張 宸，張鳳秋，高賢嫻，王丹妮，牛志多，洪 鐵,*

(1.吉林大學藥學院藥理教研室，長春130021;2.錦州市林業(yè)草原保護中心，錦州121000;3.吉林省中醫(yī)藥科學院，長春130012;)

黑木耳（Auricularia auricula）屬真菌門擔子菌亞門木耳科木耳屬，其主要活性成分是多糖[1]研究表明，黑木耳多糖具有降血脂、抗血栓、降血糖、抗凝血、抗衰老作用，抗腫瘤、提高免疫力等生物學活性[2]。

紫蘇（Perillafrutescens）為一年生唇形科草本植物[3]。紫蘇籽油作為一種藥食兩用的植物油,有著抗衰老、降血脂、防癌等諸多功效。

紫蘇黑木耳乳，是由紫蘇子油與黑木耳提取的多糖經混合、均質乳化等工藝制成的混懸乳液。本研究通過對混懸乳液中配方工藝優(yōu)化，以及混懸乳液的制備，為紫蘇黑木耳乳工業(yè)生產提供理論基礎。[4]

1 材料與儀器

1.1 儀器

BS-124S電子天平，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；HH-W420S恒溫電熱三用水箱，金壇市現(xiàn)代儀器廠；高速萬能粉碎機，北京市永光明醫(yī)療儀器有限公司；FSH-2可調高速勻漿器，常州市金壇區(qū)環(huán)宇科學儀器廠。

1.2 材料

黑木耳購于吉林樺甸；紫蘇子油由長春花香四季科技有限公司生產；葡萄糖對照品購自中國食品藥品檢定研究院；纖維素酶（酶活力≥400 U/mg）、果膠酶(酶活力≥30 U/mg）、木瓜蛋白酶(酶活力≥30 U/mg）均購自自天津利華酶制劑有限公司；蜂蠟購自杭州保靈養(yǎng)泰禾生物科技有限公司；試劑均為分析純，水為超純水。

2 實驗方法

2.1 黑木耳多糖提取工藝的確認及黑木耳多糖含量的測定

2.1.1 黑木耳多糖提取方法

參考姜洪彬[5]等人的方法，采用復合酶法提取黑木耳多糖。

流程：黑木耳粉碎過篩→加水和2%復合酶→酶解→加熱提取→過篩→收集濾液→濃縮干燥→黑木耳多糖粉。

2.1.2 黑木耳多糖提取物含量測定方法（苯酚-硫酸法）

2.1.2.1 標準曲線的制備：

精確稱取105℃干燥至恒重葡萄糖標準品0.04g，用蒸餾水定容至100ml，得葡萄糖標準溶液。將該標準溶液稀釋成濃度為 40、20、10、5、2.5、1.25μg/ml的溶液，分別吸取稀釋液2ml，加入5%的苯酚溶液1ml，混合后迅速加入5ml濃硫酸，混勻，30℃水浴中顯色10min，另以蒸餾水代替葡萄糖溶液同上操作為空白對照，在490nm波長處測定吸光度。以葡萄糖糖濃度（C）為橫坐標，吸光度（A）為縱坐標，繪制標準曲線。

2.1.2.2 測定方法：

稱取0.1g黑木耳多糖樣品，精密稱定，加蒸餾水定容至100ml，制成黑木耳多糖溶液，樣品稀釋10倍后，精密量取該溶液1ml，按上述葡萄糖吸光度測定方法操作，測定吸光度，根據(jù)標準曲線計算多糖的濃度和樣品中多糖的含量。

2.2 紫蘇黑木耳乳工藝條件的考察

2.2.1 紫蘇黑木耳乳配方比例考察

本品是由紫蘇子油與黑木耳提取的多糖及輔料制成的混懸乳。由于混懸乳易出現(xiàn)藥液分層現(xiàn)象，影響本品的服用，因此應對混合比例進行實驗考察，以便制成穩(wěn)定的混合乳液。

2.2.2 紫蘇油用量的考察

紫蘇子油合理的用量即可保證混懸乳物料具有良好的流動性，以及物料適宜的粘度，提高產品的穩(wěn)定性。通過查閱文獻和實驗摸索，對多糖提取物與紫蘇子油配比進行研究，根據(jù)混懸乳流動性和顆粒分布均勻度綜合評價，確定最佳配比。

2.2.3 多糖粉粒度的考察

以沉降體積比為指標，考察多糖粉的粒度對混懸乳液穩(wěn)定性的影響，選取不同粉碎粒度的黑木耳提取多糖粉適量，分別按配方比例加入紫蘇子油，制成混合乳液，精密稱取樣品適量，轉入具塞量筒中，蓋塞，記錄混懸液原始高度H0，靜置3h后，記錄最終高度H，按公式F=H/H0計算沉降體積比，確定多糖粉的最佳粉碎粒度。

2.2.4 助懸劑的選擇和用量

為保證混懸乳中多糖顆粒均勻分散在紫蘇子油中，防止在貯存過程中顆粒沉降，須加入一定量的助懸劑，以提高制劑的穩(wěn)定性。通過查閱文獻及多次實驗摸索確定以蜂蠟作為穩(wěn)定劑添加。

稱取紫蘇子油適量，加入不同比例的蜂蠟，60℃加熱熔融，放冷備用。分別稱取上述混合溶液適量，按配方工藝加入多糖粉，制成混合乳，轉移到具塞量筒中，37℃水浴保溫，靜置3h后，記錄沉降體積比 F＜0.9時所需的時間并觀察藥液性狀，確定蜂蠟的最佳加入量。

3 結果

3.1 多糖含量測定工作曲線結果

結果見表1，標準曲線的回歸方程為A=0.0180C+0.0015（R=0.9999），式中：A 為吸光度；C 為葡萄糖溶液濃度，單位 μg/ml。

表1 葡萄糖標準曲線表（濃度單位：ug/ml）

3.2 多糖提取物含量測定結果

通過2.1.2.2中方法測得三次多糖含量的均值為96.2%，多糖提取率超過20%，說明該提取工藝穩(wěn)定可靠，得到的黑木耳多糖可用于進一步應用。

3.3 紫蘇黑木耳乳配方實驗結果

3.3.1 紫蘇子油與黑木耳多糖配比實驗結果

表2結果表明：多糖提取物粉與紫蘇子油1：1.5混合制成的混懸乳物料的狀態(tài)較好，有適宜的粘稠度和較好的流動性，確定此配比為最佳工藝參數(shù)，后續(xù)實驗采用此配方進一步研究。

表2 紫蘇子油與黑木耳多糖不同配比對混懸乳的影響

3.3.2 多糖粒度實驗結果

表3結果表明：隨著膏粉粒度的增加，沉降體積比逐步增大，表明藥液的穩(wěn)定性逐步增強，且膏粉粒度達到120目水平以上，藥液沉降體積比達到0.90以上，因此應當取過120目篩的多糖粉制備紫蘇黑木耳乳液。

表3 多糖粒度對混懸乳液穩(wěn)定性的影響

3.3.3 蜂蠟用量實驗結果

如表4所示，蜂蠟用量為紫蘇子油的8%及以上時，混懸乳液在24h內才不發(fā)生明顯沉降，蜂蠟比例超過12%時，混懸乳液呈半固體，流動性很差。

當蜂蠟與紫蘇子油的比例達到0.08:1時，混懸乳液發(fā)生明顯沉降需要的時間較長，藥液較穩(wěn)定，流動性較好，故配方選用加入紫蘇子油8%用量的蜂臘作為助懸劑。

表4 蜂蠟用量對混懸乳液性質的影響

4 結論

本研究優(yōu)化后的紫蘇黑木耳乳制備工藝為：稱取紫蘇子油，加入蜂蠟，于60℃加熱熔融，放冷備用。黑木耳提取多糖，粉碎成能過120目篩的細粉，加入到上述冷卻的紫蘇子油蜂蠟的混合液中，充分混勻，用膠體磨均質乳化。通過本文的研究，為紫蘇黑木耳乳提供了科學、可靠的制備工藝，使紫蘇黑木耳乳的療效和質量得到保障，適合進一步工業(yè)生產。