論[5]一致。

3.3.2 抗氧化酶活性 本試驗(yàn)中隨溫度的增加，SOD、POD、CAT活性在1～5 d的脅迫時(shí)間中逐漸增加，在7～9 d的脅迫時(shí)間中逐漸降低。1～5 d的結(jié)果與董靈迪等的結(jié)論相[12-13，15]一致，但在7～9 d的試驗(yàn)結(jié)果與前人不同，抗氧化酶活性大多是隨著脅迫時(shí)間的延長而出現(xiàn)“先升后減”的情況，因?yàn)槊{迫的強(qiáng)度超出細(xì)胞承受能力，造成了細(xì)胞膜脂過氧化程度加重，嚴(yán)重影響細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)等其他物質(zhì)的合成，因此抗氧化酶活性下降[16]。由此可見，高溫脅迫下植物體內(nèi)保護(hù)酶的活性變化非常復(fù)雜，可能會(huì)因?yàn)樵囼?yàn)材料、器材、方法的不同而得出不完全相同的結(jié)論。

3.3.3 抗逆性生理指標(biāo) MDA含量可作為衡量植株受害程度的指標(biāo)之一，高溫脅迫會(huì)影響番茄葉片細(xì)胞內(nèi)MDA含量，本試驗(yàn)中隨著高溫脅迫時(shí)間的延長，番茄幼苗體內(nèi)的MDA含量不斷的增加。本研究結(jié)果與孫保娟等得出的結(jié)果[2，17]相一致。通過前人的研究結(jié)論與本試驗(yàn)的研究結(jié)論說明，其他條件相同的情況下，植株體內(nèi)的MDA含量與高溫脅迫時(shí)間呈正相關(guān)。

在逆境條件下，可溶性糖和可溶性蛋白既是不可或缺的能量儲(chǔ)存，也是滲透調(diào)節(jié)的重要物質(zhì)，能減少脅迫對(duì)植物造成的傷害，在此次試驗(yàn)中高溫脅迫1～5 d時(shí)可溶性糖與可溶性蛋含量呈上升狀態(tài)，在脅迫7～9 d時(shí)呈降低狀態(tài)。金春燕等研究發(fā)現(xiàn)，在高溫脅迫情況下，可溶性糖含量隨溫度的增加而增加[17]，本試驗(yàn)1～5 d的研究結(jié)果與前人一致，7～9 d可溶性糖降低的原因可能是植物高溫脅迫時(shí)間較長導(dǎo)致光合作用減弱，呼吸作用消耗糖類，造成可溶性糖含量減低。張紅梅等研究黃瓜幼苗耐熱性時(shí)發(fā)現(xiàn)，可溶性蛋白含量隨高溫脅迫時(shí)間的延長而不斷降低[18]，而本次試驗(yàn)中可溶性蛋白含量有一個(gè)上升階段，可能是因?yàn)楦邷孛{迫下脯氨酸積累使可溶性蛋白在一定時(shí)間里有上升階段[19]。

本試驗(yàn)的3個(gè)番茄品種在高溫脅迫下的生理指標(biāo)的變化趨勢基本相同，但變化幅度不同，說明不同品種間存在耐熱性差異。該研究的數(shù)據(jù)綜合結(jié)果表明，愛美特品種耐高溫能力最強(qiáng)，美佳其次，飛天最弱。在晝溫38 ℃/夜溫30 ℃的高溫脅迫下，3個(gè)番茄品種抗高溫脅迫時(shí)間拐點(diǎn)為5 d，后期可正常生長，高溫脅迫致死時(shí)間為9 d，此結(jié)論可為秋延遲番茄栽培和耐熱品種的篩選提供依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]郎德山. 蔬菜栽培學(xué)各論[M]. 長春：吉林教育出版社，2015：95-112.

[2]孫保娟，黎振興，羅少波，等. 持續(xù)高溫脅迫對(duì)茄子幼苗幾個(gè)主要生理指標(biāo)的影響[J]. 熱帶作物學(xué)報(bào)，2010，31（9）：1528-1534.

[3]徐小萬，曹必好，陳國菊，等. 高溫高濕對(duì)辣椒抗氧化系統(tǒng)的影響及不同品種抗氧化性差異研究[J]. 華北農(nóng)學(xué)報(bào)，2008，23（1）：81-86.

[4]吳麗君，張俊鳳. 高溫脅迫對(duì)番茄幼苗生長和生理指標(biāo)的影響[J]. 北方園藝，2013（23）：19-22.

[5]朱長志，張志仙，檀國印，等. 蔬菜作物高溫脅迫研究進(jìn)展[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2017，29（2）：53-57.

[6]劉祖祺，張石城. 植物抗性生理學(xué)[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1994.

[7]丁雪梅，張曉君，趙 云，等. 蒽酮比色法測定可溶性糖含量的試驗(yàn)方法改進(jìn)[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī)，2014（23）：230-233.

[8]王孝平，邢樹禮. 考馬斯亮藍(lán)法測定蛋白含量的研究[J]. 天津化工，2009，23（3）：40-42.

[9]沈文飚，徐朗萊，葉茂炳，等. 氮藍(lán)四唑光化還原法測定超氧化物歧化酶活性的適宜條件[J]. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1996，19（2）：101-102.

[10]李忠光，龔 明. 愈創(chuàng)木酚法測定植物過氧化物酶活性的改進(jìn)[J]. 植物生理學(xué)通訊，2008，44（2）：323-324.

[11]馮一峰，王 艷，唐 都，等. 紅棗葉片葉綠素提取方法的比較[J]. 中國釀造，2014，33（6）：50-53.

[12]董靈迪，石琳琪，焦永剛. 不同番茄品種耐熱性及耐熱機(jī)理研究[J]. 華北農(nóng)學(xué)報(bào)，2009，24（增刊1）：126-129.

[13]朱 靜，楊再強(qiáng)，李永秀，等. 高溫脅迫對(duì)設(shè)施番茄和黃瓜光合特性及抗氧化酶活性的影響[J]. 北方園藝，2012（1）：63-68.

[14]喬志霞，沈火林，安 巖. 番茄耐高溫脅迫能力鑒定方法的研究[J]. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2006，15（6）：114-120.

[15]徐佳寧，劉 鋼，張利云，等. 高溫脅迫對(duì)不同番茄品種葉片抗氧化系統(tǒng)的影響[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016（10）：27-31.

[16]李 璇，岳 紅，王 升，等. 影響植物抗氧化酶活性的因素及其研究熱點(diǎn)和現(xiàn)狀[J]. 中國中藥雜志，2013，38（7）：973-978.

[17]金春燕，郭世榮，施 標(biāo)，等. 高溫對(duì)不同番茄品種幼苗葉片抗氧化系統(tǒng)和滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響[J]. 上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，27（3）：26-30.

[18]張紅梅，金海軍，丁小濤，等. 黃瓜幼苗對(duì)熱脅迫的生理反應(yīng)及葉綠素?zé)晒馓匦訹J]. 上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)（農(nóng)業(yè)科學(xué)版），2011，29（5）：61-66.

[19]吳 斌，蔣秋瑋，顧婷婷，等. 高溫脅迫下不同耐熱性蘿卜幼苗生理響應(yīng)分析[J]. 中國蔬菜，2010（10）：25-28.